Proyecto Integrador 2_Biotecnología Industrial
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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS –
ESPE
Alison F. BarberánAlejandra Cajas
Luis David Domínguez
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
BIOLOGÍA MOLECULAR INRC: 2376
BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL
Optimización de un biocatalizador de célula completa mediante el empleo de sensores codificados genéticamente dentro de reactores nanolitros.
Microcompartimentalización
•Método de alto rendimiento para cribar un gran número de biocatalizadores generados a partir de bibliotecas genéticas.
Protocolo para evaluar por comparación el rendimiento de biocatalizadores de células enteras.Se utilizaron cápsulas de gel que funcionaron como reactores de nanolitros.
Para cultivo y análisis de una biblioteca de Bacillus subtillis biocatalizadores.
Co – confinamiento de células de Bacillus con células de E. coli
Flujo de trabajo para la optimización de un biocatalizador de célula completa de realizar la conversión de celobiosa en vitamina B2.
Resultados
Cuantificación de vitamina B2 en nLRs por sensores genéticamente producidos.
Variantes de B. Subtilis produciendo grandes concentraciones de vitamina B2
Métodos
Producción de nLRs
Encapsulación de B.
subtilis
Encapsulacio
n células E. coli
Ruptura
encapsulador chorro laminar (Nisco Engineering AG)
nLRs resulta
ntes tenían
un diámetro de 500micras.
Construcción de la biblioteca de B. subtilis
Conversión eficiente de
glucosa en B2 Mutaciones en el
cromosomaB. Subtilis BS4842
Mutación en el cromosoma
B. Subtilis 168 es la cepa de referencia
Alberga un gen de resistencia a
espectinomicina
Proyección de B. subtilis
Conclusiones• Diferenciación de método de alto rendimiento para discriminar entre
las cepas eficientes de producción con cambios modestos en su genotipo.• Se diseño una Ribozima diseñada modular, lo que induce a pensar que
podría ser el flujo de trabajo con amplia aplicabilidad.• La Construcción de ribozimas para la regulación de unos o mas genes
marcadores, la optimización de los niveles de respuesta Ribozima por medio de enlazador – región.• Los niveles de respuesta ribozim por medio de enlazador - región de
optimización en un huespesd apropiado.• La determinación de el poder sintético del biocatalizador de una se le• asocia a una célula completa va entre señales generalizadas.