ALCALOIDES DERIVADOS DE LA LISINA.ALCALOIDES QUINOLIZIDINICOS.

CONTENIDO:

1. INTRODUCCIN.2. DEFINICIN.3. PROPIEDADES FISICOQUIMICAS.4. DISTRIBUCION.5. ESTRUCTURA QUIMICA.6. BIOGNESIS.7. CARACTERIZACIN, EXTRACCIN Y PURIFICACIN.8. IMPORTANCIA FARMACOGNSTICA.9. IMPORTANCIA TOXICOLOGICA.10. PLANTAS QUE CONTIENEN ALCALOIDES QUINOLIZIDINICOS.11. INVESTIGACIONES FARMACOLOGICAS.12. BIBLIOGRAFIA.

1. INTRODUCCIN.

Los alcaloides son el grupo ms grande de sustancias vegetales cuyo nombre fue acuado aprincipios del siglo .XIX, en 1819 por W. Meissner que las describi como sustancias naturales que reaccionan como bases o lcalis.Aunque de composicin variada todas son sustancias nitrogenadas de carcter bsico, origen natural y de distribucin restringida. Su estructura se encuentra formada por C, H N, formando anillo heterocclico, siendo casi todos oxigenados y su biosntesis es generalmente a partir de aminocidos con actividad farmacolgica o toxicolgica.La importancia de estudiar a los alcaloides recae en su amplia variedad de aplicaciones tanto en Teraputica, Medicina y a Nivel Industrial.Desde un punto de vista Toxicolgico Los alcaloides figuran entre los venenos ms fuertes que conocemos. Frecuentemente bastan cantidades de algunos decigramos o aun centigramos para matar a un hombre. Disminuyendo estas dosis se observan interesantes efectos fisiolgicos que poseen mayor inters farmacutico que la misma toxicidad, tales como la accin calmante de la morfina, la estimulante de la cafena y la febrfuga de la quinina. Por esta razn, las drogas vegetales que contienen alcaloides y los alcaloides puros obtenidos a partir de las mismas, han sido desde la antigedad sustancias del ms alto inters para la investigacin farmacolgica. (VILLAR, 1999).Los alcaloides derivados de la Lisina (aminocido con C5) y la Ornitina (aminocido con C4); son origen de numerosos alcaloides, cuya estructura puede ser sencilla o compleja. La complejidad estructural se evidencia por la formacin, a partir de diversas molculas de aminocidos; as mismo tambin puede estar originada por la intervencin de otros precursores (acetato, triptfano, cido nicotnico, cido fenilpropanoico). (BRUNETON 2001 )

Nuestro enfoque se dirige a los ALCALOIDES QUINOLIZIDINICOS.

2. DEFINICIN. La quinolizidina es un heterociclo nitrogenado biciclico, muy frecuente en las estructuras alcaloidicas. Es necesario sin embargo distinguir entre los compuestos que contienen este motivo estructural como elemento de una estructura compleja ejemplo: protoberberinas (solanidanos) .(BRUNETON, 2002 )

3. PROPIEDADES FISICOQUIMICAS DE LOS ALCALOIDES QUINOLIZIDICOS

Los principales alcaloides encontrados en el chocho son: Lupanina(46%), espartena(14%), 4-hidroxilupanina(1%), los mismos que poseen propiedades alcalinas, debido a la presencia de nitrogeno bsico formado por lo general ncleos heterocclicos. Estos en forma libre son insolubles en agua, poco solubles en alcohol y solubles en ter y cloroformo, la mayora posee oxgeno en su estructura y son slidos no voltiles, sin embargo algunos no contienen oxigeno como la espartena. (Bruneton, J.2001)

4. DISTRIBUCIN.- Se encuentran principalmente en la familia fabceas, as como en Berberidceas, Solaceas, Ranunculceas, Quenopodiceas y Rubiceas. Dentro de este grupo nos encontramos alcaloides con actividad teraputica como espartena y otros que causan hepotoxicidad.(VILLAR,1999)

5. ESTRUCTURA QUIMICA La quimiolizina es un heterocclico nitrogenado biciclico, presente frecuentemente estructuras alcaloidicas. Este ncleo puede formar parte de estructuras ms complejas, como protoberberinas o alcaloides indolios; pero las denominadas quimnolizidinas genuinas son las que proceden de los aminocidos precursor lisina. (VILLAR,1999)

Se conocen ms de 170 estructuras, agrupadas segn el grado de sustitucin .En lneas generales, los alcaloides quinolizidinicos se dividen en biciclicos, tricclicos y tetraciclicos. (VILLAR,1999)6. BIOGENESIS Son metabolitos secundarios formados biogenticamente a partir del aminocido lisina va cadaverina hasta lupinina, citisina, espartena y matrina, a travs de una serie de pasos enzimticos .Sin embargo, todava se desconocen a algunas de las etapas que originan esta gran variedad de esqueletos. (VILLAR,1999)La biosntesis tiene lugar en las partes areas de las fabceas, siendo regular por luz; no obstante, las semillas son especialmente ricas en alcaloides quinolizidinicos donde pueden alcanzar hasta el 8% de su peso seco. (VILLAR,1999)7. CARACTERIZACION, EXTRACCION Y PURIFICACION Se detectan por medio de las reacciones generales de precipitacin de alcaloides en soluciones acuosas acidas. (VILLAR, 1999)La extraccin de alcaloides quinolizidnicos se realiza en equipo de soxhlet con metanol y extraccin acuosa u orgnica dependiendo del pH.(VILLAR, 1999)Tcnicas como: CLAR (cromatografa liquida de alta resolucin) o CG (cromatografa gaseosa) llegan incluso a separaciones de enantiomeros, epimeros en C-11 o C-6 tales como la espartena y isoesparteina, as como ismeros cis y trans. (VILLAR, 1999)La espectroscopia de IR fue el mtodo utilizado para la elucidacin estructural de este tipo de alcaloide; sin embargo la espectropscopia de masas y sobre todo los estudios de resonancia han reemplazado a la espectroscopia de IR. Respecto a estos ltimos, los espectros de RMN son los que ms informacin aportan a este tipo de estructuras, permitiendo diferenciar entre ismeros. (VILLAR, 1999) 8. IMPORTANCIA FARMACOGNOSTICA. La matrina se ha descrito como antipirtica. Y la espartena es un oxitcico comercial por lo que no sera accidental que esta planta presente propiedades abortivas. (MUZ, 2004) La espartena es un bloqueante ganglionar, que a nivel cardiaco disminuye la conductividad, frecuencia y amplitud de las contracciones, por lo que se utiliz como antirritmico.Perifericamente tiene una accin bloqueante neuromuscular. Adems, presenta propiedades oxitcicas, por lo que se emple para inducir al parto. Se trata de un bloqueante de los canales de potasio, lo que puede tener repercusiones farmacolgicas tanto a nivel del musculo cardiaco, como a nivel pancretico, donde se ha descrito que estimula la secrecin de insulina. (VILLAR, 1999) Otro alcaloide interesante de este grupo, por su actividad farmacolgica, es la espartena, alcaloide voltil presente en la retama negra (Cytisus scoparius Link), cuyas ramas y sumidades han sido oficinales..(VILLAR, 1999) Lupanina presenta una actividad bactericida, nematicida, antirritmica, hipotensora, y actividad hipoglucemiante.(VILLACRS, 2009)

9. IMPORTANCIA TOXICOLOGIA Distintas fabceas producen intoxicacin debido a los alcaloides quinolizidinicos. Distintas especies de altramuces, Lupinus sp. Contienen alcaloides como lupinina, lupanina y anagirina con elevada toxicidad heptica. Toxicidad de los alcaloides chocho tarwi de estos compuestos ha sido demostrado a dosis muy altas tanto como en animales como en seres humanos. Han ocurrido casos aislados de envenenamiento con semillas de lupino a una dosis 11-25mg/kg de peso corporal con nios, 25-46mg/kg en adultos. (VILLACRS, 2009) Las semillas de cytisus laburnun L., arbusto ornamental, son toxicos por su contenido en citina y anagiina. La nicas quinolizidinas que se mencionaran en este aparato son aquellas, bi-tri-, o tetraciclinas que caracterizan a la familia de las Fabceas y que, en cierto nmero de casos, son responsables de su actividad y/o su toxicidad. Se conocen casi 200, repartidas en 7 grupos estructurales segn el nmero y el agrupamiento de los ciclos.

10. PLANTAS QUE CONTENGAN ESTOS ALCALOIDES QUINOLIZIDINICOS:

A) CITISO, Laburmun anagyroides Medikus, Fabaceae (= Cytisus Laburnum L.)(Borne, lluvia de oro, falso bano, codeso de los Alpes; cat.: laburn; port.: laburno-dos-alpes, codesso-dos-alpes). DESCRIPCIN: El borne es un arbusto o pequeo arbolillo inerme, de hoja caduca, de (2)3-7m de altura, a veces mayor, de hasta 17m. (LPEZ, 2 EDC. 2006)

Tallosjvenes cenicientos, cubiertos de pelos sedosos aplicados, tallos redondeados, sin costillas, que se mantienen verdes varios aos.

Hojasalternas, trifoliadas con peciolo largo, articulado en la base, y dos estpulas triangulares, en su encuentro con el tallo.

Hojuelasson elpticas y casi obovadas, lampias por el haz, de un color algo ms plido, y con pelos aplicados, sedosos en su cara inferior.

Floresnumerosas, grandecitas, dispuestas en grandes racimos laterales, axilares, colgantes.

Frutova sobre un pie; legumbre de 4-5(7) x 0.7- 0.9 cm., alargada, comprimida, parte superior muy engrosada, algo constreida entre las semillas, blanquecina, generalmente pelosa de joven.

Semillas2-7 por fruto, ms o menos arrionadas, comprimidas, de color pardo negruzco o negras, brillantes, lisas.

OBSERVACIONES:Clasificacin cientfica

Reino:Plantae

Divisin:Magnoliophyta

Clase:Magnoliopsida

Orden:Fabales

Familia:Fabaceae

Subfamilia:Faboideae

Tribu:Genisteae

Gnero:Laburnum

Especie:L. anagyroidesMedik.

Se llam anagyroides, por su pareciso con el hediondo (Anagyris foetida), especialmente en la forma de las legumbres. Este nombre ms moderno reemplaza al de Linneo, porque Laburnum laburnum (L.) Voss (que es como se tendra que haber llamado al combinar el nombre linneano) es lo que se denomina un tautonimo (nombre binario repetido), y el cdigo de nomenclatura botnica no permite su uso. (LPEZ, 2 EDC. 2006)

ACCIN FARMACOLGICA: Todas las partes de la planta, pero sobre todo las flores y frutos, son muy txicos, por la presencia del alcaloide citisina. Veneno ganglionar (depresor respiratorio) que provoca convulsiones y la muerte por asfixia (15-20 semillas pueden matar a un adulto). (LPEZ, 2 EDC. 2006)Los efectos sobre el SNC incluyen somnolencia, debilidad, prdida de la coordinacin muscular, fasciculaciones musculares, convulsiones, coma y midriasis, as como algunos efectos anticolinrgicos, tales como la retencin urinaria. La insuficiencia respiratoria, como ocurre en el envenenamiento por nicotina, se observa en pacientes con intoxicacin severa. (BOTANICAL.COM/ BY MR. GRIEVE/2000)Insuficiencia Respiratoria.Sistema NerviosoCentral

En casos de intoxicacin severa se observan los efectos de la estimulacin central provocada por la citisina: exitacin, convulsiones, paralisis respiratoria. (BRUNETON,2001)

ALCALOIDE CITISINA: De frmula C11H14NO2, un alcaloide cristalino, amargo y muy txico usado en medicina como catrtico o diurtico. (MICROSOFT ENCARTA 2009.) Es un alcaloide tricclico de la quinolizidina que se encuentra en especias Baptisia, Cytisus, Laburnum y Sophora. Tiene efectos similares a la nicotina sobre el tracto gastrointestinal y el sistema nervioso central (SNC). Estas plantas suelen ser fumadas de manera recreativa debido a sus efectos estimulantes y leves propiedades alucingenas. La corteza, las semillas y sobre todo la cubierta del fruto contienen, adems de la citisina, soforina, toxoalbminas y otros productos venenosos. (BOTANICAL.COM/ BY MR. GRIEVE/2000)

APLICACIONES MEDICINALES: Como purgantes y emticas, cuidando mucho por supuesto la dosis. (LPEZ, 2 EDC. 2006) La raz se utiliza en la medicina china tradicional, donde se conoce como "Ku Shen" y se usa para tratar la disentera, sarna, erupciones pruriginosas incluyendo eczemas, lesiones cutneas, ictericia, edemas, disfuncin urinaria y flujo vaginal. (BOTANICAL.COM/ BY MR. GRIEVE/2000)

B)LUPINUS MUTABILIS SWEET TarwiEl Lupinus mutabilis Sweet es una leguminosa oriunda de los Andes Sudamericanos, las semillas desamargadas y en cocimiento son utilizadas por el poblador andino de nuestro pas como alimento y como planta medicinal. Crece sobre los 3,850 msnm, se puede hallar desde Venezuela hasta Chile. Utilizando HPLC desarrollamos una tcnica que nos permiti realizar la determinacin cualitativa del alcaloide Espartena.(Jean BRUNETO,2 EDICIN)

EL LUPINUS MUTABILIS SWEET TarwiClasificacin cientfica:Reino: PlantaeDivisin: MagnoliophytaOrden: FabalesFamilia: FabaceaeGnero: LupinusEspecie: L.mutabilis sweet. DESCRIPCIN:Leguminosa herbcea erecta de tallos robustos, algo leoso. Alcanza una altura de 1.8-2. Crecimiento en climas templados y frios.

Usos:Para controlar ectoparsitos y parasitos intestinales de los animales por contener alcaloides (espateina, lupinina, lupaidina, etc)gran valor nutritivo de protenas (38.9%), grasa (17.1 %), caloras (411 cal/100) g. (1) (LOPEZ GONZALES GINES ,2006)

COMPOSICIN QUMICA:Siguiendo los trabajos realizados anteriormente se comprob que los grupos funcionales en la molcula solamente fueron un tomo de hidrogeno terciario y un carbonil, la presencia del grupo hidroxilo fue firmemente establecida por la formacin de derivados de benzoil y un feniluretano y por deshidratacion de la Lupanina anhidra.

11. TRABAJOS DE INVESTIGACIN:

A) ESTUDIO FITOQUMICO Y DE LA ACTIVIDAD ANTIHELMNTICA DE LOS EXTRACTOS DE Sarothamnus scoparius y Lupinus ballianus.Wilfredo Salazar, Jorge Crdenas , Sara Villafuerte, Irma Fernndez , Len Villegas,Luz Pacheco, Graciela Untiveros.Rev Soc Qum Per. 2008, 74, N 2 (100-107)

INTRODUCCINLa enterobiosis u oxiuriosis es producida por Enterovius vermicularis, nemtodo de amplia distribucin mundial, presente en todos los climas, niveles sociales y econmicos de la poblacin; afecta mayormente a los nios.La transmisin es de persona a persona por la ingestin de huevos del parsito; las larvas se incuban en el intestino delgado y luego maduran en el colon. La hembra grvida migra hacia el rea anal, sobre todo en la noche, liberando entre 4000 a 20000 huevos los cuales, al encontrarse en las condiciones apropiadas (humedad, aerobiosis), desarrollan en 30 das la forma adulta.La migracin de los parsitos puede desencadenar una reaccin alrgica e inflamatoria local, agravada por infecciones secundarias o por lesiones traumticas(rascado); en el caso de las nias los parsitos pueden migrar hacia los genitales y producir vaginitis.Estudios en otros pases sealan las altas prevalencias en relacin directa con el nivel de educacin, condiciones de vida, hacinamiento y los hbitos de higiene inadecuados. La prevalencia de enterobiosis, realizada en nuestro pas por el mtodo de Graham vara de un rea a otra. As, en guarderas de:CIUDAD / DISTRITO

EDADPORCENTAJE

Arequipa1,5 a 6 aos34,4 %

Tacna 6 a 16 aos 32,98 %

Ica Edad escolar75,39 %

Tarapoto79,5 %

Rmac32,2%

Estos factores, incluyendo la dificultad del acceso a antihelmnticos efectivos en las zonas de escasos recursos, impulsaron a comprobar la utilidad de los extractos acuosos de Sarothamnus scoparius y de Lupinus ballianus como antihelmnticos basados en el conocimiento de la medicina tradicional.El oxiuro Enterobius vermicularis tiene un ciclo de vida muy parecido al oxiuro Syphacia obvelata, en tanto que el Aspiculuris tetraptera tiene un ciclo de vida directo de 23 a 25 das; las hembras liberan sus huevos en el colon, los que son eliminados en las heces; se vuelven infectivos de 6 a 7 das, la va de infeccin es por la ingestin de huevos infectivos en alimentos o agua.Se han realizado trabajos que extrapolan los resultados desde modelos animales con los oxiuros Syphacia obvelata y Aspiculuris tetraptera, encontrados en los ratones de laboratorio, que presentan ciclo de vida similar y sensibilidad a los mismos frmacos utilizados contra Enterobius vermicularis.Segn los estudios etnobotnicos realizados por la Biloga Irma Fernndez en diferentes comunidades del Per, se obtuvo conocimiento de varias plantas con actividad antihelmntica de las cuales vamos a detallar dos:ESPECIE

DESCRIPCINEMPLEO

Sarothamnus scoparius (Koch) Tiene varios sinnimos como Spartium scoparium Linn. , Genista scoparius (Lam.), Cytisus scoparius Linn., entre otros de la familia de las Fabaceae. Conocida como retama negra, escoba negra. Fue colectada a orillas del ro Itaya, provincia de Maynas, Departamento de Loreto (vaucher IFV 2335, Herbario de la Facultad de Ciencias y Filosofa de la Universidad Peruana Cayetano Heredia).Los pobladores preparan una infusin con una cuchara de hojas y tallos en una taza de agua hirviendo, despus de 10 minutos lo cuelan y lo beben en ayunas para eliminar parsitos.

Lupinus ballianus C.P., Smith. Conocida con los nombres de "tarwi silvestre" y "jera"; pertenece a la familia Fabaceae; Su hbitat son lugares templados y fros; es una planta endmica del Per. Se colect en la quebrada de Llaca, al norte de la laguna Churup, provincia de Huaraz (4200 msnm) (vaucher IFV2330, Herbario de la Facultad de Ciencias y Filosofa de la Universidad Peruana Cayetano Heredia).

Los lugareos preparan una infusin de la parte rea de la planta y la beben en ayunas contra los parsitos.

OBJETIVOS:- Evaluar la accin antihelmntica de los extractos acuosos de Saruthamnus scoparius y Lupinus ballianus de concentracin, 125mg, 250mg y 500 mg por Kg de ratn contra los oxiuros Syphacia obvelata y Aspiculuris tetraptera.- Determinar la naturaleza de los metabolitos secundarios de las partes reas de las plantas evaluadas por estudios fitoqumicos.- Determinar los efectos txicos de los extractos inoculados mediante la determinacin de la DL50.METODOLOGIA:

RESULTADOS Los resultados de la evaluacin del control negativo (solucin de NaCl al 10 %).

Lasgrficas, muestran el efecto de las concentraciones de las soluciones de Sarothamnus scoparius sobre los oxiuros, Syphacias obvelata , Aspiculuris tetraptera y oxiuros totales.

Lasgrficas,muestran el efecto de las concentraciones de las soluciones de Lupinus ballianus sobre Syphacia obvelata, Aspiculuris tetraptera y oxiuros totales.

Los resultados de la DL50 aguda para los extractos de ambas plantas demuestran que no son txicos; no hay cambio en la conducta de los ratones evaluados ni mortantad.

DISCUSIN DE RESULTADOS Los extractos acuosos de Sarothamnus scoparius contienen alcaloides, flavonoides, saponinas, taninos, que son compuestos polares.A) Han demostrado una considerable eficacia sobre los oxiuros Syphacia obvelata.CONCENTRACIONES.PORCENTAJE DE EFICACIA.

125 mg.62,34 %

250 mg.64,10 %

500 mg.65,90 %

B) Se encontr que el porcentaje de eficacia contra los oxiuros Aspiculuris tetraptera es menor.CONCENTRACIONES.PORCENTAJE DE EFICACIA.

125 mg.34,78 %

250 mg.36,70 %

500 mg.44,11 %,

Se encontr una relacin directa dosis-respuesta entre la concentracin de los extractos de Lupinus ballianus y el porcentaje de eficacia encontrado.A) La accin sobre el oxiuro Aspiculuris tetraptera es mayor que sobre Syphacia obvelata. CONCENTRACIONES.PORCENTAJE DE EFICACIA.

125 mg.33,14 %

250 mg.35,65 %

500 mg.44,25 %

El extracto de la parte area contiene alcaloides, flavonoides taninos que podran participar de la accin nematicida del extracto. Se ha utilizado solucin acuosa de mebendazol como control positivo, para comparar la accin antihelmntica de los extractos de la Sarothamnus scoparius y de Lupinus ballianus, en tanto que los extractos tienen una mezcla de los metabolitos secundarios mencionados. Hay ciertas diferencias en los ciclos de vida de los oxiuros evaluados; por ello que los extractos afectan en algunos casos selectivamente a un tipo de oxiuro. Al utilizar un modelo animal, en este caso ratones, lo que se quera era determinar la actividad antihelmntica de los extractos sobre el oxiuro Enterovius vermicularis, que tiene un ciclo de vida similar a la Syphacia obvelata.CONCLUSIONES Los extractos acuosos obtenidos de la parte area de Sarothamnus scoparius tienen un porcentaje elevado de eficacia contra el oxiuro Syphacia obvelata y menor eficacia para el oxiuro Aspiculuris tetraptera. Los extractos de Lupinus ballianus son ms eficaces contra el oxiuro Aspiculuris tetraptera y presentan menor eficacia para el oxiuro Syphacia obvelata. En todos los casos la actividad antihelmntica aumenta con la concentracin del extracto. La DL50 de los extractos de ambas plantas demuestran que no son txicos.

Evaluacin del Efecto Antiinflamatorio del ExtractoAcuoso de las Semillas de LupinusmutabilisSweet (Tarwi, Chocho), en Animales de Experimentacin.

OBJETIVOS: Evaluar el efecto antiinflamatorio del extracto acuoso de las semillas de Lupinus mutabilis Sweet (Tarwi, Chocho), en Animales de Experimentacin y la toxicidad aguda tanto del extracto acuoso y de los alcaloides de la semilla.

MATERIALES Y METODOS:Material Biolgico: Lupinus mutabilisSweet, Ratones Mus musculus cepa Balb C53 de ambos sexos de dosmeses de edad de 20 a 25 g de peso corporal promedio (30), Ratas albinas consanguneas cepaHo1tman de ambos sexos, de 4 meses de edad con 250g de peso corporal promedio

PROCEDIMIENTOS:

Recoleccin, identificacin taxonmica. Y estudio fitoqumico. La determinacin de alcaloides totales se realiz por el siguiente mtodo; (por mtodo screening Fitoquimico). Determinndose la presencia de cinco fracciones de alcaloides quino-zilidnicos..

Una vez recorrido el cromatofolio, se revel atomizando con el reactivo de Dragendorffy semidieron los Rf de las manchas positivas frente al revelador, se compararon los valores de Rfhalladosy el color de las manchas con reveladores de luz UV a 254 y 366 nm.

Evaluacin por HPLC

Para la lectura al HPLC de los alcaloides de LupinusmutabilisSweet , la muestra seca y pulverizadase suspendi en metanol recibiendo un tratamiento previo para la obtencin y purificacin dea1caloides, luego se extrajeron 200 mg de material con 7 ml de metanol durante 20 minutos, a temperaturaambientey con agitacin continua, procediendo luego a filtrar la solucin recibindola enunafiola de 25 mI directamente, se repitieron estos pasos dos veces mas reuniendo todos losfiltrados y se llev a un volumen determinado con metano!. El anlisis se realiz bajo las siguientescondiciones:

Columna: RP- 18, 250-4.5 um,Tipo de Bomba: L-7100Fase mvil:

A: 0,05% Acido ortofosfricoB: Metano!.C: AcetonitriloD: Agua

Temperatura: ambienteFlujo: 1ml/minVolumen de inyeccin: 80ulLongitud de Onda: UV254 nmTiempo de retencin de espartena: 0.86 Minutos

Evaluacin Toxicolgica

Se realiz el ensayo de toxicidad aguda determinndose la DL50 (mg/Kg), de acuerdo al Modelo de Lichfield JT, para lo cual se formaron grupos de seis ratones cada uno, distribuidos al

azar entre hembras y machos, administrndose el extracto acuoso en cocimiento por va peroral conla ayuda de sondas metlicas orales en dosis crecientes teniendo en cuenta un nivel de dosis paraun solo grupo de animales en estudio, asimismo se tuvo un grupo control al que se le administragua destilada. Los animales fueron observados durante 24 horas para registrar las condiciones de morbilidad o supervivencia u otros parmetros de actividad motora como convulsiones y dificultades de movimiento y a los sobrevivientes se les observ durante 7 das, evalundose los resultados mediante los Probits Log (dosis-respuesta)

DL50 de alcaloides totales: 600 mg/K

Evaluacin farrnacolgica:

La evaluacin de la actividad antiinflamatoria, se realiz por el Mtodo del edema subplantar utilizandoovoalbmina al 50% en S.S.!, para 10 cual se utilizaron ratones albinos Swiss obtenidos encondiciones normales del Bioterio del Ministerio de Salud (INS-Chorrillos) con peso corporal de 21-33g, los cuales fueron adaptados a las condiciones de laboratorio por 48 horas y distribuidos al azaren 3 grupos considerando un control positivo que recibi diclofenaco por va oral.

El Mtodo del edema subplantar consiste en la administracin subcutnea de albmina en suero fisiolgico al 50% a nivel de la aponeurosis plantar del ratn, provocando una reaccin de carcter inflamatorio mediada por liberacin de diversos autacoides (histamina, serotonina, bradiquinina, prostaglandinas fundamentalmente PGEl, PGE2, PGF2alfa, etc), la extravasacin de protenas, tienelugar durante toda la respuesta. El extracto de semillas de lupinus en cocimiento se administr por va oral. El volumen de la pata inyectada fue medida antes y despus de la inyeccin de albmina al 50% en suero fisiolgico en el pletismmetro y luego comparndolo con el grupo control.

El Grupo I (Control) con agua bidestilada, sirvi como patrn.En el Grupo II (chocho) el porcentaje de inhibicin mxima fue de 66% y se present a los 80min a la dosis de 2000 mg/Kg.En el grupo III (Diclofenaco R) el efecto mximo fue de 100% y se present a los 60 minutos a ladosis de 30mg/Kg.

Los resultados se expresan como el promedio del incremento del volumen plantar, la media delError estndar y el porcentaje de inhibicin de la inflamacin.

RESULTADOS

En las semillas secas y pulverizadas de L.m.S se ha podido evaluar la presencia de una serie deprincipios activos entre ellos: alcaloides, taninos, saponinas, esteroides, compuestos fenlicos,aminocidos libres y azcares. Encontrandose un 4.28% de alcaloides totales.

En el extracto con actividad farmacolgica se ha podido constatar por HPLC la presencia delalcaloide Espartena en la muestra de Lupinus frente a un Estndar.La DL50 para el extracto acuoso en cocimiento fu de 3,500 mg/Kg de peso y para los alcaloidestotales de 600 mg/Kg de peso, asimismo podemos mencionar que la toxicidad del Lupinus se manifiesta por convulsiones tnico-clnicas intensas que llevaron a la muerte a los animales de experimentacin y asumimos que posiblemente esta toxicidad pueda estar dada por los alcaloidespresentes en el Lupinus, sin embargo a dosis menores no se evidenci la muerte de ningn ratn hasta los 7 das. De acuerdo a la Clasificacin de Williams (DL50=3,500 mg/Kg) esta especie se ubica dentro de plantas ligeramente txicas y la causa de muerte podra deberse a la depresin respiratoria por agotamiento, como sucede con los neuroestimulantes en general.

El Extracto acuoso del lupinus mutabilis Sweet (chocho) posee efecto antiinflamatorio menor queel efecto producido por el diclofenaco. Sin embargo podra constituir una medicina alternativa paraeste tipo de afecciones.

12. BIBLIOGRAFIA:1) Villar del Fresno, ngel. Farmacognosia General, Espaa, 1999.2) Bruneton, Jean. Farmacognosia- Fitoqumica Plantas Medicinales, 2edicin 2001.3) Muoz, Orlando. Monografa plantas medicinales de uso en chile- qumica y farmacologa, Santiago de Chile, 2004.4) Villacrs, E. Propiedades y aplicaciones de los alcaloides del chocho (lupinus mutabilis sweet), Quito-Ecuador, 2009.5) Lpez Gonzles, Gins. Los rboles y Arbustos de la Pennsula Ibrica e Islas Baleares, 2 edicin, 2006. 6) MICROSOFT ENCARTA 2009.7) BOTANICAL.COM/ BY MR. GRIEVE/2000.8) Hans Schoeneberger, O. Sam ,R.Gross. Investigacin de Calidad proteica dellupinus mutabilis en ratas albinas. Pag 87-100. Informe #5 Proyecto Lupino. Instituto Nacional de Salud. Lima-Per.1980.9) Castaeda, C.B.; Manrique M.R.; Ibez V.L.; Gamarra, C.F.; Galan, L.D.; Quispe, H.P. /Art3_Vol2_N1-2/2011.