Diagnóstico del laboratorio de Bacteriología

Maestra Altagracia Jiménez Díaz

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO PASOS IMPORANTES

PRECEDEN AL TRABAJO REAL DEL LABORATORIO

1-Elección de la muestra apropiada, tomando en cuenta la patogenía de la infección

2-Obtención adecuada de la muestra para evitar contaminación con la flora normal

3-Transporte rápido de la muestra al laboratorio o almacenaje correcto.

4-información esencial para guiar al personal del laboratorio

ENFOQUES DEL TRABAJO DEL LABORATORIO

Observación del microorganismo en el microscopio después de tinción

Obtención de un cultivo puro Identificación del microorganismo

mediante reacciones bioquímicas, Proliferación en medios selectivos

ENFOQUES DEL TRABAJO DEL LABORATORIO

Ó reacciones especifícas con anticuerpos. Del tipo de muestra y del microorganismo

depende el enfoque que se emplee y en que secuencia.

Después de que el microbio se ha desarrollado en cultivo puro, se detreminará su sensibilidad a varios antibióticos.

METODOS BACTERIOLOGICOS

HEMOCULTIVOS Son más comunes cuando se sospecha

septicemia, endocarditis, osteomelitis,meningitis o neumonia.

Microorganismos mas frecuentes: Cocos Gram positivos: Staphylococcus aureus y Streptococcus

pneumoniae, y tres bacilos Gram negativos: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y

Pseudomonas aeruginosa.

TOMA DE MUESTRA

Es importante obtener por lo menos tres muestras.

10 Ml de sangre en un periodo de 24 horas.

Se hace de esta manera debido a que el número de microorganismo puede ser pequeño y su presencia intermitente.

El sitio de la venopunción debe limpiarse con yodo al 2%.

LA MUESTRA

La sangre obtenida se agrega a 100 Ml de un medio de cultivo enriquecido como caldo con infusión de cerebro-corazón.

Los Hemocultivos deben observarse por turbidez o por producción de CO2 todos los días durante 7 ó mas.

Si hay proliferación, se prosiguen los estudios y realizar la tinción por Gram.

LA MUESTRA

Se hacen subcultivos y sensibilidad a los antibioticos.

Los cultivos deberán conservarse durante 14 dias cuando se sospeche de:

Endocarditis infecciosa, fungemia ó infección por bacterias de crecimiento lento, por ejemplo, Brucella.

CULTIVO DE EXUDADO FARINGEO

Se usan en forma primaria para detectar la presencia de estreptococo beta hemolitico del grupo A.

Tambien se hace cuando se sospecha de difteria, faringitis gonocócica o aftas (Candida ).

MUESTRA DE EXUDADO FARINGEO

La muestra se toma con hisopo esteril y un baja lengua esteril.

Al obtener la muestra el hisopo deberá tocar no solo la parte posteriol de la faringe, sino amigdalas o fosa tonsilar.

El material del hisopo se inocula en una placa de agar sangre de carnero.

Se hacen estrias para obtener colonias separadas.

Si después de 24 horas de incubación a 35 grados se encuentran colonias de estreptococo beta hemolitico.

Se usa un disco de bacitracina para determinar si el microorganismo es del grupo A.

Toma de muestra para cultivo de garganta

FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN

Se cepilla la parte posterior de la garganta con un aplicador de algodón estéril (hisopo), cerca del área de las amígdalas y

se coloca en un tubo con un medio de cultivo. Con el fin de mejorar las posibilidades de detectar bacterias, el aplicador se puede utilizar para raspar la parte posterior de la garganta varias veces.

Este examen se usa principalmente para identificar estreptococos en la garganta

sin embargo, se pueden detectar otros organismos, dependiendo del tipo de medio de cultivo utilizado

PREPARACIÓN PARA EL EXAMEN

La persona debe inclinar la cabeza hacia atrás con la boca bien abierta. Se deben resistir las náuseas

Cerrar la boca mientras el cepillo toca la parte posterior de la garganta cerca de las amígdalas.

No se deben usar enjuagues bucales antisépticos antes del examen.

Lactantes o niños:

La preparación física y sicológica que se puede brindar para este o cualquier examen o procedimiento depende de la edad, intereses, experiencias previas y grado de confianza del niño.

Lo que se siente durante el examen

El paciente puede sentir dolor al momento del examen e igualmente, se puede experimentar una sensación de náuseas cuando se cepilla la parte posterior de la garganta, pero el examen sólo dura unos cuantos segundos.

RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN

El examen se realiza cuando se sospecha de una infección en la garganta, en particular, una infección de garganta por estreptococos.

Valores normales La presencia de bacterias normales de la boca de la garganta es un hallazgo normal.

SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES

La presencia de ciertos organismos,

como los estreptococos beta-hemolíticos del grupo A, que ocasionan infección de garganta por estreptococos, al igual que otros organismos que causan difteria y gonorrea, es anormal y puede ser indicio de la presencia de una infección.

CUÁLES SON LOS RIESGOS

Esta prueba es segura y se tolera bien. En muy pocos pacientes, la sensación de náusea puede llevar a una urgencia de vomitar o toser.

CONSIDERACIONES ESPECIALES

Se pueden indicar antibióticos antes

de conocer los resultados. Los antibióticos deben tomarse

según las instrucciones médicas, aunque los síntomas hayan desaparecido

RESULTADO

Si alrededor del disco de bacitracina se inhibe la proliferación, el microorganismos es estreptococo grupo A.

Si no es estreptococo beta hemolítico de otro grupo no A.

CULTIVO DE LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO

Estos se efectúan de manera primaria cuando se sospecha de meningitis.

Las muestras de LCR de pacientes con encefalitis, abscesos cerebrales y empiema subdural por lo común dan cultivos negativos.

Toma de muestra de LCR

CULTIVOS DE LCR

Las causas más frecuentes de meningitis bacterianas agudas son:

Tres microorganismos encapsulados:

Neisseria meningitidis, S. Neumoniae y Haemophilus influenzae.

CULTIVO DE LCR

Si los microorganismos semejan N meningitidis,H. Influenzae ó S. Neumoniae.

La prueba de “quellung” o la inmunofluorescencia con antisueros específicos pueden identificar al microorganismo con rapidez.

CULTIVO DE LCR

Se hacen cultivos con agar sangre y agar chocolate y se incuban a 35 grados con atmósfera de 5% de CO2. Se agregan hematina y nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) (factores V yX, respectivamente ) par potenciar la proliferación de H. Influenzae.

CULTIVO DE LCR

En caso de meningitis subaguda, Mycobacterium tuberculosis y el hongo Cryptococus neoformans son los microorganismos que se aislan más amenudo.

Se hace tinción de ZN. Se cultiva en placas y se deja por

un mínimo de 6 semanas. Se cultiva en medios especiales para M. Tuberculoso.

C. Neoformans, levadura que forma yemas y con cápsula notable, puede observarse en LCR cuando se usa tinción de la india.

LCR

Las pruebas inmunológicas para detectar la presencia de antígenos capsulares en LCR, pueden usarse para identificar:

N meningitidis, S. Neumoniae, H. Influenzae, Estrptococo del grupo B, E. Coli, y C. Neoformans.

Los dos análisis más comunes son aglutinación de partículas de caucho y contrainmunoelectroforesis.

CULTIVOS DE HECES

Estos se practican en forma primaria en personas con gastroenteritis.

Los patógenos más frecuentes son: Shigella, Salmonella y

Campylobacter, vibrio colera…

Coprocultivo

El coprocultivo es un tipo de cultivo bacteriano que se utiliza para Identificar las especies patógenas de las vías gastrointestinales a través del coprocultivo y de sus reacciones bioquímicas

La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente amplia.

Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios (Bacteroides, bácilos grampositivos, estreptococos), microorganismos entéricos grannegativos y S. faecalis.

Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces implica la separación de las especies patógenas, usualmente a través del empleo de medios selectivos diferenciales y de cultivos de enriquecimiento.

Las principales causas de trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus, las toxinas ( de: estafilococos, vibriones, Escherichia coli toxígena), bacilos entéricos gramnegativos invasores, los fermentadores lentos de la lactosa, las Shigellas, las Salmonellas y las campilobacterias.

La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas partes del mundo.

ESPECIMENES.

Las heces y los raspados réctales son los especimenes de que se dispone con mayor facilidad.

Debe anotarse la presencia de sangre, moco o helmintos en la inspección somera inicial.

Se suspenden los especimenes en un caldo selectivo como el Caldo de Tetrationato y selenite

Se cultivan sobre medios ordinarios así como en medios selectivos diferenciales, por ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S,

Para permitir la separación de los bacilos gramnegativos que no fermentan la lactosa de otras bacterias entericas comunes.

Los frotis teñidos pueden revelar una prevalecía de leucocitos y de ciertos microorganismos anormales como Cándida o estafilococos

pero no pueden utilizarse para diferenciar las bacterias entéricas patógenas de las de la flora normal.

MATERIAL, REACTIVOS Y EQUIPO

*Muestra de materia fecal en frasco con tapa.

*Placas estériles de: agar soya tripticaseína, agar EMB, agar endo, agar SS, agar verde brillante.

*Tubo de 16 x 150 con 5 ml de caldo tetrationato.

*Tubo de 16 x 150 con 5 ml de caldo nutritivo estéril.

*Mechero, asa, incubadora.

Al día siguiente:

*Placas con coprocultivo. *Equipo de coloración de Gram *Serie de tubos de cultivo para

pruebas bioquímicas: Agar Kligler, SIM medium, agar citrato de Simmons, agar manitol, caldo urea, caldo dextrosado, caldo V-P, gelatina, leche descremada, etc..

*Mechero, asa, tina, puente, piseta. *Lámpara de alcohol.

Instrucciones para la Toma de la Muestra

Obtenga la muestra antes de todo tratamiento con antibióticos. En caso que esto no sea posible, informe al laboratorio el tratamiento que está recibiendo.

La muestra puede ser recogida en su casa o en el laboratorio.

En caso de hacer la recolección en su casa, debe pedir previamente al laboratorio el material necesario,

el cual consiste en un MEDIO DE TRANSPORTE CON UN HISOPO, QUE VA DENTRO DEL EQUIPO.

Guarde este material en un sitio fresco (nunca en nevera), fuera del alcance de los niños.

Debe recoger las heces enfrasco estéril de boca ancha

En caso necesario (como en niños), es preferible realizar un hisopado rectal, que debe ser tomado por el personal entrenado.

Una vez recogidas las heces, impregne con las mismas el hisopo suministrado, prefiriendo las partes que contengan moco, sangre y restos celulares.

Introduzca el hisopo hasta el fondo del tubo con el medio gelatinoso, dejándolo dentro del tubo. Tápelo inmediatamente y manténgalo en ambiente fresco (nunca en nevera) y llévelo lo más pronto posible al laboratorio.

Favor tener en cuenta las siguientes precauciones:

No destapar el tubo, excepto para introducir la muestra; no tocar con los dedos la parte interior de la tapa, ni del recipiente, ni el algodón del hisopo.

Identifique la muestra, escribiendo claramente en la etiqueta su nombre completo, edad, hora y fecha de la toma de muestra.

No llene el tubo con heces: es suficiente con la cantidad que queda adherida al hisopo.

Cuando las heces son líquidas, asegúrese de impregnar bien el hisopo.

Las personas que sufren de estreñimiento pueden utilizar un laxante salino (sal de fruta) y recoger para el examen la segunda o tercera evacuación (nunca la primera).

En niños, pueden utilizarse supositorios de glicerina pediátricos.

En lactantes, puede recoger la muestra directamente del pañal, pero asegurándose que las heces hayan sido recién emitidas y que no hayan sido absorbidas por el pañal.

MUESTRA EN CULTIVOS DE HECES

Un examen microscópico directo de las heces puede ser informativo desde dos puntos de vista:

1-Una tinción con azul de metileno con muchos leucocitos indica la presencia de microorganismos invasivos más que uno toxigenico.

2-Una tinción de Gram puede descubrir un gran número de ciertos microorganismos ,como estafilococos, clostridios o campilobacterias

MÉTODO TOMENSE PRECAUCIONES DE

ASEPSIA AL MANIPULAR LOS ESPECIMENES.

AL INOCULAR EN LOS TUBOS ES INDISPENSABLE EL USO DE CUBREBOCAS Y GORRA.

TRABAJAR SIEMPRE FRENTE A LA FLAMA DEL MECHERO

I) AISLAMIENTO.

1) Sembrar una asada de materia fecal sospechosa en el tubo de caldo de tetrationato. Inocular con asa por emulsión.

2) De la misma manera sembrar otra asada de la misma muestra en el tubo de caldo nutritivo.

3) Etiquetar con los datos escolares

4) Levar a la incubadora a 37ºC durante 24 horas. Colocar los tubos en gradilla de rejilla, de tal manera que se mantengan en posición vertical para evitar que el líquido se derrame.

II) RESIEMBRA.

AL INOCULAR LAS PLACAS, ES INDISPENSABLE EL USO DE CUBREBOCAS Y GORRA. TRABAJAR FRENTE A LA FLAMA.

1) Retirar los tubos de la incubadora.

2) Disponer sobre la mesa una serie de medios selectivos (agar EMB, agar S-S, agar verde brillante y agar soya tripticaseina) para resembrar el cultivo en caldo de tetrationato.

3) Disponer sobre la mesa una serie de los mismos medios selectivos para resembrar el cultivo en caldo nutritivo.

4) Resembrar en cada una de las placas el inóculo correspondiente por la técnica de estrías cruzadas sectoriales. Usar solo una asada para cada placa.

5) Sellar las placas. Etiquetar con los datos escolares 6) Llevar las placas a la incubadora.

Colocarlas en posición invertida. Mantenerlas durante 24 horas.

a la siguiente:

Al día siguiente:

1) Retirar las placas de la incubadora.

2) Efectuar análisis macroscópico de cada una para valoración de la PRUEBA PRESUNTIVA respecto a la fermentación de la lactosa, de acuerdo

GUIA DE IDENTIFICACION PRESUNTIVA

La prueba presuntiva para diferenciación de los bacilos entéricos gram(-) se basa en la valoración de la fermentación de la lactosa sobre medios de cultivo adicionados con este carbohidrato, como el agar endo o el agar EMB:

a) Enterobacilos que producen fermentación rápida de la lactosa: Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae.

b) Enterobacilos que producen fermentación lenta de la lactosa: Edwarsiella, Serratia, Citrabacter, Arizona, Providencia, Erwinia.

c) Enterobacilos que no producen fermentación de la lactosa: Shigella, Salmonella, Proteus, Pseudomonas.

La manera de cómo metabolizan este azúcar en los diferentes medios de cultivo selectivos se manifiestan por cambios en el color del medio con respecto al que originalmente tenía o bien por la coloración de las colonias, la cual es típica en algunos de ellos, al respecto, se sugiere utilizar la siguiente tabla:

AGAR ENDO O EMB AGAR S-S VERDE BRILLANTE

COLONIAS CON BRILLO METALICO:Escherichia coliOtras coliformes

COLONIAS ROJAS:Escherichia coliOtras coliformes

COLONIAS VERDES:Escherichia coliOtras coniformes

COLONIAS BLANCAS:SalmonellaShigellaProteus

Pseudomonas

COLONIAS BLANCASSalmonellaShigellaProteusPseudomonas

COLONIAS ROJASSalmonellaShigellaProteus

Pseudomonas

Urocultivo

El urocultivo permite la identificación del número y los tipos de bacterias presentes en la orina.

Una vez identificado el tipo de microorganismo, el médico puede recetar el medicamento adecuado para combatirlo

CUÁNDO SE RECOMIENDAEL UROCULTIVO

Cuando los síntomas indican una posible infección urinaria como: dolor y sensación de calor al orinar, así como urgencia frecuente de orinar.

Cuando un paciente esta canalizado por largo tiempo, aunque no muestre síntomas de infección.

En mujeres embarazadas para monitorear cualquier bacteria en la orina que pueda causar algún problema al bebé.

PARA REALIZAR ESTUDIO

Se necesita la recolección de orina. Debes lavar con agua y con jabón los

genitales para evitar una contaminación de la muestra.

Por lo general este estudio no requiere que estés en ayunas o limitar o alterar tus actividades antes del estudio, sin embargo, te sugerimos pedirle a tu médico que te dé sus indicaciones.

Coméntale a tu médico de todo tipo de medicamentos que estés tomando en ese momento, para ver si es necesario que los interrumpas antes del estudio.

INSTRUCCIONES PARA LA TOMA DE LA MUESTRA EN ADULTOS:

Toma de Muestras en Mujeres: La muestra debe ser tomada

preferentemente en el Laboratorio. Si ello no es posible, seguir las

mismas instrucciones en su casa.

Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la mano lo siguiente: a) jabón desinfectante; b) agua hervida o agua estéril; c) gasa estéril o un paño acabado de lavar; y d) el recipiente para tomar la muestra (Urolab).

Proceda primero a lavarse las manos y luego siéntese en el inodoro, lo más hacia atrás que pueda. Separe los labios genitales con una mano y mantenga los pliegues separados y proceda a asearse toda la zona genital con el jabón desinfectante. Enjuague con abundante agua estéril y luego seque bien con gasa estéril o con un paño limpio.

Proceda a recoger la orina, destapando previamente el frasco SÓLO EN EL MOMENTO DE LA MICCIÓN y sin tocar con los dedos su interior, coloque la tapa con el lado plano hacia abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. Empiece a orinar en la poceta y recoja en el frasco sólo la muestra del chorro del medio es decir, NO DEBE RECOGER NI LA PRIMERA, NI LA ÚLTIMA PARTE DEL CHORRO DE ORINA

Tape muy bien el frasco y rotúlelo con su nombre. Tráigalo al Laboratorio lo más pronto posible, en un recipiente con hielo, cuidando de que no se bote el contenido del Urolab.

Toma de Muestra en hombres: La muestra debe ser tomada

preferentemente en el Laboratorio. Si ello no es posible, seguir las mismas instrucciones en su casa.

Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la mano lo siguiente: a) jabón desinfectante; b) agua hervida o agua estéril a temperatura ambiente; c) gasa estéril o un paño acabado de lavar; y d) el recipiente para tomar la muestra (Urolab).

Lavarse con jabón desinfectante primero las manos y luego la cabeza del pene empezando por la abertura uretral y continúe en dirección a usted, como muestra la ilustración,

previa retracción del prepucio, si no está circuncidado.

Luego enjuagar bien con agua estéril o previamente hervida (a temperatura ambiente) y secar con gasa estéril o con un paño recién lavado.

Destape el Urolab sólo en el momento de la micción y sin tocar con los dedos su parte interna, coloque la tapa con el lado plano hacia abajo. Comience a orinar en la poceta y recoja en el frasco sólo la muestra del chorro del medio, es decir, NO DEBE RECOGER NI LA PRIMERA NI LA ÚLTIMA PARTE DEL CHORRO DE ORINA.

Tapar bien el frasco, rotularlo con su nombre y traerlo al laboratorio lo más pronto posible, en un recipiente con hielo y cuidando de que no se bote.

VALORES NORMALES

Menos 10,000 U.F.C/ml se considera contaminación

Entre 10,000 y 100,000 U.F.C/ml se considera sospecha de infección

Mayor a 100,000 U.F.C/ml se considera infección*U.F.C. Unidades Formadoras de Colonias.

Cultivo De Secreción NOMBRES ALTERNATIVOS

Cultivo del exudado genital; Cultivo de un exudado o secreción genital

DEFINICIÓN

Es un examen de laboratorio que se

lleva a cabo en los hombres para identificar organismos en la uretra y en el tracto genital que causan infecciones.

FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN

Se limpia el orificio de la uretra (en

el extremo del pene) del paciente con un algodón o gasa estéril

para luego insertar, con suavidad, un aplicador (hisopo) de algodón cerca de 3/4 de pulgada en la uretra y girarlo suavemente.

La muestra es recolectada por lo menos una hora después de orinar, para asegurar una buena calidad de la misma.

Luego, en el laboratorio se prepara un cultivo con el exudado o secreción (líquido recolectado)

para aislar e identificar cualquier organismo que crezca en el cultivo.

La secreción puede ser examinada por medio de una tinción de gram en una lámina portaobjetos bajo el microscopio para obtener resultados preliminares que se confirman luego con el cultivo.

PREPARACIÓN PARA EL EXAMEN

El paciente no puede orinar durante

una hora antes del examen debido a que la micción arrastra algunos de los organismos necesarios para obtener un cultivo confiable.

QUE SE SIENTE DURANTE EL EXAMEN

Se experimenta una molestia asociada con el cepillado de la uretra.

RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN

Este examen se realiza para detectar enfermedades de transmisión sexual, como gonorrea y Clamidia, y a menudo cuando hay secreción uretral. VALORES NORMALES

Un cultivo negativo o la ausencia de crecimiento de organismos en el cultivo es normal.

SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES

Los resultados anormales pueden indicar infección dentro del aparato genital, lo cual puede abarcar infecciones como gonorrea o Clamidia.

CUÁLES SON LOS RIESGOS

Ocasionalmente, se presentan

desmayos producidos por la estimulación del nervio vago cuando el aplicador (hisopo) es introducido en la uretra. Hay otros riesgos como infecciones o sangrado.

CONSIDERACIONES ESPECIALES

Un examen equivalente para las

mujeres es un cultivo endocervical.

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN EN EL LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA

Cocos Gram. Positivos catalasa positivo Staphylococcus

Coloración de Gram. Colonias doradas

Forma: cocos Beta hemolíticas

Disposición: cocos en racimos En agar sangre

Propiedad tintorial: Gram. +

Prueba de coagulasa

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN EN EL LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA

Cocos Gram. Positivos catalasa negativos

Streptococcus Forma: coco Disposición en cadenas Propiedad tintorial. Gram+

Sensibilidad a la bacitracina Prueba de Camp

Streptococcus agalactiae (Grupo B)Prueba de Hidrólisis del Hipurato y positiva

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN Streptococcus neumoniae

Coloracion de Gram

Forma: cocos

Disposición: dipococos

Propiedad tintorial. Gram +

Streptococcus neumoniae

Prueba de Optoquina

Soluble en bilis, positiva: S.pneumoniae

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

Cocos Gram. Positivos catalasa negativos Streptococcus Estreptococos grupo D: prueba

de bilis esculina positiva

prueba de bilis esculina positiva

Coloración de Gram.

Forma. Coco Disposion: Cocos

en cadena Propiedad

tintorial: Gram +

Neisseria meningitidis

* Coloración de Gram.

Forma. Cocos Disposición:

diplococos Propiedad

tintorial. Gram. –

Neisseria meningitidis

Prueba de oxidasa +

Neisseria meningitidis

Fermentación de glucosa y maltosa

Neisseria meningitidisCrecimiento en agar chocolate

Neisseria gonorroheae

Coloración de Gram.

Forma. Cocos Disposición:

diplococos arriñonados intracelulares

Propiedad tintorial. Gram. –

Prueba de oxidasa + igual que N. meningitidis

Bacilos Gram. Positivos aerobios no esporulados

Listeria monocitogenes

*

Corynebacterium spPropiedad tintorial Gram.+ Agar sangre-telurito y agar sangre

Bacilos gram. Negativos Fermentadores de Glucosa

Coloración de Gram.

Forma: Bacilos Propiedad

tintorial. Gram. negativo

Crecimiento en agar de Macconkey

Todas estas pruebas se registran y se analizan con las tablas para identificación

Bacilos gram. NegativoHaemophilus influenzae

Coloración de Gram.

Forma:Coco Bacilos

Propiedad tintorial. Gram. Negativo

Haemophilus influenzae

Haemophilus influenzaeCrecimiento alrededor factores XV

Si tenemos bacilos gran negativo se les hace el test minimo

Urea, indol,gelatina, movilidad TSI, LIA Mac Conkey etc Si es Gram Positiva en racimos Manitol, coagulasa , novobiocina

Hongos

Células Levaduriforme

Criptococcus neoformans

Protocolo de rutinaIdentificación de Staphylococcus

Cocos Gram. +Agrupación en racimos o paquetes irregulares

Catalasa+Staphylococcus

Fermenta el manitol No fermenta manitolCoagulasa + Coagulasa -

Sensible resistente Staphylococcus aureus Novobiocina Novobiocina

↓ ↓ S. epidermidis S. saprophyticus

Tabla # 3 Identificación de los Staphylococcus

Protocolo de rutinaIdentificación de Neisseria gonorrhoeae

Crecimiento en thayer Martín / agar sangre y agar chocolateColoración de Gram.: Diplococos Gram.-negativos

Oxidasa Positivo

Utilización de Carbohidratos

Glu Ma Lac Sac (+) (-) (-) (-)

Neisseria gonorrhoeae

Identificación de N.meningitidisCrecimiento en thayer Martín - agar sangre y agar chocolate

Coloración de Gram.: Diplococos Gram.-negativos

Oxidasa

Positivo Neg

Identificación Serogrupo No N. meningitidis

Positivo

Utilización de Carbohidratos

Glu Ma Lac Sac (+) (+) (-) (-)

N.meningitidis

Sangre

Siembra directa en frasco de hemocultivoIncubar 24 a 37º C

Sub-cultivo en:

Agar sangre de carnero 37 º C

Búsqueda se Staphylococcus, Enterococo,Listeria

Agar heminaBacitracina extracto de levaduras GHBEL 37ºC 24h10% Co2

Búsqueda de Haemophilus influenzae b

Agar soya tripticasa (TSA)37º C 24 h

Búsqueda de Brucella.Pseudomonas

Agar de Mac conkey37ºC 24 h

Búsqueda de Enterobacterias

Medio de Thayer Martín 37º C 24 h

Búsqueda de Neisseria

Identificación de bacterias en hemocultivo

Lisis/Centrifugación

Centrifugación

.