SEP DGETI SEMS

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107

TUXTEPEC OAXACA.

NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE

CATEDRÁTICO: I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA

SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACION METABOLICAS

PRACTICA:

DETERMINACION CUANTITATIVA

DE BILLIRRUBINA EN SUERO

SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”

FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_

CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: ____________________________________

INTRODUCCION

La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado

midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, Bilirrubin-

glucurónido y bilirrubina libre ligada a la albúmina, sólo la primera reacciona en medio

acuoso (bilirrubina directa) precisando la segunda la solubilización con cafeína para que

reaccione (bilirrubina indirecta). En la determinación de la bilirrubina indirecta se determina

también la directa, correspondiendo el resultado a la bilirrubina total.

La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de bilirrubina presente

en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLÍNICO

La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina.

Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis.

La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en plasma. Causas

más probables de la hiperbilirrubinemia:

Bilirrubina Total: Aumento de la hemólisis, alteraciones genéticas, anemia neonatal,

alteraciones eritropoyéticas, presencia de drogas.

Bilirrubina Directa: Colestasis hepática, alteraciones genéticas y alteraciones hepáticas.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de

laboratorio.

PROCEDIMIENTO

1. Extraer 5ml de sangre sin anticoagulante

2. centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.

3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar

a 2500 r.p.m. por 3 minutos.

4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya

rotulado, sin desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.

5. Pipetear en tubos los siguientes volúmenes.

Blanco (B) Billirrubina Total Blanco (B) Billirrubina

Directa

Reactivo 1 - - 3.0ml 3.0ml

Reactivo 2 3.0ml 3.0ml - -

Reactivo 3 - 100µl - 100 µl

Muestra

p/calibrador

200 µl 200 µl 200 µl

6. Mezclar e incubar exactamente 5 minutos a 15-25°C

7. Leer la absorbancias a 555nm

INTERPRETACION

Reactivos 1 y 2: incoloros

Reactivo con suero:

CALCULOS

Calcule los resultados usando la siguiente ecuación:

Con factor:

(Ab muestra – Ab Blanco Muestra) x *factor = mg/dl Billirrubina muestra

*Factor = concentración del calibrador r

Ab calibrador – Ab Blanco calibrador

* Factor teórico:

Billirrubina (T) = 19.1

Billirrubina (D)= 14

SEP DGETI SEMS

Tuxtepec, OAX.

APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS

PRÁCTICA

DETERMINACION CUANTITATIVA

DE BILLIRRUBINA EN SUERO

NOMBRE DEL PACIENTE:AGUILAR FELIPE AUREA AIDA

SEXO:F EDAD:19 AÑOS FECHA:15/04/11 HORA:9:40AM

REPORTE

RESULTADOS:

______________________

OBSERVACIONES:

___________________________________________________________________________________________

_______________________________

ANALISTA:

AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”

FIRMA

VALORES DE REFERENCIA

En suero

Billirrubina Total: Hasta 1,1

mg/dL ≅18.81 μmol/L

Billirrubina Directa: Hasta

0,25 ≅mg/dL 4.275 μmol/L

CONCLUSIÓN

Aprendimos a realizar en esta sesión la determinación de bilirrubinas total y directa, es

muy importante saber que valores contenemos. Hay patologías en las cuales su

diagnostico se determina por medio de esta prueba.

También el objetivo se cumplió de capacitar al alumno para la determinación de

esta prueba, teniendo en cuenta informe teórico que en cualquier circunstancia de

Altos niveles de concentración de la Billirrubinase le conoce como hiperbilirrubinemia

y esto a su vez se conoce como ictericia. Los niveles normales de ictericia son de

aproximadamente 1mg/dL. Cuando estos niveles suben entre 2 y 3 mg/dL, entonces

hay detección clínica de ictericia.