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BIOLOGÍA: EXPERIMENTOS NOTABLES PARA REBATIR LA TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA Imagen: Microsoft Prof. Bartolomé Yankovic Nola 2010 Índice ¿De dónde procede la vida? 2 El origen de los seres vivos: Redi, Spallanzani, Needham 3 El notable experimento de Pasteur 7 Las doctrinas sobre la generación de los seres vivos 13 El experimento de Pouchet 14 Objeciones al experimento de Pouchet 15 El diseño experimental de Pasteur 16 Más detalles del experimento de Pasteur 17 Un físico da la estocada final a la GE 20

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BIOLOGÍA: EXPERIMENTOS NOTABLES PARA REBATIR LA

TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA

Imagen: Microsoft

Prof. Bartolomé Yankovic Nola 2010

Índice ¿De dónde procede la vida? 2 El origen de los seres vivos: Redi, Spallanzani, Needham 3 El notable experimento de Pasteur 7 Las doctrinas sobre la generación de los seres vivos 13 El experimento de Pouchet 14 Objeciones al experimento de Pouchet 15 El diseño experimental de Pasteur 16 Más detalles del experimento de Pasteur 17 Un físico da la estocada final a la GE 20

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BIOLOGÍA: EXPERIMENTOS NOTABLES PARA REBATIR LA TEORÍA DE

LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA

¿De dónde procede la vida?

“Se llena de trigo una vasija cuya boca se tapa con una camisa sucia. Un

fermento que procede de la camisa, transformado por el olor de los granos,

convierte en ratones el propio trigo”. (Jean Baptiste van Helmont).

Esta idea, que tan absurda parece ahora, fue durante mucho tiempo la

creencia más extendida sobre el origen de la vida. Según esta teoría, los seres

vivos se originaban de dos maneras: una, por reproducción sexual, en la que

un organismo masculino y otro femenino se unían para formar un nuevo ser;

otra, por generación espontánea (GE), según la cual los seres procedían de

una cierta “fuerza vital” que poseían algunas sustancias.

En China, por ejemplo, pensaban que los pulgones nacían por

generación espontánea de los tallos de bambú; en Egipto se atribuía el

nacimiento de gran cantidad de seres vivos al barro del Nilo cuando éste

recibía el calor del Sol; así se producirían, por ejemplo, ranas, sapos, culebras,

ratones e incluso cocodrilos.

Grabado antiguo sobre la generación espontánea: las hojas de un árbol, si caían al agua originaban peces; si caían al suelo… a partir de ellas se desarrollaban, por ejemplo, aves.

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Los seres producidos por generación espontánea – según la teoría –

poseían las mismas características que los nacidos por reproducción sexual;

de manera que en nada se distinguían estas dos formas de generar vida.

Incluso en el siglo XVII era generalmente aceptada la idea de la generación

espontánea. Un importante fisiólogo de esta época, van Helmont, hacía la

declaración ya citada como consecuencia de sus estudios sobre el origen de la

vida.

Ciertamente… los ratones se introducían en la vasija que preparaba Van

Helmont para sus experimentos; no surgían espontáneamente.

� Jean Baptiste van Helmont… si bien creía en la GE, realizó un experimento

clásico en la historia de la Biología, rebatiendo a Aristóteles, quien sostenía que

las plantas se alimentaban tragando tierra. Después de casi 20 siglos, van

Helmont demostró la falsedad de esta afirmación, formulando la siguiente

hipótesis:

• Si las plantas se alimentan tragando tierra (hipótesis):

• Entonces (predicción), al cabo de un tiempo si tengo una planta en un

macetero, ésta aumentará de peso y disminuirá el de la tierra.

Averigüe en qué consiste el experimento de Van Hemont, cuál fue su

diseño; los registros hizo y las conclusiones que formuló.

El origen de los seres vivos: Redi, Spallanzani, Needham

Las ideas científicas evolucionan; cambian, se modifican, se rechazan, y

esto es propio del desarrollo científico.

Para elaborar una teoría científica es preciso, en primer lugar, plantearse

el problema, que en este caso sería: ¿cuál es el origen de los seres vivos? En

segundo lugar, formular una hipótesis que explique la generalidad de los

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hechos conocidos y, por último, comprobar experimentalmente la validez de

dicha hipótesis. Sólo una vez hecho esto se tendrá la seguridad de una

explicación satisfactoria.

Francesco Redi (1626 – 1697), médico, naturalista, fisiólogo, y literato italiano. (Estatua del científico en la Galería Uffici, Florencia, Italia).

Redi, objetó la teoría de la generación espontánea. Redi sostenía que

“todo ser vivo procede de otro ser vivo”. Pero, para demostrar que su hipótesis

era verdadera, tenía que comprobarla experimentalmente: dispuso tres frascos

con carne en su interior: el primero lo dejó destapado, el segundo lo cubrió con

un trozo de gasa, y el tercero lo cerró herméticamente, de manera que no

tuviese ningún contacto con el exterior. Corría el año 1668.

Experimento de Redi: en el frasco herméticamente cerrado no se desarrollan gusanos.

Según la teoría de la generación espontánea, de la carne en

descomposición “nacían” unos gusanillos blancos. Redi intentó demostrar con

su experimento que esos gusanillos blancos de la carne no eran otra cosa que

larvas de mosca y que si las moscas no estaban en contacto con la carne, de

ésta no nacerían gusanos. Efectivamente, al cabo de unos días se observó que

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el primer frasco - destapado -, aparecían los gusanillos, puesto que las

moscas habían tenido ocasión de depositar allí sus huevos. En el segundo

frasco, en cambio, los huevos fueron depositados sobre la gasa y, por tanto, no

se desarrollaron los gusanos, porque para ello era necesario que los huevos

estuvieran en contacto con la carne en descomposición; en el tercer frasco –

hermético -, no apareció gusano alguno, porque las moscas no pudieron

introducir sus huevos.

Este experimento demostró que la hipótesis de Redi era correcta, al

mismo tiempo que contribuyó a echar por tierra la teoría de la generación

espontánea… aunque no en forma categórica.

Lázaro Spallanzani (1729 – 1799), naturalista italiano, tuvo múltiples intereses en investigación siendo reconocido por sus pares como “biólogo entre los biólogos”.

Posteriores experimentos realizados por otro científico italiano, Lázaro

Spallanzani, confirmaron la hipótesis de Redi y demostraron la imposibilidad de

la generación espontánea incluso para los seres microscópicos. Los estudios

de Spallanzani abrieron el camino a Pasteur.

En 1769 Spallanzani diseñó una serie de experimentos para refutar los

trabajos realizados por el sacerdote católico inglés John Needham, quien había

calentado caldo de carne en diversos recipientes que selló posteriormente,

para evitar contaminación externa… pero… así y todo encontró

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microorganismos en el caldo tras abrir los recipientes. Needham creía que esto

demostraba que la vida surge de la materia no viviente.

John Needham (1713 – 1781), sacerdote y biólogo inglés, defendió, en 1745, la validez de la teoría de la generación espontánea. Sin embargo, su diseño experimental fue objetado: los recipientes que usó no estaban debidamente sellados…

No obstante, prolongando el periodo de calentamiento y sellando con

más cuidado los recipientes, Spallanzani pudo demostrar que dichos caldos no

generaban microorganismos mientras los recipientes estuvieran sellados. Este

caso particular demuestra la importancia de un diseño experimental cuidadoso,

como soporte de las conclusiones. Además, la comunicación propiamente tal

debe permitir que otros investigadores, de cualquier lugar del mundo, puedan

repetir el experimento y llegar a las mismas condiciones.

Needham afirmaba que las cocciones del italiano destruían el “espíritu

vital”. Pero Spallanzani demostró que lo único que la cocción solo destruía las

esporas de las bacterias, y no un principio místico.

En un ambiente totalmente estéril, es decir, sin ningún microbio, es

imposible que se desarrollen nuevos seres vivos. Por lo tanto, no existe

generación espontánea. Como afirmaba Redi, “todo ser vivo procede de otro

ser vivo”. Un siglo más tarde Louis Pasteur, con sus propios descubrimientos

en este campo, descartó cualquier duda en torno a la producción de seres

vivos por generación espontánea.

� ¿Qué diseño experimental usaría en clases para repetir el experimento de

Redi?

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El notable experimento de Pasteur

Louis Pasteur (1822 – 1895), científico francés, destacó por sus investigaciones en el campo de la bacteriología. Para los biólogos Pasteur es solo comparable con el genio de Charles Darwin.

En 1676, Anton van Leeuwenhoeck, biólogo y comerciante holandés,

cubrió los microorganismos. Las observaciones realizadas no le permiten

dilucidar cómo se originan estos seres vivos y entonces se introduce un nuevo

motivo de discusión e investigación en torno al origen de la vida.

Leeuwenhoeck no tenía mayor formación científica; sin embargo, perfeccionó el

microscopio y realizó una serie de observaciones de gran importancia: fue el

primero en observar los glóbulos rojos y los espermatozoides.

Louis Pasteur estaba firmemente convencido que la teoría de la

generación espontánea era falsa. Agreguemos que en la llamada “guerra de las

infusiones” entre los partidarios de Needham y Spallanzani, el mundo estaba

dividido, y, más bien, al lado de Needham.

En la época de Leeuwenhoek, un contemporáneo suyo, Luis Joblot, en

1718, desarrolló una serie de ideas que tendrían gran influencia en Pasteur.

Para Joblot, a partir de sus propios experimentos podía deducirse que los

microbios que se desarrollaban en infusiones de pasto tenían origen aéreo; es

decir, aparecían en el caldo pero provenían del aire y no de algún “principio

activo” presente en la infusión.

Joblot preparó una infusión de pasto y la hirvió durante diez minutos, al

cabo de los cuales distribuyó en dos frascos de vidrio el contenido del

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recipiente. Uno de ellos lo tapó herméticamente con pergamino, material muy

poco poroso; y el otro frasco lo dejó abierto. El contenido del frasco destapado

se enturbió poco a poco, mientras que el del frasco tapado permanecía

translúcido. Al examinar al microscopio (rudimentario en aquella época) una

gota de cada infusión, observó que en la que correspondía al frasco abierto

había gran cantidad de microbios, mientras que en el otro no había microbios.

Concluyó que los microorganismos – en el primer caso -, provenían del aire,

pensando que la cubierta de pergamino podría haber afectado la “fuerza vital”

de la infusión. Para descartar esta idea destapó el frasco y esperó algunos

días. El contenido, translúcido, se opacó de la misma forma que el del frasco

abierto. Así, estableció que estos organismos provenían del aire.

Pero estos experimentos no fueron considerados de manera alguna

concluyentes para desterrar la teoría de la generación espontánea.

El tema tenía especial relevancia para explicar el origen de las

enfermedades. Hacia 1840 se había reunido suficiente evidencia sobre la

presencia de microorganismos en tejidos o sangre que provenía de animales o

personas enfermas, postulando que estos organismos serían agente causal de

enfermedades. Un destacado anatomista, Jakob Henle, afirmó, en 1840, que

para que un organismo microscópico pudiera ser considerado agente causal de

una enfermedad infecciosa sería necesario:

• En primer lugar, encontrar dicho agente constantemente en los

tejidos del enfermo;

• En segundo lugar, sería necesario aislar el microorganismo, y,

• Finalmente, reproducir la enfermedad con dicho agente.

Estas ideas tendrían extraordinaria influencia en Louis Pasteur y Roberto

Koch, quienes establecerían con rigor científico el origen microbiano de las

enfermedades.

A mediados del siglo XVII la controversia entre los defensores y

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del francés F. Pouchet, que trabajo con infusiones similares a las de

Spallanzani.

Pouchet preparó una infusión de pasto y le añadió oxígeno y nitrógeno

para formar “un aire artificial”. Días después encontró millones de bacterias,

hongos y protozoos en la infusión. Con esto rebatía a quienes sostenían que

los microorganismos provenían del aire.

Pasteur, convencido de la existencia de gérmenes, afirmó que estos

experimentos no se habían realizado con rigor. Repitió los experimentos de

Spallanzani y confirmó que la teoría de la generación espontánea era falsa.

Pero sus resultados no satisficieron a la comunidad científica: fueron

considerados insuficientes. La Real Academia Francesa de Ciencias no sabía

quien tenía la razón, Pasteur o Pouchet y decidió premiar a quien realizara el

mejor estudio sobre la generación espontánea.

Para Pasteur la aparición de microorganismos en líquidos alterables

cuando están en contacto con el aire, se debía a que los microorganismos

contaminan al líquido y se reproducen en dicho medio. Entonces, predijo

Pasteur, si se evita la llegada de microorganismos al líquido, se impedirá su

desarrollo. El razonamiento era impecable, pero hacía falta demostrarlo. Su

famosa serie experimental se inició en 1859.

En términos de método científico, entonces, hay una hipótesis planteada

por Pasteur:

• Hipótesis. No hay generación espontánea de microorganismos; éstos se

encuentran en el aire y contaminan los líquidos;

• Entonces (Predicción): Si se impide la llegada de microorganismos a un

líquido, éste no se contaminará.

Todo es impecable desde un punto de vista lógico, pero hace falta

someter a prueba la hipótesis. ¿Cómo? Diseñando y realizando un

experimento. (Es importante destacar que en la mayoría de los casos, la

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palabra “experimento” se refiere a hacer algo… para ver qué pasa… incluso a

nivel escolar se habla de “experimentos”, cuando se trata de actividades. La

razón es simple: un experimento se plantea o propone como respuesta a una

hipótesis… No es hacer cualquier para ver qué ocurre).

Entonces, el problema de Pasteur se reducía a diseñar un experimento

que – por una parte permitiera que el aire – pudiera circular por el sistema, u,

por otro, que tanto el polvo (que contiene gérmenes), como los gérmenes

mismos que están en el aire, NO puedan penetrar al interior de un líquido o

caldo alterable… La circulación de aire era una condición porque los partidarios

de la GE sostenían que al aire tendría algún “principio vital” de tal forma que si

se eliminaba los seres vivos no se podría generar.

Este es el relato que hace Pasteur sobre su famoso experimento de los

matraces cuello de cisne:

“En distintos frascos de vidrio coloqué, separadamente, líquidos muy

alterables cuando están en contacto con el aire: agua de levadura de

cerveza con azúcar, orina, jugo de remolacha, y agua de pimienta.

Luego procedí a doblar el cuello de los frascos a la llama, que así

quedan curvados en varios sectores. Después herví el contenido de los

frascos, de tal forma que el vapor salió por el extremo del cuello de los

matraces. Dejé enfriar y observé al cabo de algunos días que los

líquidos no se alteraban. Esto ha dejado sorprendidos a los partidarios

de la generación espontánea”

Y agrega:

“Si se corta el cuello de uno de estos matraces con una lima, al cabo de

pocos días comienzan a aparecer microorganismos, tal como sucede al

trabajar al aire libre. Esto demuestra que los microorganismos son

transportados por el aire, y que si en su recorrido encuentran obstáculos

- como el cuello doblado del matraz - no logran avanzar para hacer

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contacto con el líquido. En las soluciones nutritivas esterilizadas – que

no están en contacto con el aire - no prosperan los microorganismos.”

A) Tipo de matraz usado por Pasteur en su experimento. Debido a las

curvaturas del cuello las partículas de polvo no pueden llegar desde el

exterior hasta el líquido, aunque el aire circule libremente. El líquido

permanece inalterado.

B) Si se rompe el cuello, el líquido se contamina. El color más oscuro del

líquido representa el crecimiento bacteriano.

Entonces, en el diseño experimental de Pasteur un factor clave es que

“el cuello doblado del matraz” atrapa al polvo y a los gérmenes, sin contaminar

al caldo…

Pasteur no cerró el matraz en su extremo libre. En realidad usó muchos

matraces, algunos de los cuales todavía se conservan intactos en el Instituto

Pasteur de Paris. Los microorganismos, entonces, podían ingresar y

contaminar el cuello, pero no el caldo… esto, siempre que el matraz se

mantuviera verticalmente.

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Líquido inalterado

En algunos casos usó un filtro que colocó cerca de la boca de los

matraces; en otros, actuó como filtro la propia curvatura de los matraces: los

microbios pudieron penetrar pero la curvatura impide que lleguen al caldo y

quedan adheridos a las paredes. Si se inclinaban los matraces o se rompían

sus cuellos, el líquido se contaminaba.

Es importante precisar la importancia del cuello o eventualmente del

filtro, porque algunas publicaciones sostienen que Pasteur selló a la llama las

aberturas de todos los matraces una vez que se enfriaron, lo que no es cierto.

Sólo selló algunos matraces como se describe en el documento siguiente, con

objetivos muy claros. Pero el diseño original NO incluye el sellado de los

matraces.

* Véase LAS DOCTRINAS SOBRE LA GENERACIÓN DE LOS SERES VIVOS… en la

página siguiente)

Una pregunta obvia: ¿Por qué no cerrar la boca del tubo cuello de cisne?

Porque los partidarios de la generación espontánea afirmaban que para que la

vida se generara era fundamental la presencia de oxígeno. Entonces, en el

experimento de Pasteur la boca del tubo permite la libre circulación del aire,

que contiene oxígeno.

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Otro aspecto interesante es que si al concurso se hubieran presentado

quienes defendían la generación espontánea, con Félix - Archimède Pouchet

(1800 – 1976) a la cabeza, Pasteur habría perdido. Como se sabe aquellos no

se presentaron al concurso de la Real Academia de Ciencias de Francia en

señal de protesta. Solo quedó Pasteur quien usaba agua de levadura para sus

cultivos mientras que su oponente usaba agua de heno (pasto), que hoy

sabemos contiene gérmenes que no mueren a 100 °C y que se desarrollan

ante la entrada de una pequeña cantidad de oxígeno. Entonces, Pouchet,

hirviendo un caldo que no supera los 100 ºC tendría gérmenes en los

matraces… si hubiera seguido el diseño de Pasteur... porque algunos

gérmenes de ese caldo siguen vivos si no se alcanza una temperatura superior

a los 120 ºC. Tiempo después Pasteur descubrió que si no se alcanzaba una

temperatura de 120 °C no había seguridad de matar a todos los gérmenes.

LAS DOCTRINAS SOBRE LA GENERACIÓN DE LOS SERES VIVOS: DE LA

GENERATIO AEQUIVOCA(*) A LA DIVISIÓN CELULAR (Extracto)

Documento completo disponible en:

http://www.usuarios.multimania.es/medicinasiglo19/generacion.doc

(*) De la introducción del documento – conferencia:

(…) La gran tradición de la creencia popular, extendida a todos los pueblos y culturas, es la existencia de la generatio aequivoca, generatio spontanea o abiogénesis.

Notas del Editor

• Abiogénesis (A = sin; bios = vida; génesis = origen). Es la teoría de la generación

espontánea: los seres vivos pueden surgir a partir de la materia inanimada o sin vida,

sin perjuicio del mecanismo de reproducción sexual de algunas especies.

• Biogénesis: todo ser vivo proviene de otro ser vivo. (Bios = vida; génesis = origen)

El estudio de los microorganismos (gérmenes) y de su papel, tanto en

las enfermedades animales y humanas como en las diversas fermentaciones,

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llevó a Louis Pasteur (1822-1893) a tratar de responder a las siguientes

preguntas:

• ¿De dónde venían estos seres infinitamente pequeños?

• ¿Se originaban de progenitores semejantes?

• ¿O se originaban de novo siempre y cuando fueran favorables las

condiciones para su existencia? (Generación espontánea).

De este modo se vio inmerso en los debates de la generación

espontánea (GE). Se sabía que infusiones orgánicas susceptibles de

putrefacción, en las que se había destruido la vida por un calor prolongado a

alta temperatura, permanecían a menudo sin estropearse, y por lo general, no

se desarrollaba en ellas vida microscópica, mientras estuvieran protegidas del

contacto del aire. La mera admisión de aire, sin embargo, era suficiente para

hacer que los líquidos entraran en putrefacción o fermentación, apareciendo a

los pocos días gran variedad de microorganismos. Los partidarios de la GE

veían en estos cambios la evidencia de que era necesario el oxígeno para

iniciar la generación de la vida. Sus adversarios proclamaban, por el contrario,

que el aire simplemente introducía en los líquidos orgánicos los gérmenes vivos

de la putrefacción y fermentación.

Este confuso estado de cosas hizo crisis en 1858, cuando Félix Pouchet

leyó en la Academia de Ciencias de París un trabajo donde sostenía que había

producido la GE a voluntad admitiendo aire en la materia putrescible,

esterilizada bajo condiciones cuidadosamente seleccionadas.

El experimento de Pouchet

Felix Archimede Pouchet (1800 – 1872), naturalista francés fue director del Museo de Historia Natural de Rouen, su ciudad natal, y después profesor de la Escuela de Medicina de la misma ciudad. Defensor de la GE, la mayoría de sus partidarios defendían convicciones religiosas.

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Su experimento consistía en tomar una botella de agua hirviendo, que

cerraba herméticamente y que luego sumergía invertida en una vasija de

mercurio. Cuando se había enfriado bastante el agua, abría la botella bajo el

mercurio e introducía medio litro de oxígeno y una pequeña cantidad de

infusión de heno (pasto) previamente expuesta a una temperatura elevada por

largo tiempo. Creía que estas precauciones eran adecuadas para tapar

cualquier rendija de entrada en la botella a los microorganismos, pero a pesar

de ello aparecía regularmente el crecimiento microbiano en la infusión de heno

al cabo de pocos días. En 1859, publicó Hétérogénie concluyendo que la vida

podía originarse de nuevo a partir de soluciones inanimadas.

Con el fin de estimular los experimentos que disiparan la confusión, la

Academia instituyó en 1860 el premio Alhumpert “para arrojar, mediante

experimentos cuidadosamente dirigidos, nueva luz sobre la cuestión de la

llamada generación espontánea”. Desde 1859 ya estaba Pasteur trabajando en

este tema. Se aceptaba generalmente que una infusión orgánica, aun cuando

se la sometiera a calentamiento prolongado, padecería la fermentación o la

putrefacción por después de que se admitiera aire en ella. ¿Se debía esto al

hecho de que el aire natural era un factor esencial para la nueva generación de

la vida o era simplemente debido a que el aire contenía gérmenes preformados

y vivos?

Objeciones al experimento de Pouchet

Pasteur observó que el mercurio empleado en el momento de la

readmisión del aire en las botellas calentadas siempre contenía polvo y

gérmenes vivos en su superficie. Descubrió también que si se pudrían la leche,

la yema de huevo y la carne aun después de calentadas a 100 ºC, no se debía,

como habían creído muchos autores, a que la putrefacción fuese un proceso

inherente a estos materiales nitrogenados, sino a que los gérmenes que

contenían, para resultar inactivados, tenían que ser calentados a temperaturas

algo más altas. El uso de matraces con cuello de cisne, sugerido por Balard –

uno de los maestros de Pasteur -, para demostrar la posibilidad de mantener

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infusiones orgánicas calentadas en presencia de aire corriente, sin causar por

ello la aparición de vida microscópica, hizo famosas esas experiencias.

El diseño experimental de Pasteur

Después de introducir en la botella un líquido capaz de fermentar, el

experimentador alargaba el cuello del matraz hasta la forma de un tubo en S

sinuoso. El líquido se hervía entonces durante unos pocos minutos, hasta que

salía todo el aire forzado por el impulso del vapor a través del orificio del cuello.

Al enfriarse lentamente, el aire exterior regresaba al frasco, sin calentar y sin

filtrar. Como el cuello permanecía abierto, el aire del interior del matraz se

comunicaba libremente con la atmósfera sin calentar y sin filtrar del exterior y

existía un cambio gaseoso constante; y, sin embargo, el líquido en el matraz

permanecía indefinidamente estéril. Resultaba obvio, por tanto, que la

incapacidad de la vida para desarrollarse no podía deberse a ninguna

deficiencia en el aire. Que la propia infusión era capaz de sostener la vida

podía demostrarse fácilmente, pues bastaba que cayera en ella un poco de

polvo al romper el cuello del matraz para ver aparecer la vida microscópica, en

primer lugar en el punto inmediatamente inferior de la abertura.

• ¿Por qué permanecían entonces estériles los frascos después de

que era admitido el aire a través del cuello de cisne?

• ¿Por qué no podían entrar los gérmenes?

Era debido a que el aire se lavaba en la humedad que quedaba en las

curvas del cuello después de interrumpir el calentamiento. Al comienzo, cuando

era rápida la entrada del aire, la acción purificadora de este lavado se

aumentaba con la temperatura del líquido, aún suficientemente elevada para

matar a los gérmenes que se ponían en contacto con él. Más tarde, las paredes

húmedas del cuello fijaban (retenían) los gérmenes del aire según iban

pasando a través de la abertura. De hecho, cuando se sacudían los frascos de

tal manera que se introducía en la curva del cuello una pequeña gota de la

infusión, esta gota se enturbiaba aun cuando el orificio abierto hubiera estado

previamente cerrado de modo que nada nuevo hubiera entrado del exterior.

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Aún más: si la gota se mezclaba con el resto del líquido, este último se

infectaba como si se hubiera roto el cuello. Se ponía así en claro que el polvo

fino invisible que flotaba en el aire contenía gérmenes capaces de iniciar la vida

en los líquidos orgánicos calentados. Ante esta evidencia, Pouchet y sus

seguidores presentaron la objeción de que no era posible que hubiera

suficientes gérmenes en el aire para explicar la generación de la vida mediante

las técnicas utilizadas en el laboratorio.

Más detalles del experimento de Pasteur

Mientras trataba de contestar a esta objeción, Pasteur llevó a cabo

algunos de sus más famosos experimentos sobre la controversia de la GE, que

establecieron cómo los gérmenes de la putrefacción y de la fermentación están

distribuidos de una forma muy desigual.

• El cuello de un número de matraces que contenían extracto de

levadura y azúcar se alargaba mediante el fuego hasta formar

sólo un pequeño orificio, de modo que pudieran sellarse

fácilmente cuando se deseara. Se hervía entonces el líquido para

destruir las cosas vivas y expeler el aire, el cual quedaba

desplazado por una corriente de vapor de agua.

• Los matraces, sellados mediante la fusión del extremo del vidrio

con un soplete mientras se escapaba el vapor, quedaban

prácticamente vacías de aire y su contenido permanecía estéril

mientras se mantuvieran selladas.

Pasteur colocó estos frascos en los lugares donde deseaba hacer un

estudio del aire, y rompía los cuellos con un par de pinzas largas. Se hacía esto

con las precauciones más cuidadosas, pasando los cuellos y las pinzas por una

llama de alcohol, con el fin de matar todos los gérmenes depositados en ellos,

y manteniendo los frascos durante toda la operación lo más arriba posible de

su cabeza con el fin de evitar la contaminación del aire por el polvo de su ropa.

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Se volvían a sellar los frascos a la llama y se llevaban a la estufa para calentar

el contenido.

Aun cuando cada frasco recibía cuando menos una tercera parte de un

litro de aire exterior durante la operación, siempre había alguno que

permanecía estéril, demostrando que los gérmenes no siempre están en todas

partes.

Las pruebas demostraron que los gérmenes aéreos son más

abundantes en los lugares bajos, especialmente cerca de las tierras cultivadas.

Su número es menor cuando el aire permanece tranquilo durante largos

periodos de tiempo y también en las montañas lejos de la tierra habitada y

cultivada. En verdad, la mayor parte de los frascos que Pasteur abrió en medio

de los glaciares suizos, prueba de lo límpido de la atmósfera en las altitudes

elevadas; prueba definitiva, asimismo, de que el aire puro sin calentar resulta

incapaz de producir alteración de los líquidos orgánicos si no contiene los

gérmenes vivos de la fermentación.

Pouchet señaló en 1863 que, en colaboración con otros dos naturalistas,

había intentado sin éxito reproducir los hallazgos de Pasteur respecto a la

distribución de los gérmenes en el aire. A diferentes altitudes en los Pirineos,

hasta el borde del glaciar Maladeta, a 10.000 pies de altura, habían recogido

aire en frascos estériles que contenían infusión de heno calentada. En lugar de

obtener los resultados indicados por Pasteur, encontraron que “dondequiera

que se recogía un litro de aire que entraba en contacto con líquido orgánico, en

un frasco herméticamente sellado, el líquido revelaba pronto el desarrollo de

gérmenes vivos”. Para dilucidar la cuestión Pasteur pidió que la Academia de

Ciencias nombrara una comisión para repetir los experimentos que dos grupos

de investigadores habían llevado a cabo con resultados tan incompatibles. La

Academia estaba al lado de Pasteur. En 1862 le había concedido el premio

Alhumpert por su Mémoire sur les corpuscules organisés qui existent dans

l’atmosphère (1861). (Memoria sobre los corpúsculos organizados que existen

en la atmósfera (1861).

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Se nombró la comisión solicitada por Pasteur y éste arrojó el guante con

las siguientes declaraciones: “siempre es posible en algunos lugares tomar una

cantidad considerable de aire que no ha estado sujeto a ningún cambio químico

ni físico, y que tal aire resulte incapaz de producir cualquier alteración en el

líquido más putrescible”. Pouchet y los suyos contestaron que la declaración

era errónea y prometieron proporcionar la prueba, agregando: “si uno solo de

nuestros frascos se conserva sin alteración, aceptaremos honradamente

nuestra derrota”.

Sin embargo, en dos ocasiones diferentes, por razones largas de

explicar, rehusaron aceptar las condiciones de la prueba organizada por la

comisión y finalmente se retiraron de la competición. Pasteur, por el contrario,

llegó con sus ayudantes cargado de aparatos y listo para la prueba. Primero

demostró que tres matraces que había abierto en el Montanvert en 1860 se

habían conservado estériles desde entonces. Se abrió uno y su aire fue

analizado, revelando un contenido normal del 21% de oxígeno. Se abrió el

segundo, y en tres días ofreció incontables microorganismos. Se dejó el tercer

frasco sin tocar, y posteriormente fue exhibido en la Academia de Ciencias.

• Pasteur preparó entonces una nueva serie de 60 matraces antes

la comisión.

• Colocó en cada uno una tercera parte de un litro de agua de

levadura.

• Se estrechó el cuello y se hirvió el líquido durante dos minutos; 56

de los 60 frascos fueron cerrados a la llama.

• En cuanto se estiraron los cuellos, se doblaron hacia abajo y se

dejaron abiertos.

• De los 56 frascos cerrados, se abrieron 19 en el anfiteatro del

Museo de Historia Natural, resultando que 14 permanecieron

estériles y cinco se contaminaron; 19 se abrieron en el lugar más

alto de la cúpula del anfiteatro, de ellos, 13 se conservaron

estériles.

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• El tercer lote de 18 frascos se expuso al aire libre bajo algunos

álamos, y de ellos, sólo dos permanecieron estériles. Los 4

frascos abiertos con cuello de cisne se conservaron estériles.

Pero en realidad, tanto Pasteur como Pouchet tenían razón. Pasteur

había utilizado infusión de levadura como material putrescible en sus

experimentos, mientras que Pouchet había empleado infusión de heno. La

esterilización por calor de la infusión de levadura es fácil, mientras que la de

heno es sumamente difícil. El tratamiento por calor aplicado por Pasteur

hubiera resultado insuficiente para esterilizar a esta última. Luego la GE no

había muerto todavía…

Un físico da la estocada final a la GE

Fue el notable físico británico, John Tyndall quien acabó con la GE

cuando publicó su libro Essays on the Floating Matter of the Air in Relation to

Putrefaction and Infection (1881). / Estudios sobre el material que flota en el

aire en relación a la putrefacción y la infección (1881) /

John Tyndall (1820 – 1893) En 1869 refutó la teoría de la generación espontánea demostrando que la putrefacción no se produce en presencia de aire libre de polvo. Realizó investigaciones sobre el sonido, la luz y el calor. El llamado efecto Tyndall nos permite, por ejemplo… explicarnos por qué el cielo es azul… (Imagen tomada de http://www.fisicanet.com.ar)

Preparó cámaras experimentales, cuya superficie interior recubrió con

glicerina. Las cámaras cerradas (cajones transparentes) se dejaban sin tocar

durante varios días hasta que un rayo de luz, al pasar por unas ventanas

laterales, indicaba que toda la materia flotante del aire se había sedimentado y

quedaba adherida a las superficies de glicerina. Según la terminología de

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Tyndall, el aire estaba entonces “ópticamente vacío”. Bajo estas condiciones se

podían exponer al aire de la cámara toda clase de líquidos orgánicos

esterilizados, orina, caldo e infusiones vegetales que permanecían sin alterarse

durante meses. En otras palabras, el aire ópticamente vacío era también

estéril. De este modo se aseguraba que el poder de la atmósfera para

engendrar vida bacteriana corre pareja con su habilidad para dispersar la luz y,

por lo tanto, con su contenido en polvo, y que muchas de las partículas

microscópicas que flotan en el aire están formadas por microorganismos o

transportan microorganismos.

Observación importante

El aire no se había calentado por lo cual su fuerza vital no podía

haberse destruido. Por aquel tiempo, además, Tyndall descubre que hay

microorganismos, como los que contiene el caldo de heno o pasto, capaces de

resistir temperatura superiores a los 120 ºC. Entonces… ¡si el experimento de

Pasteur se hubiera hecho con caldo de pasto y no con caldo de levadura… los

matraces se habrían contaminado y eso se verificaría tras simple observación

visual! En estas circunstancias, no cabe duda, la GE seguiría vigente.