Universidad de San Carlos de Guatemala Facultad de Ingeniera Escuela de Ingeniera Qumica

VALIDACIN DE LA METODOLOGA ANALTICA EN EL PROCESO DE FABRICACIN DE UNA CREMA ANTIMICTICA Y LA CUANTIFICACIN DE CLOTRIMAZOL COMO INGREDIENTE ACTIVO

Edgard Rodrigo Godnez Menndez

Asesorado por: Licenciada Ana Mara Haeussler Porras

Guatemala, enero de 2008

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE INGENIERA

VALIDACIN DE LA METODOLOGA ANALTICA EN EL PROCESO DE FABRICACIN DE UNA CREMA ANTIMICTICA Y LA CUANTIFICACIN DE CLOTRIMAZOL COMO INGREDIENTE ACTIVO TRABAJO DE GRADUACIN

PRESENTADO A LA JUNTA DIRECTIVA DE LA FACULTAD DE INGENIERA POR: EDGARD RODRIGO GODNEZ MENNDEZ ASESORADO POR: LICENCIADA ANA MARIA HAEUSSLER PORRAS

AL CONFERRSELE EL TTULO DE

INGENIERO QUMICO

GUATEMALA, ENERO DE 2008

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE INGENIERA

NMINA DE JUNTA DIRECTIVA

DECANO VOCAL I VOCAL II VOCAL III VOCAL IV SECRETARIA

Ing. Murphy Olympo Paiz Recinos Inga. Glenda Patricia Garca Soria Inga. Alba Maritza Guerrero de Lpez Ing. Miguel ngel Dvila Caldern Br. Kenneth Issur Estrada Ruiz Inga. Marcia Ivonne Vliz Vargas

TRIBUNAL QUE PRACTIC EL EXAMEN GENERAL PRIVADO

DECANO: EXAMINADOR: EXAMINADOR: EXAMINADOR: SECRETARIO:

Ing. Sydney Alexander Samuels Milson Ing. Estuardo Monroy Bentez Ing. Orlando Posadas Valdz Ing. Manuel Gilberto Galvn Estrada Ing. Pedro Antonio Aguilar Polanco

ACTO QUE DEDICO A:

DIOS

Por ser mi inspiracin y empuje en busca de ser mejor da a da.

MIS PADRES

Edgard Godnez Barrios y Hada Celeste Menndez de Godnez, por su amor, dedicacin, paciencia y esfuerzo por darme los medios necesarios para culminar esta meta. Es su triunfo.

MIS HERMANAS

Nicthe, por su apoyo incondicional y todo el cario, Anaite y Mayar, siempre las tengo presentes aunque estn lejos.

TAS, TOS Y PRIMOS

A todos, gracias por creer en m y darme muestras de apoyo.

AGRADECIMIENTOS A:

A mi asesora Licenciada Ana Mara Haeussler, por el tiempo dedicado en la elaboracin del presente trabajo de graduacin.

A Licenciada Mnica Gonzlez, por su ayuda y conocimientos.

A todos mis amigos (gracias a Dios, por darme bastantes) ellos saben quienes son, les agradezco todo su cario y afecto, sin ellos no sera quien soy, nuestra amistad por siempre.

NDICE GENERAL

NDICE DE ILUSTRACIONES GLOSARIO LISTA DE ABREVIATURAS RESUMEN OBJETIVOS INTRODUCCIN

XIX XI XVII XIX XXI XXIII

1. ANTECEDENTES 1.1. Buenas prcticas de manufactura de productos farmacuticos (BPM)

1

1

2. MARCO TERICO 2.1 Conceptos de validacin 2.1.1 Validacin esbelta 2.1.2 La verificacin continua de la calidad 2.2 Procedimiento de validacin 2.2.1 Estructura bsica 2.2.1.1 Revisin de procedimientos 2.2.1.2 Calibracin 2.2.1.2.1 Exactitud 2.2.1.2.2 Precisin

5 5 7 8 9 9 10 10 10 11

I

2.2.1.2.3 Contenido del programa de calibracin por pasos 2.2.1.3 Calificacin 2.2.1.3.1 Calificacin de instalaciones 2.2.1.3.2 Calificacin de equipo 2.2.1.3.3 Calificacin de personal 2.2.1.3.4 Entrenamiento departamental 2.2.1.3.5 Entrenamiento anual 2.2.1.3.6 Documentacin 2.2.1.3.7 Calificacin de sistemas 2.2.1.4 Protocolo de validacin 2.2.1.4.1 El objetivo 2.2.1.4.2 El propsito 2.2.1.4.3 Caractersticas pertinentes de diseo del proceso o del equipo 20 2.2.1.4.4 Procedimiento real de la validacin 2.2.1.4.5 Pruebas requeridas 2.2.1.4.6 Criterios de aceptacin 2.2.1.4.7 No conformidades 2.2.1.5 Documentacin de validacin 2.2.1.5.1 Control de cambios 2.2.1.6 Revalidacin 2.3 Validacin de mtodo 2.3.1 Caractersticas de desarrollo analtico 2.3.1.1 Selectividad 2.3.1.1.1 Prueba de identificacin 2.3.1.1.2 Prueba de pureza 2.3.1.1.3 Ensayo 21 22 22 23 24 25 25 26 27 27 27 27 27 11 12 12 12 13 15 15 15 16 18 19 20

II

2.3.1.2 Linealidad 2.3.1.3 Precisin de mtodo 2.3.1.4 Precisin interna 2.3.1.5 Lmite de deteccin 2.3.1.6 Lmite de cuantificacin 2.3.1.7 Exactitud 2.3.1.8 Precisin del equipo 2.3.1.9 Rango 2.3.2 Elementos requeridos de los datos para validacin de mtodo 2.3.2.1 Categora I 2.3.2.2 Categora II 2.3.2.3 Categora III 2.3.2.4 Categora IV 2.3.2.4.1 Prueba de identificacin 2.4 Cromatografa 2.4.1 Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) 2.4.1.1 Componentes del sistema 2.5 Espectrometra 2.5.1 Componentes de los instrumentos 2.5.2 Fotmetros y espectrofotmetros de UV visible

28 28 28 29 29 29 30 30

30 30 31 31 31 31 32 33 34 35 36 37

3. PROCEDIMIENTO

39

3.1 Descripcin del proceso tecnolgico de obtencin de la crema antimictica 3.2 Plan maestro de produccin 3.2.1 Fase A (oleosa) 3.2.2 Fase B (acuosa) 39 39 39 40

III

3.2.3 Instrucciones para el llenado

41

4. METODOLOGA 4.1 Procedimiento de validacin 4.1.1 Principios para realizar el proceso de validacin 4.1.1.1 Primer principio 4.1.1.2 Segundo principio 4.1.1.3 Tercer principio 4.1.2 Equipo a utilizar 4.1.3 Materiales 4.1.4 Pasos a seguir en el proceso de validacin 4.1.4.1 Primer paso 4.1.4.2 Segundo paso 4.1.4.3 Tercer paso 4.1.4.4 Cuarto paso 4.1.4.5 Quinto paso 4.1.4.6 Sexto paso 4.2 Validacin de mtodo analtico 4.2.1 Equipo 4.2.2 Reactivos 4.2.3 Fase mvil 4.2.4 Solucin buffer para solucin estndar y muestra 4.2.5 Solucin estndar 4.2.6 Solucin muestra

43 43 43 43 43 43 44 44 45 45 45 46 46 47 47 47 47 48 48 48 48 49

4.3 Secuencia de anlisis a utilizar en el equipo de cromatografa 49 4.3.1 Consideraciones generales 4.3.2 Procedimiento 4.3.2.1 Selectividad 4.3.2.2 Linealidad 49 50 50 51

IV

4.3.2.2.1 Sustancia activa 4.3.2.3 Exactitud 4.3.2.3.1 Mtodo de acumulacin 4.3.2.4 Precisin del equipo 4.3.2.4.1 Sustancia activa 4.3.2.5 Precisin del mtodo 4.3.2.5.1 Sustancia activa 4.3.2.5.2 Evaluacin 4.3.2.6 Precisin interna del laboratorio 4.3.2.6.1 Sustancias activas 4.3.2.7 Sobre el resultado 4.3.2.7.1 Evaluacin 4.4 Criterios utilizados en el procedimiento para la evaluacin de parmetros 4.4.1 Selectividad 4.4.1.1 Muestra 4.4.1.2 Estndar 4.4.1.3 Filtros de nylon de 0.45 m 4.4.1.4 Medio de dilucin 4.4.2 Linealidad 4.4.3 Precisin de mtodo 4.4.4 Precisin interna 4.4.5 Exactitud 4.4.6 Precisin de equipo 4.4.7 Rango

51 51 51 53 53 53 53 54 54 54 54 55

55 55 55 55 55 56 56 56 57 57 58 58

V

5. RESULTADOS 5.1 Sumario 5.2 Formulacin 5.3 Produccin de crema y empaque 5.4 Proceso de acondicionamiento

59 59 59 60 62

5.5 Caractersticas de la crema / resultados de control en proceso 62 5.5.1 Homogeneidad 5.5.2 Contenido de clotrimazol 5.5.3 Microbiologa 5.6 Resultados mtodo analtico 5.6.1 Puntos de evaluacin elegidos 5.6.2 Selectividad 5.6.3 Exactitud 5.6.3.1 Mtodo de placebo 5.6.3.2 Interpretacin estadstica 5.6.3.3 Conclusin 5.6.4 Precisin del mtodo 5.6.4.1 Interpretacin estadstica 5.6.5 Precisin de equipo 5.6.5.1 Interpretacin estadstica 5.6.6 Linealidad 5.6.6.1 Interpretacin estadstica 5.6.6.2 Conclusin 5.6.7 Precisin interna del laboratorio 5.6.7.1 Interpretacin estadstica 5.6.8 Rango 63 63 64 64 64 65 65 65 66 67 67 68 68 69 69 70 71 71 72 72

VI

CONCLUSIONES RECOMENDACIONES BIBLIOGRAFA

75 77 79

VII

VIII

NDICE DE ILUSTRACIONES

TABLAS

I II III IV V VI VII VIII IX X XI XII XIII XIV XV XVI

Tpicas caractersticas analticas usadas en la validacin de mtodo Elementos de datos necesarios para validacin de mtodo Criterios a tomar en cuenta Secuencia exactitud Secuencia precisin de mtodo Rango a analizar para linealidad del mtodo Cantidad requeridas para anlisis de exactitud Clotrimazol crema Parmetros del proceso de formulacin Parmetros del proceso de sellado Desperdicios Consumo empaque primario Rendimientos Resultados de homogeneidad Contenido de clotrimazol Resultados microbiolgicos

26 32 49 52 54 56 58 60 61 61 61 62 62 63 63 64 65 65 66 66 68 69 70 72 73

XVII Resultados de selectividad XVIII Estndar utilizado XIX XX XXI Resultados anlisis de exactitud Interpretacin estadstica de exactitud Resultados de precisin de mtodo

XXII Resultados de precisin de equipo XXIII Resultados de linealidad XXIV Resultados de precisin interna del laboratorio XXV Resultados de rango IX

X

GLOSARIO

Analito

En qumica analtica un analito es el componente (elemento, compuesto o in) de inters analtico de una muestra. La

informacin analtica que se obtiene sobre el analito en la muestra puede ser cualitativa (si el analito est presente o no en una determinada concentracin en la muestra), cuantitativa (la proporcin en la que se encuentra) y estructural.

Base emulsionada

Solucin en donde se logra mezclar fases acuosas con fases oleosas, y no hay una sedimentacin o separacin de los

componentes de la misma.

Calidad de conformancia

Esto se refiere bsicamente al grado en que el producto o servicio cumple con los estndares o normas establecidas de calidad.

XI

En este concepto la frase de hacer las cosas bien a la primera vez queda perfectamente, ya que esta calidad de conformancia se enfoca a la manera de hacer las cosas; con los materiales correctos, maquinaria y equipo en buen estado, personal capacitado y motivado, etc.

Clotrimazol

El clotrimazol es un medicamento que se usa para tratar las infecciones por hongos en la vagina, la boca y la piel, como el pie de atleta (tia podal), la tia crural o inguinal y la tia corporal. Tambin puede usarse para prevenir la candidiasis oral en ciertos pacientes.

Compuestos creos

Material

hecho

de

cera

o

con

las

caractersticas especficas a la cera.

Crema antimictica

Producto farmacutico utilizado para el control y desaparicin de hongos en distintas partes del cuerpo, para uso externo nicamente.

XII

Fase acuosa

Fase en donde los materiales estn disueltos en una solucin que tiene como base agua.

Fase estacionaria

En

la

cromatografa

lquida

de

alta

resolucin es un cilindro con pequeas partculas redondeadas con ciertas

caractersticas qumicas en su superficie. Dependiendo de la naturaleza de la muestra a analizar sta es introducida en pequeas cantidades y sus componentes se retrasan diferencialmente dependiendo de las

interacciones qumicas o fsicas con la fase estacionaria a medida que adelantan por la columna. El grado de retencin de los componentes de la muestra depende de la naturaleza del compuesto, de la composicin de la fase estacionaria y de la fase mvil.

Fase oleosa

Solucin con apariencia aceitosa, muy poco miscible con la fase acuosa.

Flujo de produccin

Diagrama de flujo donde se ve todas las inspecciones y operaciones donde una materia prima sufre una transformacin para llegar a ser producto terminado, adems

XIII

incluye todos los transportes y demoras que se dan en el proceso.

HPLC

La Cromatografa lquida de alta resolucin o High performance liquid chromatography (HPLC) es un tipo de cromatografa en columna utilizada frecuentemente en

bioqumica y qumica analtica. Tambin se la denomina a veces Cromatografa lquida de alta presin o High pressure liquid chromatography (HPLC), aunque esta

terminologa se considera antigua y est en desuso. El HPLC es una tcnica utilizada para separar los componentes de una mezcla basndose en diferentes tipos de

interacciones qumicas entre las substancias analizadas y la columna cromatogrfica.

Layout

Trmino ingls con que se conocen en diseo los bocetos que o maquetas para bien

acabados proyectos.

sirven

presentar

Licuefaccin

Proceso por el cual un gas pasa a estado lquido.

XIV

Mantenimiento preventivo

Consiste en la revisin peridica de ciertos aspectos, de equipos, maquinarias y

sistemas de computo, para evitar un mal funcionamiento durante el proceso para el cual se utilizan.

Marmita

Una marmita es una olla de metal cubierta con una tapa que queda totalmente ajustada. Se utiliza generalmente a nivel industrial para procesar alimentos nutritivos,

mermeladas, jaleas, chocolate, dulces y confites, carnes, bocadillos, salsas, etc. Adems sirven en la industria qumica farmacutica.

Microorganismos patgenos

Originan enfermedad en el ser vivo que parasitan o lo intoxican con sus toxinas.

Molino coloidal

Homogeniza al punto de formar una partcula muy pequea, del orden del micrn, distribuyndolas de manera

uniforme. Subdivide la partcula de grasa o crema, dispersndola en un medio acuoso. Las mezclas basadas en cremas, obtienen un aspecto ms brilloso y consistente. Potencia

XV

los agentes de batido, emulsiones para el cutis, jarabes, helados, mayonesa, salsas tipo ketchup, mostaza, etc. Ideal para la

fabricacin de diversos jugos de fruta, licuados, leches de soja.

Potencia de ingredientes activos

Es el grado de concentracin o la cantidad de activo que contiene un medicamento.

RTCA

Reglamentos tcnicos para Centroamrica, derivados del ente internacional ICH on los

(International Harmonisation),

Conference que dictaminan

reglamentos para la regin que regulan las especificaciones de la industria farmacutica en general.

Soluto

Se llama soluto a la sustancia minoritaria (aunque existen excepciones) en una

disolucin o, en general, a la sustancia de inters. Lo ms habitual es que se trate de un slido que es contenido en una solucin lquida (sin que se forme una segunda fase)

XVI

LISTA DE ABREVIATURAS

PAM

Prcticas adecuadas de Manufactura

HPLC

High Performance Liquid Cromatography (Cromatografa Lquida de Alta Resolucin)

RTCA

Reglamentos tcnicos para Centroamrica

OMS

Organizacin Mundial de la Salud

XVII

XVIII

RESUMEN

Para cumplir con los requerimientos del mercado actual como la efectividad del propsito medicinal as como la legalidad sanitaria, es indispensable tener productos que durante su proceso de fabricacin y anlisis se mantengan dentro de los parmetros de control que aseguren la calidad del mismo; adems de que permite mantener costos bajos de operacin lo que se refleja en mayores ingresos y optimizacin de los tiempos de cuarentena del producto antes de que salga a la venta.

Por ello, se desarrollan las validaciones de proceso y anlisis, que permiten documentar y controlar que todas las operaciones de equipos, personal, y proceso se mantengan dentro de las especificaciones que exigen las normas regulatorias y que llevan a tener productos de buena calidad.

En el siguiente informe se presentan los resultados que se obtuvieron, del anlisis del proceso y el mtodo de cuantificacin que confirman que el producto cumple con los requerimientos que lo hacen apto para su uso, adems que se puede utilizar como gua para la validacin de otros procesos dentro de la rama farmacutica.

XIX

XX

OBJETIVOS

General

El presente documento tiene como objetivo describir de forma general todas las tareas y lneas maestras de actuacin para abordar, realizar, dirigir, y completar, de forma documentada, la validacin del proceso de fabricacin de la crema antimictica con Clotrilmazol en el rea de preparaciones de Lquidos y Semislidos. Permitiendo establecer as la evidencia documentada que el proceso es confiable, reproducible y efectivo para la produccin de esta forma farmacutica.

Especficos

1.

Presentar un procedimiento y tcnica de fabricacin apropiados que van a proporcionar resultados confiables de un sistema de control total de calidad en la crema antimictica.

2.

Proporcionar con la validacin de mtodo una herramienta para la verificacin que es un proceso seguro de fabricacin.

XXI

XXII

INTRODUCCIN

Dentro de la industria farmacutica existe una serie de normativas que buscan garantizar la obtencin de productos de calidad. Estas normativas son conocidas como las Prcticas adecuadas de Manufactura (PAM) o Buenas Prcticas de Manufactura, o por sus siglas en ingls GMP.

La OMS define a las GMP como el rea de garanta de calidad que asegura que los productos se fabriquen en forma uniforme y controlada, de acuerdo con las normas de calidad adecuadas al uso que se pretende dar a los productos, y conforme a las condiciones exigidas para su comercializacin. Las GMP abarcan todos los aspectos involucrados directa o indirectamente en la fabricacin de un producto en forma adecuada (produccin, control de calidad, almacenamiento transporte, etc.), junto con el personal y equipos capacitados y calificados que participan en las distintas labores. Tambin incluyen la documentacin y registros de cada proceso, permitiendo rastrear la informacin en todas las etapas a un producto.

Dentro de las GMP se encuentran incluidas las validaciones, herramientas esenciales que permiten establecer que los distintos procesos y procedimientos estn bajo control.

Validacin se puede entender como el establecimiento de la evidencia documental de que un procedimiento conducir, con un alto grado de seguridad, a la obtencin de resultados precisos y exactos, dentro de las especificaciones y los atributos de calidad previamente establecidos.

XXIII

De ah radica la importancia de este trabajo, ya que permitir dar a conocer los pasos necesarios de las validaciones de proceso y de la cuantificacin del producto, y que herramientas estadsticas se utilizan para confirmar que el producto se encuentra dentro de los parmetros designados.

XXIV

1. ANTECEDENTES

1.1

Buenas prcticas de manufactura de productos farmacuticos (BPM)

Este es un cdigo que rige el ensayo de sustancias qumicas, con el fin de obtener datos acerca de sus propiedades y asegurar su inocuidad para el ser humano y para el medio ambiente. Difiere de la descripcin de las prcticas adecuadas de laboratorio en los laboratorios de control gubernamentales, contenida en el Informe 32 del Comit de Expertos de la OMS sobre Especificaciones para las Preparaciones Farmacuticas (OMS, Serie de Informes Tcnicos, No 748, 1987). Dentro del concepto de garanta de la calidad, las Buenas Prcticas de Manufactura constituyen el factor que asegura que los productos se fabriquen en forma uniforme y controlada, de acuerdo con las normas de calidad adecuadas al uso que se pretende dar a los productos, y conforme a las condiciones exigidas para su comercializacin. Las reglamentaciones que rigen las BPM tienen por objeto principal disminuir los riesgos inherentes a toda produccin farmacutica que no pueden prevenirse completamente mediante el control definitivo de los productos. Esencialmente, tales riesgos son de dos tipos: contaminacin cruzada (en particular, por contaminantes imprevistos) y confusin (causada por la colocacin de etiquetas equivocadas en los envases). El texto de las BPM exige: a) Que todos los procesos de fabricacin se definan claramente, se revisen sistemticamente a la luz de la experiencia, y se compruebe que son el medio de fabricar productos farmacuticos que tengan la calidad adecuada para cumplir con las especificaciones.

1

b) Que se comprueben las etapas crticas de los procesos de fabricacin y todo cambio significativo que se haya introducido en dichos procesos. c) Que se disponga de todos los medios necesarios donde las BPM intervienen: i) Produccin ii) Control de Calidad iii) Instalaciones iv) Equipos y servicios adecuados v) Materiales vi) Documentacin vii) Personal adecuadamente calificado y capacitado viii) Autoinspecciones ix) Almacenamiento x) Reclamos xi) Investigacin de no conformidades xii) Validacin d) Que las instrucciones y procedimientos se redacten en un lenguaje claro e inequvoco, que sea especficamente aplicable a los medios de produccin disponibles. e) Que los operadores estn capacitados para efectuar correctamente los procedimientos. f) Que se mantengan registros (en forma manual o por medio de aparatos de registro) durante la fabricacin, para demostrar que todas las operaciones exigidas por los procedimientos e instrucciones definidas han sido en realidad efectuados y que la cantidad y calidad del producto son las previstas; cualquier desviacin significativa debe registrarse e investigarse exhaustivamente.

2

g) Que los registros referentes a la fabricacin y distribucin, los cuales permiten averiguar la historia completa de un lote, se mantengan de tal forma que sean completos y accesibles. h) Que el almacenamiento y distribucin de los productos sean adecuados para reducir al mnimo cualquier riesgo de disminucin de la calidad. i) Que se establezca un sistema que haga posible el retiro de cualquier producto, sea en la etapa de suministro o de venta. j) Que se estudie toda queja contra un producto ya comercializado, como tambin que se investiguen las causas de los defectos de calidad, y se adopten medidas apropiadas con respecto a los productos defectuosos para prevenir que los defectos se repitan.

3

4

2. MARCO TERICO

2.1

Conceptos de validacin

Histricamente, la calidad del producto era asegurada por la manufactura del producto, seguida de la evaluacin de muestras de producto terminado tomadas al azar por el departamento de control de calidad. El anlisis de las materias primas, productos en proceso y componentes de empaque proveen garanta adicional de la calidad del producto terminado. Las visitas de inspeccin y la auditoria a los proveedores tambin son muy tiles. Sin embargo, sin el estudio y evaluacin de las relaciones entre materias primas y su proceso de manufactura y de los productos resultantes, la calidad de los productos terminados no puede ser completamente asegurada. Esto trae al concepto de validacin del proceso total; desde las materias primas a los procesos de manufactura, a sistemas relacionados y un circulo completo hasta el anlisis del producto terminado. Validacin es el proceso de juntar todos estos aspectos; de conocer los lmites de operacin del proceso y de asegurar que ese proceso se mantiene dentro de esos lmites; de saber que el proceso es efectivo. Esencialmente, validacin es sentido comn organizado y bien documentado. Validacin es conocer tan bien como se pueda, la calidad de todas y cada una de las unidades producidas. Es calidad que se elabora en cada segmento del ciclo de produccin; no se analiza o se inspecciona o se segrega. La FDA define validacin como:

5

El establecimiento de evidencia documentada la cual provee un alto grado de garanta de que es un proceso especfico que producir consistentemente un producto que cumple con sus especificaciones y atributos de calidad predeterminados. La Asociacin de Fabricantes de Productos Farmacuticos de los Estados Unidos (PMA) define validacin como: Establecimiento de evidencia documentada de que un proceso hace lo que implica que debe hacer. Existen muchas definiciones, sin embargo, los elementos claves, comunes a todas ellas son la determinacin de lo que el proceso intenta hacer, el diseo de una serie de experimentos para demostrar que ese proceso cumple con las intenciones e igualmente importante, el documentar de que el trabajo fue hecho. Existen dos formas bsicas de validacin de procesos: Prospectiva Retrospectiva La validacin prospectiva debe ser usada antes de producir un producto totalmente nuevo o cuando hay cambios en el proceso de manufactura que puedan afectar atributos bsicos del producto tales como identidad o uniformidad. La validacin retrospectiva debe ser usada en aquellos casos en que el proceso ha sido usado, sin cambios, por un perodo y existen datos acumulados, suficientes y adecuados, disponibles para evaluar la efectividad del proceso. Como ejemplo de procesos que podran ser validados retrospectivamente en forma exitosa se pueden

6

mencionar las operaciones de mezclado, secado, molienda, tableteado, encapsulacin y ciertas operaciones de llenado. Existe un tercer tipo de enfoque de validacin, el de la concurrente o como fue definida por la FDA aceptabilidad de anlisis de producto, la cual debe ser usada para la manufactura de un lote nico. En diversas empresas estn presentes ests tres, aunque en los pases ms avanzados, algunas han dejado de tener validez. En forma global y considerando antecedentes y nuevas perspectivas se puede entonces hablar de cinco tipos de validacin. Las otras dos son: Validacin esbelta Validacin en tiempo real, mejor conocida como Verificacin continua de la calidad.

2.1.1 Validacin esbelta

Es el estudio que se lleva a cabo para demostrar y establecer una evidencia documentada de que un proceso hace lo que esta previsto basado en resultados que consideran en su estudio la identificacin de atributos crticos de calidad. La validacin esbelta viene de la mano con toda la corriente lean (esbelto) que se ha manejado en los ltimos tiempos. Se mencionan compras esbeltas, procesos y manufactura esbelta, almacenes esbeltos, entre otros. La validacin no poda ser la excepcin. Este nuevo concepto considera los grandes errores que se han cometido al realizar la validacin, en su parte ms dbil, la documentacin del proceso.

7

Durante la interpretacin de la validacin, la industria pens que tena que contar con una evidencia documental exagerada para demostrar el cumplimiento. Se confundi el trmino slido con muchas pginas y es comn ver que la documentacin relacionada con la validacin es muy extensa y en ocasiones con pruebas y documentos que no se enfocan en la parte sustancial Existan documentos que hacan referencia a pruebas sin un objetivo concreto, o con base a pruebas no criticas o de carcter informativo, lo cual en ocasiones causaba que la validacin de procesos se hiciera muy tediosa y larga e incluso se llegar a perder el inters en la misma. Considerando lo anterior, este concepto surge de la industria, con el objetivo de cumplir sin tener que salirse de los lmites. Con las nuevas corrientes que enfatizan la calidad por diseo (quality by design) y la importancia del desarrollo farmacutico, las empresas han vuelto sus ojos al origen del producto y a la identificacin de aquellos factores que realmente afectan la calidad del mismo, denominndolos atributos crticos de calidad. Estos atributos crticos de calidad sirven de base para el desarrollo de la validacin, puesto que esta ltima se tiene que centrar en el control de dichos atributos para garantizar el cumplimiento de las especificaciones. Por tanto, es posible conjugar la validacin prospectiva y/o concurrente con la validacin esbelta.

2.1.2

La verificacin continua de la calidad

Es el estudio que se lleva a cabo para demostrar y establecer una evidencia documentada de que un proceso hace lo que esta previsto basado en los resultados obtenidos lote a lote. Este concepto tambin de aplicacin reciente, refleja hacia donde se tendr que migrar tarde o temprano. Su fundamento tiene bastante lgica, basado en todos los problemas que tanto las empresas como las entidades sanitarias han reportado y que en ocasiones le han restado mritos al valor de la validacin. 8

En resumen este tipo validacin es: Trabajar bien SIEMPRE Ser consistente Cumplir con las especificaciones Es validar en tiempo real

Beneficios y Alcances: Rpida Bajo cultura lean Bajo enfoque de riesgo Permite formalizar Permite identificar restricciones Bajo los alcances de RAP (Revisiones Anuales de Producto)

2.2

Procedimiento de validacin

2.2.1

Estructura bsica Revisin de procedimiento Calibracin Calificacin Protocolo de validacin Documentacin de validacin Revalidacin

A continuacin se describen cada una de estas actividades:

9

2.2.1.1

Revisin de procedimientos

Es necesaria la revisin y la actualizacin de: Procedimientos estndar de operacin Procedimientos y manuales de operacin y manejo de equipo Planos de instalacin Procedimientos y programas de mantenimiento Procedimientos y programas de seguridad Procedimientos y programas de capacitacin personal

2.2.1.2

Calibracin

Es el mtodo cientfico que se usa para demostrar la precisin, reproducibilidad y exactitud de cualquier instrumento de medicin. Es la comparacin de un estndar o instrumento de exactitud conocida con uno de menor exactitud para confirmar, determinar o eliminar, mediante un ajuste, cualquier variacin en la exactitud del instrumento que es comparado.

2.2.1.2.1

Exactitud

Es el trmino que permite conocer la confiabilidad de una medicin realizada de acuerdo con una metodologa especfica (la exactitud se corrige con la calibracin).

10

2.2.1.2.2

Precisin

Es el trmino que permite conocer la confiabilidad y efectividad de una medicin realizada de acuerdo al instrumento utilizado y sus caractersticas inherentes.

2.2.1.2.3

Contenido de un programa de calibracin por pasos

Paso I Sistemas de numeracin para identificar todos los instrumentos que necesitan ser calibrados. Archivo del historial del instrumento. Archivo recordatorio del calendario de nueva calibracin. Certificado de calibracin. Etiquetas de calibracin. rdenes de calibracin. Cuaderno de datos sobre calibracin

Paso II Contar con los manuales de procedimientos de operacin

Paso III El programa de calibracin deber ser administrado por gerencia de aseguramiento de la calidad La calibracin deber ser de manera ordenada y continua La calibracin deber ser debidamente documentada 11

2.2.1.3

Calificacin

Antes de validar cualquier proceso, debemos estar seguros que todo aquello que va a intervenir para su realizacin, est debidamente calificado. La calificacin es la demostracin documentada de la capacidad de un equipo y/o sistema de operar consistentemente dentro de lmites preestablecidos para un proceso. Calificar significa evaluar las cualidades o caractersticas de todo aquello que pueda afectar la CALIDAD DE CONFORMANCIA del producto, es decir: los materiales, los equipos, los sistemas e instalaciones, el personal y los procedimientos de operacin, en base a exigencias establecidas previamente.

2.2.1.3.1

Calificacin de instalaciones

Son aquellas pruebas que permiten establecer que el equipo de proceso y los sistemas auxiliares son capaces de operar consistentemente dentro de sus lmites y tolerancias establecidas. Se evalan los pisos, las paredes, techo, ventanas, puertas, drenajes, instalaciones elctricas, sistema de ventilacin, sistema de coleccin de polvos, etc. Para calificar una instalacin tambin se tiene que considerar las condiciones de seguridad del rea, as como, realizar anlisis microbiolgicos.

2.2.1.3.2

Calificacin de equipo

Son aquellas pruebas que permiten evaluar las cualidades o caractersticas del equipo y verificar que stas cumplan con los requerimientos de la operacin que se va a realizar en dicho equipo. 12

Se evala la funcionalidad del mismo, contando con los procedimientos de operacin, as como, un programa de mantenimiento preventivo. Pasos a seguir para calificar el equipo: Conocer el proceso a validar Seleccionar el equipo Identificar el equipo, a travs de un listado donde se le asigne un cdigo a cada uno de ellos Llenar un formato de informacin bsica del equipo Determinar requerimientos de mantenimiento, calibracin y ajuste Identificar partes crticas Establecer pruebas y criterios de aceptacin Incluir la peor condicin Identificar causas de falla Identificar partes de repuesto Documentar y evaluar

2.2.1.3.3

Calificacin de personal

Son aquellas pruebas que permiten evaluar el comportamiento del personal y entrenarlo mediante un programa de adiestramiento. Las fases de un Programa de Adiestramiento son los siguientes: Orientacin Historia de la Empresa: Puntos bsicos de su filosofa como empresa Sus instalaciones (pasado, presente y futuro)

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Los productos Sealamiento sobre los tipos de productos fabricados y la lnea lder de la empresa La responsabilidad de fabricar medicamentos La organizacin de la planta Layout Flujo de produccin Actividades conexas: Control y aseguramiento de la calidad Mantenimiento (Ingeniera) Higiene y Seguridad Desarrollo Prcticas adecuadas de Manufactura (PAM) Historia y evolucin Regulacin vigente Filosofa de los PAM (Asociacin de fabricantes de productos farmacuticos de los Estados Unidos) Higiene y seguridad Regulacin al respecto Las polticas de la empresa al respecto Entrenamientos especficos

14

2.2.1.3.4

Entrenamiento departamental

Orientacin Departamental Normas y procedimientos generales Trabajo especfico. Especificaciones y procedimientos involucrados Documentos relacionados

2.2.1.3.5

Entrenamiento anual

Refrescar conceptos generales Reforzar aspectos especficos Actualizar con cambios e innovaciones

2.2.1.3.6

Documentacin

Todo el programa debe ser dividido para cada tipo de posicin Cada trabajador debe tener un registro con el entrenamiento que ha recibido Debe evaluarse los resultados del entrenamiento de manera peridica, objetiva y cuantificable Debe contarse con reforzamientos especficos cuando las evaluaciones sealen su necesidad. Una buena documentacin muestra: La existencia de lo que se ha realizado y por qu Especificaciones Procedimientos de cada equipo y cada sistema Mtodos y procedimientos de operacin de las pruebas de laboratorio y de las operaciones en lnea Control de los diagramas de Ingeniera

15

rdenes de trabajo de mantenimiento y servicio Pruebas de Ingeniera

Los documentos deben: Estar donde se les necesita Usarse por quien debe Usarse sin aplicar cambios que no estn autorizados

Gua de documentacin para la calificacin de sistemas

2.2.1.3.7

Calificacin de sistemas

Equipo Definicin: tipo, marca, modelo, serie, historial, localizacin, capacidad, motor, material de fabricacin Dimensiones: capacidad mxima y mnima en volumen Accesorios: definicin, historial, material de fabricacin Caractersticas generales de funcionamiento (direccin de rotacin) Verificacin de funcionamiento de acuerdo a diseo y a recomendacin del fabricante (velocidad, presin, temperatura), criterio de aceptacin Calibracin de sistemas de medicin criterio de aceptacin procedimiento por equipo (frecuencia) Procedimiento de limpieza criterios de aceptacin Procedimientos de operacin

Instalaciones Ubicacin, historial

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Condiciones de temperatura y humedad ambiental (registros), criterios de aceptacin Servicios, agua, aire, extraccin (procedimiento de uso y verificacin), criterio de aceptacin Espacio, aislamiento, flujo y direccin de aire, flujo de materiales, flujo de personal Control microbiolgico ambiental Mtodos de coleccin de datos

Materiales Mtodos de muestreo Especificaciones de control criterios de aceptacin -, evaluacin Calidad del agua Caracterizacin fsica Control microbiolgico Funcionalidad Procedimientos de manejo, almacenamiento y surtido (recipientes, integridad, sellado, etc.) Diferentes lotes del mismo proveedor Proveedor, historial, grado Potencia de ingredientes activos Entrenamiento entendimiento-, evaluacin Procedimientos de comportamiento Historial

Personal

Producto Atributos y especificaciones criterio de aceptacin

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Tamao del lote Mtodos de muestreo Mtodo de fabricacin, escala de produccin Sistema de almacenamiento a granel Procedimiento de llenado

Un recurso valioso para calificar es la auditoria interna, en la que intervienen las reas responsables de cada seccin que se desea calificar. Toda validacin que se efectu en condiciones distintas a las especificadas estar seriamente limitada y no permitir controlar el proceso en el futuro, ni conocer las fuentes reales de posible variacin, lo que es precisamente el fundamento de la validacin de procesos.

2.2.1.4

Protocolo de validacin

El protocolo de validacin es un documento que delinea los pasos que debemos seguir para validar. Es un plan escrito que propone como se va a llevar a cabo la validacin, e incluye los parmetros de anlisis, las caractersticas del producto, el equipo de produccin y los parmetros para decidir si los resultados de los anlisis son aceptables. El desarrollo de un protocolo de validacin constituye el primer paso en cualquier proceso de validacin. La importancia de este primer paso es absoluta, ya que es necesario el establecer por adelantado el programa, definiendo que es lo que se va a hacer, como se van a manejar los datos y cuales son los resultados esperados. Los protocolos pueden tener muchas formas diferentes, pero todos deben contener esencialmente la misma informacin:

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-

El objetivo El propsito Caractersticas pertinentes de diseo del proceso o del equipo Procedimiento real a seguir durante la validacin Descripcin completa de cualquier prueba requerida Criterios de Aceptacin Resultados esperados Es muy deseable que los protocolos se desarrollen con una base

multidisciplinaria de tal manera que representen diferentes perspectivas, todas enfocadas hacia la realizacin del objetivo final, el cual es el de operar dentro de un estado validado de control. Tpicamente las disciplinas envueltas son ingeniera, manufactura y control de calidad, adicionalmente, mantenimiento, investigacin y desarrollo, servicios tcnicos y otras disciplinas claves pueden tambin participar y contribuir al estudio. Tambin es deseable envolver al departamento de compras y al de procesamiento de datos en el caso de sistemas automatizados con computadoras.

2.2.1.4.1

El objetivo

Es un enunciado sobre lo que se trata de obtener con la validacin, mostrando que un sistema est efectivamente controlando un proceso determinado dentro de los limites necesarios preestablecidos para la operacin satisfactoria del sistema. Por ejemplo, para cumplir con requerimientos de proceso, un deionizador de agua debe producir cierto volumen de agua con cierta conductividad; debe ser regenerado a intervalos especficos y debe ser sanitizado peridicamente para reducir los niveles microbianos. El objetivo es el de asegurar que estos parmetros se cumplan.

19

2.2.1.4.2

El propsito

El propsito del proceso o equipo debe tambin incluirse en el objetivo del protocolo. El protocolo debe describir lo que el proceso hace y la manera en que es afectado por procesos anteriores y como a su vez afecta a procesos posteriores.

2.2.1.4.3

Caractersticas

pertinentes

de

diseo

del

proceso o del equipo

Debe contener informacin especfica cubriendo los procedimientos de operacin normal, diseo, caractersticas, materiales de construccin y una serie completa de especificaciones o parmetros de operacin: incluye velocidad de flujo, temperaturas, presiones y ciclos cuando sea aplicable. Estos deben incluir los lmites de operacin normales, mximos y mnimos, as como, tambin las consecuencias que se esperan cuando dichos lmites se exceden. Las especificaciones deben incluir los requerimientos de calidad de las materias primas, el rendimiento de procesos o equipo y una anotacin sobre como stos estn interrelacionados. Cuando sea necesario, tambin debe anotarse la energa, localizacin y requerimientos ambientales. esperan si dichos requerimientos no se cumplen. Los requerimientos de mantenimiento deben ser detallados e incluir de ser posible las consecuencias que se Tambin se debe incluir una descripcin completa de componentes desechables tales como filtros, y de sustitutos aceptables. Indudablemente, si un sistema nuevo va a ser validado, este aspecto de la validacin requiere muchos pensamientos y revisiones por adelantado y debe ser decidido en la etapa de diseo del sistema.

20

2.2.1.4.4

Procedimiento real de la validacin

Esta seccin cubre los experimentos y pruebas a ser realizados, los cuales demostrarn que el proceso o equipo funciona de una manera satisfactoria y reproducible. Idealmente, esta seccin debe estar construida en tal forma que provea prueba cientficamente vlida de que el sistema o equipo opera de la manera en que est supuesto a hacerlo. Una de las mejores maneras de realizar esto es subdividir el sistema en una serie de secciones menores, trabajables, las cuales tienen impacto sobre el sistema en total. De esta manera es ms fcil determinar lo que es importante y lo que no es importante; cuales variables son dependientes y cuales son independientes y la determinacin de cules son los sistemas, subsistemas o parmetros indicativos del funcionamiento correcto del sistema completo, proceso o equipo. De la misma manera que con el concepto de validacin total, es muy importante que varios departamentos participen y aporten sus puntos de vista en esta etapa. As tenemos que ingeniera, manufactura y control de calidad deben envolverse en la tarea de decidir lo que es importante y lo que no lo es, cules segmentos son realmente crticos, que parmetros deben ser vigilados y en que orden deben completarse las varias etapas del proceso de validacin. La seccin ms importante del protocolo es el diseo experimental, si ste es incompleto o dbil, la validez de los resultados puede ser cuestionable y por lo tanto compromete la validacin entera. El procedimiento debe ser lgico y cada paso debe conducirse al tiempo apropiado. Por ejemplo, sera impropio calibrar el equipo al final de la validacin, las calibraciones deben ser al principio de la validacin y recomprobadas al final; si se omite un parmetro, funcin o proceso el cual es crtico, esto podra anular la validacin entera. La validacin a trabajar ser una de tipo concurrente debido a que es la que ms comnmente se utiliza en la actualidad, esto debido a que permite validar procesos

21

durante la produccin de rutina; con lo que se trabajar la manufactura de 3 lotes, los cuales pueden ser liberados si cumplen con las especificaciones, se har una estadstica de los datos para realizar el informe de la validacin.

2.2.1.4.5

Pruebas requeridas

Las pruebas requeridas pueden variar con cada sistema o proceso y dentro de razones cientficas, deben ser nicamente limitadas por la validez de los resultados, obtenidos para soportar las conclusiones en que se basan dichos resultados. De acuerdo a la RTCA (Informe 75, para Guatemala) los parmetros a evaluar en una crema son los siguientes: Llenado mnimo Identificacin del principio Activo Concentracin del principio Activo Lmites Microbiolgicos Existen otros parmetros, pero para los intereses del proceso de fabricacin slo se tomarn en cuenta estos.

2.2.1.4.6

Criterios de aceptacin

Estos son las especificaciones que deben ser cumplidas si el sistema o proceso est funcionando en forma adecuada para producir la calidad de producto deseada. Las pruebas experimentales y el procedimiento de validacin se usan para verificar las condiciones reales de operacin del proceso. Si stas se encuentran dentro de las especificaciones previamente establecidas, entonces el criterio de aceptacin se ha 22

cumplido y el proceso puede considerarse validado. Si los valores obtenidos no estn dentro de las especificaciones se puede tomar varias acciones. El sistema o proceso puede ser fsicamente modificado para producir el cambio deseado, los parmetros de operacin pueden ser ajustados o los criterios de aceptacin o especificaciones de proceso pueden ser cambiados de tal manera de que los resultados de la validacin caigan dentro del criterio de aceptacin modificado. Las especificaciones a considerar para aceptar si el proceso es vlido o no son las enunciadas a continuacin: Homogeneidad Concentracin del Activo Temperaturas del Proceso de Fabricacin

2.2.1.4.7

No conformidades

Si el protocolo fue diseado en forma apropiada, la probabilidad de que esta situacin ocurra, es remota y cuando ocurre es muy probable que se deba a una omisin o uso de datos equivocados en alguna fase del proceso o sistema. Esto quiere decir que es muy importante que el protocolo, las pruebas, los resultados y los criterios de aceptacin sean minuciosamente revisados antes de hacer alguna decisin concerniente a acciones a ser tomadas para resolver el problema en el caso de no cumplir con el criterio o los criterios de aceptacin. El plan de accin correctiva debe prepararse nicamente despus de descubrir la causa del fallo. En ocasiones, puede ser necesario repetir la validacin, pero en todo caso la causa o causas que produjeron el fallo original deben ser suficientemente documentadas. Esto sirve para prevenir la repeticin de situaciones similares en el

23

futuro y tambin proveen justificacin para aceptar parte de los datos del protocolo original cuando esto sea posible. En la prctica, es muy til consultar con la funcin de investigacin y desarrollo quienes pueden aportar ayuda valiosa en estos casos. Para el caso del proceso de fabricacin de la crema antimictica se puede trabajar en base a un procedimiento previamente elaborado que abarque los pasos a tomar en el caso de encontrar un dato fuera de especificacin, tales como: Producto con apariencia no homognea, revisar los registros de control y determinar si requieren de un reproceso. Concentracin del producto no est dentro de las especificaciones, abrir un documento de no conformidades donde se registre cada una de las actividades que permitieron la fabricacin del producto; adems de los pasos realizados para analizar el producto, revisin de registros de equipo si hubieran fallas, registros de materiales utilizados para corroborar si eran los adecuados, y con ello dictaminar si aplica rechazo del producto, reproceso o aprobacin del mismo. Para resumir, el protocolo de validacin es un documento que describe lo que se intenta lograr con el proceso y de que manera, que equipo de proceso debe ser utilizado, el diseo y la construccin de ese equipo, las pruebas requeridas para demostrar que el equipo y proceso funcionaron apropiadamente y los criterios de aceptacin que deben cumplirse.

2.2.1.5

Documentacin de validacin

La documentacin de la validacin debe incluir el protocolo de validacin, todos y cada uno de los procedimientos a los cuales se hace referencia, procedimientos de operacin estndar, y especificaciones, los resultados obtenidos y recolectados durante la validacin, resmenes de datos resultantes para evaluaciones estadsticas, todos los 24

resultados de evaluaciones realizados por control de calidad, ingeniera, manufactura, mantenimiento y desarrollo de proceso y finalmente, una revisin y certificacin firmada por cada uno de los departamentos y/o individuos responsables de que todos los criterios de aceptacin se han cumplido y la validacin es completa.

2.2.1.5.1

Control de cambios

La documentacin de validacin es un registro completo de la validacin, el cual de ser necesario, puede ser usado para recrear la validacin original en el futuro y determinar si han sucedido algunos cambios con el tiempo. Tambin puede ser usado como prueba de que un proceso, sistema o equipo ha sido validado y es apropiado para su uso. Puede establecer y probar efectividad y puede ser usado como base para programas de revalidacin a intervalos peridicos. Por ello es necesario llevar un registro de cualquier cambio que se haya suscitado a lo largo del proceso realizado a lo largo de un tiempo estipulado, es decir, definido por el programa de revalidacin del proceso, y poder observar que cambios se hicieron y su influencia en las caractersticas del producto final.

2.2.1.6

Revalidacin

Al completar la validacin tenemos la garanta de que el sistema, proceso o equipo est funcionando de una manera aceptable y reproducible y se puede asegurar de que cualquier lote de producto producido de la misma manera cumplir con todas las especificaciones y ser consistente con lotes producidos antes y despus. Desafortunadamente, an no se puede olvidar todo, ya que los ajustes de instrumentos de medida pueden cambiar, los equipos se desgastan, los procedimientos se modifican y las personas tienen tendencia a volverse complacientes. Cuando haya cualquier tipo de

25

cambio en el proceso o en el equipo que impacte el proceso de validacin ya efectuado, entonces hay que Revalidar.

2.3

Validacin de mtodo

La validacin de un mtodo analtico es el proceso, a travs del cual se establece, por medio de estudios de laboratorio, que las caractersticas desarrolladas por el mtodo cumplan los requerimientos de la aplicacin analtica en cuestin (USP XXV). El desarrollo analtico caracterstico que puede considerarse es el enlistado en la tabla I. De acuerdo a algunas opiniones, ste puede diferir con respecto a la terminologa y uso. Cada caracterstica desarrollada es definida como una delineacin tpica de procedimientos que pueden ser medidos.

Tabla I Tpicas caractersticas analticas usadas en la validacin de mtodoSelectividad Linealidad Precisin del Mtodo Precisin Interna Lmites de Deteccin Lmites de Cuantificacin Exactitud Precisin del Equipo Rango

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2.3.1

Caractersticas de desarrollo analtico

2.3.1.1

Selectividad

Es la habilidad de asegurar inequvocamente la presencia del analito (activo) y sus componentes, ya sea impurezas, productos de degradacin y la matriz de componentes. implicaciones: Para los mtodos de ensayo, la selectividad enuncia las siguientes

2.3.1.1.1

Prueba de identificacin

Asegura la identidad del analito.

2.3.1.1.2

Prueba de pureza

Permite que todo procedimiento analtico desarrollado pueda obtener el contenido de impurezas de un analito. (Por ejemplo, sustancias relacionadas, lmite de metales pesados, lmite de impurezas orgnicas voltiles, etc.).

2.3.1.1.3 Ensayo

Provee un resultado exacto, el cual permite detectar el contenido o potencia del analito en una muestra.

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2.3.1.2

Linealidad

La linealidad de un mtodo analtico es su habilidad de obtener resultados de la prueba que son directamente proporcionales, o de una bien definida transformacin matemtica, proporcionales a la concentracin del analito en muestras dentro del rango dado.

2.3.1.3

Precisin de mtodo

La precisin de un mtodo analtico es el grado de concordancia entre los resultados individuales de la prueba cuando el mtodo es aplicado repetidamente a mltiples muestreos de una muestra homognea. Puede ser definida como la desviacin estndar o la desviacin estndar relativa (coeficiente de variacin) de una serie de mediciones. Puede ser una medida del grado de reproducibilidad o de repetibilidad del mtodo analtico bajo condiciones normales de trabajo.

2.3.1.4

Precisin interna

Es el grado de reproducibilidad de los resultados del prueba obtenidos por el anlisis de las mismas muestras bajo una variedad de condiciones, tales como laboratorios diferentes, analistas diferentes, instrumentos diferentes, diferentes lotes de reactivos, diferentes tiempos transcurridos de ensayo, diferentes temperaturas de ensayo, diferentes das, etc. Esta es normalmente expresada como la ausencia de influencia sobre los resultados de la prueba de las variables de operacin y medio dentro del cual se trabaja el mtodo de anlisis. Precisin interna es una medida de reproducibilidad de los resultados de la prueba bajo la variacin en condiciones normales esperadas de laboratorio a laboratorio y de analista a analista.

28

2.3.1.5

Lmite de deteccin

Esta es una caracterstica de las pruebas lmite. Es la cantidad mnima de analito en una muestra que puede ser detectado, pero no necesariamente cuantificado, bajo las condiciones experimentales ordinarias. Esto es simplemente obtener el limite en que la cantidad de analito esta arriba o debajo de cierto nivel. El lmite de deteccin es usualmente expresado como concentracin de analito en la muestra.

2.3.1.6

Lmite de cuantificacin

Es una caracterstica de los ensayos cuantitativos para niveles bajos de componentes en matrices de muestra, tal como impurezas en substancias bulk (a granel) y productos de degradacin en frmacos terminados. Es la cantidad mnima de analito en una muestra que puede ser determinado con precisin aceptable y exactitud bajo condiciones experimentales estables. Tambin el lmite es expresado en concentracin de analito en la muestra.

2.3.1.7

Exactitud

La exactitud de un mtodo analtico es la cercana a un valor verdadero de los resultados de la prueba obtenidos por el mtodo. La exactitud de un mtodo analtico puede ser establecido a travs de su rango.

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2.3.1.8

Precisin del equipo

La precisin del equipo es una medida de su capacidad para mantener sin efecto por pequeas pero deliberadas variaciones en los parmetros del mtodo y proveer una indicacin de su seguridad durante el uso normal del mismo.

2.3.1.9

Rango

Es el intervalo entre los niveles altos y bajos de analito (incluidos estos niveles) donde ha sido demostrado que se determina con un nivel adecuado de precisin, exactitud y linealidad lo usado en el mtodo tal como se escribi. El rango de ensayo para un producto farmacutico, segn la Farmacopeia Estadounidense es de 80% a 120% de la concentracin de la prueba.

2.3.2

Elementos requeridos de los datos para validacin de mtodo

Considerando la variedad de ensayos, es lgico que diferentes mtodos de ensayo requieran diferentes esquemas de validacin. Estos esquemas son como siguen:

2.3.2.1

Categora I

Mtodos analticos para la cuantificacin del componente principal de sustancias a granel o ingredientes activos (incluyendo preservativos) en producto terminado.

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2.3.2.2

Categora II

Mtodos analticos para la determinacin de impurezas en sustancias a granel o componentes de degradacin en producto terminado. Estos mtodos incluyen ensayos cuantitativos y prueba lmite.

2.3.2.3

Categora III

Mtodos analticos para la determinacin de caractersticas de desenvolvimiento (esto es disolucin, liberacin del activo).

2.3.2.4

Categora IV

2.3.2.4.1

Prueba de identificacin

Para cada categora de ensayo, se necesita diferente informacin analtica, para ello ver tabla II:

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Tabla II Elementos de datos necesarios para validacin de mtodo

Ensayo Categora II Caractersticas Ensayo de Desarrollo Analtico Exactitud Precisin Especificidad Lmite de Deteccin Lmite de Cuantificacin Linealidad Rango Si Si Si No Si Si Si No * No Si Si * Si * * No No Si No Categora I Cuantitativo Pruebas Lmite Ensayo Categora III Ensayo Categora IV

No Si Si

Si Si Si

No No *

* * *

No No No

* Puede requerirse, dependiendo de la naturaleza de la prueba especfica.

2.4

Cromatografa

(USP, 2004) La cromatografa es un conjunto de tcnicas de separacin. Mezclas complejas se separan en sus componentes individuales por diferencias de distribucin entre 2 fases: a. La fase mvil b. La fase estacionaria

32

La fase mvil puede ser: a. Un gas, en cuyo caso se trata de cromatografa de gases. b. Un lquido, en cuyo caso tenemos cromatografa lquida. A su vez, la cromatografa liquida se divide en: a. Cromatografa en columna b. Cromatografa de superficie: de capa fina y de papel. La cromatografa en columna admite cinco tipos principales que incluyen: a. Cromatografa lquido-slido o cromatografa de absorcin. b. Cromatografa lquido-lquido o cromatografa de particin. c. Cromatografa de enlace qumico d. Cromatografa de intercambio e. Cromatografa de exclusin. De esta ltima, se conocen dos modalidades: a. Cromatografa de permeacin en gel b. Cromatografa de filtracin en gel

2.4.1

Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)

La cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) es una tcnica usada para separar componentes de una mezcla qumica.

33

Estos componentes (o solutos) son primeramente disueltos en un solvente lquido y luego forzados a fluir a travs de una columna cromatogrfica bajo alta presin. En esta columna, la mezcla es separada en sus componentes. La cantidad de resolucin es importante y es dependiente de la extensin de la interaccin entre los componentes del soluto y la fase estacionaria. La fase estacionaria est definida como un material de empaque inmvil en la columna. La parte en movimiento del sistema es la fase mvil, la cual es un lquido. La interaccin de el soluto con las fases mvil y estacionaria puede ser manipulada a travs de diferentes solventes y columnas. Como resultado de esto, la cromatografa lquida de alta resolucin adquiere alto grado de versatilidad no encontrado en otros sistemas cromatogrficos. De esta forma, la tcnica HPLC tiene la capacidad de separar fcilmente una amplia variedad de mezclas qumicas.

2.4.1.1

Componentes del sistema

En la instrumentacin de la cromatografa lquida, se necesita una bomba de alta presin para empujar el solvente, a travs de una vlvula de inyeccin, lugar donde se introduce la muestra, luego pasa a travs de una corta y estrecha columna de acero inoxidable rellena compactamente con partculas pequeas.

El solvente y los componentes separados de la muestra pasan a travs de un detector en donde se mide su concentracin. La seal del detector se traslada a un registrador que imprime el cromatograma, el cual consiste en una serie de picos, cada uno de los cuales representa un componente de la mezcla original.

Las principales diferencias entre la tcnica HPLC y la cromatografa en columna son:

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La tcnica HPLC utiliza bombas de alta presin, columnas cortas y estrechas empacadas con partculas pequeas y un detector, el cual registra continuamente la concentracin de los componentes. Estas circunstancias determinan las ventajas de la instrumentacin HPLC.

Antes de inyectar la muestra, el solvente es bombeado del reservorio a travs del inyector, columna, detector, hasta obtener una lnea base recta.

Luego, se inyecta la muestra y el solvente o la fase mvil la lleva a la columna. Esta retendr ms tiempo algunos componentes que otros. Eventualmente, cada uno de ellos pasara al detector, diluido en el solvente.

Los picos impresos en el cromatograma corresponden a cada uno de los compuestos separados en la columna.

La temperatura de la columna cromatogrfica debe mantenerse constante.

2.5

Espectrometra

Durante mucho tiempo, los qumicos han utilizado el color como ayuda para la identificacin de substancias qumicas. La espectrometra se puede considerar como la extensin de la inspeccin visual en donde un estudio mas detallado de la absorcin de energa radiante por las especies qumicas permite una mayor precisin en su caracterizacin y en su cuantificacin. selectiva. Al reemplazar el ojo humano con otros detectores de radiacin, se pueden realizar los experimentos espectrometritos en forma

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El trmino espectrometra sugiere la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un sistema qumico en funcin de una longitud de onda de radiacin, as como las mediciones por separado a una longitud de onda determinada. Un espectrofotmetro es un instrumento para medir absorbancia o transmitancia de una muestra en funcin de una longitud de onda determinada. La mayor parte de la espectrometra utiliza soluciones y por esta razn la mayora de recipientes para la muestra son celdas para colocar lquidos en el haz del espectrofotmetro. La celda debe transmitir la energa radiante en la regin espectral de inters; las celdas tpicas para la regin visible y ultravioleta tienen 1 cm de paso de luz.

2.5.1

Componentes de los instrumentos

(Skoog, 2001) La mayora de instrumentos espectroscpicos de las regiones UVvisible e IR incluyen cinco componentes: a. Una fuente estable de energa radiante b. Un selector de longitud de onda que asla una regin limitada del espectro para hacer la medicin c. Uno o ms recipientes para la muestra d. Un detector de radiacin, que convierte la energa radiante en una seal elctrica que puede medirse e. Un sistema que procesa y lee la seal que consta, actualmente, de una computadora Las dos primeras configuraciones de los instrumentos, que se utilizan para absorcin y fluorescencia, necesitan una fuente externa de radiacin. En la absorcin se mide la disminucin de la fuente de radiacin a una longitud de onda seleccionada. 36

En la fluorescencia la fuente excita al analito, lo que origina la emisin de una radiacin caracterstica, que por lo general se mide a un ngulo de 90 grados con respecto a la fuente del rayo de incidencia. En la espectroscopia de emisin, la muestra por s misma es el emisor y no se necesita una fuente externa de radiacin. En los mtodos de emisin, por lo general la muestra se introduce en un plasma o una flama que proporciona suficiente energa trmica al analito para hacer que ste emita una radiacin caracterstica.

2.5.2

Fotmetros y espectrofotmetros de UV-visible

Algunos trminos comunes se usan para describir los instrumentos completos. As, un espectrmetro es un instrumento espectroscpico que emplea un monocromador o un policromador junto con un transductor, para transformar la intensidad de la radiacin en seales elctricas. Los espectrofotmetros son espectrmetros que permiten hacer mediciones de la relacin entre la radiacin de dos rayos, que es el requisito para medir la absorbancia (recurdese, A = log Po/P = log Pdisolvente/ Psolucin). Los fotmetros emplean un filtro para seleccionar la longitud de onda, conjuntamente con un transductor de radiacin adecuado. En el espectrofotmetro se tiene la gran ventaja de que puede variarse continuamente la longitud de onda, haciendo posible el registro del espectro de absorcin. Los fotmetros tienen como ventaja su sencillez, resistencia y bajo costo. Comercialmente se pueden encontrar varias docenas de modelos de espectrofotmetros. La mayora de los espectrofotmetros abarcan las regiones UV-visible y ocasionalmente la regin del infrarrojo cercano, mientras que los fotmetros por lo general se utilizan para regin visible. Los fotmetros tienen una gran utilidad como detectores en cromatografa, electroforesis, inmunoensayos o anlisis de flujo continuo. Tanto los fotmetros como los espectrofotmetros pueden ser de haz sencillo o de doble haz.

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Adems, ahora se cuenta con instrumentos de canales mltiples, con estos sistemas de puede obtener un espectro completo en cada ocasin. Como la energa radiante que se obtiene en las fuentes UV-visible es funcin de la longitud de onda, los instrumentos de haz sencillo comnmente miden Pdisolvente y Psolucin a cada longitud de onda. De manera alternativa, los instrumentos actuales, que utilizan computadoras, pueden hacer y almacenar el espectro completo de un disolvente, para posteriores clculos de absorbancia.

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3. PROCEDIMIENTO

3.1

Descripcin del proceso tecnolgico de obtencin de la crema antimictica

La crema antimictica es un semislido de base emulsionada aceite en agua. El mtodo de fusin es el empleado en la preparacin de esta crema, para lograr la licuefaccin de los componentes slidos o creos. Los componentes de la fase oleosa son calentados hasta una temperatura aproximada de 65C, garantizando que los mismos estn licuados y uniformes luego de un tiempo de agitacin y a una temperatura de 50C. Simultneamente en otro recipiente es calentada la fase acuosa con el resto de los excipientes solubles en agua, hasta una temperatura de 50C. En estas condiciones se aade una fase a la otra, la interna sobre la externa, lentamente y con constante agitacin. Despus de mezclados debidamente todos los componentes se debe refinar el preparado, haciendo pasar la crema por un molino coloidal adecuado, que permita eliminar todo resto de grumos, granulosidad o arenosidad perceptible.

3.2

Plan maestro de produccin

3.2.1

Fase A (oleosa)

-

En una Marmita agregar: EMULGADE CBN 24.600 Kg

-

Fundir a aproximadamente 60C. Se registra la temperatura.

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-

Agregar lentamente a la Marmita ALCOHOL CETILICO USP METILPARABEN USP PROPILPARABEN USP 4.492 Kg 250.00 G 250.00 G Agitar hasta disolver y agregar lentamente

-

Agitar hasta disolver. Agregar poco a poco: CLOTRIMAZOL USP (INCLUIR 5% EXCESO) 1.049 Kg Mezclar con agitacin vigorosa manteniendo una temperatura de 50 +/5C por 15 minutos aproximadamente o hasta disolver por completo el clotrimazol. Registrar temperatura y analizar la apariencia.

3.2.2

Fase B (acuosa)

-

En una olla de acero inoxidable de 25 lts. de capacidad agregar: AGUA PURIFICADA Registrar la temperatura. Agregar la fase Acuosa a la mezcla de la fase Oleosa en la Marmita de 100 L eliminando la fuente de calor. Debe estar a la misma temperatura de la fase oleosa 50 5C. 69.360 L Calentar a la temperatura de 50 5C (la misma de la fase Oleosa).

-

Agitar vigorosamente por 15 minutos o hasta obtener una crema homognea y uniforme. Cambiar la direccin de agitacin, hacia ambos lados (atrs y adelante). Registrar el tiempo de agitacin. Conectar el homogenizador por 10 minutos o hasta obtener la consistencia deseada. Registrar los tiempos de homogenizacin. Muestra revisada y aprobada por supervisor de rea.

40

-

Muestra tomada (2 muestras) para anlisis en control de calidad de homogeneidad.

3.2.3

Instrucciones para el llenado

-

Todo el equipo a usar debe estar limpio e identificado. Los tubos colapsables a utilizar deben de estar limpios previo al llenado, sopleteados. Llenar 5000 tubos con 20 g de Producto, en tubos de capacidad de 20 g impresos. Sellar el extremo abierto a cada tubo. Empacar los tubos en cartones corrugados con separadores en forma de panal incluidos. Identificar los cartones con cupones de Identificacin. Tomar 6 muestras, 2 al inicio, 2 al medio y 2 al final del proceso de llenado, para el anlisis de pureza y microbiologa.

41

42

4. METODOLOGA

El procedimiento a seguir es el siguiente:

4.1

Procedimiento de validacin

4.1.1

Principios para realizar el proceso de validacin

4.1.1.1

Primer principio

Disear el protocolo Qu hacer y Cmo hacer. Los lotes de prueba deben incluir los ms severos retos al sistema. El programa de validacin debe llevarse a cabo en la fase de desarrollo del producto.

4.1.1.2

Segundo principio

Establecer la variacin de los parmetros del proceso que puede permitirse para la realizacin de cada prueba individual. Identificar la variacin de las especificaciones que podran causar la falla de un lote.

4.1.1.3

Tercer principio

Las pruebas finales al producto terminado no son suficientes para asegurar la calidad del producto.

43

4.1.2

Equipo a utilizar

Fase Oleosa: Marmita con varias llaves par el control del agua caliente y fra con lnea de aforo y control de temperatura hasta un lmite de 70C y un agitador con motor elctrico Termmetro de acero inoxidable Fase Acuosa: Homogenizador tubo que gira con unos hoyitos con motor Marmita utilizada en fase oleosa Termmetro de acero inoxidable Proceso de llenado: Maquina llenadora con tolva de dosificacin, disco giratorio con espacio para colocar tubos controlando la cantidad de llenado y las revoluciones por minuto a las cuales gira el disco para llenar cada uno de los tubos.

4.1.3

Materiales

Clotrimazol grado USP Alcohol Cetlico grado USP Emulgade CBN Propilparabeno grado USP Metilparabeno grado USP Agua purificada grado USP

44

4.1.4

Pasos a seguir en el proceso de validacin

4.1.4.1

Primer paso

Verificar que la operacin bsica est bajo control. Deben ser sistemas y procedimientos para asegurar el cumplimiento de las Buenas Prcticas de Manufactura (GMPs). Deben incluirse reas como la recepcin de materias primas, programas de estabilidad, limpieza, mantenimiento, calibracin y calificacin de personal. En este inciso se revisarn los siguientes elementos del proceso de fabricacin: Limpieza del rea y equipo a utilizar. Preparar maquinaria, calibrarla y ajustarla. Recibir Material y verificar que el pedido de materiales est completo. Un supervisor aprobar la limpieza de lneas.

4.1.4.2

Segundo paso

Establecer caractersticas medibles que describan el producto. Algunas caractersticas tpicas del producto son: Fsicas: tamao, color, forma, pH, anlisis trmico, gravedad especfica, etc. Qumicas: potencia y pureza de activos y productos de degradacin. Microbiolgicas: lmites, esterilidad. De actuacin: tiempos de disolucin. Apariencia (homogeneidad) determinada en una caja de Petri Pureza determinada por cromatografa lquida de alta resolucin

Para este proceso, por ser productos semislidos las caractersticas a medir sern:

45

Temp. en la fase acuosa y en la fase oleosa, crticas durante el proceso de fabricacin

4.1.4.3

Tercer paso

Pruebas en proceso y producto terminado. Un elemento vital en el proceso de validacin, es establecer suficientes controles de proceso y con la frecuencia apropiada para asegurar que cada parmetro permanece bajo control y dentro de las especificaciones establecidas. Al hacer la preparacin del producto y mezclarlo se tomarn muestras del mismo segn la regla: No. de muestras = n +1 (Ecuacin 1)

Para los lotes de 50 Kg esto significa que se tomarn 8 muestras de stos para hacer los anlisis correspondientes, mencionados en el inciso anterior. Se trabajar bajo la norma de 3 veces la desviacin estndar de la especificacin para poder determinar si todos los resultados se encuentran bajo control.

4.1.4.4

Cuarto paso

Establecer un procedimiento de manufactura, ver el inciso 3.2 Un protocolo de validacin debe incluir todos los parmetros que se quieren controlar, en este caso estos parmetros sern: Temperaturas Homogenizacin Rendimiento de llenado y acondicionamiento Pureza 46

4.1.4.5

Quinto paso

La necesidad de revalidacin debe ser evaluada antes de que un cambio mayor sea hecho en un proceso ya validado.

4.1.4.6

Sexto paso

Este paso incluye todo lo antes mencionado e involucra una documentacin precisa de todas las etapas de validacin y manufactura posteriores.

4.2

Validacin de mtodo analtico

4.2.1

Equipo

1. Cromatgrafo Lquido de Alta Resolucin, con horno para columnas, con detector de longitud de onda variable, integrador y registrador. 2. Balanza Analtica Electrnica 3. Agitador magntico con estufa. 4. Filtros de membrana de nylon de 0.45 m de porosidad para filtrado de estndares y muestras. 5. Jeringa de 10 ml con adaptador para filtrar.

4.2.2

Reactivos

a. cido Fosfrico 85%, Suprapure b. Trietilamina 47

4.2.3

Fase mvil

Diluir 2 mL de cido Fosfrico a 100mL con Agua y ajustan el pH a 6.6 con Trietilamina. Preparar dos fases con la siguiente proporcin: Fase A: 80:20 Acetonitrilo/Buffer Fase B: 20:80 Acetonitrilo/Buffer

4.2.4

Solucin buffer para solucin estndar y muestra

Diluir 2 mL de cido Fosfrico a 100mL con Agua y ajustan el pH a 6.6 con Trietilamina.

4.2.5

Solucin estndar

En un baln volumtrico de 50 ml, pesar cuantitativamente 50 mg de Estndar de Clotrimazol. Disolver con 20 ml de Acetonitrilo. Llevar a volumen con buffer y homogenizar con agitacin.

4.2.6

Solucin muestra

Pesar 250 mg de crema en un baln volumtrico de 50 ml. Agregar 20 ml de Acetonitrilo y calentar a 60C con agitacin constante durante 15 minutos. Enfriar y llevar a volumen con buffer. Homogenizar y filtrar con filtros de nylon de 0.45 m.

48

4.3

Secuencia de anlisis a utilizar en el equipo de cromatografa

4.3.1

Consideraciones generales

El alcance de la validacin debe adecuarse al rea de aplicacin del mtodo. Se tomar como gua la siguiente tabla:

Tabla III Criterios a tomar en cuenta

CRITERIO Selectividad Linealidad Rango de trabajo Precisin: Precisin del equipo Repetibilidad del mtodo (Precisin del mtodo) Precisin interna del laboratorio Exactitud Limite de deteccin (LOD) Limite de cuantificacin (LOQ) Robustez (1)

Sustancia activa Si Si Si Si Si Si Si No (1) No (1) Si

Productos secundarios y de degradacin Si Si Si Si Si Si Si Si Si

Necesario, cuando se calculan productos secundarios y de degradacin no disponiendo de estndares de referencia de los mismos. En ese caso se realiza la determinacin de factores de respuesta del ingrediente activo. Cualquier desviacin de este esquema debe ser justificada.

49

4.3.2

Procedimiento

Debe existir un procedimiento escrito para el mtodo analtico antes de empezar la validacin.

4.3.2.1

Selectividad

Preparar muestras segn inciso 4.2.4 y realizar cromatogramas de: Placebo (materia prima) Ingrediente(s) Activo(s)

Evaluar la pureza del pico del (de los) analito(s). El pico debe ser puro. Ninguno de los componentes individuales interfiere con los otros en el cromatograma y los parmetros cromatogrficos especificados en el procedimiento a validar cumplen (los picos estn suficientemente separados). Generar un cromatograma de muestra. En este deben apreciarse todos los analitos en el rango de concentracin de la especificacin de liberacin. Generar uno o ms cromatogramas con todos los analitos a ser validados, con asignacin de picos y, si es necesario, datos de concentracin. Reportar los tiempos de retencin o tiempos de retencin relativos.

50

4.3.2.2

Linealidad

4.3.2.2.1

Sustancia activa

Se preparan 5 soluciones a los niveles de 50%, 75%, 100%, 125% y 150% de la concentracin objetivo del procedimiento de anlisis (inciso 4.2.4).

Las soluciones individuales se inyectan 2 veces para obtener cromatogramas.

Se calcula una recta de regresin por medio de regresin lineal a partir de los 10 valores individuales.

Se documenta la representacin grfica de los valores de medicin con la recta de regresin y los resultados de la evaluacin estadstica.

El coeficiente de correlacin mnimo debe ser R 0.995 El intercepto de eje relativo permitido es f 0.03

4.3.2.3

Exactitud

4.3.2.3.1

Mtodo de acumulacin

Utilizar cuando no todos los componentes del producto pueden ser adquiridos en forma individual.

51

A una muestra se agrega sustancia activa a los niveles de concentracin de: 100% (sin agregar nada), 125% (adicin de 25%), 150% (adicin de 50%) de las concentraciones de ingrediente activo declaradas. Para cada nivel se preparan 3 soluciones y se realizan cromatogramas segn la siguiente secuencia:

Tabla IV Secuencia Exactitud

Estndar 1 Muestra 1 50% Muestra 1 100% Muestra 1 150%

Estndar 2 Muestra 2 50% Muestra 2 100% Muestra 2 150%

Estndar 3 Muestra 3 50% Muestra 3 100% Muestra 3 150%

Se determina el factor de respuesta de los estndares y se calcula la concentracin de las soluciones. El porcentaje de recuperacin se calcula dividiendo el valor de la concentracin determinado (mg/mL) entre el valor de la concentracin nominal.

Se grafica la concentracin nominal contra la determinada y se reportan los porcentajes de recuperacin determinados.

El rango desde el lmite de confianza inferior (95% de seguridad estadstica) del valor promedio de la recuperacin porcentual debe incluir 100%.

52

4.3.2.4

Precisin del equipo

4.3.2.4.1

Sustancia activa

La precisin del equipo se realiza por medio de inyeccin mltiple de la misma solucin (n 6) bajo las mismas condiciones operativas.

Cada determinacin individual se debe realizar en el caso de sustancias activas al nivel de 100% del procedimiento de anlisis (ver inciso 4.2.4).

La evaluacin de los resultados se lleva a cabo tomando como lmite el lmite del procedimiento especifico de anlisis.

4.3.2.5

Precisin del mtodo

4.3.2.5.1

Sustancia activa

Determinar la desviacin estndar relativa de 6 determinaciones independientes de concentracin de la muestra (preparada segn inciso 4.2.4). Para ello realizar la calibracin con 6 estndares e inyectar 6 soluciones de muestra de forma alterna segn la secuencia:

53

Tabla V Secuencia precisin del mtodo

Estndar 1 Muestra 1

Estndar 2 Muestra 2

Estndar 3 Muestra 3

Estndar 4 Muestra 4

Estndar 5 Muestra 5

Estndar 6 Muestra 6

4.3.2.5.2

Evaluacin

Los resultados de anlisis individuales de concentracin, su valor promedio y la desviacin estndar relativa son reportadas.

4.3.2.6

Precisin interna del laboratorio

4.3.2.6.1

Sustancias activas

Se realiza en forma anloga a la determinacin de la precisin del mtodo segn 4.3.2.5, se determina la influencia de: Distintas personas Distintos equipos Diferentes das de trabajo

4.3.2.7

Sobre el resultado

La influencia de estas variaciones no tiene que ser realizada de forma individual, sino que puede ser probada en conjunto.

54

4.3.2.7.1

Evaluacin

Los resultados de anlisis individuales de concentracin, su valor promedio y la desviacin estndar relativa son reportadas.

4.4

Criterios utilizados en el procedimiento para la evaluacin de parmetros

4.4.1

Selectividad

4.4.1.1

Muestra

Pesar 250 mg. de la crema y proceder segn inciso 4.2.5 Solucin Muestra, usar la secuencia descrita para este punto en 4.3.2.1.

4.4.1.2

Estndar

Pesar 50 mg. de el estndar de clotrimazol y proceder segn inciso 4.2.4 Solucin Estndar, usar la secuencia descrita en el inciso 4.3.2.1.

4.4.1.3

Filtros de nylon de 0.45 m

Preparar una solucin de acuerdo al inciso 4.2.5 Solucin Muestra, sin agregar muestra y filtrarla a travs de estos filtros, utilizar la secuencia descrita en 4.3.2.1.

55

4.4.1.4

Medio de dilucin

Realizar el mismo procedimiento descrito en el inciso anterior.

4.4.2

Linealidad

-

Hacer una solucin Stock de estndar de Clotrimazol pesando 250 mg de Clotrimazol en baln volumtrico de 100 ml. Disolver en acetonitrilo y aforarlo con el mismo solvente.

-

Hacer las diluciones para cada uno de los puntos de acuerdo a la tabla IV y preparar las muestras de acuerdo inciso 4.2.4 Solucin Estndar, la secuencia debe hacerse segn se indica en inciso 4.3.2.2.

Tabla VI Rango a analizar para linealidad del mtodo

NIVEL DE CONCETRACIN 50% 75% 100% 125% 150%

ESTNDAR Clotrimazol Clotrimazol Clotrimazol Clotrimazol Clotrimazol

PESO O DILUCIN Alcuota de 10 ml de Solucin Stock de Estndar Alcuota de 15 ml de Solucin Stock de Estndar 50.0 mg 62.5 mg 75.0 mg

4.4.3

Precisin de mtodo

Realizar 6 determinaciones de muestra preparando cada una de ellas segn inciso 4.2.5 Solucin de Muestra, usar secuencia segn inciso 4.3.2.3. 56

4.4.4

Precisin interna

Proceder de la misma manera que en el inciso anterior. Este punto lo realiza otra persona en el mismo equipo en el cual se desarrolla la validacin.

4.4.5

Exactitud

-

Realizar un ensayo de la crema preparando la muestra y estndar de acuerdo al inciso 4.2.5 y 4.2.4 respectivamente, este ensayo se utilizar para el clculo de exactitud, segn el mtodo de acumulacin descrito en el inciso 4.3.2.3.

-

Preparar una solucin Stock de Estndar pesando 125 mg de Clotrimazol en un baln de 100 ml, hacer la dilucin de acuerdo a inciso 4.2.4 Solucin de Estndar.

-

Preparar soluciones, segn describe tabla V para cada nivel a analizar utilizando inciso 4.2.5 Solucin de Muestra, secuencia de anlisis de acuerdo a inciso 4.3.2.3.

57

Tabla VII Cantidades requeridas para anlisis de exactitud

Nivel de 100% Clotrimazol crema Nivel de 125% Clotrimazol crema Estndar de Clotrimazol Nivel de 150% Clotrimazol crema Estndar de Clotrimazol

Peso 250.0 mg Peso 250.0 mg 10 ml de Solucin Stock de Estndar (12.5 mg) Peso 250.0 mg 20 ml de Solucin Stock de Estndar (25 mg)

4.4.6

Precisin de equipo

Realizar seis determinaciones de Estndar preparado de acuerdo a inciso 4.2.4 Solucin de Estndar, evaluar segn inciso 4.3.2.4.

4.4.7 Rango

Documentar el rango de mtodo, en el cual se examin linealidad, precisin y exactitud para Clotrimazol.

58

5. RESULTADOS

5.1

Sumario

Se procedi a la fabricacin de tres lotes de Clotrimazol Crema (A, B, C) con el propsito de validar el proceso de fabricacin de este producto.

El proceso fue llevado acabo siguiendo las indicaciones descritas en el Procedimiento Maestro de Produccin. Los resultados fueron registrados en los protocolos de produccin, para Clotrimazol Crema.

Este reporte hace referencia a cada una de las reas por las cuales es procesado el material.

5.2

Formulacin

Los materiales cumplen con la descripcin definida en el protocolo de produccin. No se registraron desviaciones al procedimiento. En la tabla VIII se presentan los lotes de las materias primas consumidas en el proceso de validacin.

59

Tabla VIII Clotrimazol crema

Frmula unitaria Material Clotrimazol USP (5% de Exceso) Alcohol Cetlico USP Emulgade CBN Propilparabeno USP Metilparabeno USP Agua Purificada USP Peso Terico (20 g / tubo) Peso Objetivo 0,2098 0,8984 4,9200 0,0500 0,0500 13,8720 20 UM g g g g g g g Control de Peso

Lote A 522,5 2247,5 12300,25 125 125,25 34680

Lote B 523,25 2246,25 12300 127,5 125 34678,75

Lote C 522,5 2247,5 12300,25 125 125,25 34680

Cantidad (g) Cantidad (g) Cantidad (g)

50000,5

50000,75

50000,5

La dosificacin individual de cada material y los controles de peso resultantes cumplen con los lmites especificados.

5.3

Produccin de crema y empaque Los lotes de Clotrimazol fueron elaborados en una marmita como la descrita en el

inciso 4.1.2 y el llenado se llev a cabo con una llenadora descrita en el mismo inciso.

En la tabla IX se presentan los parmetros de control de temperaturas de los procesos de produccin de la crema, para cada uno de los 3 lotes de validacin.

60

Tabla IX Parmetros del proceso de formulacin

Parmetros Fase Oleosa Temperatura Fundicin (C) Temperatura Mezclado (C) Temperatura Calentamiento (C) Fase Acuosa Tiempo de Agitacin (min.) Tiempo de Homogenizacin (min.)

Lote A 59 50 49 15 10

Lote B 60 50 49 15 10

Lote C 60 50 49 15 10

En la tabla X se presentan los parmetros utilizados durante el proceso de sellado, para cada uno de los 3 lotes de validacin.

Tabla X Parmetros del proceso de sellado

Parmetro Sugerido Peso de Llenado Velocidad de Llenado

Parmetros 20 g / tubo 40 tubos / vuelta

Lote A 20 40

Lote B 20 40

Lote C 20 40

En la tabla XI se muestran los valores reportados en el desperdicio de tubos vacos, tubos llenos y producto.

Tabla XI Desperdicios

Lote A Peso de Producto Desperdiciado (kg) Tubos desperdiciados sin producto (kg) Tubos desperdiciados con producto (kg) 0,5 0,5 1,25

Lote B 0,3 0 0,75

Lote C 0,5 0,25 1,25

En la tabla XII se presentan los lotes y la cantidad de los materiales de empaque primario consumidos en el proceso de validacin.

61

Tabla XII Consumo empaque primario

Lote A Tubos colapsables (unidades) Cartn Clotrimazol Crema con Separador 50's (unidades) 2515 102

Lote B 2503 100

Lote C 2510 100

5.4

Proceso de acondicionamiento El proceso de acondicionamiento fue realizado empacando cada uno de los lotes en

tubos de 20 g la presentacin (el proceso fue realizado en lnea).

Tabla XIII Rendimientos

Lote A B C

Cantidad 2492 2492 2492

Rendimiento 99,68 99,68 99,68

Los 3 lotes cumplen con el rendimiento propuesto de (2475 - 2525 tubos / Lote), se mantienen los limites de proceso.

5.5

Caractersticas de la crema / resultados de control en proceso

Todos los resultados fueron anotados en el protocolo de produccin correspondiente a cada lote de producto. La siguiente seccin muestra los parmetros individuales de las cremas, para todas las muestras analizadas a lo largo de los tres lotes de validacin.

62

5.5.1

Homogeneidad

Tabla XIV Resultados de homogeneidad

Especificacin Cuadro Microscpico (caja de Petri)

Parmetros no ms de 5 micrometros

Lote A cumple

Lote B cumple

Lote C cumple

De las 6 muestras tomadas (2 por cada lote) se determin que los tiempos de agitacin y homogenizacin, adems de las temperaturas son los adecuados para obtener una crema homognea.

5.5.2

Contenido de Clotrimazol

Tabla XV Contenido de Clotrimazol

Lote A Promedio Desv. Est. C.V. L. Superior L. Inferior Cp Cpk X+3 X-3 1,0304 0,03255 0,03159 1,1000 0,9000 1,02 1,34 1,1281 0,9357

Lote B 1,0201 0,02680 0,02627 1,1000 0,9000 1,24 1,49 1,1005 0,9413

Lote C 1,0286 0,03132 0,03045 1,1000 0,9000 1,06 1,37 1,1226 0,9373

De los 18 datos individuales no se encuentra ninguno fuera de los lmites de paro del contenido objetivo (1,1000 0,9000 g / 100 g), as mismo a partir de los resultados de la tabla anterior se observa que el proceso se encuentra bajo control de acuerdo a los coeficientes de Control en Proceso (Cp y Cpk >1). 63

5.5.3

Microbiologa

Tabla XVI Resultados microbiolgicos

Anlisis Recuento Aerbico en placa Recuento de mohos y levaduras Ausencia de Microorganismos Patgenos

Parmetros Mx. 1000 UFC / g Mx. 100 UFC / g Ausencia

Lote A < 10 < 10 cumple

Lote B < 10 < 10 cumple

Lote C < 10 < 10 cumple

De acuerdo con la tabla XVI, se determina que el proceso cumple para la especificacin de Microbiologa y por consiguiente con los parmetros de control de proceso, requeridos para la validacin.

5.6

Resultados mtodo analtico 5.6.1

Puntos de evaluacin elegidos

Selectividad Exactitud Precisin del mtodo Precisin del equipo Linealidad Precisin interna del Mtodo Rango

64

5.6.2

Selectividad

El mtodo cromatogrfico de acuerdo al procedimiento es capaz de identificar las sustancias contenidas en la formulacin de crema antimictica de acuerdo a la tabla siguiente: Tabla XVII Resultados de Selectividad

Sustancia Clotrimazol

Tiempo de retencin 2.7 minutos

5.6.3

Exactitud

5.6.3.1

Mtodo de placebo

Los resultados del anlisis por el mtodo HPLC, han sido comparados contra una muestra ms ingredientes activos en exceso en cantidad conocida. Los resultados son los siguientes: El mtodo de anlisis es exacto: Es lineal en el rango de trabajo Es selectivo a los ingredientes de inters

Tabla XVIII Estndar utilizadoDescripcin Pureza Factor de dilucin de Estndar Factor de dilucin de Muestra Clotrimazol 99.8 % 0.02 [1/ml] 0.02 [1/ml]

65

-

Clculos:Estndar [mg] 1 2 3 Cont. De Clotrimazol Nivel 100 % - 1 125 % - 1 150 % - 1 204.52 Placebo [mg] Mg/100 mg Peso Muestra [mg] 52.8 65.3 77.8 [mg/100 mg] Nominal 1.0557 1.3053 1.5557 Estndar - 2 557439 688263 812902 Area Estndar 536728 Nivel 100 % - 2 125 % - 2 150 % - 2 Placebo [mg] Peso Muestra [mg] 52.8 65.3 77.8 [mg/100 mg] Nominal 1.0557 1.3053 1.5557 Estndar 3 559073 691312 810939 Area Estndar 536658 Nivel 100 % - 3 125 % - 3 150 % - 3 Placebo [mg] Peso Muestra [mg] 52.8 65.3 77.8 [mg/100 mg] Nominal 1.0557 1.3053 1.5557 557190 688330 810904 Area Muestra Area Muestra 50.9 50.9 50.9 Dilucin Est. [mg/ml] 1.0160 1.0160 1.0160 Estndar 1 Area Estndar 536027 Area Muestra Factor Resp. 1 1,89536e-06 [mg/100 mg] Analizada 1.0565 1.3045 1.5407 Factor Resp. 2 1.89288e-06 [mg/100 mg] Analizada 1.0583 1.3086 1.5350 Factor Resp. 3 1.89313e-06 [mg/100 mg] Analizada 1.0548 1.3031 1.5351 99.92 99.83 98.68 %Recuperacin 100.24 100.25 98.67 % Recuperacin 100.08 99.94 99.04 % Recuperacin

Tabla XIX Resultados anlisis de exactitud

5.6.3.2

Interpretacin estadstica

Nmero de Datos: 9

Tabla XX Interpretacin estadstica de exactitud99.63 0.65 0.65 % %

Promedio Desviacin Estndar Coeficiente de Variacin (%)

66

Intervalo 95.5% (2 Desviaciones Estndar) de: 98.33 a 100.93 Intervalo 99.7% (3 Desviaciones Estndar) de: 97.68 a 101.57 Intervalo de confianza del valor medio (P = 0.95): 99.63 0.50

5.6.3.3

Conclusin

Prueba de Exactitud cumple: 100 % queda dentro del intervalo de confianza de 0.95

5.6.4

Precisin del mtodo

-

Descripcin de Estndar:

Clotrimazol Pureza de 99.8% Factor de dilucin de Estndar 0.02 [1/ml] Factor de dilucin de la Muestra 0.02 [1/ml] 6 muestras se analizaron segn procedimiento Cada muestra se analiz contra el estndar de referencia La secuencia de anlisis es de 6 estndares contra 6 muestras, inyectadas en forma secuencial Se calcularon el coeficiente de variacin y la media del contenido de Clotrimazol Contenido de la muestra:

67

Tabla XXI Resultados de precisin de mtodo971.32 mg Area Mta. 554946 556260 563276 569569 560444 567628 Peso Estndar (mg) 50.1 50.1 50.1 50.1 50.1 50.1 Estndar [mg/100mg] 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Area Estndar 536314 536246 536671 536558 537277 536202 Factor Resp. Estndar 1.86e-06 1.86e-06 1.86e-06 1.86e-06 1.86e-06 1.86e-06 [mg/100m g] 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01

Peso Crema No