1

3. Codificación genética de las Inmunoglobulinas

•Generación de la Variabilidad en la Inmunoglobulina

•Diferenciación de las Células B en Médula Ósea

Exclusión AlélicaSelección Positiva y Negativa

•Activación y Diferenciación de las Células B

Producción de AnticuerposCambio de Isotipo

•Aplicación de los anticuerpos

Anticuerpos Policlonales Anticuerpos Monoclonales

Codificación genética de las Inmunoglobulinas

• Variabilidad

• Al menos un gen para cada clase y subclase

• Región variable y región constante en el mismo péptido

• Regiones variables e hipervariables

• Ig de distinta clase y la misma región V

• Ig soluble e Ig de membrana

• Cambio de clase en la respuesta secundaria

• Aumento de la especificidad en

la respuesta secundaria

S. TONEGAWA Nobel de medicina 1987

2

Cadenas Polipeptidicas de las Inmunoglobulinas

Locus de Genes para las Inmunoglobulinas

L: 60-90 bp; V: 300 bp; D: 30-50 bp; J: 30-50 bp; CL: 300 bp; CH: 900-1200 bp

3

RECOMBINACION SOMATICA DE LOS GENES DE INMUNOGLOBULINARECOMBINACION SOMATICA DE LOS GENES DE INMUNOGLOBULINA

Ejemplos de Recombinación de Genes V(D)J

4

PROCESAMIENTO ALTERNATIVO O PROCESAMIENTO ALTERNATIVO O SPLICINGSPLICING DE RNADE RNA

Regla 12 / 23 de Recombinación de GenesRegla 12 / 23 de Recombinación de Genes

RRS: Recombination Signal SequnceRRS: Recombination Signal Sequnce

5

Los segmentos Los segmentos génicos de la génicos de la

región V se unen región V se unen por recombinaciónpor recombinación

RSS: Secuencias Señalde Recombinación

por recombinaciónpor recombinación(cadena ligera)(cadena ligera)

Se pueden recombinar de 2 formas

RAG1 / RAG2

TdT

Delección Inversión

Recombinación de GenesRecombinación de Genes

Sinapsis RAG1/RAG2

Escisión

Formación de HorquillaDNA-PK

q

Reparación y Ligación

ArtemisaKu70/Ku80TdT

Ligasa IV/ XRCC4

6

A B

V V J

RAG-2

RAG-1RAG-2

C D

RAG-1

RAG-2

RAG-1

E F

G H

Rotura de la Horquilla

TdT

Adición de nucleótidos Unión

7

RAG-1/RAG-2

DNA-PK

Artemisa

Ku70/Ku80

TdT

Exonucleasa

DNA-ligasa/XRCC4

8

Type of tumor  Chromosomal translocation  Genes involved in translocation 

B Cell derived 

Translocaciones de Cromosomas de Leucemias o Linfomas

Burkitt's lymphoma  t(8;14)(q24.1;q32.3) most common C‐MYC, IgHAcute lymphoblastic leukemia (pre‐B‐ALL) 

t(12;21)(p13;q22) (25% of childhood cases) 

TEL1, AML1 

Pre‐B‐ALL; also chronic myelogenous leukemia 

t(9;22)(q34;q11) (25% of adult ALL, 3% of childhood ALL) 

BCR, ABL (Philadelphia chromosome) 

Follicular lymphoma  t(14;18)(q32.3;q21.3)  BCL‐2, IgH Diffuse B cell lymphoma, large cell type 

t(3;14)(q27;q32.3)  BCL‐6 (DNA‐binding protein), IgH 

Mantle cell lymphoma  t(11;14)(q13;q32.3)  CCND1 (CYCLIN D1), IgH T Cell derived Pre‐T cell acute lymphoblastic  t(1;14)(p32;q11) (5% of cases);  TAL1, TCRα; TAL1, SCLy pleukemia 

( ; )(p ;q ) ( );del(1p32) (20% of cases) 

, ; ,

T cell lymphoma, anaplastic large cell type 

t(2;5)(p23;q35)  ALK (tyrosine kinase), NPM (unknown function) 

Guardianes del DNA

Reparación del DNA de Doble Cadena no Homologo

9

DNARAG1/RAG2DNA-PKArtemisaKu70/Ku80TdTLigasa IV/XRCC4

RNA

ATM

Proteína

ATM: Molécula de Ataxia Telangiectasia

Generación de la Diversidad

1. Combinación VH y VL

2. Numerosos genes V

3. Genes D y J

4. TdT (HV3)

5. Exonucleasa y Ligasa (HV3)

6. Hipermutaciones somáticas (Respuesta secundaria) (HV1, HV2, HV3)

Variabilidad = 109-1016