PresentaciPresentacióón de la n de la Memoria de DoctoradoMemoria de Doctorado

Bienio 2002/2003Bienio 2002/2003

Juan JosJuan Joséé Rubal LoboRubal Lobo

Periodo DocentePeriodo Docente

SOBRESALIENTESOBRESALIENTESSííntesis Quntesis Quíímicamica

SOBRESALIENTESOBRESALIENTETTéécnicas cnicas espectroscespectroscóópicaspicas molecularesmoleculares

SOBRESALIENTESOBRESALIENTETTéécnicas instrumentales acopladascnicas instrumentales acopladas

APROBADOAPROBADOTTéécnicas de investigacicnicas de investigacióón estructural: Mn estructural: Méétodos de todos de difraccidifraccióón y tn y téécnicas relacionadascnicas relacionadas

SOBRESALIENTESOBRESALIENTEQuQuíímica farmacmica farmacééutica utica

SOBRESALIENTESOBRESALIENTEQuQuíímica ambientalmica ambiental

SOBRESALIENTESOBRESALIENTEAplicaciones de la modelizaciAplicaciones de la modelizacióón molecularn molecular

CalificaciCalificacióónnCursosCursos

Calificación global……………………………………..SOBRESALIENTESOBRESALIENTE

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

““Estudio FitoquEstudio Fitoquíímico de mico de Thapsia Thapsia villosavillosa varvar. . villosavillosa””

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

ObjetivosObjetivos

Hacer un estudio de los metabolitos secundarios presentes en Hacer un estudio de los metabolitos secundarios presentes en Thapsia Thapsia villosavillosa varvar. . villosavillosa..

De entre los compuestos De entre los compuestos aaíísladosslados seleccionar aquellos que seleccionar aquellos que tengan algtengan algúún tipo de actividad bioln tipo de actividad biolóógica para la realizacigica para la realizacióón de n de bioensayosbioensayos..

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

AntecedentesAntecedentes

TaxonomTaxonomíía de a de Thapsia Thapsia villosavillosa varvar. . VillosaVillosa

1.1. Es la especie Es la especie morfologicamentemorfologicamente mmáás compleja del gs compleja del gééneronero Thapsia Thapsia villosavillosa

2.2. Existe mucha confusiExiste mucha confusióón en la determinacin en la determinacióón botn botáánica de Thapsia nica de Thapsia villosavillosa y especies relacionadas.y especies relacionadas.

3.3. Existe una clasificaciExiste una clasificacióón qun quíímica que establece 5 tipos de mica que establece 5 tipos de Thapsia Thapsia villosavillosa..

4.4. La botLa botáánica establece actualmente que existen 3 variedades de nica establece actualmente que existen 3 variedades de Thapsia Thapsia villosavillosa..

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

AntecedentesAntecedentes

Usos medicinales y popularesUsos medicinales y populares1.1. La resina de la raLa resina de la raííz se usa como emplasto para combatir z se usa como emplasto para combatir

afecciones afecciones pulmonerespulmoneres, , catarrroscatarrros, dolores reum, dolores reumááticos y como ticos y como purgante vomitivo.purgante vomitivo.

2.2. La raLa raííz se usa como cebo para la pesca. Es una de las plantas z se usa como cebo para la pesca. Es una de las plantas mmáás usadas para s usadas para ééste fin.ste fin.

3.3. Sus frutos se usan como sustituto del cominoSus frutos se usan como sustituto del comino

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

AntecedentesAntecedentes

Compuestos aisladosCompuestos aislados

OO

OOR1

O

O

OR2OR3

OR

OH

OAng

OAcO

O

OH

OH

R

Fenilpropanoides Germacranos Guaianos

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

AntecedentesAntecedentes

Compuestos aisladosCompuestos aislados

O

O

OH

OAcR1O

OH

OR2AngO

O

O

O

O

R1O O O

OR2 CHO

OAc

O

OH

OR

Tapsigarginas Eslovenolidas

Tapsanos

Periodo de InvestigaciPeriodo de InvestigacióónnMateriales y mMateriales y méétodostodos•• SelecciSeleccióón y recoleccin y recoleccióón del material botn del material botáániconico•• ObtenciObtencióón de extractosn de extractos•• TTéécnicas cromatogrcnicas cromatográáficasficas

•• CromatografCromatografíía en capa finaa en capa fina•• CromatografCromatografíía en columnaa en columna•• HPLCHPLC

•• CaracterizaciCaracterizacióón de los compuestos aisladosn de los compuestos aislados•• RMN (1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC, NOE)RMN (1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC, NOE)•• IRIR•• UVUV•• RR--XX•• Actividad Actividad óópticaptica

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

ResultadosResultados

OO

O

O

O1

2

3 45

67

8

910

12

13

11

14

15

1'2' 3'

4'

5'

1''2''

H

OO

O

O

O1

2

3 45

67

8

910

12

13

11

14

15

1' 2' 3'

4' 5'

1''2''

H

O

OO

O

O

OH

H1

2

2 4 4

67

11

12

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9

14

15

1'2'

3'

4'

1''

2''

10 5'

O

OO

O

O

OS

H

H1

2

2 4 4

67

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13

8

9

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1'2' 3' 4'

1''

2''

10

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

ResultadosResultados

O

O

O

O

O

O O

OO

O1

53 8

10

11

12 13

14

15

1'2' 3'

H

HH

2

6 7

9H

H

O

O

O

O

O

O O

OO

O

S1

53 8

10

11

12 13

14

15

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3'

H

HH

2

6 7

9

O

O

O

O

O

O O

OO

OS

1

53 8

10

11

12 13

14

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1'2'

3'

H

HH

2

6 7

9

O

O

O

O

O

OH

OO

O1

53 8

10

11

12 13

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15

H

OH

2

6 7

9

O

O

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

ConclusionesConclusionesSe han aislado 5 compuestos nuevos:Se han aislado 5 compuestos nuevos:

OO

O

O

O1

2

3 45

67

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1'2' 3'

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HO

OO

O

O

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H

H1

2

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1'2' 3' 4'

1''

2''

10

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

O

O

O

O

O

O O

OO

O1

53 8

10

11

12 13

14

15

1'2' 3'

H

HH

2

6 7

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H

O

O

O

O

O

O O

OO

O

S1

53 8

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12 13

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1'2'

3'

H

HH

2

6 7

9

O

O

O

O

O

O O

OO

OS

1

53 8

10

11

12 13

14

15

1'2'

3'

H

HH

2

6 7

9

ConclusionesConclusiones

Periodo de InvestigaciPeriodo de Investigacióónn

ConclusionesConclusiones2 compuestos presenta un resto 2 compuestos presenta un resto metiltioacrilatometiltioacrilato, un , un ééster poco ster poco frecuente, frecuente, aaíísladoslado en solo 6 especies.en solo 6 especies.Un Un metabolitometabolito contiene el resto contiene el resto metiltiopropionatometiltiopropionato, que se ha , que se ha aislado por primera vez formando parte de un producto naturalaislado por primera vez formando parte de un producto naturalUn Un metabolitometabolito contiene un resto contiene un resto acrilatoacrilato, es la primera vez que se , es la primera vez que se encuentra en un producto natural. encuentra en un producto natural. El origen del El origen del acrilatoacrilato se encuentra en la descomposicise encuentra en la descomposicióón enzimn enzimáática tica del del metiltiopropionatometiltiopropionato y existen algas que se defienden mediante la y existen algas que se defienden mediante la liberaciliberacióón de n de acrilatoacrilato..

Proyecto de tesisProyecto de tesis““Estudio FitoquEstudio Fitoquíímico del gmico del géénero nero ThapsiaThapsia””

Proyecto de tesisProyecto de tesis

Objetivos:Hacer un estudio de los metabolitos secundarios presentes en esHacer un estudio de los metabolitos secundarios presentes en este te ggééneronero

Establecer conexiones quimiotaxonEstablecer conexiones quimiotaxonóómicas entre los distintos micas entre los distintos especespecíímenesmenes

Preparar muestras de los metabolitos aislados para evaluar sus Preparar muestras de los metabolitos aislados para evaluar sus actividades biolactividades biolóógicas.gicas.

Proyecto de tesisProyecto de tesisAntecedentes y estado actual del tema:Las especies del gLas especies del géénero Thapsia (Umbelliferae) se distribuyen por el nero Thapsia (Umbelliferae) se distribuyen por el sur de Europa desde Turqusur de Europa desde Turquíía hasta Portugal, y por el norte de a hasta Portugal, y por el norte de ÁÁfrica frica desde Marruecos hasta Egipto.desde Marruecos hasta Egipto.

Proyecto de tesisProyecto de tesisAntecedentes y estado actual del tema:

Tradicionalmente se han usado preparados de las raTradicionalmente se han usado preparados de las raííces de plantas ces de plantas del gdel géénero Thapsia para tratamiento de diversas dolencias como nero Thapsia para tratamiento de diversas dolencias como reuma, reuma, prostatitisprostatitis, catarros, ci, catarros, ciáática, neuralgias y enfermedades tica, neuralgias y enfermedades pulmonarespulmonaresActualmente se reconocen 6 especies pertenecientes al gActualmente se reconocen 6 especies pertenecientes al géénero nero Thapsia: (Flora IbThapsia: (Flora Ibéérica)rica)

Thapsia Thapsia garganicagarganicaThapsia Thapsia transtaganatranstaganaThapsia Thapsia villosavillosa (3 variedades)(3 variedades)Thapsia Thapsia minorminorThapsia Thapsia nitidanitida (2 variedades)(2 variedades)Thapsia Thapsia gymnesicagymnesica

Proyecto de tesisProyecto de tesisAntecedentes y estado actual del tema:

Los compuestos que se han aislado en las diferentes plantas del Los compuestos que se han aislado en las diferentes plantas del ggéénero nero Thapsia Thapsia son los siguientes:son los siguientes:

OR

OH

OH

OH

R

O

O

OH

OAcR1O

OH

OR2AngO

O

O

O

O

R1O O O

OR2

CHO

OAc

OO

OOR1

O

O

OR2OR3

Germacranos Guaianos Tapsanos

Tapsigarginas Eslovenolidas Fenilpropanoides

Proyecto de tesisProyecto de tesisHipótesis

Los estudios sobre Los estudios sobre Thapsia Thapsia garganicagarganica , , Thapsia Thapsia transtaganatranstagana y y Thapsia Thapsia gymnesicagymnesica se centraron sobre las guaianolidas.se centraron sobre las guaianolidas.El El úúltimo estudio realizado sobre plantas de ltimo estudio realizado sobre plantas de ééste gste géénero se realiznero se realizóóhace 13 ahace 13 añños sobre os sobre Thapsia Thapsia villosavillosa. . Un estudio previo realizado sobre Un estudio previo realizado sobre Thapsia Thapsia villosavillosa varvar villosavillosa ha ha revelado la presencia de nuevos metabolitos.revelado la presencia de nuevos metabolitos.

Los estudios realizados sobre Los estudios realizados sobre Thapsia Thapsia maximamaxima son muy pocos y son muy pocos y existen dudas sobre el material estudiado.existen dudas sobre el material estudiado.La realizaciLa realizacióón del estudio n del estudio fitoqufitoquíímicomico junto con el estudio paralelo junto con el estudio paralelo va a ser clave para resolver los problemas de taxonomva a ser clave para resolver los problemas de taxonomíía de a de ééste ste ggéénero.nero.

RS

O

RS

O

R

O

Proyecto de tesisProyecto de tesisMetodología

SelecciSeleccióón y recoleccin y recoleccióón del material botn del material botáániconicoObtenciObtencióón de extractosn de extractosTTéécnicas cromatogrcnicas cromatográáficasficas

CromatografCromatografíía en capa finaa en capa finaCromatografCromatografíía en columnaa en columnaHPLCHPLC

CaracterizaciCaracterizacióón de los compuestos aisladosn de los compuestos aisladosRMN (1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC, NOE,)RMN (1H, 13C, COSY, HSQC, HMBC, NOE,)IRIRUVUVRR--XXActividad Actividad óópticaptica

Proyecto de tesisProyecto de tesis

Plan de trabajo

Planta Extracto Fracciones Compuestos puros

Modificación estructural

Ensayos

Espectroscopía

Fin de la presentaciFin de la presentacióónn

Muchas gracias por su atención.