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DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD Y/O RESISTENCIA DEL A LOS INSECTICIDAS DE LOS MOSQUITOS ANOPHELES DE LAS PRINCIPALES ÁREAS MALÁRICAS DEL PERÚ MINISTERIO DE SALUD INSTITUTO NACIONAL DE SALUD CENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA 2006 BLGO. ROSARIO BALTA LEÓN BLGO. PABLO E. VILLASECA CASTRO. SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº29
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DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD Y/O RESISTENCIA
DEL A LOS INSECTICIDAS DE LOS MOSQUITOS ANOPHELES DE LAS
PRINCIPALES ÁREAS MALÁRICAS DEL PERÚ
MINISTERIO DE SALUDINSTITUTO NACIONAL DE SALUDCENTRO DE INFORMACIÓN Y DOCUMENTACIÓN CIENTÍFICA
2006
BLGO. ROSARIO BALTA LEÓN
BLGO. PABLO E. VILLASECA CASTRO.
SERIE INFORMES TÉCNICOS Nº29
DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD Y/O RESISTENCIA DEL A LOS INSECTICIDAS DE LOS MOSQUITOS ANOPHELES DE LAS PRINCIPALES ÁREAS MALÁRICAS DEL PERÚ
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INFORME FINAL
Anopheles albimanus (foto RBL06)
I.TITULO DEL DOCUMENTO.
Determinación de la susceptibilidad y/o resistencia del a los insecticidas de los mosquitos
Anopheles de las principales áreas maláricas del Perú”. (C. OGITT : 2-01-05-04-069)
II. AUTORES.
Blgo. Mercedes Rosario Balta León.
Blgo. Pablo E. Villaseca Castro.
DETERMINACIÓN DE LA SUSCEPTIBILIDAD Y/O RESISTENCIA DEL A LOS INSECTICIDAS DE LOS MOSQUITOS ANOPHELES DE LAS PRINCIPALES ÁREAS MALÁRICAS DEL PERÚ
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Mercedes Rosario Balta León Instituto Nacional de Salud- Lima Perú
Teléfono: 2516151 anexo 548 celular 98963456
Correo electrónico [email protected]
III. INDICE.
I. Titulo 1
II. Autores 1
III. Índice 1
IV. Resumen en español 1
V. Introducción 2
VI. Antecedentes 2
VII. Objetivos 2
VIII. Metodología.
Determinación de la susceptibilidad a insecticidas para mosquitos adultos
(WHO/VBC/81.807, WHO/MAL /95.1073, WHO/CTD/VBC/95.998) 4
IX. Resultados 5
X. Discusión
XI. Referencias Bibliográficas 6
IV. RESUMEN EN ESPAÑOL
Planteamiento del problema:
Las malaria es una enfermedad transmitidas al hombre por los zancudos, en nuestro país en la
década del 90 la transmisión por malaria producida por Plasmodium falcíparum, se incrementó
paulatinamente estableciéndose zonas endémicas en el Norte del Perú, con Anopheles albimanus
como vector principal, en la Amazonía con Anopheles darlingi, mientras que en las zonas
endémicas del país se tiene Anopheles pseudopunctipennis como vector principal.
En nuestro país se ha utilizado las dosis diagnosticas y la metodología de la OMS 1981, para
determinar la susceptibilidad a los insecticidas en 14 DISAS y 23 localidades en 1999. (Balta). Se
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tiene información local en el 87% de ellas, detectando tres áreas resistentes a piretroides de los
mosquitos Anopheles albimanus. Dado que no hubo mas evaluaciones desde entonces y
debiendo estas ser anuales, Actualizaremos la susceptibilidad y /o resistencia de algunos
insecticidas usados hasta el momento y de otros insecticidas opcionales.
Objetivo: Determinar la susceptibilidad a los insecticidas de los mosquitos del Gen. Anopheles
en las principales áreas maláricas del Perú. .
Material y Métodos: Para este estudio descriptivo y de cohorte transversal se utilizaron
poblaciones de zancudos Anopheles albimanus y Anopheles pseudopunctipennis y Anopheles
darlingi adultos hembras capturados dentro de las viviendas y en el peri domicilio se utilizaron
papeles impregnados por OMS siguiendo el procedimiento WHO/VBC/81.807) y con las
correcciones de 1996 (CTD/WHOPES/IC/96.1) 4 y de 1998 5 .
Se estudiaron 6 insecticidas, de los cuales 3 eran piretroides (Lambdacyalothrina, deltametrina,
Permethrina, un órgano fosforado (malation) y dos carbamato (propoxur y carbaryl). En 5
localidades del país. Para cada bioensayo se utilizaron 400 especimenes. Los bioensayos se
realizarán entre 20 y 30 °C y 70 a 90 % de HR.
Este estudio permitirá evaluar el programa de control y permitirá iniciar un monitoreo de la
susceptibilidad y delinear estrategias de control eficaces, para cortar la transmisión de la malaria
en las localidades evaluadas.
V. INTRODUCCIÓN.
La malaria es una enfermedad transmitidas al hombre por los zancudos del género Anopheles, en
nuestro país en la década de los 90s la transmisión por malaria producida por Plasmodium
falcíparum, se incrementó paulatinamente estableciéndose zonas endémicas en el Norte del Perú,
con Anopheles albimanus como vector principal, en Loreto con Anopheles darlingi y Anopheles
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benarrochi y en 21 departamentos Anopheles pseudopunctipennis es el vector principal de
Plasmodium vivax.
Se ha realizado este estudio en 5 departamentos, 4 de ellos corresponden a la región neotropical:
Loreto y Madre de Dios, correspondiéndole las especies de An. rangeli y An. albitarsis, mientras
en San Martín y Cajamarca se estudio al An. albimanus, debiendo destacarse su reciente
introducción a estas zonas. Dado que no hubo mas evaluaciones desde entonces y debiendo
estas ser anuales. Actualizaremos la susceptibilidad y /o resistencia de algunos insecticidas
usados hasta el momento y de otros insecticidas opcionales
En el departamento Lambayeque, corresponde al dominio Nor Oeste de Sud – América, donde
se estudió al Anopheles pseudopunctipennis vector principal de la malaria en el país y fueron
capturadas en las viviendas e el área de Olmos .
En Loreto, los bioensayos se han realizado en Anopheles rangeli, recolectados sobre ganado
vacuno, en Quistococha.
En la zona durante esta estación de invierno no hubo normalidad de las lluvias, las orillas se han
alejado de los poblados, el nivel del río Amazonas a fines del mes de Julio, disminuyeron 2 metros
y durante la semana del 22 al 27 de agosto el fenómeno de friaje, afectó nuestra Amazonía, todo
esto imposibilitó realizar el estudio con Anopheles darlingi.
En Madre de Dios, el brote de malaria del 2004 tuvo 768 casos de malaria correspondiente a
Plasmodium vivax, (6 veces mas casos que en el 2003) provenientes 321 del distrito de Inambari,
116 casos de Madre de Dios y 331 de Huapetuhe y por accesibilidad se escogió colectar en Madre
de Dios.
VI. ANTECEDENTES
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Entre 1998 y 99 se utilizaron las dosis diagnosticas y la metodología de la OMS 1981, para la
determinación de la susceptibilidad a los insecticidas en 14 DISAS y 23 localidades, teniéndose
información local del 87 % (Balta).
El ministerio de salud a través de DGSP y DIGESA para romper la transmisión de la malaria, ha
venido realizando el control de Anofelinos .Dado que no hubo mas evaluaciones desde entonces y
debiendo estas ser anuales, Actualizaremos la susceptibilidad y /o resistencia de algunos
insecticidas usados hasta el momento y de otros insecticidas opcionales. Se propuso evaluar la
susceptibilidad de los principales vectores de la malaria, debido a la dificultad en la compra de los
papeles impregnados no se pudo evaluar todas las áreas malaricas propuestas en el presente
trabajo.
Existe poca información sobre las evaluaciones de los programas de control en relación a la
susceptibilidad por eso es necesario ordenar estas actividades, lo que va a influir en la salud de la
población y hará más atractiva las ciudades para el desarrollo turístico.
Este nuevo conocimiento permitirá contar con la información operativa para planificar y priorizar
las compras de insecticidas.
VII. OBJETIVOS
Determinar la susceptibilidad del mosquito del genero Anopheles a insecticidas de uso en Salud
Pública en áreas de transmisión de malaria.
VIII. METODOLOGÍA
Determinación de la susceptibilidad a insecticidas para mosquitos adultos
(WHO/VBC/81.807, WHO/MAL /95.1073, WHO/CTD/VBC/95.998)
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Introducción..- Los mosquitos adultos para los bioensayos pueden provenir de colecciones
obtenidas a partir de larvas o su descendencia (generaciones en laboratorio F1, F2, etc).
Aunque ocurre raramente una gran diferencia en la susceptibilidad entre los sexos, deben usarse
los mosquitos hembras exclusivamente en las pruebas de campo. Las comparaciones de los datos
de la prueba de susceptibilidad de un solo lugar a través del tiempo son útiles para indicar las
tendencias de resistencia, así como las comparaciones de mosquitos de diferentes lugares en un
solo momento, nos sirve para evaluar su distribución.
Composición del equipo de prueba.- 25 tubos marcados con puntos verdes 20 para la espera y 5
para dejar en espera el control, 4 tubos marcados con puntos rojos para portar los papeles
impregnados, 20 correderas y 8 anillos dorados y 40 anillos plateados.
40 hojas de papel limpio (12 x 14.8 centímetro) para los tubos de espera, 02 capturadores
manuales, La hoja de la instrucción, 8 papeles impregnado 14.8 x 12 cm, Dos pinzas de punta
fina, 01 termo higrómetro, vasos colectores de 500 ml de capacidad (22), solución azucarada al
5%.
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Papeles impregnados con insecticidas.- Los papeles impregnados provienen de la Universidad de
Sains Malasia, Penang, Malasia (en nombre de OMS), vienen en la presentación de cajas de
plástico; cada caja contiene 8 papeles y se conservan a 4 ° Celsius.
Los factores generales que afectan la prueba de susceptibilidad de la OMS.- Cambios de
resistencia con la edad difieren dependiendo del mecanismo de resistencia involucrado, con
algunos insectos que se ponen más susceptible con el tiempo. El estado fisiológico de las
hembras adultas (es decir si ellos están faltos de alimento, alimentados con sangre, semi-grávidas
o grávidas) tiene un efecto notable en la susceptibilidad a los insecticidas y la expresión del
fenotipo de resistencia. La prueba debe realizarse entre 20 ° + / - 30 ° Celsius. La relación entre
la temperatura y la mortalidad por la toxicidad es directa. La temperatura y la humedad relativa
deben registrarse durante la exposición al insecticida y los períodos de espera.
Condiciones generales a ser reunidas.-
El condicionamiento de los mosquitos en vasos con el número que ira en cada tubo debe
realizarse aproximadamente 10 horas antes de realizarse la prueba, donde reposarán en
condiciones optimas entre 20 y 30 grados Celsius y 75 a 85 % de HR. Para la prueba se pueden
usar hembras alimentadas con sangre o no con 24 a 48 horas después de haber emergido. Un
número mínimo de 400 mosquitos debe probarse para cualquier insecticida a una concentración
dada, con 4 replicas de 25 mosquitos por tubo de la prueba. Dónde no es posible ensayar con el
número apropiado pueden continuarse los ensayos durante los días necesarios para lograr este
ideal.
Prueba de susceptibilidad de la OMS.- Se deben usar los tubos en posición vertical. La posición
horizontal evita el rápido knock down en los piretroides y DDT, la recuperación sub- secuente de
mosquitos pero con un riesgo de elevada exposición al insecticida. Las pruebas deben llevarse a
cabo preferentemente entre 20 ° y 30 ° Celsius y entre 70 y 80 % de humedad relativa (HR), nunca
a las temperaturas superiores a 30 ° Celsius. Si menos del 80% KD se observa después de 60
minutos, entonces KD también debe anotarse después de 80 minutos, por ejemplo dejar otros 20
minutos, en el tubo de exposición, Después de 10 minutos de exposición, contar el número de
mosquitos de KD moviendo suavemente el fondo del tubo. Donde la resistencia por el knock down
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(kdr) esta envuelto el índice de KD es un indicador sensible para el descubrimiento temprano de la
resistencia del piretroide. De las lecturas de KD de varios intervalos, se puede realizar un análisis
probit por computadora o una línea de regresión sobre papel probit, obteniendo el KD 50, así como
el KD 95 así mismo obteniendo su gráfica. Los mosquitos adultos pierden a menudo las piernas
durante las pruebas con el piretroide, sobre todo cuando están expuestos a concentraciones altas
y deben ser considerados como vivos si ellos pueden volar sin tener en cuenta el número de
piernas que permanecen.
Los papeles impregnados con piretroides no deben usarse más de 5 veces.
La interpretación de resultados de prueba de susceptibilidad .- Cuando la mortalidad ocurre entre
el 98 y 100%, indica que es susceptible. Si ocurre una mortalidad entre el 97 y 80%, indica que
los mosquitos de esa área se encuentran en vigilancia, pero cuando la mortalidad es menor al
80%, indica que existe un grado de resistencia.
Cuando el porcentaje de mortalidad en el testigo es menor al 5% no se aplica la formula de
Abbott. Cuando la mortalidad del control está entre 5% y 20%, el promedio observó la mortalidad
se corrige por la fórmula de Abbott:. Cuando la mortalidad de los testigos es mayor de 20 % se
anula la prueba y se repite.
Mortalidad corregida = % mortalidad de la prueba - % morta!idad del control x 100
100 - % mortalidad del control
Papeles impregnados con insecticidas 3.- Los papeles impregnados fueron preparados en la
Universidad de Sains Malasia, Penang, Malasia (autorizado por la OMS). Llegaron en cajas de
plástico; conteniendo cada una 8 papeles.
Insecticida Dosis diagnóstica Fecha de
Impregnación
Fecha de
Vencimiento
Deltametrina (PI) 0.05 % Agosto 2004 Agosto 2005
Lambdacyalotrina (PI) 0.05 % Agosto 2004 Agosto 2005
Permetrina (PI) 0.75 % Abril 2005 Abril 2006
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Malation (OP) 5 % Febrero 2005 Febrero 2008
Carbaryl (CA) 0.8 % Abril 2005 Abril 2006
Propoxur (CA) 0.1 % Febrero 2005 Febrero 2008
EQUIPO DE SUSCEPTIBILIDAD OMS
IX. RESULTADOS.
De Loreto : Iquitos.
Condiciones ambientales.- Los bioensayos con deltametrina se realizaron entre 23 - 29 °C y 66
- 97 % de humedad relativa. Durante el tiempo de espera la temperatura osciló entre 27 - 29 °C y
entre 66 - 97 % de humedad relativa.
Los bioensayos con malation se realizaron entre 24 - 27 °C y entre 62 - 97 % de humedad
relativa. Durante el tiempo de espera la temperatura osciló entre 24 - 27 °C y entre 70 - 96 % de
humedad relativa.
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Prueba de susceptibilidad.- La prueba de susceptibilidad con deltametrina al 0.05 % frente a
Anopheles rangeli de la localidad Quistococha, utilizando 379 especimenes, dio como resultado el
100 % de mortalidad, resultado válido y considerado como susceptible. (Ver figura N°1)
La prueba de susceptibilidad con malation al 5 % frente a Anopheles rangeli de la localidad de
Quistococha, utilizando 168 especimenes, dio como resultado el 100 % de mortalidad, resultado
considerado como susceptible y que necesita ser verificado. (Ver figura N°1).
Mosquitos controles.- La mortalidad del control en la prueba del fue de 3.0 % durante la prueba
con deltametrina a las 24 horas de reposo y 4.3 % de mortalidad durante la prueba con malation a
las 24 horas de reposo, utilizando 112 especimenes de Anopheles rangeli, lo que valida la prueba.
De Madre de Dios : Puerto Maldonado.
Condiciones ambientales.- La prueba se realizó entre 22 y 25 °C promedio y entre 85 y 93 % de
humedad relativa. Durante el tiempo de espera la temperatura osciló entre 22 y 26 °C y entre 73 y
93 % de humedad relativa.
La prueba de susceptibilidad.- La prueba de susceptibilidad con Deltametrina al 0.05 % frente a
Anopheles albitarsis de la localidad El Prado, utilizando 244 especimenes, dio como resultado el
100 % de mortalidad.
La prueba de susceptibilidad con Permethrina al 0.75 % frente a Anopheles albitarsis de la
localidad El Prado, utilizando 240 especimenes, dio como resultado el 100 % de mortalidad.
La prueba de susceptibilidad con Carbaryl al 0.8 % frente a Anopheles albitarsis de la localidad El
Prado, utilizando 245 especimenes, dio como resultado el 95.5 % de mortalidad.
La prueba de susceptibilidad con Propoxur al 0.1 % frente a Anopheles albitarsis de la localidad El
Prado, utilizando 248 especimenes, dio como resultado el 100 % de mortalidad.
Mosquitos controles.- La mortalidad del control en la prueba del fue de 2.7 % a las 24 horas de
reposo, lo que valida la prueba sin correcciones. (Ver tabla N° 1 del Anexo)
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De San Martín : Tarapoto.
Condiciones ambientales.- Los bioensayos se realizaron a 26 °C y 96 % de HR.
Prueba de susceptibilidad.- La prueba de susceptibilidad con deltametrina al 0.05% frente a
Anopheles albimanus de la localidad 3 de Octubre, utilizando 400 especimenes, dio como
resultado el 14.6% de mortalidad, resultado valido y considerado como resistente. La mortalidad
del control fue 2.6%.
En Cajamarca : Jaén.
Condiciones ambientales.- Los bioensayos se realizaron entre 23 - 28°C y 70 – 90 %.
Prueba de susceptibilidad.- La prueba de susceptibilidad con deltametrina al 0.05 % frente a
Anopheles albimanus de la localidad La Colina, utilizando 300 especimenes, dio como resultado
el 54 % de mortalidad, resultado válido y considerado como resistente.
La prueba de susceptibilidad con Lambdacyalothrina al 0.05 % frente a Anopheles albimanus de
la localidad La Colina, utilizando 300 especimenes, dio como resultado el 100 % de mortalidad,
resultado válido y considerado como susceptible.
La prueba de susceptibilidad con malation al 5 % frente a Anopheles albimanus de la localidad La
Colina, utilizando 300 especimenes, dio como resultado el 100 % de mortalidad, resultado válido y
considerado como susceptible.
La prueba de susceptibilidad con propoxur al 0.1 % frente a Anopheles albimanus de la localidad
La Colina, utilizando 300 especimenes, dio como resultado el 100 % de mortalidad, resultado
válido y considerado como susceptible.
En Lambayeque : Olmos.
Condiciones ambientales:.- Los bioensayos se realizaron entre 22 - 23°C y 82 –96 %.
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Prueba de susceptibilidad.- La prueba de susceptibilidad con deltametrina al 0.05 % frente a
Anopheles pseudopunctipennis de la localidad Sincape, utilizando 350 especimenes, dio como
resultado el 98.3 % de mortalidad, resultado válido y considerado como susceptible.
TABLA CON LOS RESULTADOS DE LAS AREAS EVALUADAS
Insecticida Anopheles DISA Distrito % mort. Resultado
Deltametrina 0.05% albimanus San Martín Banda Shilcayo 15 Resistencia
Lambdacyalotrina 0.05% albimanus Jaen Jaen 28 Resistencia
Deltametrina 0.05% albimanus Jaen Jaen 54 Resistencia
Carbaryl 0.8% albitarsis M. de Dios Tambopata 96 Vigilancia
Deltametrina 0.05% pseudopunctipennis Lambayeque Olmos 98 Susceptible
Deltametrina 0.05% rangeli Loreto Quistococha 100 Susceptible
Deltametrina 0.05% albitarsis M. de Dios Tambopata 100 Susceptible
Permetrina 0.75% albitarsis M. de Dios Tambopata 100 Susceptible
Malation 5% rangeli Loreto Quistococha 100 Susceptible
Malation 5% albimanus Jaen Jaen 100 Susceptible
Propoxur 0.1% albimanus Jaen Jaen 100 Susceptible
Propoxur 0.1% albitarsis M. de Dios Tambopata 100 Susceptible
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LAS 5 LOCALIDADES DONDE SE DETERMINO LA SUSCEPTIBILIDAD A INSECTICIDAS EN CEPAS DE Anopheles sp., 2005
XI.
Anopheles rangeli deQuistococha : Loreto (2005)
100 100
0
20
40
60
80
100
Delta-0.05% Mala-5%
% Mortalidad
Anopheles albimanus deTarapoto : San Martín (2005)
15
0
20
40
60
80
100
Delta-0.05%
% Mortalidad
Anopheles albimanus deJaén : Cajamarca (2005)
54
28
100 100
0
20
40
60
80
100
Delta-0.05% Lambda-0.05%
Mala-5% Prop-1%
% Mortalidad
Anopheles albitarsis dePuerto Maldonado : Madre de Dios (2005)
100 100 100 95.5
0
20
40
60
80
100
Delta-0.05% Per-0.75% Prop-1% Carb-0.8%
% Mortalidad
An. pseudopunctipennisde Olmos : Lambayeque (2005)
98
0
20
40
60
80
100
Delta-0.05%
% Mortalidad
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X. DISCUSION
En La Libertad el Aedes aegypti de la localidad de Trujillo, son susceptibles a la deltametrina
0.05 % (100 % de mortalidad) , Permethrina 0.75% (100% de mortalidad), Lambdacyalothrina al
0.05% (100 % de mortalidad) y malation al 5% (96 % de mortalidad) se encuentra en vigilancia.
En Tumbes el Aedes aegypti de la localidad Andrés Araujo se encuentra en vigilancia con
Deltametrina al 0.05% (84.6% de mortalidad), Se detecta resistencia a la Permethrina 0.75%
(41.7% de mortalidad) y Propoxur 0.1 % (73.4% de mortalidad) asi como Carbaryl 0.8 % (00% de
mortalidad).
En Tarapoto, el Aedes aegypti de la localidad de 9 de Abril son susceptibles a la deltametrina
0.05% (100% de mortalidad a las 24 horas).
En Piura el Aedes aegypti de la Localidad de Mancora , son susceptibles a Deltametrina al
0.05% (99 % de mortalidad),
En Lima en San Juan de Lurigancho los mosquitos Aedes aegypti son susceptibles al
insecticidas Cyfluthina 0.15 %. Con 100 % de mortalidad a las 24 horas de observación y al
Permethrina 0.75 % con mortalidad de 99 % a las 24 horas de observación .
XI. Conclusiones.
En el presente trabajo se detecta dos nuevas áreas con resistencia a Propoxur 1 % de Aedes
aegypti en las localidades de Trujillo en la Libertad y Andres Araujo en Tumbes
El Aedes aegypti son susceptibles al insecticida Deltamethrina 0.05 % en San Martin – Tarapoto
localidad 9 de Abril , en Piura en la localidad de Mancora y en La Libertad – Trujillo .
El Aedes aegypti es susceptible Insecticida Lambdacyalothrina 0.05% .
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El Aedes aegypti son susceptibles al insecticida Malation 5 % en Tumbes en la localidad de
Andrés Araujo y también es susceptible en Trujillo
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS .
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enfermedades”.(1995). WHO/MAL /95.1073, WHO/CTD/VBC/95.998”.
