Conceptos de CromatografaDario Corral

Tipos de cromatografa.y

CROMATOGRAFA DE REPARTO: Es el tipo de cromatografa de lquidos ms utilizado, permite separar compuestos polares, de baja a moderada masa molecular y no inicos. Est formada por la cromatografa lquido-lquido y cromatografa unida qumicamente que es la ms usada. En esta la fase estacionaria lquida se une qumicamente a la superficie del soporte que est constituido bsicamente por slice. Se divide en : cromatografa de fase inversa donde encontramos una fase estacionaria no polar y una fase mvil polar, donde los componentes ms polares por solubilidad sern los primeros en eluir , en contraste en la cromatografa de fase normal, la fase estacionaria es polar y la mvil apolar y por eso el analito menos polar ser el primero en eluir. CROMATOGRAFA DE ADSORCIN: Permite separar los distintos componentes de una disolucin por la absorcin selectiva de los constituyentes de una mezcla. La cromatografa de adsorcin es adecuada para compuestos no polares, que tengan masas moleculares inferiores a 5000 ua. Una caracterstica a destacar es la capacidad para diferenciar compuestos ismeros. CROMATOGRAFA DE EXCLUSIN POR TAMAO: Se aplica a especies de elevado peso molecular. Los rellenos son de slice y contienen redes de poros en las cuales pueden difundir molculas de soluto y de disolvente, las molculas eluyen en funcin de su tamao , las de mayor tamao sern las primeras en eluir porque son excluidas de los poros y las de pequeo tamao quedarn por ms tiempo retenidas en los poros y sern las ltimas en eluir. Esta tcnica se aplica para determinar azcares en zumos y para determinar rpidamente pesos moleculares en productos. CROMATOGRAFA DE INTERCAMBIO INICO: Se utiliza para separar y determinar especies inicas, en funcin de la carga de las molculas. La fase estacionaria consiste en una resina de intercambio inico, Los procesos de intercambio inico se basan en intercambios entre iones presentes en una disolucin y los iones del mismo signo de la superficie de la resina. Los intercambiadores pueden ser cidos o bsicos, fuertes o dbiles. Cromatografa de Afinidad: La Cromatografa de Afinidad permite la separacin de mezclas proteicas por su afinidad o capacidad de unin a un determinado ligando. En este caso, las protenas que se retienen en la columna son aquellas que se unen especficamente a un ligando que previamente se ha unido covalentemente a la matriz de la columna. Despus de que las protenas que no se unen al ligando son lavadas o eluidas a travs de la columna, la protena de inters que ha quedado retenida en la columna se eluye o libera mediante el empleo de una solucin que contiene bien ligando libre u otro compuesto que rompa la interaccin entre el ligando y la protena.

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Trminos comunes de la cromatografay Tiempo de retencin: es el tiempo caracterstico que tarda

un analito particular en pasar a travs del sistema, desde la columna de entrada hasta el detector. y Tiempo muerto: El tiempo cero (t0) o tiempo muerto (tm), es el tiempo de retencin del componente inerte o gas portador. y Fase mvil: consiste en un fluido (gas, lquido o fluido supercrtico) que arrastra a la muestra a travs de una fase estacionaria . y Fase estacionaria: en la cual estn retenidos los componentes de la muestra, y a travs de la cual fluye la fase mvil arrastrando a los mismos.

Teora clsica de la cromatografay Plato terico: segmento o porcin de la columna

cromatogrfica, la cual est dividida en una serie de stos platos tericos. y Altura del plato terico: Cuanto ms estrecho sea el plato terico, mayor nmero de ellos habr para una longitud L de columna, por tanto, la eficacia de la columna ser inversamente proporcional a la altura equivalente del plato terico: AEPT= H=L/N

Teora cintica (ecuacin de Van Deemter)H= A + B/u + Cu Donde: y H: altura equivalente del plato terico y A: Difusin en remolino, se refiere a los caminos en los que puedan difundirse las moleculas. y B/u: Difusin longitudinal, est asociado al proceso en el cual el soluto se difunde desde una zona de mayor concentracion (centro de la banda) hacia una sona de menor concentracin, causando un ensanchamiento. y Cu: Resistencia a la transferencia de materia, esta asociado con la transferenca de masas entre la fase movil y estacionaria. y U : velocidad de la fase mvil

Referenciasy http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/c y y y y

elular/cromatografia.htm http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/manchi//alim/TRABAJOS0809 /trabajo5.pdf http://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/parametros http://www.ulpgc.es/hege/almacen/download/39/39360/separaciones_por _cromatografia_1.pdf http://www1.uprh.edu/jorcas/paginas_laboratorio/info_adicional_lab/det_f lujo_optim2.pdf