Actividad anti-VIH-1 de factores solubles: su papel ... · Una Universidad investigadora,...

Una Universidad investigadora innovadora y humanista al servicio de las regiones y del paiacutes

Actividad anti-VIH-1 de factores

solubles su papel protector en esta

infeccioacuten

Maria Teresa Rugeles

Grupo Inmunovirologiacutea

Universidad de Antioquia


Infeccioacuten No infeccioacuten

Progresor

tiacutepico

Progresor

raacutepido

Expuestos

seronegativos

Mecanismos de

resistencia

Geneacuteticos Inmunoloacutegicos

Progresor

lento


Inmunidad Celular y Humoral

Factores solubles

Interferones Citoquinas Th1 quimoquinas SLPI Defensinas RNasas entre otros


Factores solubles anti-VIH

RANTES MIP-

1α MIP-1 y

SDF-1

HAD y HBD

HBD SLPI

RNasas

α-defensinas


Defensinas

Peacuteptidos de 30-48 aminoaacutecidos catioacutenicos

y microbicidas que se producen de forma

constitutiva yo en respuesta a productos

microbianos o citocinas proinflamatorias


Defensinas

Alfa seis en humanos

Beta seis en humanos

Teta una en primates


Evidencia antiviral in vitro de

HAD

Chang TL et al J Clin Invest 2005 Mar 115(3)765-73


Quintildeones et al AIDS 2003 Sun et al Journal of virology 2005


Klotman et al Nat Rev Immunol 2006


Enzimas reguladoras que participan en varios procesos fisioloacutegicos que van

desde el procesamiento alternativo del RNA hasta la muerte celular


Superfamilia A 13 RNasas humanas

Familia T1

Familia T2

Defensa contra distintos patoacutegenos

Actividad antitumoral


Bedoya et al AIDS Research and Human Retroviruses 22(9) 2006 pp 897ndash907


RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG

Aumenta el desarrollo fetal yo proteje contra la transmisioacuten vertical de

patoacutegenos

Alo-reconocimiento materno-

fetal


Determinar la participacioacuten en la resistencia natural

a la infeccioacuten por el VIH-1 de los siguientes factores solubles

Defensinas HAD y HBD-2 y 3 RNasas EDN RNasa 1 y angiogenina


ESN 60 CS 60 SP 60

Citometriacutea LT-CD4

Plasma

Carga viral SP

Mucosas Oral vaginal y endocervical

Extraccioacuten de RNA

(TRIZOL)

PCR en tiempo real CK19 HAD-1 HBD-2 y 3 y

RNasas


Characteristics HC (n=60) HESN (n=61) SP (n=60)

Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load

Median (Range) ND ND

2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data

Poblacioacuten de Estudio


Produccioacuten aumentada de defensinas

en mucosa oral de HESN


Produccioacuten similar de RNasas

en mucosa oral Oral mucosa

HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A

Angiogenina se detectoacute en 5

HC 1 HESN y 3 SP

RNase 1 se detectoacute en 6 HC

7 HESN y 5 SP


Produccioacuten aumentada de RNasas en

mucosa genital de HESN


Produccioacuten similar de defensinas en

mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA


HAD en mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA


Anaacutelisis de mecanismos de accioacuten anti-VIH-1 con proteiacutenas recombinantes

Inhibicioacuten de la replicacioacuten viral

Infeccioacuten con HIV-GFP Cuantificacioacuten de GFP y p24

(48h PI)

Inhibicioacuten de la Transcripcioacuten reversa

PCR en tiempo real para productos

tempranos tardiacuteos y ciacuterculos de 2-LTR

Inhibicioacuten de la entrada del virus HIV-GFP (R5-X4)


(48h PI)

Tamizaje de concentracioacuten viral


ceacutelulas 293T Transfeccioacuten

Genes de VIH-1 sin env

HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2

HIV-1 no Env Neg control

HIV-1 VSV-G Pos control

Produccioacuten de virus

recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas

Colectar y filtrar el sobrenadante

ELISA de p24 Precipitacioacuten con PEG concentracioacuten del virus

PEG + VIH 3 diacuteas

Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+

Produccioacuten de virus infecciosos a partir de

clones moleculares



Liacuteneas celulares

Infeccioacuten 100 pgml p24 polybrene 8ugml 96 pozos2h Incubacioacuten por 3 diacuteas

Infeccioacuten de liacuteneas celulares con virus de una sola ronda de replicacioacuten

HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2

HIV-1-GFP no Env Neg control

HIV-1-GFP+VSV-G Pos control

U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas


Actividad antiviral de defensinas

recombinantes


Actividad antiviral de RNasas

recombinantes


Modelo de expresioacuten de factores solubles en mucosa genital


Modelo de inhibicioacuten de la replicacioacuten del VIH-1 por hBDs y RNasas


Ventajas para el desarrollo de agentes toacutepicos

Amplio espectro antirretroviral contra

cepas X4 y R5

Mayor biodisponibilidad al no ser

susceptible a peptidasas hepaacuteticas y

renales

Bajos costos de produccioacuten

Capacidad antibacteriana



Pacientes Individuos HESN

AGRADECIMIENTOS

Wildeman Zapata Wbeimar Aguilar


Infeccioacuten No infeccioacuten

Progresor

tiacutepico

Progresor

raacutepido

Expuestos

seronegativos

Mecanismos de

resistencia

Geneacuteticos Inmunoloacutegicos

Progresor

lento



Factores solubles




RANTES MIP-

1α MIP-1 y

SDF-1

HAD y HBD

HBD SLPI

RNasas

α-defensinas


Defensinas






Defensinas






HAD











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




Factores solubles




RANTES MIP-

1α MIP-1 y

SDF-1

HAD y HBD

HBD SLPI

RNasas

α-defensinas


Defensinas






Defensinas






HAD











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




RANTES MIP-

1α MIP-1 y

SDF-1

HAD y HBD

HBD SLPI

RNasas

α-defensinas


Defensinas






Defensinas






HAD











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS



Defensinas






Defensinas






HAD











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS



Defensinas






HAD











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




HAD











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS











Familia T1

Familia T2






RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS





RNasas


EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS



EMBARAZO

EDN SDF-1 LIF y hCG


patoacutegenos


fetal






ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS







ESN 60 CS 60 SP 60


Plasma

Carga viral SP



(TRIZOL)


RNasas



Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




Age

Median (Range) 28 (19-54) 34 (17-61) 34 (17-51)

Gender n ()

Male

Female

33 (55)

27 (45)

35 (57)

26 (43)

27 (46)

33 (54)

Viral Load


2569 copiesmL

(50-493000)

T CD4+Lymphocytes


361 cellsmL

(17-909)

Table 1

Demographic profile

No data








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS








HC

HESN S

P

0

10

20

30

40

Re

lati

ve

un

its

of

ED

N m

RN

A


HC 1 HESN y 3 SP


7 HESN y 5 SP






mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

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HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

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HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS







mucosa genital

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

5

10

15

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Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN SP0

5

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-2

mR

NA

Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

0

1

2

3

4

Re

lati

ve

un

its

of

HB

D-3

mR

NA

Endocervical mucosa

HCESN SP

0

2

4

6

8

10R

ela

tive

un

its

of

HB

D-3

mR

NA



Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

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HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




Vaginal mucosa

HC

ESN S

P

00

02

04

06

08

10

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA

Endocervical mucosa

HC

ESN S

P

00

05

10

15

20

Re

lati

ve

un

its

of

HA

D-1

mR

NA





(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS






(48h PI)






(48h PI)





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS





HIV-GFP

Env R5 (HxB2)

Env X4 (YU2)

Env VSV-G

HIV-1 YU2

HIV-1 HxB2




recombinantes


Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS



Clones de VIH

Ceacutelulas 293T

2 diacuteas




Transfeccioacuten

Calcio fosfatos

p24 100-400 pgml

+

+

+


clones moleculares






HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS







HIV-1-GFP+YU2

HIV-1-GFP+HxB2



U373-MAGI

U3T3-CD4-CCR5-MAGI

CD4

CCR5

U3T3-CD4-CXCR4-MAGI

CXCR4 CD4

HB

D y

RN

asas



recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




recombinantes



recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS




recombinantes








cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS









cepas X4 y R5



renales






AGRADECIMIENTOS





AGRADECIMIENTOS


Actividad anti-VIH-1 de factores solubles: su papel ... · Una Universidad investigadora,...

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