Bronquitis Infecciosa 2013: Discusión de los resultados de ... ensayo inoculo presentacion... ·...

Bronquitis Infecciosa 2013: Discusión de los

resultados de las pruebas realizadas en el Instituto

de Virología de INTA Castelar.

Ariel E. Vagnozzi

Reunión mensual de GTA

Pilar, 9 de mayo de 2014

Reseña

Diciembre 2012 a marzo 2013 se reportaron casos de enfermedad en pollos

parrilleros de entre 25 y 40 días de edad.

• Localizados en el departamento Uruguay de la Pcia. de Entre Ríos. Particularmente en

una zona denominada como ruta J.

• Dicha zona presenta una particularidad.

Elevada densidad de granjas.

Año tras año aparecen problemas sanitarios.

Reseña

En abril 2013 se aislaron de dos granjas virus de Bronquitis caracterizados como

genotipo A en el INTA.

• Desde el sector privado se postuló que una vacuna “variante” resolvería el problema

sanitario.

En abril-mayo se llevaron a cabo una serie de reuniones (en DiLab) convocadas por

las autoridades de SENASA.

• Dichas reuniones contaron con la participación de técnicos de SENASA e INTA.

Se discutió la pertinencia de ingresar al país una vacuna de serotipo inédito.

Desde la dirección Nacional de INTA hubo un compromiso de acompañar las decisiones y

acciones que promoviera SENASA.

Se decidió implementar ensayos de urgencia para evaluar el nivel de protección conferido por

vacunas vivas atenuadas (de diferente serotipos) contra uno de los genotipos identificados en

el territorio Argentino.

Bronquitis Infecciosa

• Enfermedad viral, aguda, altamente contagiosa que afecta el tracto respiratorio

alto de los pollos.

• Signos clínicos caracterizados por rales traqueales, tos, estornudos, exudado

nasal.

• Puede afectar los sistemas renal y reproductivo (ambos sexos)

• Pérdidas económicas.

– Parrilleros: desde muerte a reducida eficiencia conversión alimentaria (menor ganancia de

peso).

– Ponedoras: Declinación en la producción de huevo.

– Reproductores: Caída de la fertilidad.

Virus de la Bronquitis Infecciosa (IBV)

• Familia Coronaviridae (grupo 3).

• Virus pleomórfico, de 90-200 nm, envuelto, con espículas que se

proyectan en su superficie.

• Genoma +ssRNA de 27.5 Kb.

– Codifica 4 proteínas estructurales.

• Nucleoproteína (N).

• Proteína integral de membrana (M).

• Proteína del envelope (E).

• Proteína de la espícula (S).

Patogenia de IBV

Fuente de

infección

Animales infectados

Alimentos y/o instalaciones

contaminadas

Conjuntiva, mucosa nasal,

tráquea, pulmones, etc.

En aves susceptibles

IBV hace una primer ciclo de

replicación en tracto respiratorio.

1ra replicación viral Restringido a epitelio ciliado y

células secretoras de mucus

Diseminación

Respiratorio Renal

Otros epitelios

Tráquea, bronquios, pulmones,

sacos aéreos.

Epitelio porción distal de la nefrona.

Nefritis intersticial linfocítica

Lesiones en oviducto,

alteraciones en el huevo.

Reproductor

Tropismo tisular

Virus puede ser aislado

de 2 a 5 días post-

infección (título mas

alto al día 3 pi)

Contaminación

bacteriana secundaria

Uso de vacunas serotipo-específicas

Elevada variabilidad de las poblaciones de IBV

1. Alta tasa de mutaciones puntuales

2. Recombinación genética

3. Deleciones/inserciones

Variabilidad

Antigenicidad

Tropismo

Virulencia

• Respiratorio

• Renal

• Reproductor

• Serotipos : ‒ Massachusetts

‒ Connecticut

‒ Arkansas

‒ Delaware

‒ 793/B

• Muy virulenta

• Medianamente

virulenta

• Atenuada

Variabilidad y fenotipo

S1 y

otros

S1

Proteínas

“NS”

Situación Argentina

Ch__Q1

Ch_J2

Ch_T3

AR05RN07

AR06BA12

14804-HVR1

AR08BA21

AR08ER22

AR06BA10

AR06BA11

Genotipo A

Holte

Italia 02

GRAY

JMK

UK/167/84

D274

D207

6/82

AR07ER18

AR08BA16

AR02BA05

AR07BA15

AR01BA03

AR05BA08

Genotipo B

BraUSP05

BraUSP11

AR03BA06

AR06BA13

AR06BA14

Genotipo C

B1648

GAV92

ARK99

CUT2

4_91

NLL1449QX

FRL1450QX

Connecticut

AR08ER26

Beaudette

AR01BA04

M41

KB8523

H120

AR08ER24

AR08ER25

AR07ER19

Vacunas

DE072

96

94

50

40

100

55

68

100

54

100

100

100

99

97

99

52

98

69

49

55

86

33

38

92

96

86

59

47

27

51

22

26

17

12

99

91

87

55

100

52

71

78

0.05

Ch_J2 Ch_T3 Ch__Q1

ArgA170_163 AR05RN07

AR06BA12 A151_1045 AV1124 AV1126 AV1129

ArgAV1620C ArgA213_095 AV1027 AV1128

ArgA120 AV1136 A151_1046 ArgA226170 ArgA166TcN4 ArgAV1147

ArgA227 ArgA221574

ArgAV1165 ArgA150 ArgA169Tc

AV1039 A151_1043

AV1014 AR08BA21 AR08ER22

AV1040 AV1029

ArgA133 ArgA226_93 AV1118

ArgA230N3 ArgAV1164 AV1108

ArgAV1228 AV1134 ArgAV1225

AR06BA10 AR06BA11

ArgA129 Ariel_IBV_D

Genotipo A

4_91 Holte Italia 02 JMK

GRAY UK_167_84 D207

D274 6_82

HVR1_B1 ArgA088 ArgA098 ArgA0101 ArgA0089 ArgA0082_D ArgA086Sta ArgA112636 ArgA0081 AR02BA05 A_FD ArgA086Sup ArgA0094 ArgA112639 ArgA097

ArgA0082_A A140fw

AV1116 AV1117

HVR1_A AR08BA16

AV1125 AV1033

AR07ER18 HVR1_025

ArgA0102 AR05BA08 ArgA090Anti

AR07BA15 HVR1_B15

AR01BA03 AV1112

Genotipo B

BraUSP05 BraUSP11

ArgA212Tc5 ArgAV1226 ArgA212Tc1 AR03BA06 ArgA212Tc2 ArgA212R4 ArgA212Tc3 ArgA212Tc4

AV1021 ArgA225 AR06BA13 AV1107

ArgAV1222 ArgA219 AV1006

IBV 8Hu8 AR06BA14

ArgA217 A216_vo A216Cl6 A216Cl9 A216Cl10 A216cl4 A216cl3 A216cl2

Genotipo C

B1648 GAV92 ARK99

CUT2 NLL1449QX FRL1450QX

Connecti ArgA188

A216Cl8 AV1115 A0082Jfw ArgA121 AR08ER26

A216Cl7 AV1110

Beaudette M41 AV1157B AV1157C

AV1120 AV1157A ArgA110

AV1013 AR01BA04

Ma5 ArgAV1212 ArgA114 AR08ER24 H120 AR08ER25 AR07ER19 ArgAV1211

KB8523 ArgA226169

ArgA033 ArgA158Mart ArgAV1620G ArgAV1115G AV1130 ArgA1731591 ArgA170_157 ArgAV1156 ArgA221576 ArgA221582 A230N2Tc IBV 11-15G

Vacunas

DE072

100

100

3843

24

13

19

50

98

55100

40

3059

45

85

53

71

31

23

14

2511

10

3

16

21

56

74

95

67

97

59

39

70

27

19

18

13

66

33

51

72

44

71

74

64

99

2767

100

52

50

98

62

68

53

16

12

36

52

58

3076

33

39

36

38

13

27

74

18

64

23

9

20

26

89

99

60

46

39

7

38

10

28

13

18

99

93

100

51

68

57

30

68

59

60

3748

57

0

40

68

67

55

39

11

22

8

34

1

20

1

1

2

18

12

9

15

3

1

4

18

48

0.1

Arbol filogenético de

muestras de IBV

2008

(22)

2009-2013

(152)

Connecti

ArgA188

A216Cl8

AV1115

A0082Jfw

ArgA121

AR08ER26

A216Cl7

AV1110

Beaudette

M41

AV1157B

AV1157C

AV1120

AV1157A

ArgA110

AV1013

AR01BA04

Ma5

ArgAV1212

ArgA114

AR08ER24

H120

AR08ER25

AR07ER19

ArgAV1211

KB8523

ArgA226169

ArgA033

ArgA158Mart

ArgAV1620G

ArgAV1115G

AV1130

ArgA1731591

ArgA170_157

ArgAV1156

ArgA221576

ArgA221582

A230N2Tc

IBV 11-15G

38

43

24

13

19

50

98

23

25

11

31

10

40

30

59

45

85

53

71

14

3

16

21

56

74

0.01

Vacunas

HVR1_B1

ArgA088

ArgA098

ArgA0101

ArgA0089

ArgA0082_D

ArgA086Sta

ArgA112636

ArgA0081

AR02BA05

A_FD

ArgA086Sup

ArgA0094

ArgA112639

ArgA097

ArgA0082_A

A140fw

AV1116

AV1117

HVR1_A

AR08BA16

AV1125

AV1033

AR07ER18

HVR1_025

ArgA0102

AR05BA08

ArgA090Anti

AR07BA15

HVR1_B15

AR01BA03

AV1112

30

7

6

7

33

36

13

39

38

27

18

68

16

62

53

12

36

52

58

23

74

64

9

20

26

89

0.01

Genotipo B

BraUSP11

BraUSP05

ArgAV1226

ArgA212Tc5

ArgA212Tc1

AR03BA06

ArgA212Tc2

ArgA212R4

ArgA212Tc4

ArgA212Tc3

AV1021

ArgA225

AR06BA13

AV1107

ArgA219

ArgAV1222

IBV 8Hu8

AV1006

AR06BA14

ArgA217

A216_vo

A216Cl6

A216Cl9

A216Cl10

A216cl4

A216cl2

A216cl3

52

66

33

44

72

71

64

70

39

67

97

59

27

19

18

13

51

74

99

0.02

Genotipo C

Genotipo A

Ch__Q1

Ch_J2

Ch_T3

AV1040

AV1029

ArgA150

ArgA169Tc

AV1134

ArgAV1228

ArgAV1164

ArgAV1165

ArgA230N3

ArgA170_163

ArgAV1225

AV1108

AV1039

A151_1043

AV1314

AR05RN07

AR06BA12

AV1014

AV1308

AV1118

AV1129

ArgA213_095

AV1126

AV1124

A151_1045

ArgAV1620C

ArgA129

AR06BA10

AR06BA11

A151_1046

ArgA221574

AV1027

ArgA227

ArgA120

ArgA166TcN4

AV1128

AV1136

ArgAV1147

ArgA226170

Ariel_IBV_D

ArgA226_93

AR08ER22

AR08BA21

ArgA133

46

63

33

7

93

19

30

19

69

31

16

0.005

Relaciones

genéticas

Genotipo A

GRAY

JMK

D207

6_82

UK_167_84

D274

Holte

4-91 (793/B)

Italia 02

Genotipo B

B1648

BraUSP11

BraUSP05

Genotipo C

GAV92

ARK99

CUT2

LX4

QX (NLL1449)

QX (FRL1450)

Cluster Qx

Cluster vacunas (Mass Conn)

DE072

97

99

99

93

47

99

95

51

40

99

64

41

87

94

52

7

4

412

3

115

10

99

0.05

Bronquitis Infecciosa e inmunosupresión

38%

24%

15%

23%

IBV

IBV+IBDV

IBV+CIAV

IBV+IBDV+CIAV

Al menos el 62 % de los casos positivos a Bronquitis

Infecciosa también presentaban IBDV, CIAV o ambas.

EEA INTA Concepción del

Uruguay (2007-2012)

Año 2013:

Etapa 1: Purificación, amplificación y caracterización molecular del inóculo

proveniente de las muestras de campo.

Etapa 2: Elección de la muestra para usar como inóculo en la prueba de

protección.

Etapa 3: Titulación del inóculo.

Etapa 4: Prueba de protección contra infección.

Propuestas de actividades a desarrollar en INTA

Etapa 1: Purificación, amplificación y caracterización molecular del

inóculo proveniente de las muestras de campo.

• Se recibieron dos muestras de campo (riñones), denominadas AV1308 y AV1314.

• Las muestras fueron procesadas y luego inoculadas (vía saco alantoideo) en

embriones de pollo de 10 días de desarrollo.

• A los 7 días post-inoculación, se recolectó el líquido alantoides y se evaluó por

RT-PCR.

Resultados fuertemente positivo.

• La caracterización molecular indicó que AV1308 y AV1314 pertenecen al genotipo

A Argentino.

Etapa 2: Elección de la muestra para usar como inóculo en la prueba

de protección.

• Selección de inóculos (amplificados y purificados por pasaje en EP) para probar

infectividad en pollos SPF.

A. 1308 or 1\10

B. 1308 Al 1\5

C. 1308 Al 1\10

D. 1314 Ea 1\10

E. 1314 or 1\5

F. 1314 or 1/10

G. Control negativo

H. Control positivo

A B C D E F C- C+

• Administración de los inóculos seleccionados en pollos SPF de 17 días de edad.

Dosis 1:5 del título original (líquido alantoideo).

100 µl vía intra-traqueal.

Evaluación diaria por 8 días.

No signos clínicos

No Lesiones ?

http://www.google.com.ar/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&docid=yM_LDZCCwHZSNM&tbnid=bERHbPaNzfQRUM:&ved=0CAUQjRw&url=http://jgdiaries.com/wordpress/?p=152&ei=m9toU4y6D6iksQT35ICwDQ&bvm=bv.66111022,d.cGU&psig=AFQjCNFLRcPcy1fPVr68wtoqYwiqg624yA&ust=1399467180421247

Etapa 2: Elección de la muestra para usar como inóculo en la prueba

de protección.

• Se tomaron muestras de hisopado traqueal (3 dpi) y de riñón (8 dpi) para

evaluación por RT-PCR.

A. 1308 or 1\10

B. 1308 Al 1\5

C. 1308 Al 1\10

D. 1314 Ea 1\10

E. 1314 or 1\5

Hisopado traqueal

Riñón

Mm A B C D E

Mm A B C D E

El virus replicó

satisfactoriamente;

sin embargo no se

observaron signos

clínicos

Etapa 3: Titulación del inóculo (muestra 1308or).

• Titulación en embrión de pollo

Se utilizaron embriones (SPF) de 10 días de desarrollo.

• Titulación en pollos SPF de 30 días de edad.


• Titulación en pollos SPF de 30 días de edad.

La titulación se llevó a cabo con diluciones seriadas (base 10) del líquido.

alantoideo proveniente de la purificación de la muestra (1308) original.

Las diluciones se administraron vía intra-traqueal (100 µl).

Grupo Número de aves Dilución del inóculo purificado

Control 8 -

A 8 1:10

B 8 1:100

C 8 1:1000

D 8 1:10000

No se observaron signos clínicos característicos en ninguna de las diluciones.

Se tomaron muestras de hisopado traqueal (3 dpi) y riñón (7 dpi) para detección de

virus por RT-PCR.

Mm C- C- 10-1 10-1 10-2 10-2 10-3 10-3 10-4 10-4 C- C+ Hisopados traqueales

(3 dpi)

Homogenato de

riñón (7 dpi)

• Resultado de RT-PCR

Se conformaron pooles con muestras de 4 animales c/u

Mm C- C- 10-1 10-1 10-2 10-2 10-3 10-3 10-4 10-4 C- C+


Hisopados

traqueales (3 dpi)

Mm 1 2 3 4 5 6 7 8 C- C+


• Resultado de RT-PCR

Evaluación individual de las muestras que conformaban los pooles de la

dilución 10-4 (1:10000).

Homogenato de

riñón (7 dpi)

Mm 1 2 3 4 5 6 7 8 C- C+

1- No se alcanzó el límite de dilución !

Conclusiones etapa 3:

2- La muestra purificada se diluyó hasta 1:10000 y todavía se produjo la

replicación viral en el hospedador natural.

4- Si bien el ensayo se realizó en pollos Leghorn (diferente susceptibilidad a la

infección), una diferencia tan elevada entre la dosis infecciosa mínima y la

máxima sin manifestaciones clínicas sugiere que la cepa aislada del brote de

IBV no es de alta virulencia.

3- Un aumento de 104 la dosis infecciosa en pollo no generó manifestaciones

clínicas después de la infección intratraqueal


• Prueba de desafío con aves vacunadas.

En esta prueba se organizaron cuatro grupos de tratamientos.

Grupos

Vacunación Desafío Muestras

1 do 14 do 30 do 3 dpi 7 dpi

Massachusetts Connecticut 793B IBV 1308

(102DIP) HT Necropsia

1 (9) Mass/Conn

2 (10) Mass/793B

3 (10) NVx/Ch

4 (10) NVx-NCh

Objetivo y metodología

Evaluación de la eficiencia de protección contra la infección de IBV (cepa

1308), conferida por vacunas comerciales de diferente serotipo.

Diseño experimental

MUESTRAS

• Histopatología: Riñón y tráquea

• RT-PCR: Riñón, tráquea (HT) y tonsila cecal

• Ciliostasis: Tráquea

Vacuna

793/B

Vacuna

Massachusetts

Pollo SPF

1 día de edad

Vacuna

Connecticut

Desafío

1308

IT (102 DIP)

HT (3dpi) Sacrificio y

muestreo (7dpi)

14 días 30 días 33 días 37 días


• Histopatología:

Traqueítis leve a moderada en la mayoría de las aves desafiadas. No hubo

diferencia significativa entre aves vacunadas.

No se observaron lesiones significativas en tejido renal en ningún tratamiento.

• Evaluación de ciliostasis:

El desafío viral del grupo Mass-Conn resultó en una mayor ciliostasis (70%)

comparada con Mass-793/B (50%).

Resultados de RT-PCR:

Evaluación de pooles de muestras

Mm 1A 1B 2A 2B 3A 3B 4A 4B C- C+

Hisopado de tráquea (3dpi)


Mm 1A 1B 2A 2B 3A 3B 4A 4B C- C+

Homogenato de Riñón (7dpi)

Referencia Número de

muestras en pool Tratamiento

1A 5 Mass-Conn

1B 4

2A 5 Mass-793/B

2B 5

3A 5 NVx-Ch

3B 5

4A 5 NVx-NCx

4B 5

Mm A B C D E F G H I A B C D E F G H I

Grupo 1A

Hisopados traqueales Homogenato renal

Grupo 2A

Mm A B C D E F G H I J C- C+

Hisopados traqueales Homogenato renal

Grupo 1B Grupo 1A Grupo 1B

Grupo 2B

Referencia Tratamiento

1A Mass-Conn

1B

2A Mass-793/B

2B

3A NVx-Ch

3B

4A NVx-NCx

4B

Resultados de RT-PCR:

Evaluación de pooles positivos (apertura)

0

20

40

60

80

100

Vx M-C Vx M-

793/B

NVx-NCh NVx-Ch

Porc

enta

je d

e posi

tivos

RT

-PC

R

Hisopado traqueal (3 dpi)

Porcentajes de animales positivos a IBV por RT-PCR (tráquea y riñón)

0

20

40

60

80

100

Vx M-C Vx M-

793/B

NVx-NCh NVx-ChP

orc

enta

je

de

posi

tivos

RT

-PC

R

Homogenato de riñón (7 dpi)

1- No fue posible determinar diferencias entre los tratamientos mediante el uso

de histopatología o la evaluación de ciliostasis

2- El uso de RT-PCR permitió observar diferencias entre tratamientos.

3- La evaluación de tráquea indicó un menor número de animales positivos a

IBV en el grupo vacunado con la combinación Mass-793/B.

Lo mismo se observó al evaluar la presencia del virus en el tejido renal,

aunque la diferencia no fue considerable.

Conclusiones etapa 4:

4- La implementación de PCR en tiempo real permitirá cuantificar carga viral

con exactitud y por consiguiente permitirá una mejor evaluación de la

protección.

?

Interrogante

• Reporte original del brote mencionaba pérdidas considerables debido a elevada

mortalidad.

• Sin embargo, los virus aislados de dos granjas no presentaron elevada

virulencia en nuestro estudio.

http://thesentientsimian.blogspot.com/2011/05/post-rapture-rap.html

Bronquitis Infecciosa e inmunosupresión

38%

24%

15%

23%

IBV

IBV+IBDV

IBV+CIAV

IBV+IBDV+CIAV

Al menos el 62 % de los casos positivos a Bronquitis

Infecciosa también presentaban IBDV, CIAV o ambas.

EEA INTA Concepción del

Uruguay (2007-2012)

Virulencia ≠ Patogenicidad

Virulencia: Atributo del agente etiológico

Patogenicidad: Efecto de un agente etiológico virulento sobre el hospedador

Agente infeccioso

de virulencia

moderada

Hospedador con

sistema inmune

competente

Hospedador no

competente

inmunologicamnete

Patogenicidad baja-

moderada

Patogenicidad

elevada

Objetivo y metodología

Evaluación del efecto de la infección con el aislado 1308 Al en pollos

previamente infectados con IBDV (cepa Winterfield) con y sin dexametasona

Diseño experimental

G1: ----- / -----

G2: IBDV / ----

G3: ---- / IBV

G4: IBDV / IBV

G5: IBDV / Dexa / IBV

G6: ---- / Dexa / IBV

MUESTRAS • Hisopados traqueales

• Riñón y BF para histopatología

• Tonsilas cecales y BF para citometría

• Riñón y BF para PCR

Tratamientos

IBDV

Winterfield

vía oral

Pollo SPF

7 días de edad

8 dpi

IBV

1308 Al

intratraqueal

Dexametasona

11 dpi

Hisopados

traqueales

15 dpi

Sacrificio y toma

de muestras

Ensayo de co-infección de IBV con IBDV

Homogenato de riñón (7 dpi) de aves

inoculadas con 1308Al (1:1000)

Mm 1 2 3 4 5 6 C- C+ 1. Control Negativo

2. IBDV

3. IBV

4. IBV + IBDV

5. IBV + IBDV + DEXAMETASONA

6. IBV + DEXAMETASONA

C-. Control negativo

C+. Control positivo

Resultado de evaluación mediante RT- PCR convencional para

detección de IBV

Resultados

PCR fragmento IBV en riñón

PCR semi-cuantitativa

• Extracción de RNA de riñón

• Síntesis de cDNA (RT)

Dilución seriada base 10

• Amplificación por PCR (fragmento de región hipervariable de proteína S1 de IBV)

P: Sin diluir

-1: 1:10

-2: 1:100

-3: 1:1000

-4: 1:10000

G1: -----/-----

G2: IBDV/----

G3: ----/IBV

G4: IBDV/IBV

G5: IBDV/Dexa/IBV

G6: ----/Dexa/IBV

• El virus aislado del brote de IBV 2013 presentó virulencia baja a moderada

en este ensayo.

• La combinación Mass-793/B fue más eficiente para inhibir la replicación

viral en tráquea que Mass-Conn. Sin embargo, dicha eficiencia fue menor

cuando se evaluó la replicación viral en riñón.

• Los ensayos realizados no son definitivos, deben realizarse mas estudios.

Ajustar los tiempos de toma de muestra.

Uso de qPCR para cuantificación de carga viral.

Emplear aislamientos de genotipos B y C adaptados a embrión de pollo

(para facilitar la estandarización).

Conclusiones generales:

Consideraciones necesarias para discutir el uso de una

vacuna viva atenuada.

Concepto ecológico de enfermedad

Factores del

ag. etiológico

Factores del

hospedador

Factores del

ambiente


Factores del

ag. etiológico

Factores del

hospedador

Factores del

ambiente

Enfermedad:

Es consecuencia de la

combinación de factores

del hospedador, del

ambiente y del agente

etiológico.

E

Factores del

hospedador

Factores del

ambiente

Factores del ag.

etiológico

• Linaje

• Nutrición

• Resistencia

• Inmunocompetencia

• Infecciones concurrentes

• Intoxicaciones

• Temperatura y humedad

ambiental (correcta

ventilación)

• Factores de stress (carga

animal)

• Higiene ambiental (p.ej:

carga viral)

• Restricción al ingreso de

personas y animales

• Serotipo

• Virulencia

• Resistencia ambiental

• Variabilidad

• Capacidad de

persistencia

Factores involucrados

. .


Factores del

ag. etiológico

Factores del

hospedador

Factores del

ambiente

Evolución viral

Teoría de la dinámica de poblaciones virales

Vacuna Virus salvaje

Virulencia Virulencia

Atenuación Atenuación

Pasajes en serie

Hospedador

Cultivo celular / embrión

Atenuación

Reversión

Variante B Variante A

Serotipo Mengano Serotipo Sultano

Pasajes en serie

Hospedador vacunado

Deriva antigénica

Respuesta inmune inducida por la vacuna actúa como un factor de

selección.

• Fundamentalmente cuando la vacunación no inhibe completamente la

replicación del virus

Serotipo

Mengano

Variante B

Serotipo

Sultano

Vacunación (filtro)

Serotipo (tipo de malla) Fulano

Ejemplo:

Variante A

Retiene partículas amarillas

Filtra partículas azules

Variante B Variante A

Deriva antigénica

Vacuna

(Serotipo Mengano) (Serotipo Sultano)

(Serotipo Fulano)

acaccgactgatgactgactgatg

atgatcgatgactgactgactgtcg

agctagactgactactcgtgactac

atgacgatatgacggcgctctgaa


ctgatcgatgactgactgactgtcg


atgacgatatgacggcgctctgagt

agggatatgtattacttattacgcgc

agtatctatctcggtagctttgcgctg

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atgatcgatgactgactgactgtcg


atgacgatatgacggcgctctgaa


ctgatcgatgactgactgactgtcg


atgacgatatgacggcgctctgagt







Variante A

Variante B

Consenso A


Consenso B


Co-infección

acaccgactgatgactgcaa

acaccgcacg

acaccgactgatg acaccgactgtg

acacg

acaccgactgatgg

Recombinación!

Recombinantes sueden estar mejor

adaptadas que las variantes virales de

las que se originaron!

Algunos artículos sobre recombinación

genética en IBV publicada en los últimos años

Consideraciones finales (perspectiva)

• El ingreso de vacunas vivas atenuadas inéditas en el país no es inocuo.

– Los riesgos deben considerarse cuidadosamente.

• Pruebas a campo deben incluir controles.

– Planteles sin vacunar.

– Planteles vacunados con la combinación Mass-Conn.

• Los Institutos de Biotecnología y Virología (INTA) implementarán un estudio

sobre recombinacion de Bronquitis Infecciosa en los planteles Argentinos.

Agradecimientos

INTA Instituto de Virología

• Dr. Ariel Pereda

• Dra. María Isabel Craig

• Tec. Valeria Olivera

• Marta D’angelo

INTA EEA Concepción del Uruguay

• Dr. Federico Vera

• Lic. Florencia Rojas

SENASA

• Dra. María Victoria Terrera

• Dra. Mariana Jáuregui Lorda

• Dra. Magalí Bombicino

• Dr. Héctor Sanguinetti

INTA Instituto de Biotecnologia

• Dra. Silvina Chimeno Zoth

• Dra. María Jose Gravisaco

• Lic. Juan Carballeda

Muchas Gracias!

INTA. CICV y A

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