DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
-
Upload
hector-goicochea -
Category
Documents
-
view
1.539 -
download
6
Transcript of DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOMicroscopia:
Tinción de Gram de las muestras de esputo constituye un método rápido de diagnosticar una neumonía y meningitis neumococica. Esto se puede confirmar con quellung(hinchazón); en esta prueba se mezclan anticuerpos anticapsulares polivalentes con las bacterias para después examinarlas al microscopio. La presencia de mayor refringencia alrededor de las bacterias se interpreta como una reacción positiva para S.pneumoniae.
• Detección de Antígenos
▫El polisacárido C del neumococo se excreta en la orina y se puede detectar por medio de un inmunoanalisis comercializado.
• Pruebas basadas en los ácidos nucleicos Se han desarrollado sondas de acidos nucleicos y pruebas de
PCR para la identificacion de S.pneumoniae en cultivo• Cultivo
El cultivo requiere la utilización de medios
enriquecidos con nutrientes (p.ejem agar
de sangre de cordero); el microorganismo
es muy sensible a un gran número de
antibióticos, por lo que el cultivo puede
arrojar resultados negativos en los pacientes
sometidos a un tratamiento parcial
Identificación de Streptococcus pneumoniae
Inoculación de la muestra
Revisión de cultivos
Incubación
35°C/20-24hy 5% CO2
CULTIVO
MÉTODOS MICROBIOLÓGICOSIdentificación de Streptococcus pneumoniae
PRIMOAISLAMIENTO
Colonias alfa hemoliticas
Reaislamiento
Prueba de Optoquina (5 µg/mL de etilhidrocupreina)
Incubación 20-24 hs 35°C y 5% CO2
Streptococcus pneumoniae
Incubación 20-24 hs 35°C y 5% CO2
5μg
10mm
6mm
5μg
Se usa el disco de optoquina para diferenciar entre S. pneumoniae (sensibles) y otras especies de estreptococos a hemolíticos (resistentes). La sensibilidad a la optoquina es una medida de la fragilidad de la membrana celular bacteriana.
Prueba de Optoquina
INTERPRETACIÓN
Prueba de OptoquinaDISCO 6 mm
S: ≥ 14 mm = S. pn9-13 mm= P. Solubilidad
DISCO 10mm
S: ≥ 16 mm = S. pn< 16 mm = P. Solubilidad
Interpretación: Sensible, cuando hay inhibición alrededor del disco. Se considera como punto de corte 16 mm. (discos de 10 mm) o 14 mm (discos de 6 mm). Resistente, cuando el crecimiento no es inhibido alrededor del disco. Los casos de halos intermedios deben resolverse por acumulación de pruebas a favor o en contra.
Solubilidad en bilis
0.5 McFarland
0.25 mL
0.25mLSS 0.25 mL desoxicolato sodio 2%
INCUBACIÓN35°C/ 2h
Identificación de S. pneumoniae
Cultivo puro
Se utiliza esta prueba para diferenciar entre S. pneumoniae, soluble, en bilis y otras especies de estreptococos alfa hemolíticos, “insolubles” en bilis. Esta prueba controla la capacidad de las células bacterianas de producir lisis en presencia de sales biliares, en un tiempo y a una temperatura específica.
Identificación de Streptococcus pneumoniaeSolubilidad en bilis
INTERPRETACIÓN
INHIBICIÓN DE LA TURBIDEZ S. pneumoniae
1 gota desoxicolato al 10%
Desaparición de la colonia
10 min
Sensibilidad: 98%Especificidad: 100%
Positiva cuando se observa un aclaramiento del tubo con desoxicolato respecto al de solución fisiológica. Negativo, cuando no hay diferencia de turbidez entre ambos tubos.