EXPLORACIÓN DE LA FASE DE COAGULACIÓN DEFINICIÓN: Medición “ in vitro” del tiempo que tarda la sangre en formar un coágulo. ASPECTOS PRÁCTICOS: 1. Extracción de la sangre: punción limpia para que no se contamine con el

factor tisular 2. Muestra: normalmente se utiliza plasma, debe obtenerse lo antes posible. Si se

forma algún coágulo la muestra no es válida 3. Anticoagulante: Citrato sódico al 3,8% en proporción 1:10 (ej. 1 ml de

anticoagulante por 9ml de sangre)

DETERMINACIONES: TIEMPO DE COAGULACIÓN: tiempo que tarda en coagular la sangre sin anticoagulantes a 37ºC depositada en un tubo de cristal. V.N. 8-12 minutos Valoro la vía intrínseca Método de Lee-White TIEMPO DE CEFALINA PARCIALMENTE ACTIVADA (TTPA): tiempo de coagulación de un plasma citratado pobre en plaquetas al que se añade Ca+2 un fosfolípido (cefalina) que sustituye al factor plaquetario III y un activador. V.N. 30-40 segundos (no debe exceder en 8 segundos al patrón) Valoro vía intrínseca salvo el factor plaquetario TIEMPO DE PROTROMBINA O TIEMPO DE QUICK: Mide el tiempo de coagulación de un plasma al que se añade calcio y tromboplastina tisular V.N. 10-15 segundos Valoro la vía extrínseca de la coagulación TIEMPO DE TROMBINA: tiempo de coagulación de un plasma al que se le añade trombina V.N. 15-20 segundos. Diferencias de 5 segundos con el tiempo de un plasma testigo son significativas Valoro: 1) cantidad y calidad de fibrinógeno presente 2) Presencia o no de antitrombinas

EXPLORACIÓN DE LA FASE DE COAGULACIÓN-METODOLOGÍA-

1. TIEMPO DE COAGULACIÓN Método de Lee-White:

• Partimos de dos tubos de cristal introducidos en un baño a 37ºC • Depositamos aproximadamente 1 ml de sangre sin anticoagulante en cada tubo y

ponemos en marcha el cronómetro • Uno de los tubos se saca del baño cada 30 segundos y se inclina para ver si fluye la

sangre • Cuando la sangre no fluya se saca el segundo tubo del baño cada 15segundos, cuando

la sangre no fluya se para el cronómetro y se anota el tiempo.

2. TIEMPO DE CEFALINA PARCIALMENTE ACTIVADA (TTPA)

• Recoger la sangre sobre citrato sódico y centrifugar 10 min a 3000rpm para obtener el plasma

• En un tubo de hemólisis calentado depositar 0.1ml de plasma + 0.1ml de cefalina con activador

• Mezclar e incubar 3 min a 37ºC • Añadir 0.1ml de Cl2Ca 0.025M y poner en marcha el cronómetro • Agitar sin sacar el tubo del baño • Sacar el tubo a los 30 segundos y anotar el tiempo de coagulación • El ensayo se debe realizar por duplicado, en las 3 horas siguientes a la extracción y

comparando con un patrón

3. TIEMPO DE PROTROMBINA O T DE QUICK

• Esta determinación se utiliza para el control del tratamiento con anticoagulantes orales • En un tubo de hemólisis se depositan 0.1 ml de plasma y se incuba 2 minutos a 37ºC • Transcurrido ese tiempo se añade 0.2 ml de tromboplastina cálcica previamente

precalentada (15 minutos a 37ºC) y se pone en marcha el cronómetro anotándose el tiempo de coagulación

• El ensayo se hace por duplicado y comparando los resultados con los de un patrón. • Debe llevarse a cabo en las 4horas siguientes a la extracción.

4. TIEMPO DE TROMBINA

• Se incuban 0.2 ml de plasma durante 2 minutos a 37ºC • Se añade 0.2 ml de trombina cálcica, se pone en marcha el cronómetro y se anota el

tiempo de coagulación • El ensayo se realiza por triplicado, obteniéndose el valor medio. Los resultados se

comparan con los de un patrón.