CROMATOGRAFÍA LIQUIDA

Agilent Serie 1100 Sistema de Calidad HPLC

El equipo se divide en varios componentes que describiré a continuación:

1. Disolventes o también conocido como la fase móvil, se colocan los disolventes a usar con

diferentes canales.

•Pureza

•Viscosidad

•Índice de Refracción

•Punto de Ebullición

•Toxicidad

•Trasparencia UV

•Solubilidad

2. Desgacificador. Tiene la función de eliminar el aire de los disolventes, mediante tubos con

membranas, para evitar que afecte la continuidad de la fase a través de la columna o que cambien

los tiempos de retención.

3. Modulo de la bomba, es de tipo cuaternario conectada a los diferentes canales que absorben los

disolventes, permite mezclar hasta cuatro diferentes al mismo tiempo dependiendo de la técnica,

cada que se haga una mezcla se empieza con el gradiente del 100% y se va reduciendo por lapsos

de tiempo hasta ajustar el equipo al gradiente deseado, ya que no es conveniente  hacerlo

directamente. Este compartimento también tiene una válvula de purga que se usa cuando hay

soluciones distintas, se purga la línea con el nuevo disolvente para que entre a la columna.

4. Automatizado, se llama así ya que es el módulo de inyección automática, mediante un brazo

robótico toma cada vial y los coloca en el puerto de inyección y con una aguja toma la cantidad

indicada para inyectarla al sistema, y se observa en la pantalla una línea roja que indica que la

corrida ha empezado, y empieza a tomar el tiempo de cada uno de los compuestos que se

evidencian en forma de pico, el tiempo que tarda en salir cada uno se denomina tiempo de

retención.

5. Módulo de columnas. Conocido como fase fija, es el espacio destinado para las columnas; sin

embargo solo se puede usar una a la vez. Mediante una válvula de suicheo se indica la que se

desea usar. La columna está conectada mediante canales que vienen del modulo anterior con la

mezcla de disolventes que pasan a través de esta hacia el modulo de detención

6. Modulo de detección.  Se tienen dos tipos de lámpara la de luz ultravioleta y la de luz visible, tiene

la capacidad de detectar diferentes longitudes de onda que se pueden medir al mismo tiempo

mediante un arreglo de iodos, tiene 64 dientes que detecta una onda diferente al mismo tiempo,

pero esto depende del equipo.

7.  Equipo de manejo de información. Es una computadora que tiene instalado el software que maneja

todo el sistema, está diseñado para indicar las características de la inyección dependiendo de la

técnica a seguir. También se establece el nombre de cada muestra, repetición, volumen de

inyección  mediante una tabla de secuencia y se puede dar seguimiento al proceso. También hay

comandos para el tipo de inyección, control de la bomba, el flojo por minuto, stop time, post time

para estabilizar el sistema. Se puede programar para que el equipo se pare en caso de que no

tenga disolvente y así evitar que se queme la bomba

Fase Móvil

Las soluciones se encuentran en envases de vidrio (Acetonitrilo, metanol, agua y buffet).

Desgasificador

las partículas del analito 0.25micras de porosidad debajo es degacificadorpara q la solución sea homogena,sino nos no dara un resultado adecuado. Superiores de pueden perder en el filtro.tiene burbujas pero nose aprecian

Bomba cuaternaria tiene 4 conductos diferente combinaciones, el eluyente, se busca unapico tenga una simetría posible, entre pico y pico una buena resolución, buena separación.

Inyector automatico

Columna se separación

Horno en hplc 20 y30, si los solventes son viscosas mayor será la Tc

Detector uv-visible