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“Año de la Unión Contra la Crisis Externa” Universidad Nacional “San Luis Gonzaga de Ica LABORATORIO CLINICO Docente : José Vivanco Vega Alumna : Béjar Ramos, Lizeth Elide Año : Tercero Ciclo : V ICA- PERU

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UNIVERSIDAD NACIONAL

GUIA DE PRCTICAS

Ao de la Unin Contra la Crisis Externa

Universidad Nacional

San Luis Gonzaga de Ica

LABORATORIO CLINICO

Docente : Jos Vivanco VegaAlumna :Bjar Ramos, Lizeth Elide

Ao

:Tercero

Ciclo : VICA- PERU2009

INTRODUCCION

El Laboratorio Clnico es una herramienta primordial para el rea mdica, ya que por medio de este se diagnostican diferentes patologas y adems se realizan estudios para establecer el tipo de tratamiento que se debe administrar al paciente, al igual que el seguimiento del mismo.

En este curso de Laboratorio Clnico, se pretende dar a conocer todas las reas manejadas en un laboratorio, la lectura de los diferentes exmenes, el procesamiento y toma de las muestras, sin olvidar la parte humana que definitivamente es tan importante como cualquier otra.

El paciente o usuario llega al Laboratorio para realizarse sus exmenes clnicos, del Bacterilogo y del Auxiliar depende que este usuario reciba el servicio adecuado en todo sentido, ya sea cientfico o humano, el profesional de la salud debe estar en condiciones de proporcionar una ayuda integral.

1.- DE 5 RECOMENDACIONES A SEGUIR EN EL LABORATORIO.

1. Uso de elementos y equipos de proteccin: de acuerdo a la naturaleza del trabajo y los riesgos especficos. Incluyen elementos tan simples como el uso de delantal, guantes, mascarillas, hasta elementos ms complejos como cmara de extraccin de gases, gabinetes de bioseguridad etc.

2. Procedimientos en el laboratorio: Uso correcto y seguimiento de todos los procedimientos operativos estndar los que deben estar escritos en el rea de trabajo y revisados cada cierto perodo de tiempo.

3. Correcta limpieza del laboratorio y no colocar las cosas de uso diario en las mesas de laboratorio.

4. No encerar los pisos

5. Eliminacin de desechos:

A.-Por agentes biolgicos:

Limpieza

Desinfeccin

Esterilizacin

b.- Por agentes qumicos

Neutralizacin

Inactivacin

Disposicin final

c.- Desechos radiactivos

2.- UTILIDAD DE LOS SIGUIENTES EQUIPOS EN EL LABORATOIO CLNICO.

Microscopio:

El tipo de microscopio ms utilizado es el microscopio ptico, que se sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto. El microscopio ptico ms simple es la lente convexa doble con una distancia focal corta. Estas lentes pueden aumentar un objeto hasta 15 veces.

Por lo general, se utilizan microscopios compuestos, que disponen de varias lentes con las que se consiguen aumentos mayores. Algunos microscopios pticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2.000 veces.

Los microscopios que se utilizan en entornos cientficos cuentan con varias mejoras que permiten un estudio integral del espcimen. Dado que la imagen de la muestra est ampliada muchas veces e invertida, es difcil moverla de forma manual.

Por ello los soportes de los microscopios cientficos de alta potencia estn montados en una plataforma que se puede mover con tornillos micromtricos

Centrifuga:

Una centrfuga es una mquina que pone en rotacin una muestra para separar por fuerza centrfuga sus componentes o fases (generalmente una slida y una lquida), en funcin de su densidad.

Existen diversos tipos de centrfugas, comnmente para objetivos especficos.

Una aplicacin tpica consiste en acelerar el proceso de sedimentacin, dividiendo el plasma y el suero en un proceso de anlisis de laboratorio.

Tambin se utiliza para determinar el grupo sanguneo mediante una toma de muestra capilar. En este caso la mquina utilizada se denomina microcentrfuga.

Otra aplicacin de las centrfugas es la elaboracin de aceite de oliva. En ella las aceitunas una vez molidas y batidas se introducen en una centrfuga horizontal en la que se separa el aceite que es la fraccin menos pesada del resto de componentes de la aceituna; agua, hueso, pulpa etc.

Las centrifugadoras utilizan instrumentos llamados butirmetros para medir el grado de grasa o crema que contiene la leche, exiten diferentes tipos de butirometro para crema, manteca, etc...

Fotocolormetro(Espectrofotmetro):

El espectrofotmetro se usa para medir la intensidad de un espectro determinado en comparacin con la intensidad de luz procedente de una fuente patrn. Esta comparacin permite determinar la concentracin de la sustancia que ha producido ese espectro. Los espectrofotmetros tambin son tiles para estudiar espectros en las zonas no visibles, porque sus elementos de deteccin son bolmetros o clulas fotoelctricas. Los primeros se aplican especialmente al anlisis de espectros de infrarrojos, y los segundos al de espectros ultravioletas.

Bao Mara:

Instrumento o material de laboratorio el cual consiste en un recinto con una tapa especial para la cada de las gotas de vapor a los lados.

Este equipo se encarga a que los preparados se mantengan a una temperatura.

Horno(estufa):

Aparato cerrado o recinto donde se produce calor por la combustin de un material, por la resistencia de un conductor, o por otras fuentes de calor, utilizado para someter a transformaciones fsicas o qumicas a los objetos que se introducen en ellos.

Oxida las proteinas

Se llama estufa cuando e utiliza a 37 C y

Se llama horno cuando se utiliza a 180 C.

Autoclave:

Es un equipo que sirve para esterilizar mediante el vapor que produce, esta esterilizacin es con calor hmedo.

Para el autoclave, la temperatura debe ser de 121 C, 135 C a una presin constante predeterminada en cada aparato durante 35 - 40 minutos.Coagula las protenas3.-GRAFIQUE EL SIGUIENTE MATERIAL:

Pipeta:

De aforo simple o trmino terminal.

De doble aforo.

Automticas.

Tubos de ensayo:

Tubos cnicos de centrfuga (graduados y sin graduar).

Lminas porta y cubreobjetos:

Matraz de Erlenmeyer:

Baln:

Vaso de precipitacin: Embudo:

Gradillas:

4.-Cul es el botiqun bsico para accidentes en el laboratorio clnico?

El botiqun bsico de un laboratorio debe contener lo siguiente:

Algodn.

Alcohol.

Vendas.

Termmetro.

Jabn.

Esparadrapo.

Gasas.

Solucin de cido actico al 5%.

Tintura de yodo.

Carbonato de Na al 5%.

Bicarbonato de Na al 2%.

5.-Qu debe hacerse en caso de un accidente con un cido? En la piel:

Dejar caer agua a chorro en la zona afectada por un tiempo prolongado, y contrarrestar con un alcalino, se coloca gasa empapada con una solucin de carbonato de Na al 5%. En los ojos:

Lavarse los ojos con abundante agua y luego aplicar de 2 a 5 gotas de bicarbonato de Na al 2%. En las mucosas:

Dejar caer agua a chorro sobre la zona afectada para luego aplicar con ayuda de una gasa solucin de bicarbonato de Na al 2%.

Si se ingiere:

En este caso se bebe una solucin jabonosa al 5%, medio litro de leche con 2 claras de huevo batidos. Luego se lleva al centro de salud ms cercano.

6.-Qu se debe hacer en caso de un accidente con un lcali? En la piel:

Dejar caer agua a chorro en la zona afectada por un tiempo prolongado, y contrarrestar con un cido fuerte, se coloca gasa empapada con una solucin de cido actico al 5% o vinagre. En los ojos:

Lavarse los ojos con abundante agua y luego aplicar gotas de cido brico saturado. En las mucosas:

Dejar caer agua a chorro sobre la zona afectada para luego aplicar con ayuda de una gasa solucin de cido actico al 5%.

Si se ingiere:

En este caso se bebe una solucin de cido actico, vinagre o limonada. Luego se lleva al centro de salud ms cercano.

7.-Qu debe hacerse en caso de un accidente por calor?

En la inhalacin de gases txicos como funguicidas, herbicidas, plaguicidas, insecticidas, el humo en caso de incendio, vapores qumicos monxido de carbono, bixido de carbono y cloro, olores de los de los pegamentos, pinturas y limpiadores, se debe realizar lo sgte :

Cerrar la fuente que produjo la intoxicacin.

Retire la victima del agente causal.

Abra ventanas y puertas para airear el recinto.

Quitar la ropa que esta impregnada con gas y cbrala con una cobija.

Prevenga o atienda el shock, si se presente paro respiratorio, de salvacin utilizando protectores.

8.-Qu debe hacerse en caso de un accidente por inhalacin de vapores txicos?Se lleva al aire libre y luego a emergencia, ya que suelen destruirse desde mucosas hasta los pulmones.

Los sntomas son:

Sensacin de quemazn.

Prdida del conocimiento.

9.-Clasifique los residuos peligrosos biolgicos-infecciosos.

Es aquel que contiene o puede contener microorganismo con capacidad para causar una infeccin o toxina que causen efectos nocivos.

1.- Muestra biolgica:

Orina

Sangre.

Heces.

Secreciones.

Fluido corporal.

Cultivo.

Cepas.

2.-Restos no biolgicos (derivado de toda de muestra):

Agujas.

Hisopos.

Bajalengua.

Jeringas.

Bistur.

3.-Materiales reusables:

Pipeta.

Tubos de ensayo.

Matraz.

10.- Cmo funciona un autoclave? Principios de la esterilizacin en autoclave y tipo de material que esteriliza.Las autoclaves funcionan permitiendo la entrada o generacin de vapor de agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presin interna de 103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 121 grados centgrados. Un tiempo tpico de esterilizacin a esta temperatura y presin es de 15-20 minutos. Los autoclaves ms modernos permiten realizar procesos a mayores temperaturas y presiones, con ciclos estndares a 134 C a 200 kPa durante 5 min para esterilizar material metlico; llegando incluso a realizar ciclos de vaco para acelerar el secado del material esterilizado.

El hecho de contener fluido a alta presin implica que las autoclaves deben ser de manufactura slida, usualmente en metal, y que se procure construirlas totalmente hermticas.

Las autoclaves son ampliamente utilizadas en laboratorios, como una medida elemental de esterilizacin de material. Aunque cabe notar que debido a que el proceso involucra vapor de agua a alta temperatura, ciertos materiales no pueden ser esterilizados en autoclave, como el papel y muchos plsticos (a excepcin del polipropileno).

11.-Fundamentos de la esterilizacin en horno. Qu tipo de material esteriliza?

Los sistemas de aplicacin del calor seco para la destruccin de los microorganismos por una oxidacin de los constituyentes esenciales.

Tiene un menor efecto sobre los microorganismos, por lo que necesita aplicar mayor tiempo que el hmedo; se usa el horno y la estufa, el calor se inicia por conduccin y se propaga por conveccin.

La temperatura optima al cual debe someterse el material puede controlarse colocando ampollas de vidrio selladas, conteniendo 0.3 gr de cido d- tartarico, a diversos niveles del horno, y si el contenido de la ampolla se funde, quiere decir que alcanzo la temperatura mnima necesaria para esterilizar, la cual es la misma que le punto de fusin de dicho cido.12.- Que colores de bolsa se usa para el manejo de residuos comunes, residuos biopatgenos y residuos especiales.

a. InfecciososSon aquellos residuos peligrosos generados durante las diferentes etapas de la atencin de salud (diagnstico, tratamiento, inmunizaciones, investigaciones, etc.) que contienen patgenos. Estos residuos representan diferentes niveles de peligro potencial de acuerdo al grado de exposicin con los agentes infecciosos que provocan las enfermedades.b. EspecialesSon los residuos peligrosos generados durante las actividades auxiliares de los centros de atencin de salud. Estos residuos constituyen un peligro para la salud por sus caractersticas agresivas, tales como corrosividad, reactividad, inflamabilidad, toxicidad, explosividad y radiactividad.

c. ComunesSon aquellos residuos generados por las actividades administrativas, auxiliares y generales que no corresponden a ninguna de las categoras anteriores. No representan peligro para la salud y sus caractersticas son similares a los residuos domsticos comunes.

Los recipientes, las bolsas y los lugares donde stos se ubican deben tener un cdigo de colores e indicaciones visibles sobre el tipo de residuo y el riesgo que representan segn las normas de cada pas, (por ejemplo, rojo para los peligrosos, negro o blanco para los comunes y verde o amarillo para los especiales). Algunos smbolos de peligrosidad, tales como el de riesgo biolgico o radiactividad son universales.

1.- Esquematice la tcnica para la determinacin del hematocrito

El hematocrito representa la proporcin de glbulos rojos a sangre entera, y se expresa en volmenes por ciento. Su medida se realiza por centrifugacin de la sangre heparinizada o tratada con algn otro inhibidor de la coagulacin, calculando el % que alcanza la masa globular.1. Introduzca la sangre en el tubo capilar por capilaridad, sumergiendo ste, con un cierto ngulo respecto a la vertical, en una gota de sangre por uno de sus extremos. Mantenga el otro extremo abierto. No llene el capilar menos de 40 mm ni ms de 70 mm.

2. Tape el extremo del tubo capilar con plastilina u otro tipo de cera extendida sobre una lmina. Para ello, tapone con el dedo el extremo superior del capilar y apritelo en forma vertical sobre dicha lmina, con cuidado de no romperlo.

3. Site el capilar en una hendidura del rotor de la centrfuga de hematocrito, con el extremo tapado con plastilina hacia la parte exterior.4. Centrifugue durante 3 minutos y lea el volumen de hematocrito mediante el empleo de la plantilla excntrica correspondiente, ajustando el cero en el inicio de la sangre y el 100 en el menisco superior del plasma.

2.- Qu valores encuentra Ud. , en las diferentes edades de la vida?

Recin nacidos44 56 %

A los 3 meses32 44%

Al ao36 41%

De 3 a 5 aos36 43%

De 5 a 15 aos37 45%

Hombre adulto40 54%

Mujer adulta37 47%

I. ANTICOAGULANTES EN EL USO DEL LABORATORIOTodos los anticoagulantes van a impedir que el calcio intervenga en la cascada de la coagulacin o la fijan en la forma no ionizada el calcio. Mientras que la heparina acta como un antitrombnico y que la silicona impide que acte el factor XII.

1.- Formula del oxalato de amonio y Potasio.Oxalato de amonio: C2 O4 ~2 + N a H ~2 ----------- (NH 4) C2 O 4Oxalato de Potasio: C2 O4-2 + K+1 -------------------- K2 Ca O42.- Uso de la mezcla de Helery Paul.Es un compuesto formado proporcionalmente, por 3 partes de oxalato de amonio, y dos partes de potasio: - Oxalato de amonio:1.2 gramos - Oxalato de Potasio:0.8 gramos -Agua destilada:100 mi. Es muy usado, y no permite que el calcio intervenga en el proceso de la coagulacin, precipitndolo. Se utiliza 2 mg. por mi. de sangre.3.- Cules son las principales ventajas y desventajas del Oxalato y amonio y Potasio?Son anticoagulantes menos comunes, utilizados ocasionalmente en las determinaciones de glucosa. Oxalato de amonio: Ventajas: -Son de bajo costo, de fcil preparacin.

Oxalato de Potasio:Ventajas: Son de bajo costo, de fcil preparacin.

Desventajas:

No son adecuadas su uso para transfusiones.

No permite el anlisis del cido ctrico.

Produce hipocalcemia, por eso no se utiliza teraputicamente.

A excepcin de los dems anticoagulantes, el oxalato no se usa desocado.

4.- Cul es mecanismo de accin de la mezcla de Wintrobe?

La mezcla de Wintrobe, impide que el calcio intervenga en el proceso de la coagulacin.5.- En qu proporcin se utilizan el cfralo trisdico cundo se requieren realizar estudios de transtornos de la coagulacin?Se utiliza en forma de sales:Sales: 100 mi. de H2O, se le coloca 3.8% de citrato, , la cual da por resultado SAL DISDICA6.- Mecanismo de coagulacin de los citratosLos citratos inhiben la formacin de la fibrina, y de esta manera, no se forma el cogulo CURATO DE SODIO: Generalmente en concentraciones al 3.8 % y ser utiliza comnmente en estudios de coagulacin.

7.- En qu casos se utiliza el A.C.D. (dextrosa citrato acida)?Se utilizan para preservar por tiempos prolongados sangre para ser utilizada en transfusiones sanguneas.8.- Cul es el mecanismo de accin del SEQUESTRENCE, o sal dipotsica o disdica del cido dietilendiaminotetraacfico?

Las sales de sodio y potasio en este cido se comportan como poderosos anticoagulantes y son anticoagulantes de eleccin para el trabajo de rutina y Hematologa (se utiliza al 10%).

No afecta la morfologa de las clulas hemticas.

No modifica la velocidad de sedimentacin globular.

Sus sinnimos son versenato y secuestreno.

Se le llama secuestreno ya que secuestra al calcio y lo separa de la cascada de la coagulacin, impidiendo que la sangre coagule. Se utilizan 0.05ml por cada 3ml de muestra de sangre. Dada la pequea cantidad de solucin, no es necesario desecarla, ya que prcticamente no diluye la sangre a analizar; en exceso afecta adversamente tanto a los eritrocitos como a los leucocitos, causando su encogimiento y provocando cambios en su forma; por ello debe cuidarse de agregar la cantidad correcta de sangre al anticoagulante. Se prefiere la sal tripotsica a la disdica, ya que es ms soluble (10 veces ms) y ello hace efectiva la mezcla del anticoagulante con la sangre.

9.- Ventajas del EDTA No afecta la morfologa de las clulas hemticas.

No modifica la velocidad de sedimentacin globular.

Sus sinnimos son versenato y secuestreno.

10.- Ventajas y desventajas de la Heparina. Cmo acta? Se utiliza para las gasomeras. La heparina es un excelente anticoagulante. No altera el tamao de los eritrocitos. Acta inhibiendo la actividad de la trombina sobre el fibringeno y es este mecanismo, el que la hace diferente a los dems anticoagulantes mencionados. Es el mejor anticoagulante. No causa efectos adversos en el embarazo. La heparina es uno de los anticoagulantes ms caros.11.- En qu consiste la desfibrinacin?Se toma un mortero, se usa tubo de vidrio.

Ventaja:

Vamos a conservar morfologa de glbulos rojos y glbulos blancos

Mtodo sencillo de realizar

Acta impidiendo que se forme la fibrina

12.- Utilidad de la cristalera con silicona.La silicona se impregna en las paredes del capilar usado para la extraccin de la sangre, de esta manera, las plaquetas no se adhieren a las paredes, y retarda la coagulacin.Es utilizado para el recuento de plaquetas, pero es muy caro.

II. TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE VENOSA Y PERIFRICA

1.- Esquematice la toma de muestra por puncin venosa

Se palpa la vena superficial y se coloca la ligadura con nudo corredizo.

Se coloca la aguja de la jeringa con el bisel hacia arriba, se introduce paralela a la vena, NO se retira la ligadura y se absorbido con cuidado.

Una vez que se extrae la cantidad la cantidad deseada, se retira la ligadura y se coloca un algodn hmedo de algodn (antes y despus). Luego se coloca en un tubo de ensayo, que contiene anticoagulante.

Tras localizar el rea de pulso, se toma una muestra de sangre de la artera

2.- Qu material requiere para realizar una toma de muestra por puncin venosa?

Primero alcohol y algodn para la asepsia adecuada antes y despus. Ligadura de brazo: que se coloca aproximadamente a tres dedos del pliegue del codo. Una jeringa para heparina, para la extraccin de la sangre. Agujas. Un tubo de ensayo. El anticoagulante.

3.- Ventajas de la puncin venosa

Mtodo practico.

Es barato.

Se obtiene un poco de sangre venosa.

Da valores reales de toda la sangre.

4.- En qu caso utiliza Ud. la puncin cutnea como mtodo para obtener una muestra de sangre y donde puede Ud. realizar la puncin cutnea. Para medir el tiempo de sangria.

En alteraciones de elementos formes de la sangre.

En sospecha de infeccin.

Para examinar elementos qumicos y bioqumicos en sangre.

Tiempo de coagulacin.

La parte donde se extrae la sangre tiene que estar caliente.

5.- Cmo previene la hemlisis al tomar una muestra de sangre? Utilizando jeringas descartadles.

El recipiente tiene que estar limpio y seco.

La muestra debe ser guardada en refrigeracin o para examen hematolgico a 4 c para el mismo da de la congelacin.

6.- Esquematice un Extendido de Lmina

I. RECUENTO DE HEMATIES

1. Esquematice la pipeta utilizada par el recuento de glbulos rojosPIPETA DE THOMAS:

2. Esquematice una cmara cuenta glbulos o cmara de Neubauer identificando el rea para el recuento de glbulos rojos o retculo de Thomas.

La cmara de Neubauer es una cmara de contaje adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos con una depresin en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrcula como la que se ve en la imagen. Es un cuadrado de 3 x 3 mm, con una separacin entre dos lineas consecutivas de 0.25 mm.3. Qu reactivo utiliza para el recuento de glbulos rojos?

El reactivo que se utiliza es el Hagen ya que este es el destruye a los glbulos blancos

4. Esquematice la tcnica utilizada para el recuento de glbulos rojos

a) Llenar hasta 0.5 de sangre en la pipeta y liquido de Hagen hasta 10 ul.

b) Se mezcla

c) Luego se lleva a la cmara de Neubaur y se lee en el microscopio ah 10 x 40 .

d) El resultado:

Se suma los 5 R X 100 000 = Resultado

5. Al analizar un recuento de hemates en una camara de Neubauer, obtiene las siguientes lecturas:Realice los calculos respectivos para obtener el numero total de HEMATIES, de los pacientes examinados e interprete los resultados.

Muestra 1Muestra 2

6 hemates

4 hemates

5 hemates

9 hemates

7 hemates

12 hemates

15 hemates

11 hemates

13 hemates

12 hemates

Muestra 1

6 + 4 + 5 + 9 + 7 = 31

31 X 100 000 = 3 100 000

Muestra 2

12 + 15 + 11 + 13 + 12 = 63

63 X 100 000 = 6 300 000

II. RECUENTOS GLOBULARES: LEUCOCITOS O GLBULOS BLANCOS

6. Esquematice la pipeta utilizada para el recuento de glbulo blancos o pipeta de Thomas

7. Esquematice una cmara cuenta glbulos o cmara de Neubauer identificando el rea para el recuento de glbulos blancos

W = rea de los glbulos blancos

8. Qu reactivo utiliza para el recuento de glbulos blancos?

El reactivo utilizado es el de Turlds, sustancia que destruye los glbulos rojos.

9. Esquematice la tcnica para el recuento de glbulos blancos

a) Llenar hasta 0.5 de sangre en la pipeta y liquido de Turlds hasta 11 ul.

b) Se mezcla

c) Luego se lleva a la cmara de Neubaur y se lee en el microscopio ah 10 x 10 .

d) El resultado

N De GB = La suma de los GB en los Cuatro cuadrantes ( W) x 50

10. Al realizar un recuento de leucocitos en una cmara de Neubauer; obtiene las siguientes lecturas:Muestra 1Muestra 2Muestra 3

18 Leucocitos

22 Leucocitos

16 Leucocitos

21 Leucocitos 38 Leucocitos

35 Leucocitos

32 Leucocitos

39 Leucocitos 69 Leucocitos

74 Leucocitos

71 Leucocitos

73 Leucocitos

Muestra 1

18 + 22 + 16 + 21 = 77

77 X 50 = 3850

Muestra 2

38 + 35 + 32 + 39 = 144

144 X 50 = 7200

Muestra 3

69 + 74 + 71 + 73 = 287

287 X 50 = 14350

III. FORMULACION DEL HEMOGRAMA

11. Esquematice el extendido y coloracin de una lamina de hemograma

12. Grafique Ud. Los siguientes elementos:

Eosinofilos

Basofilos

Neutrofilos: segmentado y abastonados

Linfocitos

Monocitos

1.- Qu mide el Tiempo de Coagulacin Sangunea?

La sangre total al ser extrada del sistema vascular y entrar en contacto con una superficie extraa formar un coagulo firme. El tiempo que toma la formacin de ste, es una medida de la coagulacin.

2.- Qu Mecanismo evala el Tiempo de Coagulacin Sangunea?El Tiempo de Coagulacin Sangunea evala el Mecanismo Intrnseco del proceso de Coagulacin.

3.- Indique En qu casos el Tiempo de Coagulacin Sangunea se halla prolongado?

Se encuentra alargado en:

Carencia de alguno de los Factores Plasmticos de la Hemocoagulacin.

Sndromes por Anticoagulantes.

Estados de Desfibrinacin o Coagulopatas por consumo:

Hemofilia

Hemofilia por Anticoagulante Circulante

Parahemofialia por dficit del Sistema Proacelerina - Acelerina

Hipoprotrombinemias :

Por carencia de Vit. K en el recin nacido.

Por dficit de Absorcin (Ictericia Obstructiva, Esprue )

Por dficit de utilizacin de Vit. K (Insuf. Heptica Grave)

Afibrinogenemia Hereditaria

Por exceso de Antitrombina en el shock anafilctico

4.- Cmo encuentra el Tiempo de Coagulacin en la Prpura Trombocitopnica?

En la Prpura Trombocitopnica son tpicos la demora y defecto en la retraccin del cogulo. Signos de coagulopatas de consumo a veces.

METODO DE LEE Y WHITE

De los varios mtodos que se utilizan slo merece confianza ste ya que en los otros puede surgir causas de error: gran superficie de contacto, tromboplastina hstica en exceso, etc.

Procedimiento:La toma de sangre debe hacerse por puncin venosa directa, que debe ser lo ms limpia posible puesto que los tejidos que se desprenden pueden contaminar el lquido con sustancias que actan como tromboplastinas. La sangre debe fluir libremente y no formar burbujas.

Una vez extrada la sangre, se retira la aguja y se coloca 1 ml en cada uno de 4 tubos de ensayo secos y limpios.

Se llevan a un bao de agua a 37C o a temperatura corporal entre las manos.

Pasados 3 minutos se inclinarn los tubos con intervalos de 15 segundos observando el flujo hasta el momento de la coagulacin. (La agitacin fuerte modifica los tiempos por tanto el movimiento debe hacerse cuidadosamente).

TUBOTiempo

18 min.

29 min.

39 min.

410 min.

RESULTADOS:Luego de tomar el tiempo de los cuatro tubos posterior a la agitacin se los promediaron dando como resultado final un tiempo de Coagulacin Total de 9 minutos

Qu recomendaciones dara al realizar el tiempo de coagulacin?

Para obviar los defectos de tcnica , que pueden falsear un tiempo de coagulacin patolgico hacindolo parecer normal, debe desecharse siempre la primera sangre extrada y no hacer expresin de los tejidos. Y si se recoge la sangre en una jeringa de plstico, puede considerarse normal un tiempo de coagulacin de hasta 15 minutos.

TIEMPO DE SANGRA

Qu Mecanismo evalua el Tiempo de Sangra?

Evala el Mecanismo Extrnseco de la Coagulacin Sangunea.

Qu indica un Tiempo de Sangra Normal?

La duracin de la hemorragia posterior a una puncin cutnea es muy buen indicio de la funcin plaquetaria y de la integridad vascular.

En qu casos se prolonga el Tiempo de Sangra?

Los casos en los que el Tiempo de Sangra se Prolonga son:

Diateis Hemorrgica de Tipo Tromboptico :

Enfermedad de Werlhoff

En las Trombopenias Sintomticas:

Infecciosas, en los casos hipertxicos (sarampin, tifus, sepsis, etc)

Alrgicas, producidas por medicamentos, alimentos o picaduras.

Mielopticas: Leucemia Aguda, Mieloma Mltiple, etc.

Esplenopticas: Enfermedad de Banti, Cirrosis Esplenomeglica, etc.

En la Prpura Trombopnica Fulminante de los nios.

En las Trombopatias Hereditarias

En la Insuficiencia Heptica Grave

En la Afibrinogenemia

En la Anemia por Insuficiencia Renal Grave

MTODO DE DUKE

Valor Normal: 2 a 3 min.

Previa limpieza con alcohol del lbulo de la oreja o del pulpejo del dedo anular, se realiza puncin con lanceta desechable hasta introducir la totalidad de la punta. Recuerde que la puncin debe hacerse con una maniobra rpida y segura disminuyendo el dolor.

Una vez realizada sta, se comienza a contabilizar el tiempo. La sangre debe fluir libremente sin ningn tipo de presin, dejando que gotee sobre un papel de filtro el cual se mover de tal manera que cada gota caiga en una rea limpia.

Cuando la salida de la sangre se va haciendo lenta y ya no caen ms gotas sobre el papel, se tocar la herida nuevamente, con intervalos de 30 segundos.

Cuando la sangre no tia el papel, se registra el tiempo transcurrido.

Resultado:

El Mtodo de Ducke en este paciente hizo un total de tiempo de 2 min 15 segRECUENTO DE PLAQUETAS

RECUENTO DE PLAQUETAS: Este resultado es importante ya que desempean un papel vital en la hemostasis. El mtodo utilizado es un mtodo directo en el que se utiliza Oxalato de amonio al 1% 1.98 ml y 0.02ml (20 landas) de sangre anticoagulada con EDTA, Se mezcla bien y se deja en reposo aproximadamente durante 10 minutos para permitir la lisis total del resto de las clulas, se monta la cmara de neubauer y se deja en reposo por otros 10 minutos en cmara hmeda para evitar que la muestra ya montada se vaya a secar. Se lee con objetivo de 40 X contando las plaquetas que se encuentran en el cuadrante de rojos (CENTRO), luego el resultado obtenido se multiplica por 1.000.Valor Normal : 150.000 - 450.000/ mm3Se disminuye en : Radiaciones, cncer, leucemia, mielomas, sndromes asociados a anemias y leucopenias, infecciones bacterianas, lupus eritematoso, mononucleosis, varicela, paperas, anemias megaloblasticas y aplasicas, tratamientos con determinadas drogas.

TROMBOCITOSIS (CONTEO ALTO DE PLAQUETAS)Las plaquetas ayudan a prevenir y controlar el sangrado en cualquier lesin en los vasos sanguneos. Trombocitosis es un trmino mdico para definir el conteo alto de las plaquetas.

Un conteo normal de las plaquetas es de 150,000 a 450,000 por microlitro de sangre. El nivel de plaquetas aumenta en respuesta a una inflamacin, deficiencia de hierro y en presencia de ciertos tumores. El trmino esencial significa que la causa de la trombocitosis es desconocida.

La trombocitemia esencial es un trastorno caracterizado por aumento del nmero de plaquetas, hiperplasia megacarioctica y tendencia hemorrgica o trombtica. Suele aparecer entre los 50 y los 70 aos y afecta con igual frecuencia a hombres y mujeres.

En pacientes ancianos con enfermedad vascular degenerativa, el aumento del numero de plaquetas puede desencadenar hemorragias o trombosis graves.

Cuando el conteo de plaquetas excede 600,000 por microlitro de sangre se puede decir que hay presencia de trombocitosis esencial. Los signos y sntomas varian desde ninguno, hasta cogulos y sangrado anormal a infartos.

Estudios de laboratorio pueden revelar anormalidades en el funcionamiento de plaquetas o aparicin de clulas en la mdula sea que produce las plaquetas.

Causas

Las causas son desconocidas, sin embargo existen muchas otras enfermedades que se asocian a trombocitosis como son:

Anemia por dficit de hierro

POLICITEMIA VERA

Enfermedad de Kawasaki

Sndrome nefrtico

Sndrome post-esplenectoma (tras extraer el bazo)

Traumatismos

Tumores

Trombocitosis primaria

TROMBOCITOPENIA (CONTEO BAJO DE PLAQUETAS)La trombocitopenia es una disminucin en el nmero de plaquetas (tambin llamadas trombocitos)

Un recuento de plaquetas normal oscila entre 150.000 y 400.000 plaquetas por milmetro cbico de sangre. En los casos graves de trombocitopenia, el recuento de plaquetas puede aproximarse a cero. En los casos leves, el recuento de plaquetas oscila entre 100.000 y 150.000. Si el recuento de plaquetas baja a menos de 30.000, se presentar un alto riesgo de hemorragia irreversible, e incluso de hemorragia cerebral, que puede provocar un ataque de apopleja (parlisis).

Las plaquetas tambin transportan serotonina y triptfano, dos sustancias que participan en los ciclos de sueo/vigilia, apetito y estado anmico.

Entre las patologas que presentan trombopenia tenemos :

Prpura Trombopnica Esencial

Lupus Eritematoso Sistmico

Sndrome de Evans (Trombopenia asociada a anemia hemoltica autoinmune)

Sndrome Antifosfolpido Primario

Septicemia

Hemangiomas Gigantes

Sndrome de Desfibrinacin

Metstasis Oseas de Neoplasias

Aplasias Medulares, etc

Qu medicamentos pueden provocar Trombopenia?

Aquellos medicamentos que deprimen a la Mdula sea, puede tratarse de txicos de efecto universal (alcoholismo crnico, antimetabolticos, benzol, uretano, agentes alquilantes, clorambucil, vinblastina, etc.) o bien por sensibilidad individual a medicamentos (antipirticos, analgsicos, antibiticos, etc.)Tambin tenemos: quinina, quinidina, sulfas, fenilbutazona, sales de oro, clorpropamida, clorotiazida, sedormid, meprobamato,etc.

RETRACCIN DEL COGULOLa retraccin del Cogulo se inicia ya en la primera hora de la extraccin hemtica y es total a las 3 o 4 horas. Normalmente, el volumen del cogulo retrado en relacin al suero exprimido representa alrededor del 55% del volumen inicial de la sangre extrada.

La retraccin depende principalmente de las plaquetas (de su nmero y calidad), pero tambin requiere la normalidad del sustrato que hay que retraer, (el fibringeno) y un factor estabilizador de la fibrina (factor XIII) contenido en el plasma.

La cspide del cogulo retraido puede ser blanquecina, lardcea, en casos con sedimentacin acelerada de los eritrocitos, por lo que es un ndice de la existencia de una inflamacin.

Es deficiente la retraccin del cogulo:

1. En las trombopenias y en las troboastenias.

2. En las disminuciones importantes del fibringeno.

3. En las poliglobulias acentuadas, por desproporcin del retculo de fibrina respecto a la masa slida celular.

4. En las reducciones de factor estabilizante de la fibrina, congnitas o adquiridas ( cirrosis heptica, neoplasias ).

Procedimiento

Un grupo sanguneo es una forma de agrupar ciertas caractersticas de la sangre que dependen de los antgenos presentes en la superficie de los glbulos rojos y en el suero de la sangre.

Las dos clasificaciones ms importantes para describir grupos sanguneos en humanos son los antgenos y el factor RH. Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccin inmunolgica que puede desembocar en hemlisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte.

Las personas con sangre del tipo A tienen glbulos rojos que expresan antgenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antgenos B en el suero de su sangre.

Las personas con sangre del tipo B tiene la combinacin contraria, glbulos rojos con antgenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antgenos A en el suero de su sangre.

Los individuos con sangre del tipo O 0 (cero) no expresan ninguno de los dos antgenos (A o B) en la superficie de sus glbulos rojos pero tienen anticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB expresan ambos antgenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos.

A causa de estas combinaciones, el tipo 0 puede ser transfundido sin ningn problema a cualquier persona con cualquier tipo ABO y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.

La denominacin O y cero es confusa, y ambas estn muy extendidas. El austriaco Karl Landsteiner design los grupos sanguneos a principios del s. XX.

Algunas fuentes indican que O podra deberse a la preposicin Ohne, que es "sin" en alemn (Sin antgeno). Sin embargo all se dice Null Blutgruppe, y casi nunca la alternativa O Blutgruppe. En alemn O se dice /o/ y 0 (cero) se dice Null. En ingls O se lee /ou/ y a veces el cero se lee /ou/ (por ejemplo en un n de telfono o, en una fecha). Sistema ABO y O blood-group es de uso mayoritario en ingls. Otros idiomas de Europa mantienen la designacin null, en sus variantes zero,cero,nula, etc. En Centroamerica es ms comn O positivo, evitando la similitud cero positivo con el trmino seropositivo -se llama seropositivo al individuo que presenta en sangre anticuerpos que, cuando se le somete a la prueba diagnstica apropiada, prueban la presencia de un determinado agente infeccioso- que mucha gente relaciona con el retrovirus VIH, causante del SIDA (sndrome de inmunodeficiencia adquirida). En Sudamerica se denomina comunmente cero positivo

El motivo exacto por el que las personas nacen con anticuerpos contra un antgeno al que nunca han sido expuestas es desconocido. Se piensa que algunos antgenos bacterianos son lo bastante similares a estos antgenos A y B que los anticuerpos creados contra la bacteria reaccionan con los glbulos rojos AB0-incompatibles.

El cientfico austraco Karl Landsteiner fue premiado con el Premio Nobel de Fisiologa o Medicina en 1930 por sus trabajos en la caracterizacin de los tipos sanguneos AB0.

Las pruebas de compatibilidad incluyen: verificacin de la hemoclasificacin del donante, determinacin del grupo (ABO) y del Rh, rastreo para anticuerpos inesperados en el receptor y la prueba cruzada mayor. Esta ltima se realiza utilizando clulas del donante, tomadas de un segmento del tubo de la bolsa que contiene la unidad de sangre total de glbulos rojos, ms el suero del receptor .

Una vez que se recibe el componente sanguneo en el servicio, es necesario confrontar los datos del paciente con el componente (nombre completo del receptor, nmero de historia clnica, tipo de sangre y Rh, nmero de bolsa y fecha de expiracin), revisar detalladamente el componente sanguneo (libre de macromolculas ), cogulos y color (adecuado con el componente) y verificar que la unidad est sellada, que contenga los sellos de calidad del Ministerio de Salud y el formato diligenciado de la prueba cruzada.

aglutingenoaglutinina

AAB

BBA

ABAB-

O-AB

Glbulos Rojos

Los eritrocitos concentrados o glbulos rojos, son el resultado de la separacin del plasma y las plaquetas, lo que se obtiene por centrifugacin o sedimentacin. FASE CELULAR.-

Para esta prueba se emplean hemates. En una lamina se colocan 3 gotas de la muestra de sangre del paciente, a una se aade anti A, a otra se le aade anti B, y a otra se le aade el reactivo anti D, se mezcla, se espera por un momento y se observa

FASE SERICA.-

Se toma la muestra sangunea del paciente y los hemates son lavados cuatro veces por solucion salina, despus de esto se coloca una gota del suero del paciente mas una gota de los hemates conocidos. Este prueba se usa para confirmar el grupo del paciente.

Si la muestra aglutina en :

ABEl grupo es :

++O

-+A

+-B

-+AB

COMPATIBILIDAD

Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O- es compatible con todos, por lo que, quien tiene dicho grupo se dice que es un donante universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+, podr recibir sangre de cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal. La tabla que sigue indica las compatibilidades entre grupos sanguneos. Por ejemplo, una persona de grupo A- podr recibir sangre O- o A- y donar a AB+, AB-, A+ o A-.[citarequerida]Cabe mencionar que al recibirse la sangre de un donante, sta se separa en distintos hemocomponentes y ah se determina la compatibilidad con los debidos grupos sanguneos. En estos tiempos ya casi no se realizan transfusiones de sangre entera, si as fuera no debemos utilizar el trmino "donante o receptor universal" ya que debemos tener en cuenta que la sangre entera est compuesta principalmente por glbulos rojos (con sus antgenos) y por plasma (con sus anticuerpos). De ese modo, si yo transfundiera a una persona de grupo A la sangre de un supuesto dador universal de grupo O, estara ingresando anticuerpos anti A (del donante que es grupo 0), que como se mencion, tiene anticuerpos anti-A y anti-B) a la persona a transfundir provocando una incompatibilidad ABO pudiendo provocar incluso la muerte.

Como se aclar, la sangre se separa en distintos hemocomponentes, los glbulos rojos, plasma, y plaquetas. De esta manera, se pueden transfundir los glbulos rojos de un donante 0 a cualquier grupo sanguneo ya que no cuenta con antgenos para el sistema ABO en sus glbulos rojos. Por el contrario, voy a poder transfundir su plasma a un individuo solamente con el mismo grupo sanguneo, teniendo en cuenta que el grupo O cuenta con anticuerpos anti-A y anti-B. Lo mismo sucede con el grupo AB.

Tabla de compatibilidad entre grupos sanguneos[1]

ReceptorDonante

O-O+B-B+A-A+AB-AB+

AB+XXXXXXXX

AB-XXXX

A+XXXX

A-XX

B+XXXX

B-XX

O+XX

O-X

Interpretacin de las pruebas con eritrocitos en la determinacin de grupos sanguneos (fase celular)

Anti - AAnti - BAnti - ABGrupo sanguineo

---O

+-+A

-++B

+++AB

De acuerdo al problema planteado en la prctica:

a. El paciente de grupo O, no presenta antgenos A,y no podr aglutinar con el anti A; por no presentar antgeno B, tampoco va a existir aglutinacin con el anti B; por ende, mucho menos va a tener antgeno AB, y no va a haber aglutinacin con el anti AB.

b. En el paciente con grupo sanguneo A, va a contar con el antgeno A, y para que exista aglutinacin, necesita la presencia de anti A, por lo tanto, va a aglutinar con en anti A administrado, y tambin con el anti AB. No va a existir agkutinacin con el anti B.

c. El paciente de grupo sanguneo B, slo va aglutinar con anti B, por lo tanto slo va a ser positivo, con la administracin del anti B y del anti AB.

d. El paciente de grupo sanguneo AB, puede aglutinar con anti A, con anti B, y con anti AB, por tales motivos, fue positivo con los tres anticuerpos.

Interpretacin de la determinacin de grupos (determinacin serica o de confirmacin)

Aglutinacin de los eritrocitos conocidos del grupoEl suero proviene de sangre del grupo

AB

++O

-+A

+-B

--AB

a. El paciente de grupo sanguneo 0, va a presentar anti A y anti B, por lo tanto, tanto con la administracin de antgenos A1 y B, aglutinar, y la reaccin ser positiva.

b. Con el paciente de grupo A, no va a presentar anticuerpo anti A, pero s presentar anti B, por lo tanto, la reaccin ser positiva con la administracin del antgeno B, y negativa con la administracin del antgeno A.

c. El paciente de grupo sanguneo B, presentar anti A, ms no anti B. La reaccin ser positiva con la administracin del antgeno A, y negativa a la presencia del antgeno B.

d. El paciente de grupo sanguneo AB, no va a presentar ni anti A ni anti B, por lo tanto , tanto con la administracin de los antgenos A1 y B, la reaccin ser negativa.

Grafique e identifique los diferentes grupos sanguneos y factor RH.

Como aglutino en la primera

Gota entonces la persona es del Grupo Sanguneo A

Qu es el factor Rh?

El sistema Rh es el grupo sanguneo ms complejo y polimrfico de la membrana del glbulo rojo. Este sistema presenta un gran inters clnico debido a que sus antgenos son sumamente inmunognicos y juegan un papel central en la patognesis de la enfermedad hemoltica fetoneonatal, en algunas anemias hemolticas autoinmunes y en reacciones hemolticas transfusionales. La tipificacin del sistema Rh se realiza en el laboratorio clnico por tcnicas de hemaglutinacin. Esta metodologa presenta limitaciones atribuibles a la dificultad para obtener reactivos con alta sensibilidad y a la imposibilidad de acceder al estudio del antgeno en ciertas situaciones clnicas. La determinacin de las bases genticas de este sistema permiti desarrollar mtodos de biologa molecular, basados principalmente en la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), para la genotipificacin de estos antgenos. Las tcnicas inmunolgicas y moleculares, utilizadas en conjunto, permiten el diagnstico precoz de la incompatibilidad fetomaterna. La genotipificacin molecular resulta apropiada para la determinacin de antgenos de grupos sanguneos en pacientes con anemia hemoltica autoinmune por anticuerpos calientes y en pacientes politransfundidos. Tambin es una herramienta til para la seleccin de unidades de sangre compatible en pacientes aloinmunizados y para la tipificacin de glbulos rojos con expresin alterada del antgeno D.

La informacin gentica del grupo sanguneo Rh tambin est heredada de nuestros padres pero de una manera independiente de los alelos del sistema ABO. Hay 2 alelos distintos por el factor Rh: se llaman Rh+ y Rh-. Una persona "Rh positiva" o "Rh+" tiene por lo menos un alelo de Rh+, pero tambin puede tener dos. Su genotipo puede ser Rh+/Rh+ o Rh+/Rh-. Una persona Rh negativa o "Rh-" tiene el genotipo de Rh-/Rh-. El factor Rh Los genotipos posibles

Rh+ Rh+/Rh+Rh+/Rh-

Rh- Rh-/Rh-

As como el sistema ABO, la madre y el padre biolgico donan uno de sus dos alelos Rh a su hijo. Una madre que es Rh- solamente puede repartir un alelo Rh- a su hijo. Un padre Rh+ puede pasar un alelo Rh- o Rh +. Esta pareja puede tener hijos del tipo Rh+ (Rh- de la madre y Rh+ del padre) o Rh- (Rh- de la madre y del padre).

MamPapHijo

Rh-Rh+Rh+

Rh-Rh-Rh-

Muestra 1

Si aglutina el paciente es Rh +

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PRACTICA N 02

HEMATOLOGIA

DETERMINACION DEL HEMATOCRITO, DOSAJE DE HEMOGLOBINA, DETERMINACION DE LAS CONSTANTES CORPUSCULARES

PRACTICA N 03

ANTICOAGULANTES DE USO EN EL LABORATORIO,

MECANISMO DE ACCIN, PREPARACIN, USOS, TOMA DE MUESTRA DE LA SANGRE VENOSA Y PERIFRICA,

EXTENDIDO DE LMINAS

EMBED MSPhotoEd.3

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PRACTICA N 04

RECUENTOS GLOBULARES: HEMATES O GLBULOS ROJOS y LEUCOCITOS O GLOBULOS BLANCOS

Se colorea

Se hace el extendido

Muestra de sangre con anticoagulante

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PRACTICA N 05 0404

TIEMPO DE COAGULACION SANGUINEA, TIEMPO DE SANGRIA, TIEMPO DE PROTROMBINA. TIEMPO DE COAGULACIN DE LA SANGRE COMPLETA

PRACTICA N 06

DETERMINACIN DEL GRUPO SANGUNEO ABO

Conclusiones: El paciente es A+

Anti Rh

Grupo A Grupo B

Anti A

Anti B

Se hace gotear en el porta objeto

Levantar la sangre y comprobar que el cogulo ya se formo

57ml100%

ml x

X = 50 %

Colocar 5 ml. de muestra en Tubo de Ensayo Graduado.

Dejar por una hora

Se toma tiempo desde el momento de la puncin hasta la formacin del coagulo en cada tubo. El tiempo de coagulacin ser el promedio de los tiempos obtenidos en cada uno de los 4 tubos.

Sangre ya Coagulada, despus de la agitacin

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Muestra de

Sangre total

centrifugado

INTRODUCCIN, RECOMENDACIONES. PRIMEROS AUXILIOS EN ACCIDENTES OCURRIDOS EN EL LABORATORIO.

MANEJO ADECUADO DE RESIDUOS PELIGROSOS BIOLGICOS-INFECCIOSOS. EQUIPOS DE UN LABORATORIO.

PRACTICA N 01

PAGE 41LABORATORIO CLINICA

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