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    C O M P O N E N T E S D E L G R U P O : D A N I E L C O R R A L F E R N N D E Z

    R A L H E R R A N Z E S C O B A R

    D A V I D M A R T N E Z R A P O S O R I B A G O R D A

    D A N I E L M A R T N E Z - S A N T O S M O R E N O

    V C T O R D E L R O D E L G A D OR O B E R T O R O D R I G O A L O N S O

    A L E J A N D R O S A N T O S C A R B A L L E S

    I S A B E L V A Z F E R N N D E Z

    10.1. Microorganismos utilizadosen la industria alimentaria

    Fundamentos de Biotecnologa

    1

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    ndice

    1. CONCEPTO DE FERMENTACIN

    2. MICROORGANISMOS INVOLUCRADOS.

    3. ALIMENTOS ELABORADOS MEDIANTEFERMENTACIN.

    4. BIBLIOGRAFA

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    CONCEPTO DEFERMENTACIN

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    La fermentacin

    Proceso catablico y en ausencia de oxgeno en elcual rompemos molculas orgnicas para producirenerga y compuestos orgnicos ms sencillos comodesecho. Estos productos orgnicos son los quedeterminan el tipo de fermentacin. Cuatro tiposprincipales: Fermentacin actica: cido actico

    Fermentacin lctica: cido lctico Fermentacin alcohlica: etanol

    Fermentacin butrica: cido butanoico

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    HISTORIA

    Se cree que la fermentacin del vino se practicaba hace100 siglos.

    Los qumicos desconocan que la materia viva formaseparte de estos procesos.

    Blondeau(1847) fue el primero en manifestar laclasificacin de las fermentaciones en base al hongoque las provocaba.

    Louis Pasteur enuncio que el azcar en ausencia de airefermentaba en etanol y CO2

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    Factores que intervienen en el crecimientomicrobiano.

    1. pH, cada microorganismo tiene un rango optimo depH.

    Microorganismo Rango optimo

    Bacterias 6 - 8

    Levaduras 4,5 - 6

    Hongos 3,5 - 4

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    2. Potencial redox

    En estas reaccin el agente que va aceptar los electrones serun compuesto endgeno (NADH, Nicotinamida AdeninaDinucletido + Hidrgeno).

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    3. Actividad acuosa

    Es la relacin entre la presin de vapor del alimento y la presin devapor del agua pura a la misma temperatura, esto hace referencia ala humedad del alimento.

    Este dato nos proporciona una informacin valiosa en cuanto a lacapacidad de conservacin y propagacin microbiana.

    Este valor tiene que estar entorno a 1.

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    4. Temperatura

    Clasificacin R. Temperaturas C EJEMPLO

    Psicrofilos 15-18 Polaromonas vacuolata

    Mesofilos 25-40 Eubacterias

    Termofilos 50-70 Procariotas

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    MICROORGANISMOS

    INVOLUCRADOS

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    Saccharomyces cerevisiae

    Formas variadas (esfrica,elipsoidal, cilndrica)

    Crecimiento favorecido por

    VITAMINAS.

    Capacidad para produciralcoholes.

    Capacidad en fermentacin de azcares.

    Involucrada en fermentacin de pan, cerveza y vino.

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    Leuconostoc

    Bacterias del cidolctico

    Forma de coco ovoide

    Heterofermentativas.

    Produccin de VINO,QUESOS

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    Pediococcus

    Bacterias del cidolctico

    Homofermentativas Gram-positivas

    Utilizada en conservacinEnsilado.

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    Estreptococcus

    Homofermentativa

    Diversidad de hbitats yactividades.

    Variedades:EnterococcusyLactococcus.

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    Enterococcus

    Bacterias del cido lctico.

    Organismo facultativo aerobio.

    Presentes en el intestinohumano: E. faecalis y E.

    faecium.

    Fermentacin de glucosa sinproducir CO2

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    Lactococcus

    Bacterias del cido lctico.

    Gran importancia en laindustria lechera (quesos yyogures).

    Composicin DNAsimilar a las demsbacterias lcticas.

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    Escherichia

    Caractersticas de animales desangre caliente.

    Funcin en el intestino(vitamina K)

    Organismo anaerobio

    facultativo.

    Fermentan glucosa y lactosa.

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    ALIMENTOS

    ELABORADOSMEDIANTE

    FERMENTACIN3

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    Tipos de fermentacin.

    FERMENTACIN PTRIDA:

    Factores intrnsecos. pH. Contenido de humedad. Actividad o disponibilidad de agua. Potencial rdox. Estructura del alimento. Nutrientes disponibles.

    Posible presencia de agentes antimicrobianos naturales.

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    Tipos de fermentacin.

    Sustrato Procesos qumicos Productos y efectos tpicos

    Pectina Pectinolsis

    Metanol, cidos urnicos

    (prdida de la estructura de lafruta, podredumbres blandas

    Protenas Protelisis, desaminacin

    Aminocidos, pptidos,

    aminas, sulfuros, amonaco,

    indol (amargor, acidez, mal

    olor, viscosidad)

    Carbohidratos Hidrlisis, fermentacionescidos orgnicos, CO2,

    alcoholes mixtos (acidez,

    agriado)

    LpidosHidrlisis, degradacin de

    cidos grasos

    Glicerol y cidos grasos

    mixtos (ranciedad, amargor)

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    Tipos de fermentacin.

    Factores extrnsecos. Temperatura.

    Humedad relativa.

    Gases (atmsfera). Tipos y nmero de microorganismos en el alimento.

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    Tipos de fermentacin.

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    Hay 4 productos de desechoen las etapas anaerobias:

    -Etanol

    -2,3 butanodiol

    -Glicerina

    -cido lctico

    Presenta 2 etapas lagluclisis:

    -Etapa preparatoria:se obtiene gliceraldehdo-3-

    fosfato gastando energa-Etapa final: se obtiene unode los productosanteriormente mencionadospara obtener energa.

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    Presenta 5 etapas principales:

    Su objetivo es obtener 2 molculas de gliceraldehdo-3-fosfato

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    -Adicin de un fosfato en el carbono 6dando lugar a la glucosa-6-fosfato

    -Catalizada por la hexoquinasa

    -Isomerizacin de lacetona del carbono 1 alcarbono 2, pasando elhidroxilo al carbono 1

    -Catalizada por la

    fosfoglucoisomerasa

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    -En esta reaccin vemos como seadiciona al carbono 1 un fosfato quesustituye al hidroxilo, produciendo1,6 fructosa difosfato.

    -Cataliza la reaccin el enzimafosfofructoquinasa-1.

    -Se produce la rotura de la fructosa-1,6difosfato generando dihidroxiacetona-fosfatoy gliceraldehdo-3-fosfato

    -La reaccin es catalizada por el enzimafructosa 1,6 difosfato aldosasa

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    -Isomerizacin de la dihidroxiacetona

    fosfato al gliceraldehdo-3-fosfato

    -Catalizada por triosa fosfato isomerasa

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    -Consta de 5 etapas en las que se obtendr piruvirato

    -Se ganarn 2 molculas de ATP

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    -Adicin de un grupo fosfato alaldehdo

    -Catalizada por el gliceraldehido-3-Fosfato

    -Inhibidor irreversible (yodoacetato)

    -Obtencin de ATP por la eliminacindel grupo fosfato del aldehdo, dejandoun grupo carboxilo

    -Catalizado por el fosfoglicerato quinasa

    -Reacciona con arsnico sin formacinde ATP

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    -Isomerizacin del fosfato delcarbono 3 al 2, pasando el hidroxiloa la posicin 3

    -Catalizada por el fosfoglicerato

    mutasa

    -Deshidratacin de la molculaeliminando agua del hidroxilo

    -Catalizada por la enolasa

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    -Obtencin de ATP eliminando el fosfato restante, produciendo enolpiruvirato

    -Catalizada por el piruviratocinasa

    -Presenta tautomera, transformando el enolpiruvirato en cetopiruvirato

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    -Produccin de etanol a partir de piruvirato, regenerando el NAD+

    -La primera reaccin la cataliza el piruvirato quinasa produciendo acetaldehdo

    -La segunda regenera el NAD+ reduciendo el acetaldehdo a etanol, siendocatalizada por el alcohol deshidrogenasa

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    -Para regenerar el NAD+ se reduce directamente el hidrxido del piruviratogenerando cido lctico.

    -La cataliza la deshidrogenasa lctica.

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    En esta fermentacin se regenera el NAD+ oxidando aerobiamente el etanolresultante de la fermentacin alcohlica. El NADH producido se puede emplearpara el catabolismo aerobio de la glucosa, lo cual es un aadido.

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    Genera cido butanoico a partir del piruvirato. Esta fermentacin la genera lasbacterias del gnero Clostridium.

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    El chocolate

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    Importancia de una buena fermentacin.

    Granos bienfermentados

    Granos mal

    fermentados

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    Mtodos de fermentacin:

    - En cajas - En cajones

    - En montones40

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    Tipos de fermentacin.

    -Fermentacin alcohlica.

    -Fermentacin acido lctica.

    -Fermentacin actica.

    -Fermentacin butrica.

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    Microorganismos involucrados

    -Levaduras: (Saccharomyces cerevisae). Hongosunicelulares que metabolizan los azcares de lapulpa dando lugar a etanol.

    Saccharomyces cerevisae

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    Microorganismos involucrados

    -Bacterias lcticas (LactobacillusyStreptococcus): se activan por accin del etanoly dan lugar a acido lctico.

    Lactobacillus Streptococcus

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    Microorganismos involucrados

    -Bacterias etanoicas (AcetobacteryGluconobacter): producen cido actico poroxidacin del etanol.

    Acetobacter Gluconobacter

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    Microorganismos involucrados

    - Hongos, mohos comoAspergillus, Penicilliumy Mucor, que producen compuestos queproducen ciertos olores y sabores desagradablesen el cacao.

    Aspergillus Penicillium

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    Evolucin de los microorganismos en la

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    Evolucin de los microorganismos en lafermentacin.

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    Composicin de la pulpa antes y despus de la

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    Composicin de la pulpa antes y despus de lafermentacin

    Composicin de la pulpa

    Antes de lafermentacin

    Despus de lafermentacin

    Sacarosa 12% 0%cido ctrico 1-3 % 0,5%

    Pectina 1-1,5 % 0 %

    pH

    3,7 %

    6,5%

    Etanol 0 % 0,5%

    cido actico 0 % 1,6%

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    DERIVADOS DE LA SOJA

    Sustrato Producto FinalMicroorganismos

    implicadosPas originario

    Soja y trigo Shoyu (salsa de soja)Aspergillus oryzae,

    bacterias, levadurasMalasia,China

    Soja Sufu Actinomucor elegans China

    Soja Hamma natto Aspergillus oryzae Japn

    Soja TaucoA.Oryzae, bacterias,

    levadurasIndonesia

    Soja KochuyangBacillus, Aspergillus,

    Rhizopus, levadurasCorea

    Soja Tau-si Aspergillus oryzae Filipinas

    Soja y arroz MisoA.Oryzae,

    Saccharomyces rouxiiChina yJapn

    Soja negra Ketyap Aspergillus oryzae Indonesia

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    DERIVADOS DE LA SOJA

    Tostado y trituracindel trigo

    Remojo (10 h) de lashabas de soja y

    trituracin

    Coccin

    Cultivo iniciador:Aspergillus oryzae,A. sojae, A. tamari

    Mezclar e incubar

    KOJI + NaCl

    MoromiFermentaciones

    lctica y alcohlica

    Maduracin oenvejecimiento

    Prensado

    Pasteurizado

    SALSA DE SOJA

    Salsa de soja

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    DERIVADOS DE LA SOJA

    Sufu Inmersin en agua,molturacin y coccin delas semillas

    Filtracin

    Bebida de extracto desoja

    Prensado

    Cuajada o TofuCorte y calentamiento

    Siembra(Actinomucor elegans)

    Salazonado

    Sufu

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    DERIVADOS DE LA SOJA

    Miso (soja + arroz)

    Preparacin del arroz y lassemillas de soja

    Cultivo dePed. Halophilus,Sacch. Rouxii, Torulopsis sp,

    Str. faecalis

    Mezcla

    Envejecimiento o maduracin

    Pasteurizacin

    Producto final (Miso)

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    Proceso de elaboracin de lacerveza:

    1) Materias primas y preparacin de la malta.

    Materia primaconsistente encereales

    malteados

    Humidificacin :10%-50%(p/p)% en

    H2O.415 C - 21 C

    Germinacin delgrano.

    Secado de la malta:Se inhibe el crecimiento

    microbiano.Se interrumpen los procesos

    respiratorios de la germinacin.

    Cuando se alcanza el grado demodificacin requerido:

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    2) Maceracin y filtracin:

    Materias primasmaceradas se tratan

    con agua.

    Los carbohidratos necesariospara la fermentacin sesolubilizan, hidrolizan

    enzimticamente y se extraendel cereal.

    Sistemas de macerado:Infusin.Coccin.

    Combinacin entre

    ambos.

    Sistema de

    maceracinpor infusin

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    3) Separacin del mosto:

    Una vez macerado elproducto se hierve

    con objeto deconseguir:

    La inactivacin delos enzimas.

    La esterilizacin delmosto.

    Generacin dearomas y sabores por

    caramelizacin deazcares y oxidacin

    de taninos.

    Precipitacin deprotenas.

    Destilacin devoltiles.

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    4) Fermentacin del mosto:

    La velocidad de fermentacin depender dela cantidad de levaduras inoculadas.

    El mosto ha sufrido un proceso deaireacin previo para favorecer la sntesisde cidos grasos y esteroles.

    Los azcares fermentables quenormalmente constituyen el 70-80% de los

    carbohidratos del mosto se convierten enetanol durante la fermentacin.

    El pH disminuyeaproximadamente una unidad apartir del valor inicial de 5,2.Esto se debe fundamentalmentea la presencia del cido acticomotivada por la fermentacindel acetaldehdo.

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    4) Fermentacin del mosto:

    La temperatura tiende aaumentar a medida que avanzala fermentacin y cundo sealcanza el mximo puede ser

    necesario enfriar.

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    4) Acondicionamiento final:

    Fermentacin secundaria.

    Se produce CO2 que ayuda apurgar la cerveza de oxgeno,

    cido sulfhdrico y decompuestos voltiles no

    deseados.

    Aditivos para ajustar elaroma, el sabor o el colorde la bebida.

    Eliminacin de residuospor floculacin,

    centrifugacin o filtracin.

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    Proceso de elaboracin delWhisky:

    1) Materias primas y maceracin.

    Materia primaconsistente en

    unacombinacinde cereales

    malteados y nomalteados.

    Adicin deAmilglucosidasa,

    optimiza lafermentabilidad

    del mosto.

    Proceso demaduracin

    similar al de lacerveza.

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    3) Destilacin y maduracin del Whisky:

    Objetivo de ladestilacin:Extraer los

    compuestos conlos aromasdeseados.

    Generar nuevosaromas debido alas reacciones del

    proceso.

    Maduracin:El destilado se

    almacena enbarricas deroble, donde

    extrae y oxidaalgunos

    componentes de

    la madera.

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    BEBIDAS ALCOHLICAS

    2) Fermentacin del mosto y almacenado del vino.

    Durante lafermentacin latemperatura va

    ascendiendo pero

    no debemos dejarque supere los37 C para no

    matar laslevaduras.

    Cuando finaliza lafermentacin, se

    obtiene unaconcentracin de

    etanol del 8 al 15%en volumen

    El vino sesepara de laslevaduras se

    clarifica y sealmacena.

    El vino se dejaenvejecer en

    tanques, dondesufrir

    reacciones deesterificacin y

    oxidacin.

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    EL QUESO

    Proceso de elaboracin delqueso:

    Etapas generales del proceso:

    Tratamientoprevio de laleche:

    Reduccin dela actividad

    microbiana porpasteurizacin.

    Coagulacin:se consigue

    generalmentemediante elproceso

    combinado dela reduccin

    del pH y de laaccin de

    enzimas.

    La acidezreduce la

    solubilidad delas casenas amedida que el

    pH seaproxima a 4,6,

    su pI.

    La Acidificacin selleva a cabomediante cultivos

    lcticos:LactosaAc.Actico

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    Q SO

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    EL QUESO

    Es aconsejableemplear leche

    con un bajorecuento

    bacteriano.

    A nivel general:

    Evitar excesiva

    produccin degas y desarrollo

    de aromasdesagradables.

    Las diferenciasentre unos

    quesos y otrosradican en losdistintos

    microorganismosempleados parala fermentacin.

    Proponibacteriuum(queso suizo)

    Penicillium roqueforti(azul)

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    PRODUCTOS CRNICOS

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    PRODUCTOS CRNICOS

    Proceso de elaboracin deproductos crnicos fermentados:

    Generalidades del proceso:

    Lafermentacinmicrobianaempleada

    contribuye aalcanzar un pHcido.

    El objetivo es

    controlar losstaphylococcus

    carnosus.

    El pH del

    producto debeser inferior a

    5,3.

    Contribuye a laestabilidad y alargala vida del producto.

    Facilita la eliminacin de la humedad.Genera aromas caractersticos.

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    VINAGRE

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    VINAGRE

    Proceso de elaboracindel vinagre:

    Generalidades del proceso:

    El objetivo esobtener unadisolucin

    acuosa rica encido actico.

    Oxidacin del

    etanol departida,

    bajo accin dela alcohol

    deshidrogenasa

    Acetaldehdo.El Acetaldehdo

    hidratado reaccionamediante la accinde la acetaldehdodeshidrogenasa.

    cido actico.

    C2H5OHCH3CHO +H2O CH2CH(OH)2CH3COOH + H2O

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    P d i d l d

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    Produccin de levaduras

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    P d i d l d

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    Produccin de levaduras

    - Se utilizan fermentadores aireados con un volumende entre 40 y 200 litros.

    - Medio: melazas constituidas por grandes cantidadesde azcar, y en menor proporcin aminocidos,minerales y vitaminas. Se aade cido fosfrico comofuente de fsforo y sulfato amnico que aportarazufre y nitrgeno.

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    P d i d l d

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    Produccin de levaduras

    - Las melazas se aadenprogresivamente paraevitar la fermentacin ymaximizar la produccinde levadura.

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    P d t

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    Productos

    La levadura secomercializa como: Pastillas de levadura

    prensada (panadera)

    Levadura desecada activa(panadera)

    Levadura alimenticia enpolvo (suplementoalimenticio)

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    F b i i d l

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    Fabricacin del pan

    Pan: alimento complejo muy antiguo. Alto valornutritivo en trminos energticos y de protenas.

    Ingredientes del pan: Harina (generalmente de trigo)

    Agua

    Levadura

    Sacarosa

    Sal

    Grasas especficas

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    Et

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    Etapas

    La fabricacin del pan consta de las siguientesetapas: Amasado

    Fermentacin

    Coccin

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    Amasado

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    Amasado

    - Funciones del amasado: Mezclar e hidratar los ingredientes

    Producir la masa panaria

    Aireacin de la masa Puntos de nucleacin del CO2 Oxigenacin para ayudar al esponjamiento

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    Amasado

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    Amasado

    - Tienen lugar en amasadoras, equipos de agitacinque deben asegurar la mezcla y la formacin de laestructura.

    - Temperatura de 30C 1C. La temperatura secontrola con el agua aportada. La actividad de laslevaduras en la fermentacin depende crticamente deesta temperatura.

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    Fermentacin

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    Fermentacin

    Incubado de la masa a 25 - 35C para impulsar la fermentacin de losazcares de la masa por lasS. cerevisiaeformando alcohol y dixido decarbono, cuyas burbujas quedan atrapadas en la masa.

    Como resultado de la fermentacin se produce el hinchamiento de lamasa, la modificacin de la estructura del gluten, el desarrollo de una

    textura ligera y esponjosa y la aparicin del aroma y sabor de pan.

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    BIBLIOGRAFA

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    BIBLIOGRAFA

    La Ciencia del Chocolate. Stephen T. Beckett. Editorial Acribia,2008. ISBN: 978-84-200-0963-6The Microbiology of ChocolateChristine L. Case, Ed.D. BiologyProfessor Skyline College

    La Salud y la Soja. Instituto Toms Pascal. Editorial Edimsa, 2007.ISBN: 84-7714-251-3Biotecnologa de la Fermentacin. Owen P. Ward. Editorial Acribia,1989. ISBN: 84-200-0706-4Microbiologa. Prescott, Harley, Klein. Ed. McGraw-Hill.Obtencin y caracterizacin de cepas autctonas de levaduras para

    la elaboracin estandarizada de vinos de calidad. Jose AntonioRegodn MateosBioqumica de los procesos metablicos. Virginia Melo, VirginiaMelo Ruiz, Oscar Cuamatzi.