Capacidad Antioxidante FRAP
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Capacidad Antioxidante (FRAP)
Preparar la solución de bicarbonato de sodio (NaHCO3 310mM, pH 3.6), para ello pesar
13.02 gr de NaHCO3 y aforar hasta 500 mL con agua desionizada. Ajustar pH con ácido
acético gota a gota (CH3COOH).
Preparar solución FeCl3 20 mM. Pesar
Preparar Solución Triazina 10 mM.
Preparar la curva estándar (TRABAJAR EN OSCURIDAD).
o Para ello preparar una solución stock de FeSO4 con una concentración de 2 mM
(2,38 g de ácido gálico en 1 mL de agua desionizada)
o Preparar diluciones seriadas (1000 µl) como se muestra a continuación:
STD Concentración µl solución
stock
µl agua
desionizada
A 30 µM 300 700
B 25 µM 250 750
C 20 µM 200 800
D 15 µM 150 850
E 10 µM 100 900
F 5 µM 50 950
G 2 µM 20 980
H 0 µM ---- 1000
Agregar 15 µl de muestra o STD, según corresponda, a cada pocillo. Recuerde hacer
duplicado o triplicado de sus muestras.
Agregar 235 µl de Buffer Acetato de Sodio (Utilizar multicanal).
Agregar 25 µl de FeCl3 20 mM (Utilizar multicanal).
Agregar 25 µl de Triazina 10 mM
Incubar 4 min a 37°C en el multilector y medir a longitud de onda de 593 nm.
Los resultados son expresados como µmol Fe+2/100g