SEP DGETI SEMS

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107

TUXTEPEC OAXACA.

NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE

CATEDRÁTICO: I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA

SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACION METABOLICAS

PRACTICA:

DETERMINACION CUANTITATIVA

DE ALANINA AMINOTRANSFERASA GPT (ALT)

SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”

FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_

CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: ____________________________________

INTRODUCCION

La Alanina aminotransferasa (ALAT), anteriormente conocida como Transaminasa glutámico-

pirúvica (GPT), también llamada alanina transaminasa (ALT), es

una enzima aminotransferasa con gran concentración en el hígado y en menor medida en los

riñones, corazón y músculos.

Cuando hay una lesión de estos órganos la ALT es liberada a la sangre y aparece elevada en los

análisis.

Como es una aminotransferasa más específicamente hepática que la Aspartato

aminotransferasa (AST), aparece más elevada en las enfermedades hepáticas que en otras, por

eso el cociente ALT/AST (o GPT/GOT) será mayor de 1 en ciertas enfermedades hepáticas como

la hepatitis vírica. Al contrario aparece menor de 1 en enfermedades crónicas como

la cirrosis hepática, enfermedad hepática alcohólica, congestión hepática o tumores hepáticos.

PRINCIPIO DEL METODO

La alanina aminotrasferasa (ALT) inicialmente llamada transaminasa glutámico pirúvica (GPT)

cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato con

formación de glutamato y piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en presencia de

lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH:

ALT

L-Alanina + α-Cetoglutarato ---⎯⎯⎯→Glutamato + Piruvato

LDH +

Piruvato + NADH + H + ⎯⎯⎯→ Lactato + NAD

La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinado

fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra ensayada.

SIGNIFICADO CLINICO

La ALT es una enzima intracelular, se encuentra principalmente en las células del hígado y el

riñón.

Su mejor aplicación es en el diagnóstico de las enfermedades del hígado.

Se observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la hepatitis, enfermedades de los

músculos y traumatismos.

Cuando se emplean en conjunción con la AST ayuda en el diagnóstico de infartos de miocardio, ya

que el valor de la ALT se mantiene dentro de los límites normales y aumenta en los niveles de

AST.

El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

INTERFERENCIAS

Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA oxalato o fluoruro no afectan los

resultados. La hemólisis interfiere con la determinación.

Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la ALT.

Ciertos medicamentos pueden elevar sus valores; como el paracetamol, el alopurinol, la ampicilina,

la azatioprina, la carbamacepina, cefalosporinas, la clorpropamida, el clofibrato, la cloxacilina, la

codeína, la indometacina, la isoniacida, el metroxate, el ácido nalidixico, la notrofurantoina, los

anticonceptivos orales, la fenotiacina, la fenitoina, la procainamida, el propanolol, y la tetraciclina.

METODOLOGIA

1. Extraer 5ml de sangre sin anticoagulante

2. Centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.

3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar a 2500 r.p.m.

por 3 minutos.

4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya rotulado, sin

desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.

5. Pipetear en una cubeta

RT (ml) 1.0 Como nuestro espectrofotómetro no

lee menos de 100, duplicaremos

cantidades.

2.0

Muestra (µl) 100 200

6. Mezclar, incubar 1 minuto

7. Leer la absorbancia (Ab) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la

absorbancia cada minuto durante 3 minutos.

8. Realizar cálculos

REACTIVOS

INTERPRETACION

Color del reactivo:

Color del reactivo con el suero:

CALCULOS

Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (∆Ab/min).

∆Ab/min x 1750= U/L de ALT

Lecturas Minuto

1 1’

2 2’

3 3’

4 4’

CONCLUSION

En esta práctica aprendimos a realizar la prueba de la enzima aminotransferasa, asiendo ajustes

en los valores de RT y muestra, pues como esta descrito anteriormente se duplicaron valores por la

razón de que nuestro espectrofotómetro solo tiene la capacidad de leer la absorbancia a más de

100nm.

También aprendimos como interviene esta enzima en el metabolismo, obteniéndose por un par de

reacciones derivando del ciclo de Krebs.

SEP DGETI SEMS

Tuxtepec, OAX.

APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS

PRÁCTICA

DETERMINACION CUANTITATIVA DE ALANINA AMINO TRANFERASA GPT (ALT)

NOMBRE DEL PACIENTE: MENDOZA BLAS ROBERTO ANTONIO

SEXO: M EDAD: 18 AÑOS FECHA: 17/05/11 HORA: 9:40AM

REPORTE

RESULTADOS:

______________________

OBSERVACIONES:

________________________________________________________________________________________________

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ANALISTA:

AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”

FIRMA

25ºC 30ºC 37ºC

Hombres Hasta 22 U/L

29 U/L 40 U/L

Mujeres Hasta 18 U/L

22 U/L 32 U/L

VALORES DE REFERENCIA