INSTRUCTIVO DETERMINACIÓN DE

ALCOHOL METÍLICO EN SANGRE

CÓDIGO: IAM-LTXC-05

Versión: 01

UCE- FAC.CCQQ LABORATORIO

DE TOXICOLOGIA CLÍNICA

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1. OBJETIVO:

Determinar cuantitativamente la presencia de metanol en muestra de sangre y evaluar el efecto tóxico provocado por el metanol. 2. FUNDAMENTO:

Se fundamenta en la extracción del metanol de las muestras biológicas mediante microdifusión y oxidación con permanganato de potasio transformando el metanol en formaldehído y la identificación y cuantificación del formaldehido mediante reacciones con grupos fenólicos (ácido cromotrópico) que da un color característico violeta, cuya intensidad depende de la cantidad de metanol presente en la muestra, por lo que puede ser cuantificado espectrofotométricamente en muestra de sangre. 3. DEFINICIONES: Consultar:

Metanol Bebida alcohólica 3. RESPONSABILIDADES: Las señaladas en indicaciones generales 4. CONTENIDO:

Muestra de sangre con anticoagulate EDTA, tomada sin utilizar alcohol en la asepsia de la zona de punción REACTIVOS EQUIPOS /MATERIALES

Carbonato de potasio 20 % Tubos de ensayo de 15 ml.

Agua destilada Tubos tapa rosca de 15 ml

Estándar de alcohol metílico de 0,2 g/litro Cámaras de CONWAY

Ac. sulfúrico 10 % Pipetas volumétricas de 1 ml

Ac. sulfúrico conc. Probeta de 10 ml.

Ac. cromotrópico 0.5 % Espectrofotómetro VIS

Sulfito de sodio (soluc. saturada).

Permanganato de potasio-ácido (3 g de KMnO4, 15 cm3 de ác. Fosfórico y diluir a 100 cm3 con agua dest.

PROCEDIMIENTO:

Extracción por Microdifusión:

INSTRUCTIVO DETERMINACIÓN DE

ALCOHOL METÍLICO EN SANGRE

CÓDIGO: IAM-LTXC-05

Versión: 01

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DE TOXICOLOGIA CLÍNICA

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Preparar la cámara de CONWAY, en el compartimiento central, colocar 2.2 cm3 de ác. sulfúrico al 10 %, en el compartimiento externo colocar 1 cm3 de solución de carbonato de potasio 20 % y 1 cm3 de muestra, cerrar la cámara inmediatamente, homogeneizar por rotación y dejar en reposo por dos horas a temperatura ambiente o por 20 min. a 37 °C. Prueba cuantitativa : Oxidación : A 1,0 cm3 del compartimento central, oxidar con 1- 2 gotas de solución de permanganato de potasio, agitar, dejar en reposo por dos min y decolorar el exceso de permanganato añadiendo gota a gota solución de sulfito de sodio. Desarrollo de color: a la solución oxidada añadir 0.2 cm3 de ác. cromotrópico, agitar, añadir por las paredes del tubo 2 cm3 de ác. sulfúrico conc. en caso positivo aparecerá un anillo de color violeta en la interfase. En caso positivo, añadir a la reacción anterior 2 cm3 más de ác. sulfúrico conc. y mezclar, dejar en reposo por 20 min. y leer la D.O. a 570 nm. Preparar un estándar y un blanco en igual procedimiento que la muestra . Cálculos :

D.O.(muestra) x Conc.(St.) Conc. M = ----------------------------

D.O (St.) 6. REFERENCIAS

Sunshine, I,1987, Methodology for Analitical Toxicology, 5ta. Impresión, Vol. I, Editorial CRCPress, USA, Florida

Vallejo, M, Toxicología Analítica, Universidad Nacional de Bogotá

Ferrari, Luis, 2005, Maual de Técnicas Analíticas en el Laboratorio de Toxicología, La Plata – Argentina, Editores Leda Giannuzzi