DIAGNOSTICO DE INFECCIONES VIRALES
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EL LABORATORIO COMO
HERRAMIENTA EN EL
DIAGNÓSTICO DE
ENFERMEDADES
INFECCIOSAS
Laura Vanessa Moreno
Villamizar
Slenddy Dayhanna Padilla
Velandia
Laura Carolina Rodriguez
Nuñez
INFECCION VIRALLos virus causan infecciones familiares como
el resfrío común, la gripe y las verrugas.
Pueden causar enfermedades graves como
el VIH / SIDA, la viruela y las fiebres
hemorrágicas.Los virus son como secuestradores. Invaden las
células vivas normales y las aprovechan para
multiplicarse y producir otros virus como ellos. Las infecciones virales son difíciles de tratar
porque los virus viven dentro de las células de
su cuerpo. Están "protegidos" contra los
medicamentos, que suelen trasladarse a través
del torrente sanguíneo
Son muy pequeños, mucho más pequeños que
las bacterias
MANEJO DE LA
MUESTRAMÉTODOS
DIRECTOS
Detección de virus
Biopsia
Descamación como Papanicolaou
Frotis
Lavado bronquioalveolar
Secreción
Exudados
Líquido corporal
Sangre
INDIRECTOS
Serología:
IgM
IgG
Muestreo periódico:
Dengue
Hepatitis
SIDA
Enfermedades congénitas:
Líquido amniótico
Muestra de sangre al nacimiento
Respuesta
inmune del
virus
Cómo se evidencia la actividad viral en un cultivo celular?
1) Por efecto citopático (ECP) observables mediante el uso de microscopio invertido
Este método no permite la identificación del agente causal, por lo que
se requiere la
confirmación mediante técnicas específicas. IF- Inmunhistoquímica
(IHQ).
Ejemplo
LISIS Picornavirus(virus de la
Fiebre Aftosa,
Herpesvirusbovino)
DESPRENDIMIENTO y LISIS
(HVB-5)
SINCICIOS =
Paramyxovius (Virus sincicial
respiratorio)
VACUOLIZACION = BVDV
cepa citopática.
REDONDEAMIENTO
( Adenovirus)
2) Por visualización de cuerpos de inclusión (CI):
• Tipos Cowdry A y B, intranucleareas e intracitoplasmáticos. Su
visualización en cultivos celulares se efectúa previa tinción con
colorantes específicos.
Ejemplos:
• Virus de la rabia -Corpúsculos de Negri (intracitoplasmáticos en
neuronas) –Coloración de Seller’s.
• Los cuerpos de inclusión pueden visualizarse también en cortes
histológicos ; por ejemplo: Herpesvirus equino- Cowdry A
(intranucleares en hepatocitos y células bronquiales fetales)-
coloración de hematoxilina-eosina.
La detección de cuerpos de inclusión asociados, en algunos
casos es orientativa y en otras confirmatoria de la presencia
del agente.
Principales virus
• VRS Lactantes
• Rinovirus (50%) Todas edades
• Adenovirus Todas edades
• Gripe Especialmente < 5 años
• Parainfluenza < 5 años
• Coronavirus
Muestras clínicas
• Frotis nasal
• Lavado nasal
• Frotis faringeo
• Aspirado nasofaringeo
o Obtenerlas en los tres
primeros dias despues del
inicio de los sintomas
Métodos de Dx directo
• Cultivo viral Gold
estándar
o Efecto citopatico
o Dx lento 5-7 días
o No todos son cultivables
HBoV
CoV
RV
PIV
• Detección de Ag mediante
Ac monoclonales
o Inmunofluerescencia
o Inmunocromatografía
o Enzimoinmunoanálisis
• Detección de ácidos
nucleicos
o PCR
Virus herpes simplex
Prueba de Tzank
• Tinción de Wright o Giemsa
• Observa sincitios e inclusiones nucleares de Cowdry
Detección de Ac
• Usa para primo infección y estudios epidemiológicos
Transmisión: Saliva
• VHS-1
Transmisión: Secreción vaginal
• VHS-2
Varicela zoster
• Virus se aisla de las
vesículas
• Prueba de Tzanck
• Técnicas de biología
molecular
Virus Epstein-Barr
• Mononucleosis infecciosa
• Deteccion en suero de:
o Linfocitos atipicos
o Anticuperpos heterofilicos No están en reactivaciones
o Anticuerpos anti-VEB
CITOMEGALOVIRUS
• Infecta al 50 – 80% de las
personas en el transcurso
de la vida
VHH 6, 7 y 8
• VHH6 Roseola niños
• VHH7 Roseola
• VHH8 Sarcoma de
KaposiOjo de lechuza
Están en tejidos y en orina
Papanicolau
HE
Eosina
PCR
Inmunofluorescencia
Enzimoinmunoanálisis
VHH8
VHH6VHH7
Cultivo viral
VHH7 VHH6
Indicación para la
realización de
coprológico y Ag
virales en heces
o Valorar si hay deshidratación, historia clínica y exploración física
o Laboratorio Se usan cuando hay deshidratación
Descartar otros dx
• Diarrea mucosanguinolenta
• Inmunodeficiencias
• Diarrea de evolución
prolongada >15 días
• Diarrea en niño llegado de
países en vía de desarrollo
Diagnóstico
• ELISARotavirus
• Microscopía electrónica
• Ig especificas
• Proteínas virales ELISA – Aglutinación látexAdenovirus
• RT-PCRCalicivirus
• Microscopía electrónica
• ELISA
• Inmunoflorescencia
• PCR
• Cultivo
Astrovirus
DENGUELeucopenia
Incremento de transaminasas
en dengue febril
Trombocitopenia
Aumento de fibrinólisis
Hemoconcentración
IgM – IgG (ELISA) después de
la fase febril
PCR
Detección de proteína vírica
específica NS1 por ELISA
Inmunohistoquímica para
DENGUE
HEMORR
ÁGICO
Se transmite por:
Cuando el
mosquito Aedes
Aegypti se alimenta
con sangre de una
persona enfermas con
este virus y luego pica
a personas sanas.
La hembra deposita
sus huevos en las
paredes de
recipientes con agua
estancada, limpia y a
la sombra. Al beber
esta agua
CHIKUN
GUNYA
Leucopenia
Trombocitopenia
RT-PCR
Cultivo
Títulos altos de IgM
Concentración cuatro veces mayor de la
IgG convaleciente
RARA
VEZ
FIEBRE
AMARILLALeucopenia
Proteinuria 5 a 6 g/L
AST es el doble de, ALT
Tiempo de protrombina
IgM por ELISA en fase aguda y convaleciente
PCR
Inmunoanálisis de anticuerpos monoclonales contra
Ags víricos circulantes.
Albuminuria para Dx diferencial
Se transmite por:
•Cuando el mosquito Aedes
Aegypti, Aedes Haemagogus y
Aedes Sabethes se alimenta con
sangre de una persona enfermas con
este virus y luego pica a personas
sanas.
RABI
AAcs fluorescentes Biopsia de piel
Sensibilidad de 60 a 80%
PCR de transcriptasa inversa
Amplificación de secuencias
de ácidos nucleicos
Aislamiento vírico de LCR o saliva
Acs en suero y LCR
CUERPOS DE NEGRI
RUBÉ
OLALeucopenia en primeras etapas
Aumento de células plasmáticas
Acs IgM
Títulos de Acs IgG
Aislamiento del virus
Falsos positivos de Acs IgM
Acs en orina y saliva
PCR
Virus de Epstein-
Barr
CMV
Parvovirus
Factor
reumatoide
POLIOMI
ELITISRecuento periférico de leucocitos
Presión de LCR y sus proteínas
Glucosa no disminuye
Menos de 500 leucocitos/µl
24h
LCR normal en 5% de los casos
Acs neutralizantes
Fijadores de complemento
Linfocito
s
Normal o
apenas alto
Primera o
segunda semana
de la enfermedad
HEPATITI
S BDetección del antígeno superficial del virus de la hepatitis
B (HBsAg).
La infección aguda se caracteriza por la presencia del
HBsAg y de inmunoglobulina M (IgM) en el antígeno del
núcleo HBcAg.
En la fase inicial de la infección los pacientes también son
seropositivos para el HBeAg.
La infección crónica se caracteriza por la persistencia (más
de seis meses) del HBsAg (con o sin concurrencia de
HBeAg).
La persistencia de HBsAg es el principal marcador del
riesgo de ulterior desarrollo de hepatopatía crónica y
La detección de anticuerpos anti-VHC mediante un examen
serológico revela que la persona está infectada con el virus.
Si el examen es positivo se debe realizar una prueba de
ARB del VHC para confirmar la infección crónica, dado que
entre el 15 y el 45% de las personas infectadas con el VHC
eliminan espontáneamente la infección mediante una
respuesta inmunitaria fuerte, sin necesidad de tratamiento.
Aunque ya no estén infectadas, los análisis serológicos de
esas personas revelarán la presencia de anticuerpos anti-
VHC.
HEPATITIS
C
Se analiza una muestra de
sangre para determinar la
secuencia genética del VHC.
El análisis del genotipo del
VHC sólo se hace una vez ya
que el genotipo no cambia.
Sin embargo, si alguien
infectado con el VHC se
vuelve a exponer al virus, se
pueden infectar con un
genotipo diferente.
Examen microscópico: observación de células sospechosas con
cambios coilocíticos en citologías de cuello uterino y vagina en
mujeres, usando la tinción de Papanicolaou.
Se pueden tomar biopsias de lesiones sospechosas, o incluso de
vegetaciones o verrugas genitales, tanto de hombres como de
mujeres, y enviar las muestras a una sección de anatomía
patológica para su análisis.
Detección directa del material genético del virus por técnicas de
biología molecular, que amplifican el ADN del virus y permiten la
identificación de los distintos serotipos.
VPH
http://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/irsv.pdf
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/herpes.html
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicro
biologia/seimc-procedimientomicrobiologia8a.pdf
https://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/gastroenteritis_aguda.pdf
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/inf-tracto-
gastro.html
BIBLIOGR
AFÍA