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UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES. FACULTAD DE MEDICINA
II CÁTEDRA DE MICROBIOLOGÍA, PARASITOLOGÍA E INMUNOLOGÍA
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA I
CLASE TEÓRICA 4
BASES BIOQUÍMICAS Y MOLECULARES
APLICABLES EN LA MICROBIOLOGÍA
Profesor Regular Titular: Dr. Norberto Sanjuan
Doctor en Medicina (UBA)
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ALGUNAS DEFINICIONES
• GENÉTICA
• BIOQUÍMICA
• BIOLOGÍA MOLECULAR
• INGENIERÍA GENÉTICA
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CONCEPTOS DE «MUTANTES»
• MUTACIÓN ESPONTÁNEA (AL A
• MUTAGÉNESIS POR DELECIÓN
• MUTAGÉNESIS POR INSERCIÓN
• MUTAGÉNESIS DIRIGIDA
• MUTAGÉNESIS POR CRISPR-Cas
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HERRAMIENTAS BÁSICAS EN BIOLOGÍA
MOLECULAR
MICROPIPETA CON «TIP» TUBOS «EPPENDORF»
MICROCENTRÍFUGA «FUENTE DE PODER»
(GENERADORES DE CORRIENTE)
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MÉTODOS DE ESTUDIO DE ÁCIDOS NUCLEICOS
ELECTROFORESIS EN GELES DE AGAROSA
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DNA PLASMÍDICO DNA CROMOSÓMICO
GELES DE AGAROSA
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PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION)
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SOUTHERN BLOT Y NORTHERN BLOT
SOUTHERN BLOT
NORTHERN BLOT
SOUTHERN BLOT NORTHERN BLOT
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ESTUDIO DE FUNCIONALIDAD DE PROMOTORES
(ENSAYOS «CAT»)
PROMOTORES «FUERTES»: TATAAT («TATA BOX»); TTGACA
RECORDAR POSICIONES -10 Y -35 EN BACTERIAS.
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SECUENCIACIÓN (MÉTODO DE SANGER)
A C G T
A C G T A C G T
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HIBRIDIZACIÓN IN SITU DE DNA
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MÉTODOS DE ESTUDIO DE PROTEÍNAS
CUBA ELECTROFORÉTICA VERTICAL
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METODOLOGÍA BÁSICA PARA EL ESTUDIO
DE PROTEÍNAS
SDS-PAGE GEL EN 2 DIMENSIONES
(2-D GELS)
ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA
EN UNA DIMENSIÓN EN DOS DIMENSIONES
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WESTERN BLOT SDS-PAGE Y WESTERN BLOT
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CROMATOGRAFÍA EN COLUMNAS
• TIPOS DE CROMATOGRAFÍA: . POR TAMIZ MOLECULAR
. DE AFINIDAD
. DE INTERCAMBIO IÓNICO
. DE ALTA PERFORMANCE (HPLC)
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HPLC
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ESPECTROMETRÍA DE MASAS
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MÉTODOS DE DETECCIÓN DE PROTEÍNAS Y ÁCIDOS
NUCLEICOS EN TEJIDOS Y EN CÉLULAS
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INMUNOFLUORESCENCIA
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INMUNOPEROXIDASA
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INMUNOMARCACIÓN ULTRAESTRUCTURAL (ANTICUERPOS CONJUGADOS CON ORO COLOIDAL)
Sanjuan et al. J.Virol 75:2891-2899, 2001
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PCR IN SITU