CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN … · número de MN en los eritrocitos de sangre periférica...
93
CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN CÉLULAS DE SANGRE PERIFÉRICA DE MOTOTAXISTAS QUE TRABAJAN EN LA CIUDAD DE CARTAGENA DE ÍNDIAS LILIANA PATRICIA CARRANZA LÓPEZ Código: 598934 UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE TOXICOLOGIA CONVENIO CON LA UNIVERSIDAD DE CARTAGENA BOGOTA D.C. 2011
Transcript of CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN … · número de MN en los eritrocitos de sangre periférica...
1
CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN CÉLULAS DE SANGRE PERIFÉRICA DE MOTOTAXISTAS QUE TRABAJAN EN LA CIUDAD DE
CARTAGENA DE ÍNDIAS
LILIANA PATRICIA CARRANZA LÓPEZ Código: 598934
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE TOXICOLOGIA
CONVENIO CON LA UNIVERSIDAD DE CARTAGENA BOGOTA D.C.
2011
2
CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN CÉLULAS DE SANGRE PERIFÉRICA DE MOTOTAXISTAS QUE TRABAJAN EN LA CIUDAD DE
CARTAGENA DE ÍNDIAS
LILIANA PATRICIA CARRANZA LÓPEZ Código: 598934
Trabajo de investigación presentado como requisito para optar al título de: Magister en Toxicología
DIRECTOR: Ph.D. JESÚS OLIVERO VERBEL
Línea de Investigación: Biología Molecular
Grupo de Investigación: Química Ambiental y Computacional
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE TOXICOLOGIA CONVENIO CON LA UNIVERSIDAD DE CARTAGENA
BOGOTA D.C. 2011
3
FORMATO UNICO PARA ENTREGA DE LOS TRABAJOS DE GRADO CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN CÉLULAS DE SANGRE PERIFÉRICA DE MOTOTAXISTAS QUE TRABAJAN EN LA CIUDAD DE CARTAGENA DE INDIAS
QUANTIFICATION OF MICRONUCLEI IN PERIPHERAL BLOOD CELLS OF MOTORCYCLE DRIVERS WORKING IN THE CITY OF CARTAGENA DE INDIAS RESUMEN Introducción. Cartagena de Indias es una ciudad con abundante tráfico donde las emisiones de motores de vehículos representan una de las fuentes principales de contaminación del aire. Esta ciudad está experimentando el fenómeno conocido como ―mototaxismo‖, caracterizado por el transporte público de personas empleando motocicletas. La exposición de estas personas a la contaminación del aire es extensa y no existe ninguna información sobre el impacto de esta actividad sobre la salud humana. Objetivo. Evaluar la frecuencia de micronúcleos (MN) en células de sangre periférica de mototaxistas que trabajan en la ciudad de Cartagena de Indias. Materiales y métodos. En este estudio participaron 109 individuos varones, 73 mototaxistas y 36 controles. Recolección de información sociodemográfica, así como análisis hematológicos y evaluación de micronúcleos en células de sangre periférica fueron realizados a cada individuo. Comparaciones entre medias fueron realizadas usando el T-test y asociaciones entre variables mediante análisis de correlación. Resultados. El promedio ± error estándar (EE) de MN en eritrocitos de sangre periférica de mototaxistas de Cartagena fue de 0.02 ± 0.004 por 1000 células, mientras que para el grupo control fue de 0.002 ± 0.002 por 1000 células, con diferencias estadísticamente significativas entre estos grupos (p<0.05). No hubo correlaciones estadísticas entre variables socio-demográficas y la presencia de MN en los grupos de estudio. Conclusiones. Los mototaxistas de la ciudad de Cartagena tienen un mayor número de MN en los eritrocitos de sangre periférica que personas dedicadas a otros trabajos. Palabras clave: Micronúcleos, tráfico, genotóxico, contaminación, Colombia.
4
Abstract
Introduction: Cartagena de Indias is a city with abundant traffic, where vehicle
engine emissions represent one of the main sources of air pollution. This city is
experiencing the phenomenon known as ―mototaxismo‖, characterized by the
public transportation of people using motorcycles. The exposure of these people to
air pollution is extensive, and no information is available regarding the impact of
this activity on human health.
Objective: To evaluate the frequency of micronucleus (MN) in peripheral blood
cells of motorcycle drivers that work in the city of Cartagena de Indias.
Materials and methods: In this study participated 103 male individuals, 73
motorcycle drivers and 36 controls. Collection of sociodemographic information, as
well as hematological assays and micronucleus evaluation in cells from peripheral
blood were performed for each participant. Comparisons between means were
executed using the T-test, and relationships between variables were explored by
correlation analysis.
Results: The average ± standard error (SE) of MN in erythrocytes of peripheral
blood of motorcycle drivers from Cartagena was 0.02 ± 0.004 per 1000 cells,
whereas for the control group it was 0.002 ± 0.002 per 1000 cells, with statistical
differences between these groups (p<0.05). Statistical correlations were not found
between socio-demographic variables and the presence of MN in the studied
groups.
Conclusions: Motorcycle drivers from Cartagena have greater number of MN in
erythrocytes from peripheral blood than people having different job.
Keywords: Micronuclei, traffic, genotoxic, pollution, Colombia.
FIRMA DEL DIRECTOR_____________________
LILIANA PATRICIA CARRANZA LÓPEZ, 1971
5
Nota de aceptación:
El trabajo titulado “Cuantificación de micronúcleos en células de sangre periférica
de Mototaxistas que trabajan en la ciudad de Cartagena de Indias”, presentado por
el estudiante Liliana Patricia Carranza López, como requisito parcial para optar al
título de Magister en Toxicología, fue evaluado y calificado por los evaluadores:
Firma del director del trabajo
Firma del jurado
__________________________________
Firma del jurado
6
DEDICATORIA
A mi familia y muy especialmente a mi adorada abuelita Oty y a mi pequeñín
William Andrés.
7
AGRADECIMIENTOS
A Dios por permitirme la oportunidad y darme la fortaleza para sostenerme este
proyecto.
A mi familia, a mis maravillosos padres y hermana por sus oportunas palaras de
estimulo y apoyo en momentos muy difíciles, gracias por creer en mí.
A mi querido Gerardo por su comprensión, paciencia y apoyo incondicional
A mis compañeros, integrantes del grupo de Química ambiental y computacional
por su colaboración, especialmente Berthy, Karencita, Nerlys, Doctora Angélica,
muchas gracias.
A la Doctora Bárbara Arroyo Salgado por ser mi luz, mi amiga, mi madre, por sus
palabras y todo su tiempo, mil gracias.
A mi director de tesis, modelo a seguir, Doctor Jesús Olivero Verbel por su
orientación, apoyo y dedicación.
A las personas de la facultad que enfermería que voluntariamente aceptaron
participar en el estudio.
A la Doctora Miriam Gutiérrez por su empeño en pro de la superación profesional.
A todas las personas de la facultad de Ciencias Farmacéuticas que de una u otra
forma colaboraron con este propósito.
8
CONTENIDO
Pág.
RESUMEN ............................................................................................................. 13
ABSTRACT ............................................................................................................ 15
INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 16
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ............................................................. 18
2. JUSTIFICACIÓN ............................................................................................. 20
3. OBJETIVOS .................................................................................................... 22
3.1 OBJETIVO GENERAL ..................................................................................... 22
3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ............................................................................ 22
4. HIPÓTESIS ..................................................................................................... 23
5. MARCO TEÓRICO Y ESTADO DEL ARTE ................................................... 24
5.1 MOTOTAXISMO .............................................................................................. 24
5.2 CONTAMINACIÓN AMBIENTAL EN ZONAS URBANAS ................................ 26
5.2.1 Enfermedades asociadas a la contaminación ambiental .............................. 32
5.2.1.1. Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). ................................. 32
5.2.1.2. Enfermedades cardiovasculares. .............................................................. 32
5.2.1.3. Alergia. ...................................................................................................... 33
5.3. MICRONUCLEOS .......................................................................................... 35
5.3.1. Formación de micronúcleos. ........................................................................ 36
5.3.2. Criterios para identificar micronúcleos. ........................................................ 39
5.3.3. Utilidad del ensayo de micronúcleos. 5)....................................................... 40
5.3.4. Detección de alteraciones genéticas. ......................................................... 42
5.3.5. Biomarcadores para contaminación ambiental. .......................................... 42
6. METODOLOGÍA ................................................................................................ 45
6.1. POBLACIÓN EN ESTUDIO ............................................................................ 45
9
6.1.1. Criterios de inclusión. ................................................................................... 45
6.1.2. Criterios de exclusión ................................................................................... 46
6.2. OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE. .............................................. 46
6.3. EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA Y EVALUACIÓN DE LA
PRESENCIA DE MICRONÚCLEOS EN ERITROCITOS. ...................................... 47
7. ANÁLISIS ESTADÍSTICO. ................................................................................. 48
8. RESULTADOS ................................................................................................... 50
8.1. CONDICIONES LABORALES Y SOCIOECONÓMICAS DE LOS INDIVIDUOS
PARTICIPANTES EN EL ESTUDIO. ..................................................................... 50
8.2. RESULTADO DE LOS EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA Y
EVALUACIÓN DE LA PRESENCIA DE MN. ..................................................... 54
8.3. ASOCIACIONES ENTRE LA FRECUENCIA DE MICRONÚCLEOS Y
FACTORES SOCIODEMOGRÁFICOS Y LABORALES DE LOS MOTOTAXISTAS
EN CARTAGENA DE INDIAS. ............................................................................... 58
9. DISCUSIÓN ....................................................................................................... 61
CONCLUSIONES .................................................................................................. 66
RECOMENDACIONES .......................................................................................... 67
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ....................................................................... 68
ANEXOS ................................................................................................................ 88
10
LISTA DE TABLAS Tabla 1. Descripción de los principales contaminantes atmosféricos químicos y sus fuentes. ……………………………………………………………………………...……27 Tabla. 2. Criterios de identificación de micronúcleos………………………………. 40 Tabla 3. Características laborales y socio-demográficas de individuos expuestos y no expuestos a contaminantes ambientales de la ciudad de Cartagena de Indias………………………………………………………………………………………52 Tabla 4. Aspectos relacionados con los parámetros respiratorios, dérmicos y oftalmológicos de la población de mototaxistas de la ciudad de Cartagena de Indias………………………………………………………………………………………53 Tabla 5. Parámetros hematológicos en controles y expuestos……………………..55 Tabla 6. Asociaciones entre la frecuencia de micronúcleos y factores sociodemográficos y laborales de los mototaxistas de Cartagena de Indias…….60
11
LISTA DE FIGURAS Figura 1. Formación de micronúcleos…………………………………………..…..37 Figura 2. Posibles mecanismos de formación de micronúcleos …………..……38 Figura 3. Hallazgos de la observación de los extendidos de sangre……………48 Figura 4. Comparación recuento de micronúcleos en serie Roja………………..56 Figura 5. Comparación recuento celular de la serie Blanca……………………...57 Figura 6. Comparación recuento celular de la serie Roja…………………………58
12
LISTA DE ANEXOS Anexo A. Encuesta. Datos generales para la cuantificación de micronúcleos en sangre periférica de mototaxistas que trabajan en la ciudad de Cartagena de indias Anexo B. Consentimiento informado
13
RESUMEN
Introducción. Cartagena de Indias es una ciudad con abundante tráfico donde las
emisiones de motores de vehículos representan una de las fuentes principales de
contaminación del aire. Esta ciudad está experimentando el fenómeno conocido
como ―mototaxismo‖, caracterizado por el transporte público de personas
empleando motocicletas. La exposición de estas personas a la contaminación del
aire es extensa y no existe ninguna información sobre el impacto de esta actividad
sobre la salud humana.
Objetivo. Evaluar la frecuencia de micronúcleos (MN) en células de sangre
periférica de mototaxistas que trabajan en la ciudad de Cartagena de Indias.
Materiales y métodos. En este estudio participaron 109 individuos varones, 73
mototaxistas y 36 controles. Recolección de información sociodemográfica, así
como análisis hematológicos y evaluación de micronúcleos en células de sangre
periférica fueron realizados a cada individuo. Comparaciones entre medias fueron
realizadas usando el T-test y asociaciones entre variables mediante análisis de
correlación.
Resultados. El promedio ± error estándar (EE) de MN en eritrocitos de sangre
periférica de mototaxistas de Cartagena fue de 0.02 ± 0.004 por 1000 células,
mientras que para el grupo control fue de 0.002 ± 0.002 por 1000 células, con
diferencias estadísticamente significativas entre estos grupos (p<0.05). No hubo
correlaciones estadísticas entre variables socio-demográficas y la presencia de
MN en los grupos de estudio.
14
Conclusiones. Los mototaxistas de la ciudad de Cartagena tienen un mayor
número de MN en los eritrocitos de sangre periférica que personas dedicadas a
otros trabajos.
Palabras clave: Micronúcleos, tráfico, genotóxico, contaminación, Colombia.
15
ABSTRACT
Introduction: Cartagena de Indias is a city with abundant traffic, where vehicle
engine emissions represent one of the main sources of air pollution. This city is
experiencing the phenomenon known as ―mototaxismo‖, characterized by the
public transportation of people using motorcycles. The exposure of these people to
air pollution is extensive, and no information is available regarding the impact of
this activity on human health.
Objective: To evaluate the frequency of micronucleus (MN) in peripheral blood
cells of motorcycle drivers that work in the city of Cartagena de Indias.
Materials and methods: In this study participated 103 male individuals, 73
motorcycle drivers and 36 controls. Collection of sociodemographic information, as
well as hematological assays and micronucleus evaluation in cells from peripheral
blood were performed for each participant. Comparisons between means were
executed using the T-test, and relationships between variables were explored by
correlation analysis.
Results: The average ± standard error (SE) of MN in erythrocytes of peripheral
blood of motorcycle drivers from Cartagena was 0.02 ± 0.004 per 1000 cells,
whereas for the control group it was 0.002 ± 0.002 per 1000 cells, with statistical
differences between these groups (p<0.05). Statistical correlations were not found
between socio-demographic variables and the presence of MN in the studied
groups.
Conclusions: Motorcycle drivers from Cartagena have greater number of MN in
erythrocytes from peripheral blood than people having different job.
Keywords: Micronuclei, traffic, genotoxic, pollution, Colombia.
16
INTRODUCCIÓN
En la actualidad la contaminación ambiental constituye uno de los principales
factores que determina la salud de las personas (1). Cuando las variables
ambientales interaccionan con los aspectos socio-económicos, el impacto sobre la
salud es aún más severo (2). Por ejemplo, a nivel global la contaminación
atmosférica ha sido asociada a importantes cifras de morbilidad y mortalidad y a
un incremento en la rata de enfermedades respiratorias en humanos (3).
Este proceso igualmente ocurre en Colombia, generado, entre diversas causas,
por la combustión de derivados del petróleo y el transporte en carretera. Este
factor sumado al desempleo y la violencia forzada, cuyas cifras han aumentado a
través de los años, según los reportes realizados por el CODES (Consultoría para
los Derechos Humanos y el Desplazamiento), probablemente estén disminuyendo
la posibilidad de bienestar para las familias, con implicaciones económicas,
sociales, familiares y de salud en particular para las familias en donde la
supervivencia depende de trabajos poco remunerados y con muy baja estabilidad,
como es el caso de los mototaxistas. El mototaxismo constituye hoy día una fuente
de empleo para miles de familias de bajos recursos, los cuales, tras la experiencia
del desplazamiento del campo a la ciudad, la falta de oportunidades, entre otras
causas, han visto en esta forma de trabajo, la única posibilidad de salir adelante.
Sin embargo esta actividad presenta diversos riesgos ambientales y de salud
pública, derivados de la contaminación ambiental y la poca cultura ciudadana
existente en la ciudad.
Hasta el momento no existe ninguna estadística en relación con la salud de los
mototaxistas. No obstante, es claro que estas personas están expuestas a multitud
de contaminantes atmosféricos frecuentes en los centros urbanos, tales como
17
material particulado (4), hidrocarburos aromáticos polinucleares (5), óxidos de
nitrógeno y agentes oxidantes, entre otros, los cuales pueden estar afectando su
salud por ser compuestos con conocida actividad genotóxica, mutagénica y/o
carcinogénica (Barale et al., 1991; Guimaraes et al., 2000; Pope et al., 2002).
Dada la presencia de algunos contaminantes en el aire urbano, la hipótesis de
esta investigación es que los mototaxistas presentan mayor índice de
genotoxicidad, medido por la presencia de micronúcleos en sangre periférica, en
relación con personas que se dedican a otras actividades como empleados de
oficina.
18
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Uno de los graves problemas que enfrenta la población mundial actualmente es la
contaminación ambiental, situación que preocupa a toda la comunidad
internacional si se tiene en cuenta que las grandes ciudades industrializadas son
las más contaminadas (Zhang and Wen, 2008; Wan et al., 2011; Zhang et al.,
2010) Sin embargo, esta contaminación se extiende hasta lugares lejanos no
industrializados, con lo que afecta al hombre y a animales (Lazar et al., 2010), por
tal motivo la causa de una alarmante y creciente lista de enfermedades en el
hombre se le atribuye a la contaminación ambiental (Miller et al., 2009).
La contaminación ambiental está asociada con las emisiones de gases generados
por la actividad humana, que están cambiando el clima del planeta, incrementando
de esta manera la concentración atmosférica de gases (Zhang et al., 2010a;
Zhang et al., 2010b) De estos gases uno de los que mayor concentración presenta
en el medio ambiente es el dióxido de carbono (CO2), procedente
fundamentalmente del consumo de combustibles fósiles (carbón, petróleo y gas) y
la tala y quema de bosques, a esto también se suman actividades industriales
como producción de cemento, utilización de caliza (diferente a la usada en la
elaboración de cemento), pavimentación asfáltica, industrias de pulpa y de papel,
alimentos y bebidas (Hunt et al., 2010). La acumulación de altas emisiones de
estos gases en países desarrollados, trajo una preocupante situación de manejo
de residuos líquidos que se producen de manera incontrolable (Feo et al., 2009).
De la misma manera, el transporte es considerado una de las principales causas
de emisión de contaminantes, debido a que genera muy altos niveles de (CO)
monóxido de carbono, en menor escala, pero de igual importancia, NOx (óxidos de
nitrógeno), SOx (óxidos de azufre), PM(10) y PM(2) (material particulado) (Barale
et al., 1991; Guimaraes et al., 2000; Pope et al., 2002; Zhang et al,.2010), COVNM
19
(compuestos orgánicos volátiles diferentes al metano) entre otros, resultado de
actividades industriales, por la transformación la materias primas mediante
procesos químicos y físicos; no obstante, el crecimiento de la cifra de vehículos y
motos en los últimos años ha sido continuo, igual a las proyecciones de tendencia
de crecimiento de la población. Además, una mayor población implica una mayor
demanda de transporte público, un incremento en el número de viajes y kilómetros
recorridos y por lo tanto, mayor cantidad de contaminantes emitidos a la atmósfera
(Moreno, 2008).
20
2. JUSTIFICACIÓN
Hasta el momento no son conocidos los efectos que pueda ocasionar sobre la
salud, el trabajo denominado ―mototaxismo‖, el cual constituye una fuente
importante de ingresos para un porcentaje alto de la población que habita en el
norte de Colombia. Por ello, este trabajo será el primero en generar una
aproximación a lo que puede estar sucediendo con la salud de estas personas.
Dado el incremento en el número de ciudadanos que viven de este trabajo, y que
por lo tanto están expuestos a gases contaminantes por largos períodos de
tiempo, tales como los hidrocarburos aromáticos polinucleares (Kishida et al.,
2008), metales (Zhang et al., 2010), partículas, CO, NOx, SO2, y productos
resultantes de actividades industriales (COVNM), entre otros. Por lo anterior, es
coherente inferir que la salud de estas personas está siendo impactada
ocupacionalmente, y por tanto el conocimiento de la problemática es crítico para
intentar ayudar en el bienestar de estas personas.
Es claro que diversos componentes presentes en el aire de las ciudades puede
conducir a daños en el ADN. Por ejemplo, existe evidencia que señala a los
constituyentes de material particulado 2.5 (PM 2.5), como responsable de daños
oxidativos sobre el ADN en los humanos (Wei et al., 2010), al igual que partículas
presentes en el aire urbano han estado asociadas con efectos adversos sobre la
salud (Price et al., 2010), a nivel pulmonar y cardiovascular, como es el caso de
Enfermedad pulmonar obstructiva crónica, y enfermedades cardiovasculares,
respectivamente. Los hidrocarburos aromáticos también son considerados
agentes potencialmente cancerígenos. (D Villarejo et al., 2009).
Uno de los marcadores de importancia relacionados con la presencia de daños en
el ADN o a nivel cromosomal es la presencia de micronúcleos en células
21
sanguíneas (Torres et al., 2010; Au et al., 2010; Rubes et al., 2010; Wei et al.,
2010., Pavanello et al., 2010). Por lo anterior, y considerando además que no
existe evidencia que sugiera un cambio en las actividades económicas de los
mototaxistas a mediano plazo, es claro que este trabajo presenta una justificación
coherente por cuanto pretende detectar un enlace entre los problemas de
contaminación por exposición al aire urbano y los posible efectos de los mismos
sobre las células sanguíneas. Lo anterior ofrecerá herramientas para propender
por que los mototaxistas puedan ser integrados a un sistema de salud que permita
garantizar un impacto mínimo de su actividad sobre la calidad de vida de los
mismos.
22
3. OBJETIVOS
3.1 OBJETIVO GENERAL
Evaluar la frecuencia de aparición de micronúcleos en células de sangre
periférica de mototaxistas de la ciudad de Cartagena de Indias.
3.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Determinar las condiciones laborales y socioeconómicas de una muestra de
mototaxistas que laboran en la ciudad de Cartagena de Indias.
Cuantificar la frecuencia de aparición de micronúcleos en células de la serie
blanca como en células de a serie roja, en sangre periférica de mototaxistas
que trabajan en la ciudad de Cartagena de Indias, comparando dichos
valores con los obtenidos en personas que se dedican a trabajos diferentes.
Establecer asociaciones entre la frecuencia de micronúcleos y factores
socio-demográficos y laborales de los mototaxistas
23
4. HIPÓTESIS
Los mototaxistas de la ciudad de Cartagena de Indias presentan mayor frecuencia
de micronúcleos en las células de sangre periférica que personas dedicadas a
otras actividades.
24
5. MARCO TEÓRICO Y ESTADO DEL ARTE
5.1 MOTOTAXISMO
Desde hace más de una década, el mototaxismo ha sido una realidad extendida a
lo largo y ancho de nuestro país, no solo en las grandes ciudades, sino también en
los pueblos y veredas de nuestra geografía. Ante la falta de oportunidades, el
desempleo y los bajos niveles de escolaridad de la población, ser mototaxista se
ha convertido en la solución para poder sobrevivir. Sin embargo, a pesar de que
este oficio le trae beneficios a quienes viven de él, o a quienes lo tienen para su
uso personal, esta modalidad de trabajo informal ha traído problemáticas como el
aumento de accidentes, congestión vehicular y contaminación del medio ambiente
(Sánchez, 2011); (El Heraldo.co. Junio 1 de 2011).
Los inicios del mototaxismo en Colombia, según varias fuentes, tiene lugar en
Cotorra, municipio perteneciente al departamento de Córdoba, extendiéndose
luego al departamento de Sucre, más tarde Bolívar, y tomando fuerza hasta la
mayoría de las capitales de la costa Caribe Colombiana (El Espectador.com. Julio
8 de 2011) y de igual forma, gran parte del país. Es de esta manera como puede
evidenciarse que para el año 2000 en Colombia, el parque automotor de
motocicletas registró cifras de 1.123.764 unidades, presentando para el 2003 un
aumentó de 89.000 unidades; con un incremento consecutivo hacia los años 2004
con 150.943 y 2005 con 248,741 unidades respectivamente. De acuerdo con estos
datos puede apreciarse un incremento del 59% de unidades de motocicletas
partiendo del año 2000 al 2005. Respecto al crecimiento del parque automotor de
motocicletas en Colombia, el crecimiento ha sido de 64.8% aproximadamente,
según análisis recientes (Fuente fondo de prevención vial).
25
No existen estadísticas concretas del número de mototaxistas que hay en la
actualidad en el país, pero se cuenta con algunos censos y estudios que se han
publicado en algunas regiones. Según cifras oficiales de la secretaría de tránsito y
transporte municipal de Sincelejo, el servicio del mototaxismo es prestado en la
ciudad por una cifra de 20.000 personas aproximadamente (Sánchez, 2011).
Esta forma de trabajo informal que surge por la necesidad de un bienestar, en la
actualidad es una actividad común en muchas ciudades, la cual representa una
seria competencia para el transporte público, razones, entre otras, por las que
vienen realizándose estudios al respecto, como puede señalarse las
investigaciones sobre este fenómeno del mototaxismo a cargo de varias
universidades y censos de alcaldías, en seis capitales de la Costa atlántica, que
muestran que en tres años (2005 - 2008), el mototaxismo aumentó de 33 mil a 86
mil ―mototaxistas‖ (El Tiempo.com. Abril 14 de 2008).
La Alcaldía de Montería realizó un censo de mototaxistas en la ciudad que arrojó
un número de 2.700 personas dedicadas de tiempo completo a esta actividad (El
Tiempo.com. Febrero 10 de 2009). En Cartagena, a pesar de que están
matriculadas oficialmente 12.000 motos aproximadamente, se estima que en la
ciudad puede haber más de 50.000 de estos vehículos, muchos de los cuales se
usan para mototaxismo. En el estudio denominado, el Sexto Estudio Socio-
demográfico de los Usuarios de Motos en Colombia, es revelado que el 67%
bolivarense compran moto para ganar un sustento (El Universal.com.co. Junio 6
de 2011).
Aunque el mototaxismo constituye la única fuente de ingresos para muchas
familias, las personas dedicadas a este oficio deben permanecer en las calles
durante muchas horas al día, expuestos a radiación solar y a diversidad de
contaminantes ambientales, generados por el tráfico urbano (Chien and Huang
26
2010; Mills et al., 2011). A continuación son presentados los aspectos de mayor
relevancia dentro de la contaminación atmosférica en las ciudades.
5.2 CONTAMINACIÓN AMBIENTAL EN ZONAS URBANAS
Una de las definiciones de contaminación es la presencia de elementos en la
atmósfera que alteran su composición y que afectan a cualquier componente del
ecosistema. Desde un punto de vista antropocéntrico la contaminación atmosférica
se refiere a los contaminantes que afectan la salud o el bienestar humano
(Morales 2006). En la actualidad, el resultado del desarrollo y progreso tecnológico
ha originado diversas formas de contaminación, las cuales alteran el equilibrio
físico y mental del ser humano. Debido a esto, la actual contaminación se
convierte en un problema más crítico que en épocas pasadas, (Wan et al., 2011).
La contaminación del aire en las ciudades desarrolladas se debe a los escapes o
emisión de gases de los motores del tráfico por quema de combustibles fósiles, a
los aparatos domésticos al igual que las industrias por combustión, liberados a la
atmósfera en forma de gases, vapores o partículas sólidas capaces de
mantenerse en suspensión, en concentraciones superiores a las normales,
perjudicando la salud del ser humano como animales y plantas (Mills et al., 2011).
El aire que respiramos está compuesto principalmente de nitrógeno y oxígeno, así
como de otros gases en pequeñas concentraciones. Entre estos, se encuentran
gases que contaminan el aire y que se consideran potencialmente tóxicos como el
ozono (O3), monóxido de carbono (CO), dióxido de azufre (SO2), óxidos de
nitrógeno (NOx), hidrocarburos aromáticos polinucleares (HAPs) (Kishida et al.,
2008), compuestos orgánicos volátiles (COV), Algunos de estos compuestos
carcinógenos, como el benceno y el butadieno (D Villarejo, 2009), metales
pesados y aerosoles y material particulado respirable (PM 2,5 y PM 10) (Reed et
al., 2008). Debido a la diversidad de compuestos presentes en la contaminación
del aire, podrían generarse efectos agudos y crónicos en la salud humana,
afectando diferentes sistemas y órganos (Kampa and Castañas, 2008).
27
Tabla 1. Descripción de los principales contaminantes atmosféricos químicos y sus fuentes
CONTAMINANTE FOMACIÓN ESTADO FÍSCO FUENTE
Partículas en suspensión (PM): PM10 y Humos negros
Primaria y secundaria Sólido, Líquido Vehículos, procesos industriales, humos de tabaco
Dióxido de azufre (SO2) Primaria Gas Procesos industriales, vehículos
Dióxido de Nitrógeno (NO2) Primaria y secundaria Gas Vehículos, estufas de gas
Monóxido de Carbono (CO) Primaria Gas Vehículos, humos de tabaco, combustiones de interiores
Compuestos orgánicos volátiles (COVs) Primaria, secundaria Gas Vehículos, industria, humos de tabaco, combustión de interiores
Plomo (Pb) Primaria Sólido (Partículas finas) Vehículos, industria Ozono 8(O3) Secundaria Gas Vehículos (secundario a foto-
oxidación de NOx y compuestos orgánicos volátiles).
PM10: Partículas con diámetro inferior a 10 mm; NOx: Óxidos de Nitrógno
Fuente: Ballester, 2005.
28
Los contaminantes ambientales son llamados primarios y secundarios Primarios
cuando se encuentran tal y como fueron emitidos y secundarios, cuando son
formados a partir de los primarios como consecuencia de transformaciones ó
reacciones químicas y físicas. Ejemplos de estos últimos son el O3, los ácidos
sulfúrico y nítrico, derivados de la contaminación fotoquímica y la acidificación del
medio, respectivamente (Ballester, 2005; Oyarzun, 2010; Morales 2010). Así
mismo, muchos COVs han sido identificados mediante espectrometría de masas y
cromatografía de gases en muestras urbanas estudiadas, incluyendo alcoholes,
carbonilos, alcanos y aromáticos, en donde el etanol aparece como el principal
actual COV (Chung et al., 2010). Las características de los principales
contaminantes químicos y sus fuentes más importantes son presentadas en la
Tabla 1.
Los HAPs son compuestos semivolátiles (Zhang et al., 2011) que contienen
hidrógeno (H) y carbono (C), entre los que puede mencionarse el metano,
acetileno, benceno, tolueno, etc. (Zhang, Eddings and Sarofim, 2008), su
importancia radica en que son considerados cancerígenos, principalmente los que
tienen cinco anillos (Dichut et al, 2000) y son producidos durante la combustión
incompleta de combustibles fósiles mediante un proceso pirolítico (Sanderson y
Farant, 2000).
Pueden producir efectos perjudiciales sobre la salud a diferentes escalas, existen
los que no representan ningún riesgo para la salud, otros, que pueden comportase
como poco tóxicos y que por la razón de contribuir a la formación de otras
sustancias como el ozono se consideran como contaminantes a tener en cuenta
en cualquier control de emisiones; y por último está un grupo que en general, son
contaminantes muy tóxicos, y se encuentran ampliamente distribuidos en el medio
ambiente (Bolognesi et al.,1997); La exposición a HAPs por inhalación, produce
efectos distintos dependiendo del tipo de hidrocarburo en estudio. Los
hidrocarburos aromáticos: benceno y tolueno, son los más irritantes, pudiendo
29
causar lesiones importantes en las membranas mucosas si sus vapores son
inhalados. Los hidrocarburos no saturados son los más peligrosos por su facilidad
de reaccionar con la radiación solar originando el conocido smog fotoquímico
(Wang, Du and Ge., 2009), además los HAPs son considerados agentes
potencialmente cancerígenos (D, Villarejo et al., 2009), estudios han demostrado
que los HAPs pueden interactuar con el material genético, sobre las cadenas de
ácido desoxirribonucleico (ADN), provocando un incremento en los errores durante
la mitosis y hasta muerte celular (Calderón-Segura et al., 2004).
En el medio ambiente se han estudiado más de 3.000 compuestos químicos,
identificados en la atmósfera ambiental, de los cuales una variedad de agentes
son mutagénicos y/o carcinogénicos, como HAPs, aminas aromáticas y
compuestos heterocíclicos. Existen reportes de asociaciones positivas entre
marcadores citogénicos y niveles de HAPs en el aire, mediante estudios
experimentales y humanos. (Bolognesi et al., 1997).
Algunos HPAs como Benz[a]antraceno (BA), dibenz[a]ntraceno (DBA) y
dibenzo[a]pirenos se han encontrado en productos fósiles de combustión
incompleta y otros materiales orgánicos, lo cual podría tener influencia sobre la
población que labora a nivel industrial, es decir, que la relación de los trabajadores
con el medio, puede ser un factor de exposición a los químicos por inhalación.
(Zhong et al., 1995).
Otro compuesto aromático policíclico es el fenantreno (PHE), considerado uno de
los PAHs prioritarios para la Agencia de Protección Ambiental (EPA) de los
Estados Unidos, el cual se encuentra en el ambiente acuático debido a fuentes
tanto petrogénicas como pirogénicas, y se ha comprobado su efecto tóxico en
varias especies marinas (Albers 2003). Por su gran distribución, los organismos
acuáticos, como los peces, pueden absorber estos compuestos del agua través
30
de las branquias y mediante la ingestión de sedimentos o alimentos contaminados
(Hick et al., 2007).
El aire urbano también está constituido por partículas denominadas material
particulado (PM), el cual ha sido asociada con una variedad de efectos adversos
para la salud. Estas partículas que se encuentran suspendidas pueden
encontrarse de diferentes diámetros a saber, de 10 μm, ≤ 2.5 y las más pequeñas
con un diámetro de ≤ 0.1 μm. Las de un diámetro menor o igual a 10 μm (PM10)
son llamadas ―respirables‖ por su capacidad de introducirse en las vías
respiratorias; Las partículas finas con diámetro aerodinámico ≤ 2.5 μm alcanzan
fácilmente los bronquíolos terminales y los alvéolos, desde donde pueden ser
fagocitadas por los macrófagos alveolares y atravesar la barrera alvéolo-capilar
para ser transportadas hacia otros órganos por la circulación sanguínea. Por
último las partículas denominadas ultrafinas o nanopartículas por su menor
diámetro, ≤ 0.1 las cuales pueden pasar directamente desde los alvéolos al
torrente circulatorio (Morales 2010; Oyarzun, 2010).
Existen muchos reportes de estudios sobre material particulado relacionados con
disfunción respiratoria han sido realizados en Estados Unidos y Europa (Crebelli et
al., 1995; Viras et al., 1991; Isidoro et al., 2003), por lo cual se cree en la
actualidad que las partículas más pequeñas, ultrafinas o nanopartículas suelen ser
las más perjudiciales, es decir, cuanto menor sea el diámetro de la partícula,
mayor capacidad tendrá por penetrar al árbol respiratorio, razón por las que se le
atribuye su efecto más grave sobre la salud (Price et al., 2010).
No obstante, en el ambiente pueden encontrarse presentes otros compuestos
tales como el dióxido de azufre, el ácido sulfúrico y los sulfatos, los cuales
producen un efecto irritante sobre las mucosas del tracto respiratorio, pudiendo
ocasionar enfermedades crónicas del sistema respiratorio, como bronquitis y
enfisema pulmonar (D Villarejo, 2009).
31
Este efecto dañino de los óxidos de azufre puede incrementarse al estar presentes
en una atmósfera con partículas suspendidas, por la razón de que el dióxido y el
ácido sulfúrico paralizan los cilios del tracto respiratorio y de esta manera, las
partículas de polvo penetran en los pulmones arrastrando también los compuestos
azufrados, originando entonces graves daños, e incluso la muerte (D Villarejo,
2009).
El ozono es considerado igualmente un gas contaminante, generado a nivel
troposférico, capaz de provocar efectos nocivos para el hombre, animales y
plantas, produciendo tos, flema, dolor al respirar e inflamación en el tejido
pulmonar. Reduce la capacidad respiratoria, disminuye la capacidad mucociliar, y
debilita las defensas naturales del aparato respiratorio (D Villarejo, 2009).
El dióxido de nitrógeno (NO2) como es uno de los principales gases contaminantes
atmosféricos ya que puede formar ácido nítrico y ácido nitroso, componentes de la
lluvia ácida por reacción con agua, lo que produce irritación de los alvéolos
pulmonares y puede llegar a ser mortal en altas concentraciones. Los efectos
tóxicos del NO2 dependen de su concentración ambiental. Estudios demuestran
que la formación de ozono está influenciada por la emisión de contaminantes que
actúan como precursores (como los óxidos de nitrógeno emitidos en área urbana
precedentes de complejos de refinería) y por condiciones meteorológicas (Borrego
et al., 2010).
La fuente principal de emisión de monóxido de carbono (CO), lo constituye los
motores de combustión interna, el cual no produce efectos tóxicos, pero a
elevadas concentraciones puede afectar seriamente el metabolismo respiratorio,
debido a la alta afinidad de la hemoglobina por este compuesto, de tal manera que
las emisiones de CO en un área cerrada, pueden causar la muerte por
insuficiencia cardíaca (D Villarejo, 2009).
32
5.2.1 Enfermedades asociadas a la contaminación ambiental
El hombre es en gran parte responsable de que la calidad del aire reaccione
como un producto nocivo (Flores et al., 2010). Numerosas enfermedades han sido
relacionadas con la contaminación ambiental, teniendo en cuenta que la salud de
los seres vivos se ve influenciada en forma importante por el entorno en el cual
viven. Entre estas, las más frecuentes y que presentan fuerte asociación con la
contaminación son enumeradas a continuación:
5.2.1.1. Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC). Los contaminantes
atmosféricos contribuyen también en la disminución de la función pulmonar y al
aumento de la reactividad bronquial, en la disminución de la tolerancia al ejercicio
y al aumento del riesgo de bronquitis obstructiva crónica, enfisema pulmonar,
exacerbación del asma bronquial y cáncer pulmonar, entre otros efectos (Oyarzun,
2010). La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) se define desde el
punto de vista clínico como la obstrucción crónica y poco reversible al flujo aéreo
(Almagro et al., 2010). Es una entidad caracterizada por limitación progresiva del
flujo espiratorio que no es completamente reversible derivada de daño bronquiolar
y enfisema pulmonar, asociada a una respuesta inflamatoria anormal del pulmón a
la inhalación de gases y partículas nocivas (Morales et al., 2010)
Se calcula que incrementos de 10 mg/m3 en los niveles atmosféricos de ozono y
de 1 mg/m3 en los de monóxido de carbono se asocian con una aumento de los
ingresos hospitalarios del 6,1 y del 3,9%, respectivamente (Ballester et al., 2005).
5.2.1.2. Enfermedades cardiovasculares. De acuerdo con estudios, reportes en
la literatura internacional refieren una mayor frecuencia de hospitalizaciones y
muertes de origen cardiovascular durante los períodos de elevada concentración
de partículas contaminantes, como ocurre en la estación invernal (Zanobetti,
Schwartz y Dockery, 2000; Peters et al., 2001). Entre estas enfermedades
cardiovasculares, el colesterol elevado, hipertensión o alta presión sanguínea, y
las enfermedades del corazón, afectan el corazón al estrechar las arterias y al
33
reducir el flujo sanguíneo que recibe el corazón, lo que hace que el corazón
trabaje más. Con base en estudios poblacionales, hay indicios de que la
exposición a la compuestos químicos del aire por como partículas finas y
ultrafinas, hidrocarburos aromáticos policíclicos, aldehídos, y los metales podrían
a elevar el riesgo de ECV asociado a aterogénesis, trombosis, o regulación de la
presión arterial, aumentando el riesgo de morbilidad y mortalidad cardiovascular
(O'Toole, Conklin y Bhatnagar, 2008)
Durante el episodio de ―smog‖ (compuesto por altas concentraciones de dióxido de
sulfuro y humo negro) de Londres de 1952 fue observado que la mortalidad por
causa cardiopulmonar fue duplicado (Iniesta et al., 2009).
5.2.1.3. Alergia. El aire contiene contaminantes biológicos, que pueden ser de dos
tipos:
Microorganismos que pueden ser transmitidos por el aire, aunque no
puedan desarrollarse en él. Son virus, bacterias u hongos que causan
enfermedades infecciosas.
Sustancias o partículas procedentes de animales o plantas, como las heces
de algunos artrópodos o el polen de determinadas plantas. Pueden producir
enfermedades respiratorias o alergias.
El polen de las plantas anemógamas (que utilizan el viento como medio de
polinización), como gramíneas (trigo, cebada, centeno, etc), oleáceas (olivos) y
urticáceas (ortigas), es el principal contaminante biológico del aire, aunque sus
efectos se limiten al periodo de floración.
No obstante, la salud es afectada por el polen, presentando como principal efecto
el desarrollo de síntomas alérgicos: asma, rinitis y conjuntivitis. Estudios a nivel
internacional, como sucede en España, señalan que la alergia al polen afecta a un
20% de la población, aunque esta cifra va en aumento. Por otra parte, la
contaminación atmosférica, que afecta a las vías respiratorias, y los hábitos
34
higiénicos en los países desarrollados, lo cual favorece el desarrollo del sistema
inmunitario, parecen ser las causas de la cada vez mayor incidencia de este tipo
de afecciones (http://www.bioygeo.info/pdf/04_Contaminacion_Atmosferica.pdf)
Cambios notorios en la elevación de la temperatura y el aumento de la humedad
ambiental incrementan la producción de polen de abedules, así mismo en el caso
de otros tipos de pólenes, como el de la artemisa, han sido relacionados con un
incremento en la producción de ambientes con altas concentraciones de dióxido
de carbono (Iniesta et al.,2009).
Dado que entre los contaminantes atmosféricos existen varios que pueden
generar daño al ADN o los cromosomas, varios autores han mostrado que los
efectos de la contaminación del aire puede ser monitoreada evaluando
marcadores de toxicidad indirectos, dentro de los cuales están: análisis de la
concentración de contaminantes usando sensores, óxido nítrico en el asma (De
Diego, 2010) y medición de partículas suspendidas (Flores et al., 2010).
Como es evidente, la contaminación ambiental es un tema de gran preocupación,
especialmente para los investigadores, razón por la cual, estos, a través de los
años, buscaron la forma de implementar pruebas que permitieran determinar si
estos compuestos que se encuentran en el medio ambiente, podían causar
efectos sobre la salud del ser humano, especialmente, sobre el material genético
(ADN) del mismo. Bajo este contexto, los individuos están expuestos a la
contaminación de aire de manera directa que podría afectar su genoma. Una
forma relativamente sencilla de analizar alteraciones en la integridad genética es
el ensayo de micronúcleos. Esta prueba es aplicada a muchos estudios y es
empleado con mucha frecuencia en investigación ambiental.
35
5.3. MICRONUCLEOS
Durante la división celular, el material genético contenido en el núcleo celular, se
replica y divide equitativamente dando lugar a dos células hijas idénticas; este
proceso puede producirse de manera errónea debido a alteraciones durante la
replicación y posterior división del ADN, a roturas cromosómicas y al efecto de
radiación y de sustancias genotóxicas, produciéndose perdida cromosómica y
haciendo que el reparto del material genético no sea equitativo (Zalacaín et al.,
2005). Al ocurrir esto, el material genético que se desprende y, por tanto, queda
excluido y no se incorpora correctamente al núcleo de la célula hija, origina un
nuevo núcleo de menor tamaño que el primero denominado ―micronúcleo‖ (MN),
visible fácilmente al microscopio óptico, el cual se originan de fragmentos
cromosómicos acéntricos o cromosomas enteros que han quedado rezagados en
la anafase durante la división nuclear (Zalacain 2005; Fenech 2006, 2007).
Entre las definiciones planteadas, los micronúcleos son masas de cromatina que
tienen un aspecto similar al del núcleo principal y se ven como pequeños núcleos
en el citoplasma de las células interfásicas (Venegas et al. 2002). Se describe
como un núcleo más pequeño, comparado con el presente normalmente la célula,
fácilmente identificable por microscopía de luz luego de la obtención de la muestra
respectiva, previa preparación y tinción del frotis, haciendo posible evidenciar el
número de micronúcleos presentes en los eritrocitos y policromáticos (Samanta y
Dey, 2010).
Durante el evento biológico de maduración del eritroblasto, este se transforma a
eritrocito o célula madura, donde el núcleo principal es expulsado, mientras que el
micronúcleo puede ser conservado en el citoplasma. A nivel molecular es
generada una perturbación expresada a través de los micronúcleos, que se
forman por condensación de fragmentos cromosomales o cromosomas enteros
que no fueron incorporados en el núcleo hijo durante la mitosis (anafase), debido
tanto a rupturas como a mala segregación cromosómica. De tal forma que pueden
36
observarse en el citoplasma separados del núcleo principal, (Heddle et al. 1991;
Gudi et al.1992 en Palm & Krause 1995; Al-Sabti & Metcalfe 1995; Gauthier et al.
1998; Chung et al. 2002; Alay et al. 1994 en Gavilán 2003, Adams 2002).
Varios factores podrían ocasionar esta perturbación, así por ejemplo, la exposición
a residuos contaminantes, como, pesticidas, con conocidas propiedades
genotóxicas y clastogénicas lo cual genera respuestas a distintos niveles en los
organismos vivos (Martínez y Gómez, 2007).
5.3.1. Formación de micronúcleos. Entre los investigadores involucrados
pueden destacarse Countryman y Heddle en 1976, por ser los primeros
investigadores que de manera independiente propusieron el ensayo de
micronúcleos (MN), como una prueba alternativa y simple para determinar el daño
cromosómico en poblaciones celulares en división (Arencibia y Rosario, 2009). Del
mismo modo, Heddle (1973) y Schmid (1975) en Al-Sabti & Metcalfe (op cit.),
quienes expusieron que los micronúcleos son formados en el citoplasma a través
de los siguientes eventos:
1) En la anafase, una cromátida céntrica y fragmentos cromosomales rezagados
con retraso cuando los elementos céntricos van hacia los polos del huso. Los
micronúcleos se presentan de fragmentos cromosomales o cromosomas
acéntricos que no son incorporados en el núcleo hijo en la mitosis porque carecen
de centrómero.
2) Los elementos rezagados pueden ser incluidos en el núcleo de las células hijas,
pero una proporción de una o varios núcleos secundarios los cuales son mucho
más pequeños que los núcleos principales (1/5 o 1/20), y son por lo tanto llamados
micronúcleos. Los cuales no pueden ser observados hasta después del primer
ciclo celular. (Figura1).
37
Figura 1. FORMACIÓN DE MICRONÚCLEOS
Fuente: Heddle, 1973 y Schmidt, 1975.
Por otra parte los MN pueden formarse de fragmentos acéntricos y por
cromosomas enteros que derivan de fragmentos acéntricos se forman por ruptura
directa del ADN, replicación del ADN dañado e inhibición de la síntesis de ADN, en
tanto que, los que se originan de cromosomas enteros se forman por alteraciones
del huso mitótico, del cinetocoro, daño en las subestructuras del cromosoma u
otras partes del huso mitótico y alteraciones en la fisiología celular (Albertini 2000).
(Figura 2).
38
Metafase Anafase
Metafase Anafase
Metafase Anafase
Metafase Anafase
(2N+MN) + 2N
2N + (2N+MN)
Metafase Anafase
(2N+MN) + 2N
2N + (2N+MN)
2N + 2N
(2N+1) + (2N-1)
(2N+MN) + (2N-1)
2N+ ((2N-1)+ MN)
(2N+MN) + (2N-1)
2N+ ((2N-1)+ MN)
(2N+MN) + (2N-1)
2N+ ((2N-1)+ MN)
(2N-1+MN) + (2N-1)
(2N-1+MN) + (2N-1)
(2N+MN) + (2N-1)
2N+ ((2N-1)+ MN)
(2N-1+MN) + (2N-1)
(2N-1+MN) + (2N-1)
(2N-1+MN) + (2N-1)
(2N-1+MN) + (2N-1)
A
B
C
D
E Replicación tardía
Modificaciones epigenéticas
Figura 2. Posibles mecanismos de formación de micronúcleos
Diagrama que representa la formación mecanismos propuestos en la formación de MN. A. Rompimiento de ADN que originan fragmentos cromosomales acéntricos. B. Alteraciones en la fijación de las fibras de tubulina del huso acromático con los cinetocoros de los centrómeros cromosomales. C. Despolimerización de la tubulina. D. Defectos centroméricos asociados a alteraciones en los cinetocoros. E. Replicación tardía del DNA y modificaciones epigenéticas de las histonas (hiperacetilación, metilación y fosforilación). Fuente: Kirsch et al 2002; Mateuca et al 2006; Fenech et al 2011; Kirsch et al 2011.
Estudios demuestran que estos micronúcleos envueltos en la membrana nuclear,
se forman por piezas de ADN retrasados después de la segregación de los
cromosomas homólogos durante la anafase, como resultado de cromosomas que
no poseen centrómero con apariencia de fragmentos cromosomales o
cromosomas acéntricos, fenómeno provocado por agentes denominados
39
clastogénicos o porque la formación del huso o enlace es interrumpido, producto
de la intervención de un agente aneugénico (Adams 2002).
Mediante estudiados ha sido posible identificar compuestos involucrados en
desencadenar este efecto. Gudi et al. (1992) y Palm and Krause (1995) señalan
que agentes que inducen aneuploidía (venenos de huso mitótico) inducen
micronúcleos con centrómeros, mientras clastógenos inducen micronúcleos sin
centrómeros (Norppa et al., 1993). Así Nepomuceno et al., (1997) señalan que los
micronúcleos son indicadores de efectos clastogénicos y aneugénicos.
Entre las ventajas del ensayo de MN podrían mencionarse que: estas estructuras
son fácilmente detectados mediante observación en microscopio óptico o por
fluorescencia en la placa porta objetos con ADN (muestra) teñido; Provee índices
de genotoxicidad, requiere no más de un microscopio, no necesita complejos
laboratorios, sin embargo la enumeración al microscopio de muchas células
consume tiempo (Adams 2002).
Para la medición de los MN en un extendido en placa, estudios iniciales realizados
en animales, según reportes de la literatura, han utilizado eritrocitos policromáticos
jóvenes procedentes de la médula ósea de mamíferos de laboratorio que fueron
expuestos, por vías apropiadas, a una sustancia determinada. Luego de extraer la
médula ósea, fueron realizados los extendidos, coloreados, posteriormente vistos
al microscopio óptico y finalmente cuantificado el número de micronúcleos
presentes en los eritrocitos policromáticos y normocromáticos. (Arencibia., et al
2011).
5.3.2. Criterios para identificar micronúcleos. Mediante estudios se han
formulado criterios para la identificación de estructuras donde incluyen los MN,
que tratan sobre las características necesarias para ser reconocidos como tal y
permitan un recuento fiable y objetivo a partir de criterios de selección de las
40
células binucleadas (BN) y de los MN, (Fenech, 2000; Fenech et al., 2003;
Zalacain 2005), definidos con base en
http://ehs.sph.berkeley.edu/holland/humn/projects/lymphocy tes/ variability. La Tabla 2 muestra
los criterios para la identificación de MN.
Tabla. 2. Criterios de identificación de micronúcleos definidos por el HUMAM-project
El diámetro del MN debe tener una medida entre 1/16-1/3 del diámetro del núcleo principal (menos de una mitad del núcleo principal). No refractarios Intensidad de tinción similar a el núcleo principal No unidos a el núcleo de la célula de origen Pueden tocar el núcleo de la célula de origen pero no superponerse con él y su membrana debe verse con claridad
Fuente: Fenech, 2000; Fenech et al., 2003.
5.3.3. Utilidad del ensayo de micronúcleos. Han sido descritos los usos de la
técnica de recuento de MN, como medida de daño cromosómico sobre cultivos de
linfocitos humanos, propuesta por primera vez por Countryman y Heddle en 1976,
cuyo único requisito era la elección de tipos celulares con gran actividad mitótica.
Este ensayo de genotoxicidad fue mejorado por Fenech y Morley, más tarde, en
1985, tras lograr detener el proceso de división celular cuando la célula sólo
hubiese sufrido una división mitótica, avance que fue posible con el desarrollo de
la técnica del bloqueo de la citocinesis (CBMN: cytokinesis-block micronucleus)
cuyo fundamento es la utilización de un agente químico denominado citocalasina-
B cuya función es impedir la citocinesis celular (Fenech y Morley, 1985).
Partiendo del concepto que el ensayo de MN es una herramienta para evidenciar
efectos clastogénicos y aneugénicos (Norppa and Falck, 2003), de la misma
manera, la prueba ha sido utilizada para la determinación de respuestas
41
genotóxicas, en todo tipo de organismos incluso en animales, como los peces por
ejemplo (Carrasco et al. 1990; Pacheco y Santos 1997, 1998). Mediante estos
estudios iniciales en animales, fue posible demostrar que para hallar los MN en
una muestra, la célula analizada debe cumplir una condición, es decir, se requiere
una división celular después del daño para que puedan formarse los micronúcleos
y ser visualizados (Fenech y Morly, 1985) por lo que éstos proporcionan un índice
útil y confiable de la ruptura y pérdida de (Koppe and Starling 2001).
Esta prueba de micronúcleos ha sido considerada como un ensayo in vivo a corto
plazo destinado a descubrir las lesiones cromosómicas o del aparato mitótico
inducidas por sustancias químicas. Es así como los estudios realizados en
animales con este ensayo, se basan en un aumento del número de micronúcleos
en los eritrocitos policromáticos y normocromáticos de los animales tratados
respecto de los animales testigo (Koppe and Starling 2001).
Con base en las razones anteriores, el Test o ensayo de micronúcleos es
considerado como una de las metodologías existentes para el análisis de
biomarcadores realizado a través de la evaluación de respuestas biológicas ante
algún contaminante o la suma de estos, fenómeno que ocurre durante la mitosis
como respuesta ante la perturbación a nivel celular (Arcand-Hoy and Metcalfe
2000).
El uso de este Test como indicador biológico de la exposición a contaminantes
químicos genotóxicos es apoyado por varios autores (Hoofman and de Raat, 1982;
Manna et al. 1985; Hose et al. 1987; Brunetti et al. 1988; Metcalfe 1988; Long &
Buchman 1989 en Carrasco et al. 1990 y Koppe and Starling 2001) y se
fundamenta en la acción clastogénica que tienen algunos compuestos químicos
sobre el ADN cromosómico (Alay et al. 1995).
42
La metodología del ensayo de micronúcleos se ha puesto en práctica en diferentes
campos de la investigación, bien sea para estudios en animales, plantas, incluso el
ser humano. En 1999, la prueba fue validada y considerada a nivel mundial como
biomarcador efectivo del daño de ADN (Zalacain et al., 2005), y desde entonces
ha sido ampliamente utilizada como marcador de daño genotóxico (Olgun et al.,
2007, Bloching et al., 2008; Palacio et al., 2009; Fortin et al., 2010).
5.3.4. Detección de alteraciones genéticas. En la actualidad varias técnicas son
utilizadas para la detección de anormalidades celulares ocasionadas por agentes
xenobióticos. Entre las que puede mencionarse el análisis del cariotipo, el cual ha
sido tradicionalmente utilizada para detectar desórdenes genéticos, lo cual es
valorado como un aspecto relevante para el diagnóstico de casos de cáncer,
considerándose el factor pronóstico más importante en los pacientes que padecen
esta enfermedad (Slovak et al., 2000; Byrd et al., 2002).
Otras de las técnicas relacionadas con las alteraciones genéticas son la
hibridación in situ con fluorescencia (FISH) y la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), las cuales son habitualmente empleadas, a nivel no sólo
diagnóstico, sino en el seguimiento de pacientes con neoplasias, específicamente
en la detección de translocaciones (Calasanz, 2001), siendo la PCR, la técnica
actual de detección estándar para estos desórdenes (Zelenetz et al., 1991).
5.3.5. Biomarcadores para contaminación ambiental. Un biomarcador es un
indicador de la respuesta biológica de un organismo frente a la agresión de un
xenobiótico o sustancia química, generalmente un tóxico, o los metabolitos que
resulten de su biotransformación, cuya determinación en los líquidos biológicos,
tejidos o aire exhalado permita evaluar la intensidad de exposición o riesgo para la
salud. Por otro lado, el uso de los biomarcadores resulta de gran ayuda en la
evaluación del riesgo de exposición como una relación causa efecto y,
particularmente para controlar riesgos (World Health Organization).
43
Los marcadores biológicos, biomarcador o indicador biológico de exposición a un
compuesto, como se les conoce ,puede ser el propio compuesto, los productos
procedentes de reacciones de conjugación, aductos formados por reacción del
compuesto o por sus metabolitos característicos respectivamente, igualmente,
para cada una de las tres posibilidades, con macromoléculas, interferencias
bioquímicas o enzimáticas medibles, etc. (Periago, 2003). Estas señales actúan
como respuestas fisiológicas que reflejan una exposición, una respuesta celular
precoz, o una susceptibilidad inherente o adquirida (Silberged y Davis, 1994).
Existe una variedad de biomarcadores utilizados para valorar eventos por
exposición a tóxicos, entre los principales y de acuerdo con el propósito pueden
definirse como biomarcadores de exposición y biomarcadores de efecto. Los
primeros son respuestas que indican la exposición a químicos, pero no provee
conocimiento de los efectos adversos en algún nivel del organismo. El
biomarcador de efecto es el parámetro que refleja la interacción del compuesto
químico con los receptores biológicos de un organismo, provocando alteraciones
que anteceden al daño estructural, su detección permite la identificación precoz de
exposiciones excesivas o peligrosas y tomar medidas preventivas. Estos
biomarcadores pueden producir reacciones como nefrotoxicidad, hepatotoxicidad,
neurotoxicidad y genotoxicidad principalmente (World Health Organization).
El uso de los biomarcadores de exposición presentan la ventaja de tener en
cuenta aspectos por individual en una población, evalúan la vulnerabilidad laboral
en estudios epidemiológicos, el tratamiento para respuestas a la exposición y
contribuyen al conocimiento del metabolismo del xenobiótico (Barret, 1997).
Durante las últimas décadas, han sido usados biomarcadores en diferentes tipos
de estudios, como es el caso de daño cromosómico, la inestabilidad del genoma y
el riesgo de cáncer, (Bolognesi, 2003; El-Zein et al., 2006; Iarmarcovai et al.,
2008; Olivero 2008), análisis de varios tipos celulares, tales como linfocitos,
44
eritrocitos normocromáticos y policromáticos y células epiteliales exfoliadas
(Koppe and Starling 2001; Diler and Celik, 2011; Dertinger et al., 2011; Fenech et
al., 2011; Pandey y Rizvi, 2011).
45
6. METODOLOGÍA
En este estudio participaron 109 individuos varones, 73 mototaxistas y 36
controles. Recolección de información sociodemográfica, así como análisis
hematológicos y evaluación de micronúcleos en células de sangre periférica
fueron realizados a cada individuo. Comparaciones entre medias fueron realizadas
usando el T-test y asociaciones entre variables mediante análisis de correlación.
La propuesta metodológica para el desarrollo de éste proyecto, estuvo enmarcada
en las etapas descritas a continuación:
6.1. POBLACIÓN EN ESTUDIO
El presente estudio de tipo descriptivo fue realizado en la ciudad de Cartagena de
Indias, en el Departamento de Bolívar-Colombia, (10° 26‖ ′ N 75° 30‖ ′ 0) con la
participación de setenta y tres (73) individuos varones, los cuales laboran como
mototaxistas en la extensión de la cuidad, así mismo, treinta y seis 36 individuos
de sexo masculino que se desempeñan en otras labores o trabajos de interior,
residentes en la ciudad de Cartagena, quienes fueron incluidos en el estudio como
grupo control.
6.1.1. Criterios de inclusión. La participación de los individuos que
voluntariamente accedieron a hacer parte de este estudio estuvo enmarcada
dentro de los siguientes criterios de inclusión:
Haber trabajado como mototaxista por un período mínimo de dos años a la
fecha de estudio.
Trabajar mínimo cuatro horas al día.
Tener una edad comprendida entre 20 y 40 años.
Tener buen estado de salud.
46
6.1.2. Criterios de exclusión
No tener historia personal de cáncer.
No haber estado expuesto previamente a radiaciones o haber recibido
radioterapia o tratamiento con medicamentos quimioterapéuticos.
No presentar enfermedades infecciosas en el momento de inclusión al
estudio o en los tres meses previos. Poseer un buen estados de salud, sin
enfermedades crónicas tales como diabetes, presión arterial, problemas
cardíacos, visuales, respiratorios, dérmicos, VIH-SIDA, infecciones de
transmisión sexual.
Para los trabajadores sin exposición directa o grupo control, fueron aplicados los
criterios anteriores, excepto: Haber trabajado como mototaxista.
Antes de la toma de muestra, cada individuo recibió información detallada (Anexo
1) relacionada con el proyecto, así como el respectivo consentimiento informado
(Anexo 2), el cual fue leído en voz alta. Una vez firmado y por tanto aceptada la
participación del voluntario en el estudio, le fue extraída la muestra de sangre.
6.2. OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE.
Una muestra de cuatro mililitros 4 mL de sangre periférica fue obtenida de cada
voluntario por punción venosa, usando tubos vacutainer con ácido
etilendiaminotetracetico (EDTA) como anticoagulante. La muestra fue llevada en
un tiempo no mayor a dos horas, al laboratorio de Ecotoxicología, del Grupo de
Química Ambiental y Computacional de la Facultad de Ciencias Farmacéuticas de
la Universidad de Cartagena y almacenada a 18°C hasta el momento de su
análisis (Ruiz, 2005).
47
6.3. EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA Y EVALUACIÓN DE LA
PRESENCIA DE MICRONÚCLEOS EN ERITROCITOS.
El procedimiento del extendido de sangre fue realizado colocando una gota de
sangre sobre una lámina portaobjetos, la cual fue extendida tomando precaución
en que esta fuera delgada para su posterior tinción. Para este proceso fue
utilizada la coloración de Wright, colorante especial para teñir células sanguíneas,
permitiendo observar su morfología. Culminado el tiempo de la tinción, el
portaobjetos fue enjuagado con agua, secado al aire y finalmente realizada la
lectura al microscopio (Díaz y González, 1999).
El análisis de los micronúcleos en la sangre periférica de los mototaxistas y
controles estudiados fue realizado utilizando cinco (5) placas de extendido
preparadas con anterioridad mediante recuentos celulares en diez (10) campos
microscópicos en objetivo de inmersión 100X (aumento 1000X de magnificación),
contando un número de 1000 células correspondientes a la serie roja (SR), es
decir, eritrocitos maduros y eritrocitos policromáticos. Por cada placa fueron
contadas en el microscopio 1.000 células. La fracción de células sanguíneas con
micronúcleos (‰) fue reportada como la media ± error estándar por las cinco
lecturas realizadas por individuo (Hick et al, 2007).
En la Figura 3 aparecen hallazgos de la observación de los extendidos de sangre
periférica al microscopio.
48
7. ANÁLISIS ESTADÍSTICO.
Todos los datos fueron presentados como medias ± error estándar (EE), además,
fueron realizados, T test y pruebas de normalidad y homogeneidad de varianza.
Las asociaciones entre variables fueron revisadas por análisis de correlación
mediante la prueba de Pearson. Valores de P<0.05 fueron considerados como
estadísticamente significativos. El análisis estadístico fue realizado usando el
software Prisma 5.0 (GraphPad Prism 5 Demo).
Figura 3. Hallazgos de la observación de los extendidos de sangre
49
Fotografías de MN y estructuras celulares presentes en extendidos de sangre periférica. A y B presencia de micronúcleo (MN) en glóbulo rojo (GR). C eosinófilo (EOS) y glóbulos rojos (GR). D neutrófilo (NEU) Y micronúcleo (MN) en glóbulo rojo policromático (POLIC). E monocito (MON). F linfocitotos (LIN). Fuente: Autor
50
8. RESULTADOS
Los resultados de este trabajo fueron organizados teniendo en cuenta las etapas
de su elaboración, a continuación son detallados en ese orden.
8.1. CONDICIONES LABORALES Y SOCIOECONÓMICAS DE LOS
INDIVIDUOS PARTICIPANTES EN EL ESTUDIO.
De acuerdo con la encuesta realizada a 109 participantes de la ciudad de
Cartagena de Indias, 73 (67%) corresponden a trabajadores con exposición
directa a contaminantes ambientales (en su labor como mototaxistas) y 36 (33%)
fueron considerados como no expuestos. La media de la edad del grupo evaluado
fue de 30.2 años (rango 20 - 44), siendo para los trabajadores expuestos 31.4 ±
2.5 y para los no expuestos 29.05 ± 2.85 años. El peso promedio de los individuos
en general fue de 73.8 Kgs. siendo para grupo expuesto fue 75.5 ± 3.9 y para el
grupo control 72.2 ± 3.2 Kgs.
Del total de los participantes con número de hijos en rango de 0 a 2 se aprecia
que el 74% y 91.7 % corresponden a individuos expuestos y controles
respectivamente. Es de especial interés que el 45.2% correspondiente a los
individuos expuestos han laborado durante el periodo de 4-7 años y un 39.7%
entre 0-3 años. Los individuos fueron estratificados de acuerdo a la localización
del sitio de residencia, el grupo expuesto con un 56.2% fue localizado en el
estrato 1, y el grupo control estuvo distribuido en su mayor porcentaje (47.2%) en
el estrato 3. Con respecto al estado civil se tiene que para los expuestos 37.0%
son casados y para el grupo control 50% son solteros.
Sobre el dato de afiliación a salud entre los expuestos, 91.8%, poseen el servicio
activo del SISBEN (Sistema de Identificación de Potenciales Beneficiarios de
51
Programas Sociales), contrario al grupo control que el 100% está afiliado a fondos
públicos y privados nacionales de salud . Con respecto a la escolaridad, del total
de participantes expuestos, 64.4% han cursado la secundaria, mientras tanto el
94% del grupo control se encuentran en el rango universitario. Del total de los
individuos expuestos, el 32,9% tiene el hábito de fumar, y un 66.7% fuman de 0 –
2 cigarrillos por día con un total de años consumiendo cigarrillos de 54.2%.
Del total de los individuos expuestos, de forma cualitativa pudo observarse que
los utensilios de protección de seguridad de uso regulatorio por el DATT
(Departamento Administrativo de Tránsito y Transporte) para el ejercicio de este
trabajo informal, no es el adecuado. En efecto, durante las horas laborales los
mototaxistas utilizan poca protección, representada en artículos, tales como,
casco protector de la cabeza en mal estado y carente de buenas normas
higiénicas, gafas protectoras de los ojos, guantes industriales y en algunos casos
de manera inapropiada el uso de guantes de tela para la protección de los
antebrazos por el contacto directo de los rayos solares.
Con relación a los parámetros de salud, fueron estratificados en parámetros
respiratorios, dérmicos, oftalmológicos presentes en los individuos expuestos. En
el caso de los parámetros respiratorios la presencia de signos, síntomas y
enfermedades perse manifestados por la población de estudio fueron dificultad
respiratoria (17.8%), alergias (16.4%), y ausencia de Bronquitis y Asma.
Desde el punto de vista de los parámetros dérmicos los síntomas de mayor
frecuencia referidos por los trabajadores objeto del estudio tales como señales en
la piel, señales en la cara y cambios en las señales fueron 2.7%,21.9% y 5.4%
respectivamente. Para los parámetros oftalmológicos, los individuos que laboran
en el mototaxismo presentaron signos tales como ardor en los ojos (28.8%),
lagrimeo (9.6%), irritación visual (17.8%), dificultad para leer (8.2%), dificultad para
la visión cercana (6.8%), y visión lejana (5.4%). Es relevante anotar que el tiempo
52
de exposición para los individuos expuestos correspondiente al 45.2%
comprendido en un periodo de 4-7 años de labor y un 39.7% entre 0-3 años
probablemente actuó como un factor predisponente para la generación de
afecciones respiratorias 45.2% correspondiente a los individuos expuestos han
laborado durante el periodo de 4-7 años y un 39.7% entre 0-3 años.
No se reportaron antecedentes de enfermedades crónicas como diabetes,
hipertensión, cardiopatías, cáncer, ni antecedentes de tratamientos de radioterapia
o quimioterapia.
El resumen, respecto a los resultados de las características relacionadas con los
aspectos socioeconómicos, laborales, parámetros de salud, tales como
respiratorios, dérmicos y oftalmológicos, para los dos grupos en estudio son
mostrados en la Tabla 3 y 4.
Tabla 3. Características laborales y socio-demográficas de individuos
expuestos y no expuestos a contaminantes ambientales de la ciudad de
Cartagena de Indias.
REFERENCIA MOTOTAXIS
(%) (%)
Muestras (n)
36
73
EDAD AÑOS
20-24 44.4 9.4 25-29 13.9 34.2 30-34 11.1 15.1 35-39 13.9 31.5 40-44 16.7 9.6
Media ± EE 29.1 ± 2.85 31.4 ± 2.5
PESO
Menor de 75 Kg 55.6 45.2 Mayor de 75 Kg 44.4 54.8
Media ± EE 72.2 ± 3.2 75.5 ± 3.9
HIJOS
0 a 2 91.7 74.0 3 a 5 8.3 23.2
Más de 5 0.0 2.7
AÑOS LABORADOS 0 a 3 0.0 39.7 4 A 7
8 a 11 0.0 0.0
45.2 15.1
53
Tabla 4. Aspectos relacionados con los parámetros respiratorios, dérmicos y
oftalmológicos de la población de mototaxistas de la ciudad de Cartagena de
Indias.
PARAMETROS
SALUD
Dificultad respiratoria
Nunca 100 82.2
Poco 0.0 17.8
Bronquitis
Nunca 100 100
Alergia
Nunca 100 83.6
Poco 0.0 16.4
Asma
Nunca 100 100
PARAMATROS
DERMICOS
Señales de piel
Nunca 100 97.3
Poco 0.0 2.7
Señales en la cara
ESTRATO 1 25 56.2 2 11.1 28.8 3 47.2 11.1 4 16.1 4.1
ESTADO CIVIL Soltero 50.0 24.7
Casado 19.4 37.0 Unión libre 25.0 35.6 Separado 5.6 2.7
AFILIACIÓN Si 100 91.8
No 100 8.2
ESCOLARIDAD No estudió 0.0 1.4
Primaria 0.0 27.4 Secundara 0.0 64.4
Técnico 5.6 6.8 Universitario 94.4 0.0
FUMA Si 19.4 32.9
No 80.6 67.1
CIGARRILLOS/DÍA 0 - 2 57.1 66.7 3 - 5 42.9 16.7 6 - 8 0.0 16.6
TIEMPO/FUMADOR 0 - 2 42.8 54.2 3 - 5 57.1 33.3 6 - 8 0.0 12.5
REFERENCIA MOTOTAXISTAS
(%) (%)
54
Nunca 100 78.1
Poco 0.0 21.9
Cambio en señales
Nunca 100 94.5
Poco 0.0 5.4
PARAMETROS
OFTALMOLÓGICOS
Ardor de los ojos
Nunca 100 71.2
Poco 0.0 28.8
Lagrimeo
Nunca 100 90.4
Poco 0.0 9.6
Irritación visual
Nunca 100 82.2
Poco 0.0 17.8
Dificultad para leer
Nunca 100 91.8
Poco 0.0 8.2
Visión cerca
Nunca 100 93.2
Poco 0.0 6.8
Visión lejana
Nunca 100 94.6
Poco 0.0 5.4
Carácter: Nunca, Poco, Moderado, Mucho (Los caracteres que no se exponen en la tabla corresponden a cero).
8.2. RESULTADO DE LOS EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA Y
EVALUACIÓN DE LA PRESENCIA DE MN.
El promedio de MN en eritrocitos de sangre periférica de mototaxistas de
Cartagena, fue de 0.02 ± 0.004 por 1000 células, mientras que para el grupo
control fue de 0.002 ± 0.002 por 1000 células, con diferencias estadísticamente
significativas entre estos grupos (P<0.05). No hubo correlación estadística entre
las variables del estudio y la presencia de MN en los grupos de estudio. Los
parámetros hematológicos de todos los participantes de este estudio son
presentados en la Tabla 5.
55
Tabla 5. Parámetros hematológicos en controles y expuestos
Referencia (n = 36) Mototaxistas (n = 73)
Media ± EE Media ± EE
Micronúcleos en SR (%)
Micronúcleos en SB (%)
Plaquetas (%)
0.0019 ± 0.0019
0.0
7.19 ± 0.15
0.0166 ± 0.0039*
0.14 ± 0.11
6.64 ± 0.13*
Policromáticos (%) 0.08 ± 0.00 0.09 ± 0.00
Microcitos (%) 0.06 ± 0.00 0.04 ± 0.00*
Linfocitos (%) 42.90 ± 1.3 50.00 ± 0.6*
Neutrófilos (%) 50.03 ± 0.95 43.63 ± 0.67*
Eosinófilos (%) 3.70 ± 0.35 7.07 ± 0.25*
Monocitos (%) 5.23 ± 0.21 6.23 ± 0.18*
Basófilos (%) 3.11 ± 0.14
2.00 ± 0.11*
* Diferencia estadísticamente significativa.
56
Para el análisis comparativo de recuento celular con respecto al grupo control el
número promedio de micronúcleos detectados por cada 1000 células de SR de
sangre periférica evaluada en una muestra de referencia y en mototaxistas de la
ciudad de Cartagena de Indias, es presentada en la Figura 4. Existe una diferencia
estadísticamente significativa entre las medias de los dos grupos evaluados
(P<0.05), siendo mayor el número de micronúcleos en el grupo expuesto.
Figura 4. Micronúcleos en células de la serie roja (SR) en una muestra de
referencia y una de mototaxistas de la ciudad de Cartagena. La media ± el error
estándar para cada grupo aparece en corchetes. *. Diferencia estadísticamente
significativa al comparar las medias de los grupos (P<0.05)
Los resultados de los conteos para linfocitos, neutrófilos, eosinófilos, monocitos y
basófilos de la SB en los extendidos de sangre periférica para los dos grupos en
estudio aparecen en la Figura 5.
0.00
0.02
0.04
0.06
Mic
ron
úc
leo
s e
n S
R (
‰)
Referencia Expuesto
[0.0019 ± 0.0019]
[0.0166 ± 0.0039]*
Grupo
57
Figura 5. Polimorfonucleares de la SB en los extendidos de sangre periférica en
los grupos de referencia y de mototaxistas de la ciudad de Cartagena, A (%)
Linfocitos; B (%) Neutrófilos; C (%) Eosinófilos; D (%) Monocitos; E (%) Basófilos.
La media ± el error estándar para cada grupo aparece en corchetes. *. Diferencia
estadísticamente significativa al comparar las medias de los grupos (P<0.05).
Los resultados de los conteos para plaquetas, policromáticos, y microcitos de la
SR en los extendidos de sangre periférica para los dos grupos en estudio
aparecen en la Figura 6.
0
20
40
60
Lin
foc
ito
s e
n S
B (
%)
Referencia Expuesto
[ 42.9 ± 1.3 ]
[ 50.0 ± 0.6 ]
Grupo
*
0
2
4
6
8
10
Eo
sin
ófi
los
en
SB
(%
)
Referencia Expuesto
[7.07 ± 0.25]
[3.70 ± 0.35]
Grupo
*
0
2
4
6
8
10
Mo
no
cit
os
en
SB
(%
)
Referencia Expuesto
[6.23 ± 0.18]
[5.23 ± 0.21]
Grupo
*
A B
C D
E
0
20
40
60
Ne
utr
ófi
los
en
SB
(%
)
Referencia Expuesto
[50.03 ± 0.95]
[43.63 ± 0.67]
Grupo
*
0
1
2
3
4
5
Ba
só
filo
s e
n S
B (
%)
Referencia Expuesto
[2.00 ± 0.11]
[3.11 ± 0.14]
Grupo
*
58
Figura 6. Células de la SR en los extendidos de sangre periférica en los grupos de
referencia y de mototaxistas de la ciudad de Cartagena, A (%) Plaquetas; B (%)
Policromáticos; C (%) Microcitos; La media ± el error estándar para cada grupo
aparece en corchetes. *. Diferencia estadísticamente significativa al comparar las
medias de los grupos (P<0.05).
8.3. ASOCIACIONES ENTRE LA FRECUENCIA DE MICRONÚCLEOS Y
FACTORES SOCIODEMOGRÁFICOS Y LABORALES DE LOS
MOTOTAXISTAS EN CARTAGENA DE INDIAS.
Según los resultados obtenidos no se observó correlación entre la frecuencia de
MN y las variables tratadas en el estudio, es decir, no existe correlación con
significancia estadística.
0.00
0.02
0.04
0.06
0.08
0.10
Mic
roc
ito
s e
n S
R (
%)
Referencia Expuesto
[0.06 ± 0.00]
[0.04 ± 0.00]
Grupo
*
0
2
4
6
8
10
Pla
qu
eta
s e
n S
R (
%)
Referencia Expuesto
[7.19 ± 0.15][6.64 ± 0.13]
Grupo
*
B%)
A
0.00
0.05
0.10
0.15
Po
lic
rom
áti
co
s e
n S
R (
%)
Referencia Expuesto
[0.08 ± 0.00]
[0.09 ± 0.00]
Grupo
C%)
59
Respecto a los parámetros hematológicos, en cuanto a la serie blanca la
correlación entre los valores del hematocrito, hemoglobina y micronúcleos en
células de la serie blanca no fue significativa (R = -0.1341 P=0.2582); (R= -0.1341
P =0.2582) respectivamente.
Para los parámetros hematológicos, en cuanto a la serie roja la correlación entre
los valores del hematocrito, hemoglobina y micronúcleos en eritrocitos y
policromáticos no fue significativa (R = 0.0406 P=0.7333); (R =0.0394 P =0.7405)
respectivamente. Los resultados de correlación entre la presencia de micronúcleos
y algunas de las variables en estudio aparecen en la Tabla 6.
60
Tabla 6. Asociaciones entre la frecuencia de micronúcleos y factores sociodemográficos y laborales de los
mototaxistas de Cartagena de Indias.
EDAD PESO ESTRATO AÑOSLAB MNERIT‰ MNLEUC‰ Hto % Hb mg/dL FUMA AÑO /FUM EDAD 1 *0.0000 *0.0000 *0.0000 *0.6869 *0.0948 *0.0000 *0.0000 *0.0000 *0.0000 PESO **0.9378 1 *0.0000 *0.0000 *0.6407 *0.2598 *0.0000 *0.0000 *0.0000 *0.0000 ESTRATO **0.8202 **0.8697 1 *0.0000 *0.9184 *0.2862 *0.0000 *0.0000 *0.0000 *0.0000 TIEMPO/ACTIVIDAD
**0.9322 **0.9475 **0.9310 1 *0.9016 *0.9016 *0.0000 *0.0000 *0.0000 *0.0000
MNERIT‰ **0.0480 **0.0555 **-0.0122 **-0.0147 1 *0.4832 *0.7333 *0.7405 *0.6940 *0.9171 MNLEUC‰ **-0.1970 **-0.1336 **-0.1265 **-0.1236 **-0.0834 1 *0.2582 *0.2582 *0.6235 *0.4369 Hto % **0.9284 **0.9010 **0.6868 **0.8411 **0.0406 **-0.1341 1 *0.0000 *0.0000 *0.0000 Hb mg/dL **0.9274 **0.9004 **0.6860 **0.8410 **0.0394 **-0.1341 **0.9997 1 *0.0000 *0.0000 FUMA **0.8006 **0.7491 **0.5275 **0.6987 **0.0468 **-0.0584 **0.8160 **0.8193 1 *0.0000 TIEMPO /FUMAR
**0.6678 **0.8263 **0.8861 **0.8422 **-0.0124 **-0.0924 **0.5765 **0.5748 **0.3853 1
P= 0.05
* Valor de R aparece a la izquierda de la diagonal ** Valor de P aparece a la derecha de la diagonal
61
9. DISCUSIÓN
El mototaxismo, es considerado una práctica de transporte público que empezó
hace más de 10 años y que se ha ido extendiendo a 26 de los 32 departamentos
de Colombia, convirtiéndose en un problema social de gran impacto en la salud
pública. Aproximadamente 400.000 colombianos laboran en esta actividad
informal. A pesar de la intervención del Congreso de la República, el Programa de
las Naciones Unidas para el Desarrollo (PNUD), las universidades y el propio
Gobierno, este ejercicio laboral se realiza diariamente debido a la necesidad en los
municipios y muchas ciudades intermedias especialmente en barrios marginales y
zonas rurales, ya que los vehículos no pueden transitar por las condiciones de las
vías.
En el ejercicio del mototaxismo se generan problemas en la salud, de los cuales
los más preocupante están relacionados con enfermedades que se manifiestan a
mediano y largo plazo: tales como patologías de la columna, enfermedades
respiratorias, del aparato reproductor masculino (Tielsch et al., 2009),
oftalmológicas y a largo plazo lesiones precancerosas y cáncer de la piel (Ramos
et al. 2004; Sánchez-Laorden et al., 2009), por la exposición a rayos (Crebelli et
al., 1995; Viras et al., 1991; Isidoro et al., 2003). En Cartagena, en promedio los
habitantes realizan 480.000 viajes diarios, de los cuales en un 10% se utiliza la
moto, situación que es similar en otras ciudades y municipios de Colombia tales
como como Cúcuta, Valledupar, Quibdó, Montería, Riohacha, Barranquilla,
Buenaventura, Popayán, Puerto Inírida (Guainía), Tierralta (Córdoba) o Riosucio
(Caldas), donde el mototaxismo es también una fuente básica de empleo.
Esta nueva modalidad de trabajo y el uso del parque automotor de motocicletas,
aumentan el impacto negativo generado por la excesiva contaminación del aire y
62
del ambiente. Es así, como se plantea que en los ambientes urbanos se
encuentran presentes una gran variedad de compuestos contaminantes emitidos
por fuentes estacionarias y móviles, entre los que pueden destacarse, las
partículas atmosféricas, consideradas como unos de los contaminantes
atmosféricos más importantes, debido a que contienen compuestos con conocida
actividad genotóxica, mutagénica y/o carcinogénica, como los hidrocarburos
aromáticos policíclicos (HAPs) y sus derivados, metales pesados, óxidos de azufre
y de nitrógeno (Barale et al., 1991; Pope et al., 2002; Guimaraes et al., 2000). La
mayoría de estos compuestos, una vez emitidos al aire, condensan y son
adsorbidos sobre las superficies de partículas de hollín y cenizas, de este modo se
trasladan e ingresan a los pulmones de animales y seres humanos. Estudios
recientes al respecto, han demostrado que los HAPs pueden interactuar con las
cadenas de ADN, provocando un incremento en los errores durante la mitosis y
hasta muerte celular (Calderón-Segura et al., 2004).
Estudios epidemiológicos han demostrado que el incremento en la exposición a
partículas atmosféricas puede provocar un aumento en la morbilidad y mortalidad
por manifestaciones de compromiso cardiaco y respiratorio principalmente (Stölzel
et al., 2007). La mayor parte de los efectos adversos del material particulado (MP)
se producen por la presencia de partículas cuyo diámetro es inferior a 10 µm
(PM10) ya que, por su tamaño, pueden penetrar más profundamente en el tracto
respiratorio e incluso llegar a depositarse en los alvéolos pulmonares. Más aún,
estudios recientes demuestran que existen efectos adversos producidos por
acción de MP a niveles que es frecuente encontrar en ambientes urbanos (Pope et
al., 2002).
Existen numerosos métodos que han sido establecidos como herramientas para
la monitorización de poblaciones ocupacional o medio ambientalmente expuestas
a un agente mutagénico conocido o sospechado (Anwar, 1997), algunos emplean
biomarcadores de efecto, como la aberraciones cromosómicas en cultivo de
63
linfocitos, técnicas para medición del daño del ADN y test de micronúcleos (MN).
(Anwar, 1997; Hallberg et al., 1997; Anwar and Kamal, 1988. Au et al., 2010).
En el presente estudio fueron comparadas la presencia de micronúcleos y varios
parámetros sociodemográficos, hematológicos, dérmicos, oftalmológicos en los
mototaxistas que trabajan en la ciudad, que podrían estar expuestos a
contaminantes del aire urbano. Aunque diferentes estudios han demostrado que la
exposición directa a estos contaminantes ambientales podrían producir un
aumento en el numero de micronúcleos en sangre periférica de individuos
expuestos, en este trabajo, los resultados hallados están fuera del rango normal
de la población general tomando como referencia los trabajos realizados por da
Silva et al., (1997) y Fenech y Morley (1985), donde la prevalencia de MN en
individuos sanos no expuestos a agentes genotóxicos es de 0.8%. Aunque podría
limitarse este valor debido a que este es el primer estudio de esta naturaleza. Así
mismo este dato es relevante puesto que estaría indicando nuevas acciones que
podrían ser tomadas en cuenta para reducir el impacto negativo y fijar límites de
exposición ambiental en estudios de biomonitoreo en humanos. Sin embargo, este
resultado positivo es similar a los datos reportados por estudios sobre policías de
tránsito que trabajan en la ciudad de Lanzhou, que proporcionan realmente uno de
los primeros informes de un aumento significativo en la frecuencia de MN en este
contexto, apoyados en datos de Zhao et al., (1998). No obstante hay otros
estudios en esta misma población con la presencia negativa de MN expuestos a
concentraciones de benceno (Bolognesi et al., 1997; Merlo et al., 1997; Carere et
al., 2002; Leopardi et al., 2003).
Con relación a las variables sexo, edad, estrato social, tiempo de exposición y el
hábito de fumar, no hubo correlación entre estas variables y la presencia de los
MN. Igualmente en la correlación de los parámetros hematológicos, dérmicos y
oftalmológicos. Esto podría ser debido a que estos daños son producidos a largo
plazo.
64
Según la información obtenida de los mototaxistas en las encuestas, la gran
mayoría de los mototaxistas de la ciudad de Cartagena, presentan un buen estado
de salud, lo que se refleja en los parámetros hematológicos, esto concuerda con
reportes que indican que la ingesta de proteínas y vitaminas podrían ayudar a
prevenir el aumento de alteraciones citogenéticas (Singh et al., 1988; Carere et
al., 2002). Existen datos importantes acerca de folatos y vitamina B12, los cuales
son importantes en el metabolismo del ADN, las deficiencias de estos
micronutrientes ha estado relacionado con incrementos en la formación de
micronúcleos en humanos (Fenech 1993; Fenech et al., 1999; Fenech, 2001;
Fenech y Crott 2002). En el presente estudio la presencia de micronúcleos en la
población expuesta, al no presentar un incremento significativo, podría
relacionarse con el hecho de que no hay deficiencia de las anteriormente
mencionadas, (folatos y vitamina B12) comparado con la hemoglobina normal de
los expuestos.
Por otra parte, reportes en la literatura han explicado que la exposición a la
contaminación del aire de combustión, relacionado con el tráfico en el entorno
urbano es común y se ha asociado con efectos adversos para la salud humana,
manifestándose en morbilidad y mortalidad con alteraciones de tipo respiratorio,
cardiovascular y cáncer (Brunekreef y Holgate, 2002; Schwartz, 2004; Sram et al.,
2005; Raaschou -Nielsen y Reynolds, 2006; Vineis et al, 2007). Por otro lado,
estudios epidemiológicos sobre otros compuestos como el benceno proporcionan
una fuerte evidencia de que a altos niveles de exposición están asociados con un
mayor riesgo de leucemia en los seres humanos (Agency for Toxic Substances
and Disease Regustry (ATSDR); Hayes et al., 2001).
En contraste otros estudios han mostrado que el aumento de la frecuencia de MN
en patrulleros de la policía no tenían alteración de parámetros hematológicos,
este efecto podría explicarse en parte por la compleja actividad de muchos
contaminantes como por ejemplo los metabolitos del benceno, cuya toxicidad está
65
relacionado con el metabolismo de xenobióticos en la médula ósea (Bruckner y
Warren, 2001; Snyder, 2002).
Caso similar ocurre para los parámetros dérmicos y oftalmológicos debido a que
los individuos expuestos en la ciudad de Cartagena, por las altas temperaturas de
la ciudad, las comunes revisiones por parte del DATT (Departamento
administrativo de Tránsito y transporte) utilizan ropa informal, pero de manera
permanente el casco de seguridad, gafas y guantes en los antebrazos de tela.
Estas discrepancias encontradas podrían ser atribuidas a variaciones en el perfil
de exposición de las diferentes poblaciones de estudio, por ejemplo, con respecto
niveles locales de contaminación, áreas específicas del trabajo, la duración del
turno de trabajo (Bolognesi et al., 1997).
En esta investigación no se estudió la identificación de los contaminantes
específicos responsables de la inducción de micronúcleos. De hecho, el ambiente
de las zonas urbanas recibe la contribución de las fuentes de contaminación
diferentes, en combinación con los complejos procesos fotoquímicos, lo que hace
casi imposible aislar la participación de agentes tóxicos in en la patogénesis del
daño al ADN (Mariani et al., 2009).
66
CONCLUSIONES
1. Existe diferencia estadísticamente significativa entre las medias de las
frecuencias de micronúcleos en eritrocitos de sangre periférica de
mototaxistas de Cartagena en comparación con personas dedicadas a otras
actividades.
2. La frecuencia de micronúcleos no presentó correlación significativa con
factores sociodemográficos y laborales de los mototaxistas que laboran en
la ciudad de Cartagena de indias.
3. La presencia de micronúcleos puede ser considerada como un biomarcador
de efectos clastogénicos y aneugénicos del material genético.
67
RECOMENDACIONES
Realizar estudios epidemiológicos en el gremio de mototaxistas de la ciudad de
Cartagena de Indias, correlacionando esta información con parámetros de
contaminación del aire, flujo de tráfico y tiempo de exposición.
68
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Quina M, Bordado J, Quinta-Ferreira R. Chemical stabilization of air pollution
control residues from municipal solid waste incineration. Journal of hazardous
materials. 2010; 179(1-3).
Deguen S, Zmirou-Navier D. Social inequalities resulting from health risks related
to ambient air quality-A European review. European journal and public Health.
2010; 20(1):27-35.
Bolognesi C, Merlo F, Rabboni R, Valerio F, Abbondandolo, A. Cytogenetic
biomonitoring in traffic police workers: micronucleus test in peripheral blood
lymphocytes. Environmental and molecular mutagenesis. 1997; 30(4):396-402.
Consultoría para los Derechos Humanos y el Desplazamiento/CODHES. Informe
sobre desplazamiento, conflicto armado y derechos humanos en Colombia 2010.
Boletín informativo N 77, Bogotá, 15 de febrero de 2011. Consultado marzo 8 de
2011. Disponible en: http://www.nrc.org.co/docs/codhesinforman75abril2009.pdf.
Price H, Arthur R, Sexton K, Gregory C, Hoogendoorn B, Matthews I, Jones T,
BéruBé K. Airborne particles in Swansea, UK: their collection and characterization.
Journal Toxicology Environmental Health A. 2010; 73(5):355-67.
Kishida M, Imamura K, Takenaka N, Maeda Y, Viet PH, Bandow H. Concentrations
of atmospheric polycyclic aromatic hydrocarbons in particulate matter and the
gaseous phase at roadside sites in Hanoi, Vietnam. Bulletin of environmental
contamination and toxicology. 2008; 81(2):174-9.
69
Barale R, Giromini L, Ghelardini G, Scapoli C, Loprieno N, Pala M, Valerio F y
Barrai I. Correlations between 15 polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) and the
mutagenicity of the total PAH fraction air particles in La Spezia (Italy). Mutation
Research. 1991; 249:227-241.
Guimaraes ET, Domingos M, Alves ES, Caldini JR N, Lobo DJA, Lichtenfels AJFC
y Saldiva PHN . Detection of the genotoxicity of air polutants in and around the city
of Sao Paulo (Brazil) with the Tradescantia-micronucleus (Trad-MCN) assay.
Environmental and Experimental Botany. 2000; 44:1-8.
Pope CA, Burnet RT, Thun MJ, Calle EE, Kewski D, Ito K, Thurston GD . Lung
cancer, cardiopulmonary mortality, and long-term exposure to fine particulate air
pollution. Journal of the American Medical Association. 2002; 287:1132–1141.
Zhang KM, Wen ZG. Review and challenges of policies of environmental protection
and sustainable development in China. Journal of environmental management.
2008; 88(4):1249-61
Wan JM, Lin M, Chan CY, Zhang ZS, Engling G, Wang XM, Chan IN, Li SY.
Change of air quality and its impact on atmospheric visibility in central-western
Pearl River Delta. Environ Monit Assess. 2011; 172(1-4):339-51.
Zhang J, Mauzerall DL, Zhu T, Liang S, Ezzati M, Remais JV. Environmental
health in China: progress towards clean air and safe water. Lancet. 2010(a); 375
(9720): 1110-9.
Lazar AN, Butterfield D, Futter MN, Rankinen K, Thouvenot-Korppoo M, Jarritt N,
Lawrence DS, Wade AJ, Whitehead PG. An assessment of the fine sediment
dynamics in an upland river system: INCA-Sed modifications and implications
forfisheries. Science total Environmental. 2010; 408(12):2555-66.
70
Miller C, Sanchez E, Mucio S, Mendoza J, León M. Los contaminantes
ambientales bifenilos policlorinados (PCB) y sus efectos sobre el sistema nervioso
central. Salud Mental. 2009; 32: 337.
Zhang W, Wang W, Chen J, Liu H, Dai T, Yang XY, Zhang F, Lin J, Wang Z.
Pollution situation and possible markers of different sources in the Ordos Region,
Inner Mongolia, China. The science of the total environment. 2010(b); 408(3):624-
35.
Hunt AJ, Sin EH, Marriott R, Clark JH. Generation, capture, and utilization of
industrial carbon dioxide. ChemSusChem. 2010; 3(3):306-22.
Feo, O., Elisa, S., Beingolia, L., Aparicio, M., Vilagra, M., Prieto, M., García, J.,
Jiménez, P., Bencourt, O., Aguilar, M., Bekcman, J., Gastañaga, M., Llanos, A.,
Osorio, A., Silveti, R. Cambio Climático y salud en la región andina. Rev Peru Med
Exp Salud Pública. 2009; 26(1): 84!
Moreno M. La gestión ambiental urbana. El caso de la contaminación atmoférica
en Bogotá. Revista Escuela de Administración de Negocios [en línea] 2008, [fecha
de consulta: 3 de noviembre de 2010] Disponible en:
http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/ArtPdfRed.jsp?iCve=20611457003.
Wei, Y., Han, I., Hu, M., Shao, M., Zhang, J., Tang, Z. Personal exposure to
particulate PAHs and anthraquinone and oxidative DNA damages in humans.
Chemosphere. 2010; 81(10):1280-1285.
D Vilarejo. Los contaminantes atmosfércos deivados de la utilización de la energía
y su control. Contaminantes atmosférios y su control. 2009; 2: 65-99.
71
Torres CH, Varona ME, Lancheros A, Patiño RI, Groot H. [DNA damage
assessment and biological monitoring of occupational exposure to organic
solvents, 2006]. Biomedica. 2008; 28(1):126-38.
Au WW, Giri AK, Ruchirawat M. Challenge assay: A functional biomarker for
exposure-induced DNA repair deficiency and for risk of cancer. International
journal of hygiene and environmental health. 2010; 213(1):32-9.
Rubes, J., Rybar, R., Prinosilova, P., Veznik, Z., Chvatalova, I., Solansky, I.,Sram,
RJ. Genetic polymorphisms influence the susceptibility of men to sperm DNA
damage associated with exposure to air pollution. Mutation Research/Fun
damental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis. 2010; 683 (1-2): 9-15
Pavanello, S., Pesatori, A., Dioni, L., Hoxja, M., Bollati, B., Siwinska, E.,
Mielzyńska, D., Bolognesi, C., Bertai., P., Baccareli, A. Shorter telomere length in
peripheral blood lymphocytes of workers exposed to polycyclic aromatic
hydrocarbons. Carcinogenesis. 2010; 31(2): 216-221
Sánchez, A. 2011. La economía del mototaxismo: el caso de Sincelejo
Documentos de trabajo sobre economía nacional. 140 (1-54). Disponible en:
http://www.banrep.gov.co/documentos/publicaciones/regional/documentos/DTSER
-140.pdf. Consultado Marzo 2011.
Redacción local. ―120 mototaxistas se volvieron ―caminantes‖ del medio ambiente‖.
Consultado junio 1 de 2011. Disponible en: http://www.elheraldo.co/local/120-
mototaxistas-se-volvieron-caminantes-del-medio-ambiente-23703.
Adolfo Meisel Roca. ―La revolución de las sabanas‖. ELESPECTADOR.COM.
Consultado julio 8 de 2011. Disponible en:
http://www.banrep.gov.co/documentos/publicaciones/regional/documentos/DTSER-140.pdf.%20%20Consultado
72
http://www.elespectador.com/impreso/opinion/columna-283043-revolucion-de-
sabanas.
Fondo de prevención vial
http://www.fonprevial.org.co/index.php?option=com_jb2&view=category&Itemid=64
Redacción nacional. ―Se Pierde la Batalla Contra el Mototaxismo‖, consultado
Noviembre 2 de noviembre de 2010. Disponible en:
http://www.eltiempo.com/archivo/documento/MAM-2897774. Sección Información
General, abril 14 de 2008,
Gudilfredo Avendaño M. ―En Montería mototaxis serán pintados de colores
específicos‖. Consultado Noviembre 3 de 2010. Disponible en:
http://www.eltiempo.com/archivo/documento/CMS-4806960. Sección Nación,
febrero 10 de 2009.
Miguel Montes Camacho.‖ Motos, preferidas por cartageneros que menos ganan‖.
Consultado junio 6 de 2011. Disponible en:
http://www.eluniversal.com.co/cartagena/local/motos-preferidas-por-cartageneros-
que-menos-ganan-27834 Sección información local.
Chien S, Huang Y. Sizes and polycyclic aromatic hydrocarbon composition
distributions of nano, ultrafine, fine, and coarse particulates emitted from a four-
stroke motorcycle. Journal Environmental Science and Health. Part A,
Toxic/hazardous substances environmental y engineering. 2010; 45(13):1768-74.
Mills N, Miller M, Lucking A, Beveridge J, Flint L, Boere A, et al. Combustion-
derived nanoparticulate induces the adverse vascular effects of diesel exhaust
inhalation. European Heart Journal. 2011.
73
Morales R. Contaminación atmosférica urbana. Episodios críticos de
contaminación ambiental en la ciudad de Santiago. Editorial Universitaria SA,
Santiago de Chile, 2006.
Reed MD, Barrett EG, Campen MJ, Divine KK, Gigliotti AP, McDonald JD,
Seagrave JC, Mauderly JL, Seilkop SK, Swenberg JA. Health effects of subchronic
inhalation exposure to gasoline engine exhaust. Inhalation Toxicology. 2008;
20(13):1125-43.
Kampa, M. and Castañas, E. Human health effects of air pollution. Environmental
pollution. 2008; 151 (2). 362-367.
Ballester, F. Contaminación atmosférica, cambio climático y salud. Revista
Española de Salud Publica. 2005; 79(2): 159-175.
Oyarzun M. Contaminación atmosférica y sus efectos sobre la salud. Revista
Chilena de enfermedades respiratorias. 2010; 26: 16- 25.
Chung M, Beene M, Ashkan S, Krauter C, Hasson AG. Evaluation of non-methane
volatile organic compound (NMVOC) emissions from dairies. Atmospheric
Environmental. 2010; 44(6):786-794.
Zhang R, Wang W, Shi X, Yu X, Li M, Xiao L, Cui Y. Health risk of semi-volatile
organic pollutants in Wujin river inflow into Taihu Lake. Ecotoxicology. 2011;
20(5):1083-9.
Zhang HR, Eddings EG, Sarofim AF. 2008; Pollutant emissions from gasoline
combustion. 1. Dependence on fuel structural functionalities. Environmental
science & technology. 2008; 42(15):5615-21.
74
Dichut R., Canuel E., Gustafson K., Walker S., Edgecombe G., Gaylor M. And
Macdonald E. Automotive sources of carcinogenic PAH with particulate matter in
the Chesapeake Bay Region. Environmental Science and Technology. 2000; 34:
4535-4640.
Sanderson E. and Farant J. Use of benzo(a)pyrene relative abundance ratios in
assess exposure polycyclic aromatic hydrocarbons in ambient atmosphere in the
vicinity of Soderberg aluminum smelter. Journal of Air and Waste Management
Association. 2000; 50: 2085-2092.
Wang K, Du L, Ge M. Environmental chamber study of the photochemical reaction
of ethyl methyl sulfide and NO(x). Journal of Environ Sciences (China). 2009;
21(2): 137-41.
Calderón-Segura ME, Gómez-Arroyo S, Villalobos-PIetrini R, Butterworth FM y
Amadormuñoz O. The effects of seasonal weather on the genotoxicity and
organochemical content of extracts of airborne particulates in Mexico City.
Mutation Research. 2004; 558:7-17.
Zhong BZ, Gu ZW, Stewart J, Ong T. Micronucleus formation induced by three
polycyclic aromatic hydrocarbons in rat bone marrow and spleen erythrocytes
following intratracheal instillation. Mutation Research. 199; 326(2):147-53.
EPA. Agencia de Protección Ambiental de Estados Unidos
http://www.epa.gov/espanol/historia.htm
Albers PH. Petroleum and individual polycyclic aromatic hydrocarbons. In Hoffman
DJ, Rattner BA, Burton GA, Cairns J. Citado por Reis-Henriques, MA; Ferreira, M;
Coimbra, AM; D'Silva, C; Costa, J; Shailaja, MS. Phenanthrene and nitrite effects
on juvenile sea bass, Dicentrarchus labrax, usinghepatic biotransformation
75
enzymes, biliary fluorescence, and micronuclei as biomarkers. 2009. Ciencias
Marinas. 2003; 35. 29-40
Hick A, Paczkowski M, Gadano, A & Carballo, M . Biomarcadores de
Genotoxicidad en Individuos Expuestos al Arsénico. Latin American Journal of
Pharmacy. 2007; 26 (5): 691-9
Crebelli R, Fuselli S, Baldassarri LT, ZiemackI G, Carere A, y Benigni R.
Genotoxicity of urban air particulate matter: correlations between mutagenicity
data, airborne micropollutants and meteorological parameters. International
Journal of Environmental Health. 1995; 5:19–34.
Viras L.G, Siskos P.A, Samara C, Kouimtzis T, Athanasiou K y Vavatzandis
A.1991. Polycyclic aromatic hydrocarbons and mutagens in ambient air particles
sampled in Thessaloniki, Greece. Atmospheric Environment. 1995; 10: 999–1007.
Isidoro M, Ferrara M, Lavorgna M, Nardelli A, Y Parrella A. In situ monitoring of
urban air in Southern Italy with the Tradescantia micronucleus bioassay and
semipermeable membrane devices (SPMDs). Chemosphere. 2003; 52:121–126
Borrego C, Monteiro A, Ferreira J, Moraes M.R , Carvalho A, Ribeiro I. Modelling
the photochemical pollution over the metropolitan area of Porto Alegre, Brazil.
Atmospheric Environment. 2010; 44 (3) 370-380.
Flores C, Solis M, Fortt A y Valdivia G. Sintomatología respiratoria y enfermedad
pulmonar obstructiva crónica y su asociación a contaminación intradomiciliaria en
el Área Metropolitana de Santiago: Estudio Platino. Revista chilena enfermedades
respiratorias. 2010; 26 (2). 72-80
76
Almagro P, López F, Cabrera F, Montero L, Morchón D, Díez J, et al, and Grupo
EPOC de la Sociedad Española de Medicina Interna. Study of the comorbidities in
hospitalized patients due to decompensated chronic obstructive pulmonary disease
attended in the Internal Medicine Services. ECCO Study. Revista clínica española.
2010; 210(3):101-108
Zanobetti A, Schwartz J, Dockery DW. Airborne particles are a risk factor for
hospital admissions for heart and lung disease. Environmental Health Perspectives
2000; 108: 1071-7.
Peters A, Dockery D, Muller J. Mittleman M. Increase particulate air pollution and
the triggering of myocardial infarction. Circulation. 2001; 103: 2810-15.
O'Toole TE, Conklin DJ, Bhatnagar A. Environmental risk factors for heart disease.
Rev Environ Health. 2008; 23 (3):167-202.
Iniesta N, Rios J, Fernández M, Barbado F, Hernández J. Cambio climático:
¿nuevas enfermedades para un nuevo clima? Revista Clinica Española. 2009;
209(5): 234- 240.
La contaminación atmosférica
(http://www.bioygeo.info/pdf/04_Contaminacion_Atmosferica.pdf).
De Diego A. Óxido nítrico en el asma ¿Para qué sirve. Archivos de
Bronconeumología. 2010; 46: 157-9.
Flores J, Peña P, Balcázar M, Madigal D, Ramos L, López A, Morales J,
Estimacón de riesgo a la exposición de partículas supendidas en el Valle de
Toluca, CIENCIA ergo sum. 2010; 17: 72-80.
77
Zalacaín M, Sierrasesúmaga L, Patiño A. El ensayo de micronúcleos como
medida de inestabilidad genética inducida por agentes genotóxicos. 2005; 28. (2).
Fenech M. Cytokinesis-block micronucleus cytome assay envolves into a ―cytome‖
assay of chromosomal instability, mitotic dysfunction and cell death. Mutation
Research. 2006; 600: 58-66.
Fenech M. Cytokinesis-block micronucleus cytome assay. Nature protocols. 2007;
2. (5).
Venegas W, S Poblete, G Weigert, C Marquez, V martinez & R Marcos. Seminario
Internacional Contaminación Ambiental en Chile. Efectos Tóxicos y Genotóxicos
de Agentes Químicos y Físicos. Universidad de Concepción. 2002.
Samanta, S., Dey, P. Micronucleus and its applications. Diagnostic Cytopathology.
2010.
Palm A & Krause T. Micronucleated Erythrocytes in Fish from several Estonian
waterbodies. Proc. Estonian Acad. Sci. Biol. 1995; 44. (3/4). 69 – 77.
Al-Sabti k & Metcalfe C. Fish micronuclei for assessing genotoxicity in water.
Mutation research. 1995; 343(2-3):121-35.
Gavilan J. Evaluación y Monitoreo de la Contaminación Acuática a través del uso
de Biomarcadores. Biomarcadores. Universidad de Concepción. Centro EULA-
CHILE. Escuela de Verano en Medo Ambiente. 2003; 13.
Adams M. Biological indicators of aquatic ecosystem stress. Environmental
Sciences Division Oak Ridge National Laboratory. American Fisheries Society
Bethesda, Maryland. 2002; 625.
78
Martínez-Valenzuela C, Gómez-Arroyo, S. Riesgo genotóxico por exposición a
plaguicidas en trabajadores agrícolas. Revista internacional de Contaminación
ambiental [online]. 2007; 23 (4): 185-200.
Countryman PI, Heddle JA. The production of micronuclei from chromosome
aberrations in irradiated cultures of human lymphocytes. Mutation research. 1976;
41: 321-332.
Arencibia D, Rosario L, Actualización sobre el ensayo cometa y de micronúcleos.
Revista de Toxiclogía en línea (RETEL). La Habana, Cuba. 2009;
Albertini RJ, Anderson D, Douglas GR, Hagmar L, Hemminki K, Merlo F, Natarajan
AT, Norppa H, Shuker DE, Tice R, Waters MD, Aitio A, IPCS guidelines for the
monitoring of genotoxic effects of carcinogens in humans. International Programme
on Chemical Safety. 2000; 463(2):111-72.
Kirsch-Volders M, Plas G, Elhajouji A, Lukamowicz M, Gonzalez L, Vande Loock
K, Decordier I. The in vitro MN assay in 2011: origin and fate, biological
significance, protocols, high throughput methodologies and toxicological relevance.
Archives of Toxicology. 2011; 85(8):873-99.
Kirsch-Volders M, Vanhauwaert A, De Boeck M, Decordier I. Importance of
detecting numerical versus structural chromosome aberrations. Mutation
Research. 2002; 504:137–148.
Mateuca R, Lombaert N, Aka PV, Decordier I, Kirsch-Volders M. Chromosomal
changes: induction, detection methods and applicability in human biomonitoring.
Biochimie. 2006; 88:1515– 1531.
79
Fenech M, Kirsch-Volders M, Natarajan AT, Surrales J, Croft J, Parry J, Norppa H.
Molecular mechanisms of micronucleus, nucleoplasmic bridge and nuclear bud
formation in human cells. Mutagenesis. 2011; 26:125–132
Norppa H, Luomahaara S, Heikanen H, Roth S, Sorsa M, Renzi L, Lindholm C.
Micronucleus assay in lymphocytes as a tool to biomonitor human exposure to
aneuploidogens and clastogens. Environ Health Perspect. 1993; 101 Suppl 3:139-
43.
Nepomuceno J, Ferrari I, Spaño M & Centeno A. Detection of Micronuclei in
Peripheral Erythrocytes of Cyprinus carpio Exposed to Metalic Mercury.
Environmental and Molecular Mutagenesis. 1997; 30:293-297.
Arencibia D, Vidal A, Rosario L, Suárez Y, Delgado L. Biomodelos para la
inducción de micronúcleos en células de la médulaósea por ciclofosfamida y
bleomicina. VacciMonitor. 2011; 20(1):28-33
Fenech M. The in vitro micronucleus technique. Mutation Research/Fundamental
and Molecular Mechanisms of Mutagenesis. 2000; 455: 81–95.
Fenech M, Chang WP, Kirsch-Volders M, Holland N, Bonassi S, Zeiger E. HUMN
project: detailed description of the scoring criteria for the cytokinesis-block
micronucleus assay using isolated human lymphocyte cultures. Mutatation
Research. 2003; 534: 65-75
Fenech M, Morley A. Measurement of micronuclei in lymphocytes. Mutation
research. 1985; 147: 29-36.
Norppa H, Falck GC. What do human micronuclei contain? Mutagenesis. 2003; 18:
221–233
80
Carrasco KR, Tilbury KL, Myers MS. An assessment of the piscine micronucleus
test as an in situ biological indicator of chemical contaminant effects. Canadian
journal of fhisheries and aquatic sciences. 1990; 47: 2123–2136
Pacheco M, Santos MA. Induction of EROD activity and genotoxic effects by
polycyclic aromatic hydrocarbons and resin acids on the juvenile eel (Anguilla
anguilla L.). Ecotoxicology and Environmental Toxicology Safety. 1997; 38: 252–
259
Pacheco M, Santos MA. Induction of liver EROD and erythrocytic nuclear
abnormalities by cyclophosphamide and PAHs in Anguilla anguilla L. Ecotoxicology
and Environmental Safety. 1998; 40: 71–76.
Koppe C, & Starling F. Micronuclei monitoring of fishes from Lake Paranoá, under
influence of sewage treatment plant discharges. Mutation research. 2001; 491:39-
44
Arcan-Hoy & C Metcalfe. Hepatic micronuclei in brown bulheads (ameiurus
nebulosus) as a biomarker for exposure to genotoxic chemicals. Journals of greath
lakers research. 2000; 26(4):408-415.
Alay F, Campos H, Gavilan J, Gonzalez F, Bisol P & Cabello J. Criterios para
evaluar apropiadamente las alteraciones del ambiente y establecer los
parámetros: desde el punto de vista de la genética. Cienc. Tec. 1995; 23-27.
Olgun E, Şengün A, Ulker M. Cytotoxicity of Mouthrinses on Epithelial Cells by
Micronucleus Test. European Journal of Dentistry. 2007; 44( 3): 220-226.
81
Bloching M, Reich W, Schubert J, Grummt T, Sandner A. Micronucleus rate of
buccal mucosal epithelial cells in relation to oral hygiene and dental factors.
Elsevier. 2008; 44(3): 220-226
Palacio I, Palacio J, Camargo M. Micronuclei test application to wild
tropicalichthyic species common in two lentic environments of the low zones
incolombiaColombia. Revista Actualidades Biológicas. 2009; 30 (91).
Fortin F, Anghel T, Brochu P, Lemieux N. Optimizing urothelial cell preparation for
the human urinary micronucleus assay. Toxicología In Vitro. 2010; 24(6):1821-7
Slovak,M.L, Kopecky,K.J, Wolman, SR, Henslee-Downey,JP, Appelbaum FR,
Forman SJ, & Blume KG. Cytogenetic correlation with disease status and
treatment outcome in advanced stage leukemia post bone marrow transplantation:
a Southwest Oncology Group study (SWOG-8612). Leukemia research. 1995;
19(6) 381-388.
Byrd JC, Mrozek K, Dodge RK, Carroll AJ, Edwards CG, Arthur DC, et al,
Pretreatment cytogenetic abnormalities are predictive of induction success,
cumulative incidence of relapse, and overall survival in adult patients with de novo
acute myeloid leukemia: results from Cancer and Leukemia Group B (CALGB
8461). Blood. 2002; 100: 4325-4336.
Calasanz, M. Revisión de técnicas de citogenética convencional y molecular y su
implicación en el diagnóstico y pronóstico del cáncer. ANALES Sis San Navarra.
2001; 24 (1): 17-29.
Zelent A, Guidez F, Melnick A, Waxman S, & Licht JD. Translocations of the
RARalpha gene in acute promyelocytic leukemia. Oncogene. 2001; 20, 7186-7203.
82
World Health Organization. Biological monitoring of chemical exposure in the
workplace. Geneva: World Health Organization; 1996.
Pariego J. Evaluación de la exposición a compuestos orgánicos mediante su
determinación directa en fluidos biológicos. Revista de toxicología. 2003; 20: 70-74
Silbergeld, E., Davis, D. Role of biomarkers in identifying and understanding
environmentally induced disease. Clin Chem 40: 1994; 1363-1367
Barrett,J., Vainio, H., Peakall, D., Goldstein, B. 12th Meeting of the Scientific
Group on Methodologies for the Safety Evaluation of Chemicals: Susceptibility to
Environmental Hazards . Biological Markers of Effect. Environmental health
perpectives. 1997; 105. 4.
Bolognesi C. Genotoxicity of pesticides: a review of human biomonitoring studies.
Mutation Research. 2003; 543:251–72.
El-Zein RA, Schabath MB, Etzel CJ, Lopez MS, Franklin JD, Spitz MR.
Cytokinesis-blocked micronucleus assay as a novel biomarker for lung cancer
cancer risk. Cancer Research. 2006; Jun 15; 66(12):6449-56.
Iarmarcovai G, Ceppi M, Botta A, Orsière T, Bonassi S. Micronuclei frequency in
peripheral blood lymphocytes of cancer patients: a meta-analysis. Mutation
Research. 2008; 659(3):274-83.
Olivero O. Relevance of experimental models for investigation of genotoxicity
induced by antiretroviral therapy during human pregnancy. 2008; 658(3):184-90.
Diler SB, Celik A. Cytogenetic Biomonitoring of Carpet Fabric Workers Using
Micronucleus Frequency, Nuclear Changes, and the Calculation of Risk
83
Assessment by Repair Index in Exfoliated Mucosa Cells. DNA and cell biology.
2011; 15.
Dertinger SD, Torous DK, Hayashi M, MacGregor JT. Flow cytometric scoring of
micronucleated erythrocytes: an efficient platform for assessing in vivo cytogenetic
damage. Mutagenesis. 2011; 26(1):139-45.
Fenech M, Kirsch-Volders M, Natarajan AT, Surralles J, Crott JW, Parry J, et al,.
Molecular mechanisms of micronucleus, nucleoplasmic bridge and nuclear bud
formation in mammalian and human cells. Mutagenesis. 2011; 26(1):125-32.
Pandey KB, Rizvi SI. Biomarkers of oxidative stress in red blood cells. Biomedical
Paper of The Medical Faculty of the Univerity Palacky, Olomouc, Czechoslovackia.
2011; 155(2):131-6.
Ruiz M. Protocolo para recolectar muestras sanguíneas por punción venosa en
niños. Enfermaría en Costa Rica. 2005; 26(1): 28-30.
Díaz S, González Y. Frecuencia de micronúcleos en sangre periférica de
pacientes tratados con ozono. Revista Cubana de Investigaciones Biomédicas.
1999; 18(1): 29-31.
SISBEN. Sistema de Identificación de Potenciales Beneficiarios de Programas
Sociales. http://www.sisben.gov.co/
PNUD. Programa de las Naciones Unidas para el Desarrollo. 2009.
http://www.segeplan.gob.gt/downloads/perfilpnud.pdf.
84
Tielsch JM, Katz J, Thulasiraj RD, Coles CL, Sheeladevi S, Yanik EL,
Rahmathullah L. Exposure to indoor biomass fuel and tobacco smoke and risk of
adverse reproductive outcomes, mortality, respiratory morbidity and growth among
newborn infants in south India. International journal and epidemiology. 2009;
38(5):1351-63
Ramos J, Villa J, Ruiz A, Armstrong R, Matta J. UV dose determines key
characteristics of nonmelanoma skin cancer. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.
2004; 13(12):2006-11
Sánchez-Laorden BL, Herraiz C, Valencia JC, Hearing VJ, Jiménez-Cervantes C,
García-Borrón JC. Aberrant trafficking of human melanocortin 1 receptor variants
associated with red hair and skin cancer: Steady-state retention of mutant forms in
the proximal golgi. Journal of cellular physiology. 2009; 220(3):640-54.
Stölzel M, Breitner S, Cyrys J, Pitz M, Wölke G, Kreyling W, Heinrich J, Wichmann
HE, Peters A. Daily mortality and particulate matter in different size classes in
Erfurt, Germany. J Expo Sci Environ Epidemiol. 2007; 17 (5):458-67.
Anwar WA. Biomarkers of human exposure to pesticides. Environmental health
perspect; 1997; 105 Suppl 4:801-6.
Hallberg LM, Bechtold WE, Grady J, Legator MS, Au WW. Abnormal DNA repair
activities in lymphocytes of workers exposed to 1,3-butadiene. Mutation research.
1997; 383(3):213-21.
Anwar W, Kamal A. Cytogenetic effects in a group of traffic policemen in Cairo,
Mutation research. 1988; 208.225–231.
da Silva Augusto LG, Lieber SR, Ruiz MA, de Souza CA. Micronucleus monitoring
85
to assess human occupational exposure to organochlorides. Environental
molecular mutagenesis. 1997; 29(1):46-52.
Zhao X, Niu J, Wang Y, Yan C, Wang X, Wang J. Genotoxicity and chronic health
effects of automobile exhaust: a study on the traffic policemen in the city of
Lanzhou. Mutation research. 1998; 415(3):185-90
Carere A, Andreoli C, Galato R, Leopardo P, Marcon F, Rosati MV, et al.
Biomonitoring of exposure to urban air pollutants: analysis of sister chromatid
exchanges and DNA lesions in peripheral lymphocytes of traffic policemen.
Mutation research. 2002; 518:215-224.
Leopardi P, Zijino A, Marcon F, Conti L, Carere A, Verdina A, Galati R, Tomei F,
Crebelli R, Analysis of micronuclei in peripheral blood lymphocytes of traffic
wardens: effects of exposure, metabolic genotypes, and inhibition of excision repair
in vitro by ARA-C, Environmental and molecular mutagenesis. 2003; 41: 126–130.
Singh NP, McCoy MT, Tice RR, Schneider EL. A simple technique for quantitation
of low levels of DNA damage in individual cells. Experimental cell research. 1988;
175:184-191.
Fenech M. The cytokinesis-block micronucleus technique: a detailed description of
the method and its application to genotoxicity studies in human populations.
Mutation research. 1993; 285: 35-44.
Fenech M, Holland N, Chang W, Zeiger E, Bonassi S. The HUman MicroNucleus
Project—An international collaborative study on the use of the micronucleus
technique for measuring DNA damage in humans. Mutation research. 1999; 428:
271-283.
86
Fenech M. The role of folic acid and Vitamin B12 in genomic stability of human
cells. Mutation research. 2001; 475(1-2):57-67.
Fenech M, Crott J. Micronuclei, nucleoplasmic bridges and nuclear buds induced
in folic acid deficient human lymphocytes-evidence for breakage-fusionbridge
cycles in the cytokinesis-block micronucleus assay. Mutation research. 2002; 504:
131-136.
Brunekreef, B., Holgate, S.T. Air pollution and health. Lancet. 2002; 360; 1233-
1242.
Schwartz J. Air pollution and children's health. Pediatrics. 2004; 113 (4
Suppl):1037-43.
Sram RJ, Binkova B, Dejmek J, Bobak M, Ambient air pollution and pregnancy
outcomes: a review of the literature. Environ. Health Perspect. 2005; 113; 375–382
Raaschou-Nielsen O, Reynolds, P. Air pollution and childhood cancer: a review of
the epidemiological literature. International journal of cancer. 118(12): 2006; 2920–
2929.
Vineis P, Hoek G, Krzyzanowski M, Vigna-Taglianti F, Veglia F, Airoldi L, et al,.
Lung cancers attributable to environ- mental tobacco smoke and air pollution in
non-smokers in different European countries: a prospective study. Environmental
health. 2007; 6, 7.
Agency for Toxic Substances and Disease Regustry (ATSDR). Toxicological
Profile for Benzene, Public Health Service, Atlanta, GA. Effects of environmental
benzene: micronucleus frequencies and haematological values in traffic police
working in an urban area. 1997.
87
Hayes R.B, Songnian Y, Dosemeci M, Linet M. Benzene and lymphohematopoietic
alignancies in human, American journal of industrial medicine. 2001. 40:117–126.
Bruckner J.V, Warren D.A. Toxic effects of solvents and vapors, in: C.D. Klaassen
(Ed.), Casarett & Doull’s Toxicology the Basic Science of Poisons, McGraw-Hill,
USA, 2001, 2001; 869–916.
Snyder R. Benzene and leukemia. Critical Reviews in Toxicology. 2002; 32(3):155-
210.
DEPARTAMENTO ADMINISTRATIVO DE TRANSITO Y TRANSPORTE
Cartagena de Indias D.T. y C. 2005: [email protected]
Mariani RL, Jorge MP, Pereira SS, Melione LP, Carvalho-Oliveira R, Ma TH,
Saldiva PH. Association between micronuclei frequency in pollen mother cells of
Tradescantia and mortality due to cancer and cardiovascular diseases: a
preliminary study in Sao José dos Campos, Brazil. Environmental pollution. 2009;
157(6):1767-70.
SISBEN. Sistema de Identificación y Clasificación de Potenciales Beneficiarios
para los programas sociales. http://www.sisben.gov.co/
88
ANEXOS
89
ANEXO A
CÓDIGO ___________________________
UNIVERSIDAD DE CARTAGENA FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS
GRUPO DE QUÍMICA AMBIENTAL Y COMPUTACIONAL CARTAGENA, COLOMBIA
DATOS GENERALES PARA LA CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN
SANGRE PERIFÉRICA DE MOTOTAXISTAS QUE TRABAJAN EN LA CIUDAD DE CARTAGENA DE INDIAS.
INFORMACIÓN GENERAL Día ___ Mes ___ Año ___ Municipio ________________ Ciudad G ________________ Nombre __________________________________________________________ Dirección _________________________________________________________ Edad ___________ Sexo M ( ) F ( ) Estatura ____________ Peso ___________ Hijos ____________________ Ocupación ________________________________________________________ Años de Trabajo ___________________________________________________ Grado de escolaridad: Ninguna ___ Primaria ___ Secundaria ___ Técnico ___ Universidad ________________________________________________________ Estrato ________ Estado civil _________________________ Afiliación a servicios de salud ___________________________ Cuántas horas al día trabaja: 0 - 4 ____ 4 - 8____ 8 - 12____ En qué horario: Mañana ____ Tarde____ Noche____ HÁBITOS DE SALUD GENERAL Fuma: Si __ No __ Nº de Cigarrillos al día _____ Tiempo fumando _________ Ingiere bebidas alcohólicas: Si ___ No___ Cuales ______________, __________________ Nº de días a la semana que ingiere alcohol: 0 -2____ 2-4 ____ 4-6___
90
SINTOMATOLOGÍA
Presenta algún síntoma respiratorio como: Dificultad respiratoria ____ Bronquitis ____ Asma ____ Alergias___
Ha notado alteraciones en su piel como: Aumento en tamaño de lunares ____ Lunares que se oscurecen ____ Aparición de sombras en la cara o en otro lugar ____
Ha notado en sus ojos: Ardor ____ Lagrimeo____ Irritación visual____ Aparición de manchas o tejido en los ojos_____ Dificultad para leer____ Dificultad para visualizar a corta distancia____ PARÁMETROS DE EXCLUSIÓN Presenta problemas de presión arterial _____ Presenta problemas de diabetes _____ Presenta problemas del corazón _____ Es positivo para VIH _____ Presenta usted alguna enfermedad de transmisión sexual_____ OBSERVACIONES ________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
91
ANEXO B
CONSENTIMIENTO INFORMADO
Titulo de la Investigación
“CUANTIFICACIÓN DE MICRONÚCLEOS EN SANGRE PERIFÉRICA DE MOTOTAXISTAS QUE TRABAJAN EN LA CIUDAD DE CARTAGENA DE INDIAS”
Estimado participante: El grupo de Química Ambiental y Computacional de la Universidad de Cartagena está realizando un estudio el cual tiene por objeto establecer las posibles alteraciones en la integridad del material genético, asociadas con la exposición a radiación solar que experimentan los mototaxistas en la ciudad de Cartagena. Por favor lea cuidadosamente este documento o solicite al investigador que se lo lea en voz alta. Usted puede realizar todas las preguntas que considere pertinentes relacionadas con el estudio.
Consideraciones generales del estudio Este documento que usted está leyendo es el consentimiento informado que explica en forma escrita el propósito, beneficios y riesgo de este estudio. Esta investigación es realizada con el propósito de determinar si los mototaxistas de la ciudad de Cartagena presentan alteraciones en su material genético. Usted es libre de participar en este estudio porque usted es voluntario.
2. Importancia de este estudio El mototaxismo constituye uno de las principales actividades económicas para un grupo importante de la población cartagenera. Las personas dedicadas al mototaxismo están permanentemente expuestas a radiación solar y diversos contaminantes ambientales que pueden estar alterando la integridad de su material genético, y por tanto, afectando negativamente la salud de los mismos. Este estudio le permitirá conocer al participante la magnitud del daño genético presente en sus células sanguíneas, y a la Universidad de Cartagena, evaluar por primera vez los posibles efectos que sobre la salud de las personas, genera la actividad económica del mototaxismo. 3. Investigadores encargados de este estudio Esta investigación es realizada bajo la dirección del Profesor Jesús Olivero Verbel, Ph.D, Director del Grupo de Química Ambiental y Computacional de la Universidad de Cartagena, y Liliana Patricia Carranza López, estudiante de maestría en Toxicología, Universidad Nacional de Colombia-Universidad de Cartagena.
92
4. Descripción de la participación de los voluntarios en el estudio Las personas que voluntariamente accedan a participar en el estudio serán entrevistadas para colectar información general relacionada con la edad, sexo, peso, ocupación y enfermedades de las que padezca, entre otros aspectos. Una vez llenado este formulario, el participante donará una muestra de sangre de 2 mL, la cual será obtenida por la Bacterióloga Liliana Patricia Carranza López, con tarjeta profesional № 401 y № de registro 341010. La muestra será colectada de una vena del brazo del donante, utilizando jeringa estéril, la cual será abierta en presencia del mismo, mediante el procedimiento de venopunción utilizando el sistema Vacutainer, de acuerdo a lo establecido en el artículo 40 del decreto 1571 de 1993 referente a que ―La recolección de la sangre deberá hacerse de forma aséptica, mediante el uso de elementos estériles, libres de pirógenos, conservando el sistema cerrado‖. Esta muestra será utilizada exclusivamente para realizar el ensayo conocido con el nombre de Evaluación de micronúcleos en un extendido de sangre periférica. Una vez utilizada la muestra, el volumen de sangre restante será destruido y por tanto la misma no será utilizada para realizar ningún otro tipo de estudio diferente al mencionado con anterioridad. 5. Riesgos y posible inconformidad en los participantes El proceso de extracción de sangre venosa es simple y será realizado siguiendo los lineamientos estandarizados para la investigación en salud, por un profesional calificado, encargado de tomar la muestra. De acuerdo con la Resolución № 008430 1993, expedida por el Ministerio de Salud, el procedimiento de extracción de sangre al que será sometido voluntariamente el donante es clasificado como de riesgo mínimo. El voluntario podrá experimentar un dolor leve asociado a la penetración de la aguja sobre el sitio donde se tomará la muestra. 6. Beneficios Los resultados obtenidos con este estudio serán entregados directamente a los voluntarios, y por tanto cada participante podrá conocer la magnitud del daño en el material genético que presentan sus células sanguíneas. Esto le permitirá incrementar las medidas de prevención pertinente, de tal forma que pueda proteger su salud. 7. Participación voluntaria La persona que participa voluntariamente en este estudio, lo hace bajo su propio criterio, sin ningún tipo de presión u obligación para con el mismo. Usted puede realizar cualquier pregunta a los investigadores de este estudio cuando considere conveniente o retirarse del mismo cuando así lo crea pertinente. 8. Derechos de autor y confidencialidad Todos los datos generados en este estudio serán propiedad de la Universidad de Cartagena. Los voluntarios participarán en el mismo, con la confidencialidad tal que su nombre no será publicado bajo ninguna circunstancia, pero si los códigos asociados con cada voluntario.
93
9. Consentimiento del participante Con el presente documento se pretende informar a usted sobre el procedimiento que se le practicará por lo que le solicitamos diligenciar con su puño y letra los siguientes espacios
en blanco. Yo ___________________________________________de la ciudad de Cartagena y con C.C. Nº ______________________de_______________________ manifiesto,
DECLARACIÓN DE CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA PARTICIPACIÓN EN ESTUDIO
Que Liliana Carranza López identificado con C.C. Nº 25.914.684 de Chinú, Córdoba, ha sido claro y preciso en suministrarme la información sobre la toma de muestra para el proyecto ―Cuantificación de micronúcleos en sangre periférica de mototaxistas que trabajan en la ciudad de Cartagena‖. Estoy de acuerdo en participar en esta investigación donando 2 mL de sangre.
Responda SI o NO en los espacios en blanco He recibido información del procedimiento en un lenguaje claro y sencillo: Si___ No___ Se me ha permitido todas las observaciones y preguntas al respecto: Si___ No___ También comprendo que sin necesidad de dar ninguna explicación puedo revocar este consentimiento, por ello manifiesto que estoy satisfecho con la información recibida y que comprendo el alcance del procedimiento a realizar. En tales condiciones, ACEPTO PARTICIPAR EN EL PROYECTO: Cuantificación de micronúcleos en sangre periférica de mototaxistas en la ciudad de Cartagena. 10. Firma Su firma abajo significa que usted leyó y entendió este documento y que usted accede voluntariamente a participar en este estudio. Firma _______________________ Fecha ______________________
