PRACTICA N 02

DESCRIPCIN Y MANEJO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO.

1. INTRODUCCIN:

Casi la totalidad de los organismos unicelulares son imperceptibles para el ojo humano, y para observarlos es esencial el microscopio. El uso de este dispositivo es indispensable en el Laboratorio de Biologa para el estudio de la morfologa y estructura de los microorganismos, as como su reaccin a diferentes colorantes, lo cual junto con otros criterios, permitir su identificacin, por lo tanto, es importante conocer su adecuado manejo.

El microscopio compuesto es un instrumento ptico formado por dos sistemas de lentes que aumentan la imagen de objetos imperceptibles a simple vista.

El poder de resolucin de un instrumento ptico es la capacidad de observar por separado a dos puntos muy cercanos entre s.

Tabla 3.1: Resolucin y magnificacin de diferentes instrumentos pticos.

Instrumento pticoResolucinMagnificacin

Ojo humano0.1 mm1

Microscopio ptico0.2m1000

Microscopio electrnico0.1 nm1 000 000

La imagen formada por el microscopio compuesto depende de:

La longitud de onda de la luz utilizada para formar las imgenes. El ndice de refraccin. La apertura numrica.

Estas propiedades fundamentales de la microscopia, permiten examinar detalles mnimos de la estructura de la clula y de sus organelos, as como de los microorganismos. As mismo permite detectar imperfecciones en metales, cristales, cermica, tipo de rocas, minerales, fsiles, etc.

DESCRIPCIN DEL MICROSCOPIO COMPUESTO. El microscopio compuesto presenta dos partes:

1. PARTE PTICA: Es la parte fundamental del microscopio ya que el poder de resolucin y el aumento depende exclusivamente de ella.

0. Lentes: Comprende ocular (es) y objetivos.

Ocular (es): Es el lente ms cercano al ojo del observador. Da una imagen virtual y aumentada que se proyecta al ojo.

Objetivos: Son lentes con diferentes aumentos (4X, 10X, 40X y 100X), que permiten amplificar la imagen del objeto. Da una imagen real y aumentada.

Existen dos tipos de objetivos: en seco y de inmersin.

Objetivo en seco: Son aquellos en cuya distancia focal existe aire. Se usan para preparaciones en fresco o en seco; a su vez pueden ser: de pequeo aumento (hasta 10X), de mediano aumento (ente 10X y 45X) y de mayor aumento (mayores de 45X y menores de 100X).

Objetivo de inmersin: Es aquel en cuya distancia focal se coloca aceite de microscopa para mejorar la imagen. Se utiliza para observaciones de preparados en seco (100 X).

0. Sistema de iluminacin: Ubicado debajo de la platina y comprende:

Lmpara: Es la fuente de luz que forma las imgenes y se sita en la base del microscopio.

Porta filtro: Es un dispositivo que permite colocar filtros de diferentes colores para seleccionar la luz que formar las imgenes.

Condensador: Dispositivo que concentra la luz sobre el objeto para formar la imagen que luego ser aumentada.

Diafragma: Conjunto de laminillas concntricas que pueden abrirse y cerrarse para regular la luz que formar la imagen.

2. PARTE MECNICA: Dar soporte al sistema de iluminacin y al sistema ptico, permitiendo el enfoque de la imagen. Est formado por:

Pie: Es una base que sostiene al microscopio, asegurando su estabilidad en posicin vertical, inclinada u horizontal. Tiene diferentes formas.

Brazo: Es una pieza que se articula al pie mediante una bisagra llamada charnela (comn en microscopios antiguos), sostiene a las diversas partes del equipo. Es de donde se toma para su traslado y manejo.

Platina: Es una placa de metal que est ubicada en forma horizontal y perpendicular al brazo; en el centro presenta un orificio que permite el paso de la luz que proviene del sistema de iluminacin, tambin lleva adherida unas pinzas que permiten sujetar las lminas portaobjetos y un carril mvil para el desplazamiento de las mismas. En los microscopios modernos la platina puede ser accionada por los tornillos macro y micromtricos.

Tubo ptico: Es una estructura metlica de forma cilndrica oscurecida internamente; en su extremo superior se encuentra la lente ocular y en el extremo inferior se comunica con los lentes objetivos por medio de un revlver

Revlver: Es un dispositivo metlico de forma circular, que se atornilla en la parte inferior del tubo ptico, gira sobre su propio eje central para permitir cambiar los lentes objetivos durante la observacin.

Tornillos macromtricos: Se ubica a cada extremo del brazo, cerca de la base. Permite realizar grandes desplazamientos de la platina.

Tornillos micromtricos: Se encuentran debajo o comparte la misma ubicacin con el tornillo macromtrico. Sirve para realizar desplazamientos cortos de la platina, afinando la imagen a observar.

ILUMINACIN Y ENFOQUE.La iluminacin y enfoque son dos condiciones principales para realizar la observacin al microscopio.

Iluminacin: Los rayos luminosos procedentes de una fuente natural o artificial son reflejados por el espejo o lmpara hacia el objeto preparado. Cuando se hacen observaciones a grandes aumentos, la luz debe ser intensa; mientras que, cuando las observaciones se hace a menores aumentos, la intensidad de la luz debe ser menor. El diafragma y el desplazamiento del condensador permiten graduar la entrada de luz.

Enfoque: Una vez obtenida la iluminacin adecuada, se acciona el tornillo macromtrico hasta encontrar la imagen (enfoque aproximado) y luego se acciona el micromtrico que permite obtener una imagen ntida (enfoque perfecto).

CUIDADO DEL MICROSCOPIO.Para mantener la integridad del MC, es necesario tomar en cuenta las siguientes consideraciones.

1) No se deben tocar nunca las lentes con las manos, sino con pauelos especiales para lente.

2) No dejar nunca una preparacin sobre la platina cuando no est usando el microscopio.

3) Para cambiar el objetivo, utilice siempre el revlver.

4) Despus de utilizar el objetivo de inmersin lmpielo. En caso de que el aceite se haya secado, avise al docente para limpiarlo con xilol.

5) No fuerce nunca los dispositivos giratorios del microscopio (macro y micromtricos, platina, revlver y condensador).

6) No cambie nunca de objetivo mientras est observando a travs del ocular.

7) Cuando realice observaciones preparadas en fresco, evite que el agua o cualquier otra sustancia se derrame sobre el condensador o diafragma.

8) Cuando utilice el objetivo de inmersin, use la cantidad adecuada de aceite de cedro, evitando que este caiga sobre la platina, condensador o diafragma.

9) No colocar la yema de los dedos sobre la superficie de los lentes o del espejo. 10) Cuando finalice el trabajo ponga el objetivo de menor aumento en posicin de observacin.

11) Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin de prctica.

12) Para el transporte, se debe tomar del brazo del microscopio con la mano derecha y la mano izquierda en la base del mismo. Evitando la cada de los lentes o el espejo.

1. OBJETIVOS:

Reconocer las diferentes partes del MC. Iluminar y enfocar correctamente en el MC. Adiestrarse en el uso del microscopio Reconocer muestras de Bacterias , algas y hongos

1. MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS

Materiales:Microscopio compuesto.Estereoscopio Lminas y laminillasAceite de microscopaPapel lente Lancetas

Materiales que el alumno debe traer Papel y lpizLetra E (pequea)Agua estancada Championes

1. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

Reconocimiento y descripcin de las partes del MC: El docente expondr el nombre, ubicacin y funcin de las diferentes partes de un MC, respondiendo a las interrogantes e inquietudes de los estudiantes.

Observacin del tipo de imagen del MC.

Microscopio ptico: 1. Conectar el microscopio. 2. Mover el tornillo macromtrico para que baje la platina hasta el tope. 3. Mover el revlver y seleccionar el seco dbil. 4. Colocar sobre la platina la preparacin y sujetar con las pinzas. 5. Encender y regular la intensidad de la luz. 6. Subir lentamente la platina con el tornillo macromtrico hasta que aparezca la imagen. 7. Ajustar la claridad de la imagen, con el tornillo micromtrico. 8. Para observar con ms aumento nicamente mover el revlver y el tornillo micromtrico. 9. Para usar el objetivo de inmersin, coloque una gotita de aceite de inmersin.

A continuacin colocar las siguientes muestras:

A. Colocar la letra E en una lmina y observar al microscopio. Dibujar el tipo de imagen.B. Observacin de protozoarios. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de agua estancada, cubre con el cubreobjetos y observa al microscopio, retira el exceso de agua con el papel filtro. Observa primero con el objetivo seco (10X) y por ltimo con el objetivo seco de (40X). Dibujar lo observado

Determinacin de la magnificacin de los objetivos de un MC. En una lmina portaobjetos colocar una gota de sangre cubrir con una laminilla y observar las clulas sanguneas a objetivos de 10X, 40X y 100X. Dibujar lo que observa.

Observacin en el estereoscopio

Manejo del estereoscopio 1. Coloque el estereoscopio utilizando ambas manos, poniendo una en la base y la otra en el brazo y dejarlo a una distancia de 20 cm de la toma de corriente elctrica de la mesa de trabajo, la cual debe de estar limpia y libre de polvo o agua.2. Limpie el estereoscopio papel lente , ligeramente humedecida con xilol (xileno) y conctelo a la toma de corriente elctrica y encender el microscopio.3. Colocar el objeto a observar en un cristalizador pequeo o la base de una caja de petri de vidrio sobre la platina.4. Colocar el objetivo y bajar lo ms posible al objeto de observaci6n, sin llegar a tocarlo.5. Comenzar la observacin con los oculares, adapte la distancia entre ellos de acuerdo a la distancia entre sus ojos.6. Suba lentamente utilizando el tornillo macromtrico hasta que aparezca la imagen.7. Observe utilizando una de las fuentes luminosas y despus la otra. Seleccione lo que a su juicio sea la ms correcta para observar la muestra.8. Al terminar su observacin apague el microscopio, limpie las lentes con papel seda y la platina con ellienzo, desconecte el microscopio de la toma decorriente y enrolle el cable. Observacin de muestra en el estereoscopio

A. Deposite en la base de una caja de petri una muestra de una champin B. Colquela sobre la platina y observe. C. Observe todas las estructuras indicadas por el Docente .

V.RESULTADOS. 1. Nombra las partes del microscopio compuesto (utiliza flechas para indicar la Ubicacin):

2.

A: Dibujar el tipo de imagen observada al microscopio (Letra E).

Observacin: . ...Muestra:.... Aumento: ..

B: : Dibujar el tipo de imagen observada al microscopio (Protozoarios ).

Observacin: . ...Muestra:.... Aumento: ..

3. Dibuja las observaciones de las estructuras en sangre

Observacin: ......Muestra: ........

4. Dibujar las imgenes observadas en el estereoscopio

Observacin: ......Muestra: ........

VI .DISCUSIN E INTERPRETACIN DE RESULTADOSVII.CONCLUSIONES: VII.REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. IX. CUESTIONARIO1. Qu tipo de imagen da el ocular y el objetivo de un microscopio? 2. Con un ejemplo indica cmo se calcula el nmero de aumentos de una observacin microscpica. 3. Qu diferencias observas al utilizar el microscopio ptico y el estereoscopio?