UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS –

ESPE

Alison F. BarberánAlejandra Cajas

Luis David Domínguez

INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA

BIOLOGÍA MOLECULAR INRC: 2376

BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

Optimización de un biocatalizador de célula completa mediante el empleo de sensores codificados genéticamente dentro de reactores nanolitros.

Microcompartimentalización

•Método de alto rendimiento para cribar un gran número de biocatalizadores generados a partir de bibliotecas genéticas.

Protocolo para evaluar por comparación el rendimiento de biocatalizadores de células enteras.Se utilizaron cápsulas de gel que funcionaron como reactores de nanolitros.

Para cultivo y análisis de una biblioteca de Bacillus subtillis biocatalizadores.

Co – confinamiento de células de Bacillus con células de E. coli

Flujo de trabajo para la optimización de un biocatalizador de célula completa de realizar la conversión de celobiosa en vitamina B2.

Resultados

Cuantificación de vitamina B2 en nLRs por sensores genéticamente producidos.

Variantes de B. Subtilis produciendo grandes concentraciones de vitamina B2

Métodos

Producción de nLRs

Encapsulación de B.

subtilis

Encapsulacio

n células E. coli

Ruptura

encapsulador chorro laminar (Nisco Engineering AG)

nLRs resulta

ntes tenían

un diámetro de 500micras.

Construcción de la biblioteca de B. subtilis

Conversión eficiente de

glucosa en B2 Mutaciones en el

cromosomaB. Subtilis BS4842

Mutación en el cromosoma

B. Subtilis 168 es la cepa de referencia

Alberga un gen de resistencia a

espectinomicina

Proyección de B. subtilis

Conclusiones• Diferenciación de método de alto rendimiento para discriminar entre

las cepas eficientes de producción con cambios modestos en su genotipo.• Se diseño una Ribozima diseñada modular, lo que induce a pensar que

podría ser el flujo de trabajo con amplia aplicabilidad.• La Construcción de ribozimas para la regulación de unos o mas genes

marcadores, la optimización de los niveles de respuesta Ribozima por medio de enlazador – región.• Los niveles de respuesta ribozim por medio de enlazador - región de

optimización en un huespesd apropiado.• La determinación de el poder sintético del biocatalizador de una se le• asocia a una célula completa va entre señales generalizadas.