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ASPECTOS ECOLÓGICOS ASOCIADOS A LOS OVM CURSO DE POST GRADO MODULAR BIOSEGURIDAD DE LOS OVM EN LOS ECOSISTEMAS PRODUCTIVOS Y SU ENTORNO Emma Rivas Seoane MAYO 2016

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ASPECTOS ECOLÓGICOS ASOCIADOS A LOS

OVM

CURSO DE POST GRADO MODULAR

BIOSEGURIDAD DE LOS OVM EN

LOS ECOSISTEMAS PRODUCTIVOS

Y SU ENTORNO

Emma Rivas Seoane

MAYO 2016

CONTENIDO

o CONTEXTO

o PERSISTENCIA

o PLAGAS RESISTENTES

o FLUJO DE GENES

o PAQUETE TENOLÓGICO

o SUSCEPTIBILIDAD DE ORGANISMOS NO

BLANCO

CONTEXTO

VALOR DE LA BIODIVERSIDAD

Valor intrínseco

• Por el hecho de existir, no necesariamente por alguna utilidad

Valor directo

• De consumo: referido a productos de consumo local

• De uso productivo: productos obtenidos en el ambiente y vendidos en el mercado

Valor indirecto

• Se da a los servicios ambientales que no derivan del consumo de productos

• Se denominan valores de no consumo

No hay justificación de progreso y desarrollo económico para eliminar sistemas biológicos que existen desde hace millones de años

PNUD, 2010

El 35% de la producción de cultivos en todo el mundo se

sustenta en animales polinizadores

Existen más de 300 mil especies visitadoras de flores:

Los cálculos del valor global del los servicios de la polinización fluctúan entre US $ 112 mil millones y US $200 mil millones/año

EJEMPLO DEL VALOR DE LAS ESPECIES

POLINIZADORAS

o abejas (25 mil a 30 mil sps)

o moscas

o mariposas

o avispas

o polillas

o escarabajos

o murciélagos

o aves

VALOR DE LA BIODIVERSIDAD

Valor de opción

• Deseo de conservar una especie por su potencial benéfico

• Este valor cambia a medida que cambia la sociedad

Valor de existencia

• Se expresa a través de la valoración económica de donaciones para contribuir a la protección de ecosistemas y especies

Valor utilitario

• Aquel cuyo uso beneficia a otros, los beneficiarios son los humanos (es antropocéntrico)

• Este valor se atribuye al aporte de bienes, servicios, información y beneficios psico espirituales

La estimación monetaria de los servicios de la biodiversidad a nivel global (considerando 17 bienes y servicios) es de US $ 33 billones de anuales en promedio.

PERSISTENCIA

LAS TOXINAS Cry

MODO DE ACCIÓN DE LAS TOXINAS Cry

de Maagd et al., 2001

• Persistencia muy larga de los productos

insecticidas en el suelo (Bt e inhibidores de

proteinasas).

• La toxina Bt producida por el Bacillus

thuringiensis subespecie kurskatki permanece

activa en el suelo enlazándose rápida y

fuertemente a arcillas y a ácidos húmicos.

• Las toxinas enlazadas retienen sus propiedades

insecticidas y se encuentran protegidas contra

la degradación microbiana (pueden persistir en

varios tipos de suelo por al menos 234 días).

TOXINA Bt EN EL ECOSISTEMA DEL SUELO

Altieri, 2001

ESTUDIOS DE ADN VEGETAL EN DIVERSOS TIPOS DE SUELO

Fuente y estado inicial

del ADN

Tipo de

suelo

Genes

monitoreados

Método de detección Periodo

detectado

Tejidos de hojas de

tabaco (microcosmos del

suelo)

franco

limoso

T-nos

CaMV35S

extracción ADN total, PCR 120 días

Suelo con hojas de

tabaco y camada de papa

sobre su superficie

franco

limoso

T-nos

CaMV35S

extracción de ADN total,

PCR

77-137 días

Lugares de un campo con

plantas de tabaco GM

arcilloso

arenoso

aac-I extracción selectiva de

siembra, extracción ADN

total, PCR, hibridación

1 año

Microcosmos del suelo

con ADN de beterraga GM

franco

limoso

npt-II extracción de ADN total,

PCR

3-6 meses

Lugares de un campo con

plantas de beterraga GM

franco

limoso

npt-II

extracción selectiva de

siembra, extracción ADN

total, PCR, hibridación

2 años

Hojas de álamo

tierra

forestal

npt-II extracción de ADN total,

PCR

4 meses

Nielsen et al., 2007

ESTUDIOS DE PERSISTENCIA DE ADN BACTERIANO

Fuente y estado

inicial del ADN en el

microcosmo

ADN

monitoreado

Suelo utilizado

(no estéril)

Método de

detección

Estabilidad

Inóculo vivo de E. coli Derivado pUC19 tierra Parabrown Hibridización, PCR 28 días

Inóculo vivo de

Enterobacter

agglomerans

Transposon TN5 arcilloso arenoso Hibridización 70 días

plásmido 3H – marcado

del pUC18-ISP

pUC18-ISP ampR arena margosa,

arcilla limosa

Cuantificación

radiactiva,

Southern Blot y

trasnformación

> 10 días

Inóculo vivo de E.coli Genes UidA y

nptII

franco limoso MPN PCR 40 días

Plásmido pUC18-ISP

pUC18-ISP ampR

arena margosa,

arcilla limosa

PCR y

electroporación de

E. coli

60 días

ADN purificado de

Bacillus subtilis

adsorbido en arcilla

pHV4 y AA´s

marcadores

franco limoso

Transformación

15 días

Lisados celulares de

Pseudomonas

aurefasciens

Elemento de

fusión Tn7-lac

franco limoso PCR 30 días

Nielsen et al., 2007

Caso: Escape de poblaciones de Canola GM

1995: Escape de campos de cultivo de

Canola GM resistencia a glifosato y Canola GM resistente a glufosinato.

B. rapa x B. oleraceae

Brassica

B. napus “Canola”

Schafer et al., 2011

Caso: Escape de poblaciones de Canola GM

2010: Estudio de presencia y abundancia de genes de Canola en

poblaciones de Colza (Canola no GM) y sus parientes silvestres en Dakota

del Norte, USA o Transectos a lo largo de 8

Km ladera de carreteras.

o Detección de proteínas

CP4 EPSPS (resistente a

glifosato) y proteína PAT

(resistente a glufosinato)

con tiras reactivas

Resistencia a glifosato: 41%

Resistencia a glufosinato: 39%

Resistencia a glifosato y glufosinato: 0.7% *

Ausencia del transgen

80% (+)

* Fenotipo (+) para ambos genes no fue producido por las compañías de semillas

Schafer et al., 2011

PLAGAS RESISTENTES

CASO: GUSANO ROSADO DE LA INDIA RESISTENTE AL ALGODÓN Bt

• Plaga de origen asiático propagada por todo el

mundo

• En fase larval excavan la bellota del algodón

para alimentarse de las semillas: manchan y

afectan la longitud y resistencia de las fibras

del algodón, creando una vía de entrada para

infecciones de la planta huésped.

Consecuencias:

- baja la calidad y precio de venta del algodón

- perdidas en la viabilidad y peso de la semilla

- baja calidad del aceite.

Pectinophora gossypiella

LEPIDOPTERA

La unión de

cadherinas

permite que

toxinas formen

un preporo en el

intestino

Mutaciones

en las

proteínas

receptoras

de la

toxina Bt:

cadherinas

Zhang et al 2012

CASO: GUSANO ROSADO DE LA INDIA RESISTENTE AL ALGODÓN Bt

PRINCIPALES ESPECIES PLAGAS QUE NO SON SUSCEPTIBLES AL

ALGODÓN Bt EN LA INDIA

FLUJO DE GENES

FLUJO DE

GENES

TRASFERENCIA

HORIZONTAL

TRASFERENCIA

VERTICAL

• Entre plantas, micoorganismos,

bacterias

• Se desconoce si ocurre entre transgenes

???

FLUJO MEDIADO X

PROPAGACIÓN

VEGETATIVA

Material genético trasportado a través de órganos de la planta x

animales

FLUJO MEDIADO

X SEMILLAS

Dispersión de

semillas x

animales

Vías para el

flujo de genes

Movimiento de genes en diferentes poblaciones de una

especie

El flujo de genes

mediado por

polen puede

producir

hibridación e

integración

Movimiento o intercambio

de genes entre especies

diferentes o entre

poblaciones diferentes de

la misma especie

FLUJO MEDIADO

X POLEN

RIESGOS DE LA TRANSFERENCIA HORIZONTAL DE GENES

Microrganismos pueden adquirir características patogénicas

Transferencia de genes virales y bacterianos introducidos en

plantas transgénicas.

Difusión de genes marcadores con resistencia a antibióticos

entre los patógenos.

Inserción secundaria al azar de genes en organismos que

interactúan con las plantas de los cultivos transgénicos.

Impacto ecológico debido a la diseminación de genes exóticos

introducidos.

PUNTOS CLAVE A CONSIDERAR PARA EL FLUJO VERTICAL DE

GENES EN LOS CULTIVOS

Compatibilidad sexual entre

especies de plantas, especies

domesticadas o sus parientes

silvestres.

Tasa de producción de polen.

Tasa de fecundación cruzada y

autopolinización.

Tasa de dispersión del polen.

Viabilidad del polen y

capacidad competitiva.

Características de los agentes

polinizadores.

Distancias espaciales entre OGM

y sus receptores

Factores medio ambientales

Densidad local en la población

Floración:

- diferencias temporales

(aislamiento fenológico);

- sincronía (calendario para la

liberación del polen y antesis);

- receptividad coincidente entre el

cultivo y sus parientes cercanos

La descendencia resultante debe

ser viable y fértil

Hodson et al., 2011

Coexistencia:

Elección de los consumidores y los agricultores

entre la producción convencional, orgánica y

cultivo transgénico, en cumplimiento de las

obligaciones legales sobre etiquetado definido

en la legislación de la Comunidad. Comisión Europea

CASO: FLUJO DE GENES DE MAÍZ GM EN SUDÁFRICA

Viljoen & Chetty , 2011

o Desde 1997 Sudáfrica ha

cultivado maíz GM de primera

generación con fines

comerciales.

o El 2008 ocupó el 8vo lugar a

nivel mundial en la producción

comercial.

Distribución en campo dibujado a escala:

Centro = maíz amarillo GM donante

Bloque gris = maíz blanco no GM receptor

Líneas discontinuas = transectos de colecta de

mazorcas

X = trampas para de polen

% polinización

cruzada

Promedio (m)

BV-2006

Promedio (m)

BV-2007

Promedio (m)

WB-2007

1 9 14 16

0.1 33 42 50

0.01 114 126 159

0.001 398 377 501

BV = Bainsvlei WB = Waterbron

La polinización cruzada resultó

diferentes en los lugares del ensayo:

Conclusiones

o La polinización cruzada resulta de la

interacción entre la carga de polen, el

ambiente y la fisiología reproductiva.

o Tener en cuenta la distancia de

aislamiento para reducir al mínimo el

flujo de genes y otros factores para un

plan de gestión integral de riesgo para

los ensayos de campo.

o Aunque las tendencias sean similares, se

requieren datos geográficos específicos

de una región para establecer las

distancias de aislamiento.

CASO: FLUJO DE GENES DE MAÍZ GM EN SUDÁFRICA

INTROGRESIÓN DE GENES

Lu, 2013

Introgresión de transgenes en poblaciones que son parientes silvestres.

Impacto en la conservación de la diversidad genética de los parientes

silvestres.

La persistencia y diseminación de alelos dependerá de: o la frecuencia del flujo de genes a las poblaciones silvestres; o las ventajas selectivas naturales de los alelos de los cultivos o el entornos favorable para una selección positiva o negativa

de los alelos introducidos

Condiciones: o hibridación de especies de plantas domesticadas o GM con

poblaciones de parientes silvestres (mediada por flujo génico o polen).

o flujo de los alelos a las poblaciones de parientes silvestres

INTROGRESIÓN DE GENES

Lu, 2013

Si los transgenes con fuertes ventajas selectivas

introgresan en poblaciones silvestres se producen cambios

en:

- la composición genética

- el potencial evolutivo

- la invasividad de las poblaciones silvestres

La determinación precisa de los impactos es necesaria para

una gestión eficaz de las poblaciones parientes silvestres,

principalmente para la conservación in situ.

CASO: INTROGRESIÓN DE TRANSGENES EN VARIEDADES LOCALES

DE MAÍZ NATIVO EN OAXACA -MÉXICO

Quist & Chapella, 2001

o Presencia del p-35S en 5 de 7 muestras

Leyenda: a –d = maíz criollo e = maíz de la tienda local (muestra de granos a granel) f = control (-) (muestra de mazorca de maíz del Cusco) g = maíz RR (Monsanto Corporation) h = maíz Bt (Monsanto Corporation) i = control (-) interno de la PCR j = escalera de ADN de 100 pb

II = Nested PCR

I = PCR convencional

EFECTOS DEL PAQUETE TECNOLÓGICO

monocultivo

uso intensivo de agroquímicos

industrialización del campo

dependencia de grandes corporaciones

cultivos para exportación

El paquete tecnológico de los transgénicos es una

profundización de las bases sobre las que se desarrolló la

Revolución Verde:

Helander et al., 2012

EL GLIFOSATO INHIBE LA VIA DEL SHIKIMATO A NIVEL DE LA EPSPS

(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase)

o Principio activo del Roundup

o Se aplica con surfractantes

para mayor penetración en la

planta

DESTINO AMBIENTAL DEL GLIFOSATO

Helander et al., 2012

MECANISMO DE ACCION DE LOS HERBICIDAS

Déyle et al, 2013

Especies Nombre común País

Amaranthus palmeri Palmera amaranto EE.UU.

Amaranthus spinosus Amaranto o bledo

espinoso EE.UU.

Amaranthus

tuberculatus Cáñamo común EE.UU.

Ambrosia artemisiifolia Ambrosía común EE.UU., Canadá

Ambrosia trifida Ambrosía gigante EE.UU., Canadá

Conyza bonariensis Rama negra EE.UU.

Conyza canadensis Cola de caballo o

erigeron EE.UU., Canadá

Echinochloa colona Arrocillo EE.UU.

Eleusine indica Pasto pata de ganso EE.UU.

Kochia scoparia Coquia EE.UU., Canadá

Lolium multiflorum Ryegrass italiano EE.UU.

Lolium rigidum Ryegrass rígido EE.UU.

Poa annual Pasto azul anual EE.UU.

Sorghum halepense Sorgo de Alepo EE.UU.

ESPECIES RESISTENTES AL GLIFOSATO: AMÉRICA DEL NORTE

http://paraquat.com/spanish/knowledge-bank/malas-hierbas-resistentes-al-glifosato

ESPECIES RESISTENTES AL GLIFOSATO: CENTRO Y SUDAMÉRICA

Especies Nombre común País

Amaranthus quitensis Argentina

Bidens pilosa México

Chloris elata Brasil

Conyza bonariensis Rama negra Brasil, Colombia

Conyza canadensis Cola de caballo o erigeron Brasil

Conyza sumatrensis Rama negra Brasil

Cynodon hirsutus Gramilla mansa Argentina

Digitaria insularis Pasto amargo Brasil, Paraguay

Echinochloa colona Arrocillo Argentina

Eleusine indica Pasto pata de ganso Colombia, Argentina

Leptochloa virgata Pasto moro tropical México

Lolium multiflorum Ryegrass italiano Argentina, Brasil, Chile

Lolium perenne Ryegrass perenne Argentina

Parthenium

hysterophorus Escoba amarga Colombia

Sorghum halepense Sorgo de Alepo Argentina

http://paraquat.com/spanish/knowledge-bank/malas-hierbas-resistentes-al-glifosato

ESPECIES RESISTENTES AL GLIFOSATO:

EUROPA Y MEDIO ORIENTE

Especies Nombre común País

Conyza bonariensis Rama negra España, Grecia, Israel, Portugal

Conyza canadensis Cola de caballo o

erigeron

España, República Checa,

Polonia, Italia

Conyza sumatrensis Rama negra España, Grecia

Lolium perenne Portugal

Lolium multiflorum Ryegrass italiano España

Lolium rigidum Ryegrass rígido Francia, España, Israel, Italia

http://paraquat.com/spanish/knowledge-bank/malas-hierbas-resistentes-al-glifosato

ESPECIES RESISTENTES AL GLIFOSATO: AUSTRALASIA

Especies Nombre común País

Brachiaria eruciformis Australia

Bromus diandrus Bromo frágil Australia

Chloris truncata Pasto pangola

australiano Australia

Conyza bonariensis Rama negra Australia

Echinochloa colona Arrocillo Australia

Lolium perenne Nueva Zelanda

Lolium rigidum Ryegrass rígido Australia

Sonchus oleraceus Australia

Urochloa panicoides Pasto africano Australia

http://paraquat.com/spanish/knowledge-bank/malas-hierbas-resistentes-al-glifosato

ESPECIES RESISTENTES AL GLIFOSATO: ASIA

Especies Nombre común País

Conyza canadensis Cola de caballo o erigeron China

Eleusine indica Pasto pata de ganso China, Malasia

Hedyotis verticillata Malasia

Lolium multiflorum Japón

ESPECIES RESISTENTES AL GLIFOSATO: ÁFRICA

Especies Nombre común País

Conyza bonariensis Rama negra Sur de África

Lolium rigidum Ryegrass rígido Sudáfrica

Plantago lanceolata Llantén, llantén menor Sudáfrica

http://paraquat.com/spanish/knowledge-bank/malas-hierbas-resistentes-al-glifosato

SUSCEPTIBILIDAD DE ORGANISMOS NO

BLANCO

Efectos inadvertidos causados por los OVM a organismos benéficos del medioambiente.

“Proveedores de servicios ecosistémicos”: organismos que aportan en el funcionamiento de los ecosistemas y la economía humana.

Parasitoide desarrollando dentro de una

plaga

Polinizadores

Detritívoros Valor paisajistico

CASO: IMPACTOS DE MAIZ BT EN LARVAS DE MARIQUITA

CASO: IMPACTOS DE MAIZ BT EN LARVAS DE MARIQUITA

Hilbeck et al, 2012

2009 o Schmidt et al, reportan que larvas de la mariquita de

dos puntos (Adalia bipunctata) mueren al ser alimentadas con huevos de la polilla de la harina (Ephestia kuehniella) recubierta con una solución de toxinas purificadas de Bacillus thuringiensis

o Álvarez - Alfageme et al, reportan que larvas de la misma especie mariquita se sometieron en pruebas de alimentación para las mismas toxinas pero no se encontró resultados significativos y concluyen que los "efectos nocivos aparentes de Cry1Ab y CryBb1 reportados son artefactos resultantes de un pobre diseño del estudio, de los procedimientos y de falsos positivos".

o Oficina Alemana de Protección de los Consumidores y Seguridad Alimentaria prohíbe el cultivo del maíz MON810 que expresa una de las toxinas Bt utilizados en el estudio de Schmidt.

ELEMENTOS CRÍTICOS DE ENSAYOS DE ALIMENTACIÓN BITROFICA

Parámetros /métodos

Alvarez-Alfageme et al. Schmidt et al.

# insectos evaluados Probablemente 34 a 41 30

# de repeticiones Probablemente 1 4

# total de insectos por

tratamiento

N = 34 a 41 N = 120

Tratamiento

Agua/ solución azucarada con Bt

Huevos de polilla de la harina tratados

con Bt en buffer

Control

Agua/ solución azucarada

Huevos de polilla de la harina tratados

con constructos vacíos en buffer

Huevos de la polilla de la harina

tratados con buffer

Dosis de toxina Bt

1 3 para cada tratamiento

Tiempo de exposición 12 días con periodos de

recuperación

9 a 10 días continuos

ELEMENTOS CRÍTICOS DE ENSAYOS DE ALIMENTACIÓN BITROFICA

Resultados

Alvarez-Alfageme et al. Schmidt et al.

% mortalidad de control # tratamientos control = 1 # tratamientos control = 3+3

pBD10 = 6

% mortalidad

tratamiento

1 dosis de cada toxina Bt 3 dosis de cada toxina Bt

Cry1Ab 45 µg/ml 5 µg/ml 25µg/ml 50µg/ml

Cry3Bb

200 µg/ml

5 µg/ml 25µg/ml 50µg/ml

Control

Agua/ solución azucarada

Huevos de polilla de la harina tratados

con constructos vacíos en buffer

Huevos de la polilla de la harina tratados

con buffer

Tiempo de exposición 12 días con periodos de

recuperación

9 a 10 días continuos

EFECTOS POTENCIALES DIRECTOS DE LOS CULTIVOS GM

INVASIVIDAD FLUJO DE GENES

DESTINO AMBIENTAL DE

PRODUCTOS

TRANSGENICOS

ORGANISMOS NO

BLANCO

ORGANISMOS

BLANCO

Supervivencia y

reproducción

fuera del área

cultivada

Transferencia de

polen a parientes

silvestres y formación

de híbridos

Persistencia, degradación y

propagación de polen

transgénico

Incorporación

directa o indirecta

de productos GM a

través de alimentos

Desarrollo de

resistencia

Supervivencia y

reproducción de

híbridos

Acumulación de productos

GM en el suelo:

- Eluviación (lixiviación)

- Inmisión (trasporte de

partículas insolubles de

productos GM en el agua)

Efectos sobre los

ecosistemas

Población transgénica

(híbridos/cultivos) con aptitud

mejorada respecto a la población

silvestre

Propagación y persistencia

(híbridos/cultivos) fuera del área

cultivada

Fuera del área

cultivada

Supermalezas en el

área cultivada Efectos sobre la dinámica poblacional

DAÑO AL

MEDIOAMBIENTE DAÑO ECONÓMICO DAÑO AL MEDIOAMBIENTE

DAÑO AL

MEDIOAMBIENTE DAÑO ECONÓMICO

Hodson et al., 2011

DESARROLLO DE RESISTENCIA EFECTOS EN LOS MÉTODOS AGRONÓMICOS Y SISTEMAS DE

CULTIVO

Resistencia a plagas

blanco /

enfermedades

Selección de

plantas silvestres

tolerantes a

herbicidas

Cambios en las

prácticas de cultivo

/ labranza

Cambio en los

intervalos entre

cultivos / área de

cultivo

Exceso de

competitividad

agronómica de los

OGM

Pérdida de efectividad

de los productos

transgénicos

Reducción de la

efectividad de

herbicidas

específicos

Cambios en el

espectro de plagas,

enfermedades y

organismos benéficos

Disminución de la

calidad del suelo:

cambios en las

características

físicas, químicas y

biológicas

Sustitución de

variedades

tradicionales

Necesidad de cambiar las estrategias de control de plagas /

enfermedades

DAÑO ECONÓMICO

DAÑO AL MEDIOAMBIENTE

EFECTOS POTENCIALES INDIRECTOS DE LOS CULTIVOS GM

Hodson et al., 2011

ALGUNAS REFLEXIONES …

o El uso de OGM profundiza en la mayoría de sus efectos, el

mono-cultivo propio de la revolución verde y propicio en

países “graneros”.

o El uso masivo de cultivos GM representa riesgos potenciales

desde un punto de vista ecológico.

o Los efectos ecológicos no están limitados a la resistencia en

las plagas o a la aparición de nuevas variedades de malezas.

o Los cultivos GM pueden producir toxinas ambientales que se

mueven a través de las cadenas tróficas pudiendo llegar al

suelo y al agua, afectando así a los invertebrados y

probablemente al ciclo de nutrientes.

o En realidad, nadie puede predecir los impactos a largo

plazo que pueden resultar de la diseminación masiva de estos

cultivos.

… Gracias por su atención