3_Pesquiza e Identificacion de Anticuerpos DIAMED
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PESQUIZA E IDENTIFICACIÓN DE
ANTICUERPOS IRREGULARES
ALOINMUNIZACIÓN
Diagnóstico de aloinmunización
Exposición a antígenos eritrocitarios
30 sistemas / 257 antígenos
(DANIELS, 2005)
(MOREIRA et al, 1996; GIBLETT, 1961)
Inmunogenicidad del antígeno
D > K > c > E > Fya > Jka Dia (?!)
Origen étnica
Frecuencia de los antígenos
Frecuencia de las transfusiones
ALOINMUNIZACIÓN
•Características del
anticuerpo
Temperatura de reactividad
“in vitro”
Naturaleza (natural o
inmune)
Ativación de C “in vitro”
Clase Ig
Autoinmune
Características del antígeno
Sensibilidad a enzimas
proteolíticas
Efecto de dosis
Imunogenicidad
Forma de coneción y
expresión en la membrana,
ex: Dombrock e Wrb-GPA.
Genética, ej:
FYB x FY
CARACTERÍSTICAS DE LOS ANTÍGENOS Y
ANTICUERPOS
Antígeno Frecuencia %
Cauc. africanos
D 85 92
C 68 27
c 80 96
E 29 22
e 98 98
Características
Anticuerpos Naturales, inmunes
(IgG e IgM)
RT / DHRN
autoanticuerpos
T.A., AGH e ENZIMA
Efecto de dosis
Genes RHD e RHCE (cromosoma 1)
2 Proteínas altamente homólogas
Proteínas intergrales con 417 aa,
48 antígenos
Antígenos mas comunes: D, C, c, E, e
417 aa
NH2
COOH
C/c
103ser>pro
E/e
226pro>ala
Sistema Rh (004-ISBT)
Gen KEL (cromosoma 7)
Proteína: 732 aa
24 antígenos
Características
Clase IgG, raramente IgM
activa complemento
RT / DHR
AGH
Imunogenicidad
COOH
NH2
K/k (Met>Thr)193
Kpa/Kpb (Trp/Arg)281
Jsa/Jsb (Pro/Leu)597antígenos Frecuencia%
Cauc. africanos
K 9 2
k 100 100
Kpa 2 <1
Kpb 100 100
Jsa <1 20
Jsb 100 99
Sistema Kell (006-ISBT)
Gen FY (cromosoma 1)
Proteína: 338 aa
6 antígenos
Características:
Clase IgG, raramente IgM
Activa complemento
RT / DHR
AGH
Fya e Fyb (sensíbles a enzimas)
antígenos Frequencia %
Cauc. africanos
Fya 66 10
Fyb 83 23
Fy3 100 32
El fenotipo Fy(a-b-) en africanos es debido a mutaciones de punto 33t>c,
em el sítio GATA1, que impide la expresión eritróide del alelo FYB (gen Fy).
COOH
NH2
Fya/Fyb
(Gly/Asp)
42
Anti-Fy3
Sistema Duffy (008-ISBT)
Gen HUT11 (cromosoma 18)
Proteína: 391 aa
3 antígenos
Características:
Efecto de dosis (Jka)
Classe IgG
Activa complemento
RT / DHR
AGH y enzima
Antígenos Frecuencia%
Cauc. Afr.
Jka 77 92
Jkb 74 49
Jk3 100 100
COOHNH2
Jka/Jkb (Asp/Asn)280
Sistema Kidd (009-ISBT)
Genes GYPA e GYPB
(cromosoma 4)
43 antígenos
GPA importante para la expresión
de Wrb
Características:
T. A. y AGH. ( IgM e IgG)
RT e DHR (rara)
Efecto de dosis
Sensibilidad a enzimas
(excepción Ag U)
antígenos Frecuencia%
Dadores africanos
M 78 74
N 72 75
S 55 31
s 89 93
U 100 100
Ena 100 100
Mk 100 100
M
Ser
Ser
Thr
Thr
Gly
1
5
N
Leu
Ser
Thr
Thr
Glu1
29Met/Thr S/s
UPapaína
Tripsina -quimiotripsina
72
72
40
131Glicoforina B
Glicoforina A
N’
Leu
Ser
Thr
Thr
Glu
5
65
Sistema MNS (002-ISBT)
Gen DI (cromosoma 17)
Proteína: 911 aa
21 antígenos
anticuerpos
Clase IgG
Aactiva complemento
RT / DHR
AGH
Inmunogenicidad
Antígenos Frecuencia%
Dadores Asiáticos
Dia 3 13
Dib 100 100
Wra 1 1
Wrb 100 100
COOHNH2
Dia/Dib
(854Leu/Pro)
400-408
Wra/Wrb
(658Lys/Glu)
Sistema Diego (0010-ISBT)
La expresión de Wrb depende
de la presencia de GPA.
Telen et al, 1990; Spring et al, 1994 ; Rios et al, 2002
gen DO (cromosoma 12)
Glicoproteína (GPI): 314 aa
4 antígenos (fenótipo nulo: Gya-)
HPN
antígenos Frecuencia%
caucasianos africanos
Doa 67 55
Dob 82 89
Joa 100 100
Hy 100 100
Gya 100 100
características
Clase IgG
RT: inmediata / tardía
AGH, Enzima
108
117
Hy (Gly)
Joa (Thr)
265 Doa/Dob
Asn/Asp
NH2
Sistema Dombrock (0014-ISBT)
PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES
(HEDDLE et al, 1995; REDMAN et al, 1996; ISSIT & ANSTEE, 1998; SCHONEWILLE et al, 2000; CHARACHE et al, 1990)
•AloiNmunización: Riesgo / frecuencia
2,6% - 8,4% receptores eventuales
+ 60% receptores crônicos
•Persistencia del anticuerpo (26% / 10 meses)
Anticuerpos Kidd: < tiempo de detección
30 – 60% RTH
•Respuesta inmune 7 dias después de la transfusión
Anti-Jka (4dias)
PREVENIR
REACCIONES HEMOLÍTICAS TRANSFUSIONALES AGUDAS O
TARDÍAS
Discrepancias entre la tipificación directa y reversa ABO
Acs (anti-A1; anti-I; anti-IH; anti-N y otros)
Panel compuesto por dos o tres células grupo O fenotipadas para los
principales antígenos eritrocitarios
Antígenos con efecto de dosis
R1R1; R2R2; Jk(a+b-) e M+N-
PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES
•Soluciones potencializadoras de las reaciones PAI
Macromoléculas (proteínas o polímeros - ↓ potencial de
repulción)
Ex: Albumina bovina (*) o Polietilenglicol
Soluciones de baja fuerza iônica (LISS)
Enzimas proteolíticas (↓ nube iônica)
•Test Indirecto da Antiglobulina Humana
Tubo
Gel centrifugación
Microplaca (?)
PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES
Castilho, 1997
PESQUIZA DE ANTICUERPOS IRREGULARES
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
PAI POSITIVO
1 ou + Aloanticuerpo(s)
PAI (P)
auto-control y CD (N)
PAI (P) y auto-control (P)
Ag alta frecuenncia
Fenotipo Nulo
Efecto de dosis
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
PAI POSITIVO
PAI (P)
auto-control y CD (N)
PAI (P) y auto-control (P)
Auto frio interferencias
CD
negativopositivo
Auto-anticuerpo(s) Auto + Aloanticuerpo(s)
complemento
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
•Panel de identificación
AGH X Enzimático
•Panel de células seleccionadas
R1R1; R2R2; fenotipos raros (Mk, Tja, k, Rh17, Kpb)
• Adsorcióno Seleción células o técnicas
Tratamiento enzimático de células seleccionadas
•Congelamiento de hematíes
Nitrógeno líquido
•Fenotipificación / genotipificación
RECURSOS IMUNOHEMATOLÓGICOS
Caso 1
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 1+ 0
2 R1R1 + 0 + + + 0 + + + + + + 0 + + + 1+ 2+
Caso 1) Identificación en muestras conteniendo + de 1 anticuerpo.
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 1+
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 1+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 1+
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 1+
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 1+
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 1+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 1+
11 auto 0
X X X X X X X X X X XX X
OBS: antígeno Fyb y sensible a enzimas proteolíticas.
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 1+ 0
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 0
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 1+ 0
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+ 3+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 1+ 0
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 1+ 3+
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 1+ 0
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 1+ 0
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 1+ 0
11 auto 0 0
Caso 1) Identificación en muestras conteniendo + de 1 anticuerpo.
X X X X X X X X X X XX XX
Anticuerpos identificados: anti- Fyb, - E
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 2
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 1+ 0
2 R1R1 + 0 + + + 0 + + + + + + 0 + + + 0 0
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado Obs
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss 18º
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 2+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 2+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 2+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 2+ 3+
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 2+ 3+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 2+ 3+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 2+
11 auto 0 0
Caso 2) Efecto de dosis.
Anticuerpo identificado: anti-M
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 3
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 3+ 4+
2 R1R1 + 0 + + + 0 + + 0 + + + + + 0 + + + 3+ 4+
Paciente/donanter: O Rh negativo nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 3+ 4+
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + 0 + + 0 0 + + + + + 3+ 4+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 0 + + + + + + + 0 + 3+ 4+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + 0 + 0 + + + 0 3+ 4+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 + 3+ 4+
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 3+ 4+
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 3+ 4+
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + 3+ 4+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 3+ 4+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + 3+ 4+
11 auto 0 0
Caso 3) antígeno de alta frecuencia poblacional.
Fenotipificación: Kp(a+b-)
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Caso 3) antígeno de alta frecuencia poblacional alo-adsorción con rr
Anti- Kpb, - D, - C
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donanter: O Rh negativo nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 3+ 4+
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + 0 + + 0 0 + + + + + 3+ 4+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 0 + + + + + + + 0 + 3+ 4+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + 0 + 0 + + + 0 3+ 4+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 + 3+ 4+
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + 0 0
9 rr 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0
11 auto 0 0
Caso 4
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donante: nº de la muesstra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s Liss ENZ
1 R1wR1 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 0 + 2+ 0
2 R1R1 + 0 + + + 0 + + 0 + + + + + 0 + + + 1+ 0
Caso 4) antígeno de alta frecuencia poblacional.
Fenotipificación:Fy(a-b+) M-N-S-s-
PRESENCIA DE ALOANTICUERPOS
Paciente/donante: O Rh negativo nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Kpa Kpb Fya Fyb Jka Jkb M N S s LISS 18°
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + + + 0 0 + 0 + 2+ 3+
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + 0 + + 0 0 + + + + + 1+ 3+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 0 + + + + + + + 0 + W 3+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+ 3+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 + W 3+
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 1+ 3+
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 2+ 3+
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + 0 + + 2+ 3+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 2+ 3+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + 0 + 1+ 3+
11 auto 0 0
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTO-CONTROL POSITIVO
PATOLOGIAS causas investigar
Anemia hemolítica auto-
imune en caliente / frio.
IgG / IgM / IgA / Complemento
Sistema Rh y utros
Caracterizar a Ig y
Complemento
Enfermedad hemolítica
del recién nacido
Incompatibilidad sanguínea
materno-fetal
Identificar el Ac
(tipificación y elución)
Reacción transfusional
hemolítica
Error técnico
Aloanticuerpo en bajo título
Identificar el Ac
(Elución e IAI)
Anemia inducida por
droga
a-metildopa Historia clínica
Poliaglutinación Coloides
Reaciones inflamatorias
Historia clínica
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-
CONTROL POSITIVO
Presencia de auto-anticuerpos y complemento
Ampla reactividad
Interfieren en la investigación e identificación de aloanticuerpo
Investigación
AGH monoespecífica (IgG e C)
32% dos pacientes con AHAI presentan aloanticuerpos
DIFICULTADES
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-
CONTROL POSITIVO
¿QUE HACER ?
Inactivación de complemento
Disociación Fenotipificación / Auto-adsorción de la muestra de suero
Pesquiza e identificación de aloanticuerpos
Genotipificación
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-
CONTROL POSITIVO
Disociación de los auto-anticuerpos
Temperatura (Acs frios)
Difosfato de cloroquina
ZZAP
Glicina EDTA
Auto-adsorción
Necesidad de grandes volúmes de hemtíes
Tiempo para realización del procedimento
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-
CONTROL POSITIVO
Hematíes LI AGH
I 3+ 1+
II 3+ 2+
Auto 3+ W
Caso 5: autocontrol positivo a temperatura ambiente
INVESTIGAR HISTORIA TRANSFUSIONAL RECIENTE
REALIZAR C.D. (reacción hemolítica transfusional o auto-inmune)
REALIZAR AUTO-ADSORCIÓN EN FRIO
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O AUTO-
CONTROL POSITIVO
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 3+ W
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 3+ 2+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 3+ 1+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 3+ 2+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 3+ W
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 3+ W
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 3+ 1+
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 3+ 2+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 3+ 2+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 3+ W
11 auto 3+ W
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Caso 5: autocontrol positivo a temperatura ambiente
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
Ag
Ag
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
Ag
AgAg
Remoción del auto-anticuerpo frio con
lavado de los hemtíes con Nacl (0,9%)
a 37ºC
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Remoción del auto-anticuerpo frio
con lavado de los hemtíes con Nacl
(0,9%) a 37ºC
Muestra con auto-anticuerpo frio + aloanticuerpo
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
Auto-adsorción en frio 4°C
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
Muestra adsorbida para test de
IAI
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Paciente/donanter: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + W 2+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 0
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 1+ 2+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 2+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 W 2+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0
11 auto 0 0
Anticuerpos identificados: anti-S
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Caso 5: autocontrol positivo a temperatura ambiente
Hematíes LI AGH
I 0 2+
II 0 2+
Auto 0 2+
Caso 6
(auto control positivo en AGH)
•INVESTIGAR HISTÓRIA TRANSFUSIONAL RECIENTE
•REALIZAR C.D. (reación hemolítica transfusional o auto-inmune)
•REALIZAR DISOCIACIÖN y AUTO-ADSORCIÓN A 37°C
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 2+
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 2+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 2+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 2+
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 2+
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 2+
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 2+
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 2+
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 2+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 2+
11 auto 0 2+
CASO 6) Identificación en muestras con auto control positivo e AGH .
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Disociación del auto anticuerpo
con Difosfato de cloroquina (CDP)
20% en PBS (pH 7,2)
Ag
Ag
AgAg Ag
Ag
Ag
AgAg
Ag
Ag
AgAg
AgAg
CDP
CDP
CDP
CDP
CDP
CDPCDPCDP
CDP
CDP
CDP
CDP
CDP
CDP
CDP
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
AgAg Ag
Ag
Ag
AgAg
Ag
Ag
AgAg
AgAg
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Dissociación del auto anticuerpo
con Difosfato de cloroquina (CDP)
20% en PBS (pH 7,2)
Muestra co auto-anticuerpo frio + aloanticuerpo
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
Auto-adsorción a 37°C
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
AgAg
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Muestra adsorbida para test de
IAI
Paciente/donante: nº de la muestra:
Sistema Rh Kell Duffy Kidd MNS resultado
fenótipo D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka Jkb M N S s LI AGH
1 R1wR1 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0
2 R1R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 2+
3 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 2+
4 R2R2 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 0
5 r’r 0 + 0 + + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0
6 r”r 0 0 + + + 0 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 0
7 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0
8 rr 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 0
9 rr 0 0 0 + + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 2+
10 rr 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0
11 auto 0 0
CASO 6) Identificación en muestras con auto control positivo e AGH .
Anticuerpos identificados: anti-K
TEST DE COOMBS DIRECTO POSITIVO O
AUTOCONTROL POSITIVO
Técnicas de congelamiento
Sueros raros y anticuerpos contra antígenos públicos
•Panel de células selecionadas y fenotipos nulos
Fenotipificación es siempre fundamental
Técnicas de disociación
Técnicas de adsorción (auto o alo):•Frío / caliente/ enzimáticas.
CONCLUSIÓN
Paneles de hemátíes
história transfusional, obstétrica y diagnóstico
PESQUIZA E IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES
•DANIELS, G. Human Blood Groups. Oxford: Blackwell Science, 1995. 737p.
•VERGELEN-TYLER, V. (Ed.). Technical Manual. 13. ed. Bethesda: American
Association of Blood Banks, 1999. 798p.
•DANIELS, G & BROMILOW, I. Essential Guide to Blood Groups. Oxford:
Blackwell Publishing, 2007. 99p.
•MOLLISON, P. L.; ENGELFRIET, C. P.; CONTRERAS, M. Blood transfusion
in clinical medicine. 10 ed. Oxford: Blackwell Science, 1997.
Referencias bibliográficas