NEMATOLOGIA AGRÍCOLA

REPORTE:

““CORTES FENESTRALES””

Mesa: 4

PRESENTA:

CRUZ JIMENEZ EDGARDO

GRADO: 6° GRUPO: 2

PARASITOLOGÍA AGRÍCOLA

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA

CHAPINGO “ENSEÑAR LA EXPLOTACIÓN DE LA TIERRA, NO LA DEL HOMBRE”

PROFESOR:

M.C. JUVENTINO CUEVAS OJEDA

CHAPINGO, MEXICO, SEPTIEMBRE DE 2015

Introducción

La detección, identificación y el diagnóstico oportuno de los nematodos es un

componente fundamental de las medidas implementadas para el manejo de este

complejo problema. Los métodos tradicionales de taxonomía clásica (claves

taxonómicas, fotografías, colecciones de referencia, etc.) han sido empleados de

manera masiva para la determinación de la identidad de nematodos formadores de

quistes. Estas metodologías si bien han dado buenos resultados, también conllevan

desventajas como el requerimiento de habilidades de nematólogos con experiencia

así como la inversión de mayor cantidad de horas-hombre. Debido a la gran

diversidad morfológica y morfométrica de poblaciones cercanamente emparentadas

como el nematodo del quiste blanco G. pallida, y el complejo G. tabacum (G. t.

tabacum, G. t. virginae y G. t. solanacearum) se hace necesario el uso de

procedimientos alternativos que proporcionen mayor certidumbre en la

determinación de la identidad del nematodo dorado. Con el surgimiento de

metodologías más versátiles y rápidas como el análisis del material genético

mediante técnicas moleculares y su uso en conjunto con las técnicas tradicionales

de una forma integral, se ha incrementado la robustez de los diagnósticos dando

mayor confiabilidad en la toma de decisiones relacionadas a la regulación del

nematodo dorado de la papa en México y a nivel regional.

Objetivos

Aprender y realizar las técnicas para hacer cortes fenestrales en los nematodos

enquistados para su posterior identificación.

Entender la importancia de esta técnica para la identificación de especies de

nematodos fitopatógenos.

Cada integrante del equipo realice por lo menos tres cortes.

Materiales

Agua destilada

Quistes

Pescadores

Pincel

Caja Petri

Microscopio óptico

Navaja

Base de plástico (mica)

Aguja de disección

Agua oxigenada

Portaobjeto plano y cubreobjeto

Bálsamo de canada

Sellador

Etiquetas

Metodología

1. Hidratar los quistes (en agua durante 24 horas, si se quiere hacer una

muestra permanente, o en láctico láctico al 4% durante 5 minutos)

2. Depositar una gota de agua en la mica y transferir 3 quistes con el pescador.

3. En el microscopio óptico enfocar el quiste y con la navaja realizar un corte en

la región ecuatorial del quiste.

4. Eliminar la parte anterior del quiste

5. Limpiar la mitad media posterior del quiste.

6. Colocar la mitad media posterior del quiste boca abajo y luego realizar dos

cortes teniendo cuidando de no eliminar el modelo fenestral

7. Realizar otros dos cortes para que quede el modelo fenestral dentro de un

cuadrito.

8. Decolorar la cutícula del quiste poniendo el corte en agua oxigenada durante

30 segundos

9. Depositar una gota de glicerina en el portaobjeto

10. Colocar los cortes fenestrales boca abajo (Globodera, Punctodera,

Heterodera, etc.)

11. Colocar el cubreobjeto, sellar y etiquetar.

Resultados

Logramos identificar dos especies de nematodos fitopatogenos en la practica

Genero Meloidogyne

La hembra adulta de Meloidogyne es esférica o tiene forma de pera con un cuello

alargado piriforme (0.45-1.3mm de longitud).

El género tiene la particularidad de tener solo la fenestra vulvar otras especies

pueden llegar a presentar fenestras vulvar y anal como M. hapla.

Genero Punctodera

Quistes sin cono vulvar, piriformes, subesféricos o esféricos, con cuello corto,

presentan fenestra vulvar y anal terminales, ambos circunfenestrados

separadamente.

Discusión

Gracias a la ayuda de un microscopio electrónico se pudo realizar los cortes

fenestrales de quistes pertenecientes al género Globodera. El patrón cutícular de

estos nematodos es muy característico ya que presenta una forma de encaje. Se

puede notar la abertura de la vulva y el número de estrías cutículares entre el ano y

la vulva.

Al momento de tener el corte rectangular pudimos observar una característica muy

importante para identificar la especie de nematodo que teníamos, esa característica

era la fenestra vulvar y la fenestra anal y dependiendo en la posición en la que se

encontraban podíamos decir que era una cactodera, heterodera, globodera o

punctodera.

Conclusiones

La práctica de los cortes fenestrales fue una de las más complicadas para algunos

de nosotros, cumpliendo a un así con el objetivo del conocimiento de dichos cortes,

sin embargo llegamos a la conclusión de que se tiene que practicar más cortes para

que obtengamos la habilidad de poder realizarlos sin ninguna complicación.

Aunque no se cumplió el objetivo de que cada alumno hiciera los tres cortes en

clase por lo menos se practicó lo suficiente para realizarlos y entregar después.

De aquí la importancia de los cortes para poder identificar algunas especies de

nematodos.

Bibliografia

http://plpnemweb.ucdavis.edu/nemaplex/Courseinfo/Curso%20en%20Espanol/LAB

%201%20%20Extracci%C3%B3n%202013.pdf

Moss, C. S., 1997. Clave para los géneros y especies de heteroderidos (nematoda)

que se enquistan. México: Colegio de Postgraduados.

Carlos Sosa-Moss, e. a., 1997. Manual de Técnicas para el Diagnóstico de las

Enfermedades de las Plantas. México: IICA.