Post on 23-Jan-2018
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
EVOLUCIÓ DE LA CONCENTRACIÓ DE MICELI DE TUBER MELANOSPORUM AL SÒL AL LLARG DE L´ANY I EVALUACIÓ DE LA BIODIVERSITAT FUNGICA EN ARBRES PRODUCTIUS I NO PRODUCTIUS Marcos Morcillo1, Javier Parladé2, Joan Pera2, Mónica Sanchez1, Xavier Vilanova1 1 MICOLOGIA FORESTAL & APLICADA. Cami Del Fou, s/n 08459 Sant Antoni De Vilamajor. (Barcelona) SPAIN 2 IRTA. Proteccio Vegetal Sostenible Ctra. de Cabrils, Km 2, 08348 Cabrils (Barcelona) SPAIN marcosmorcillo@micofora.com xavier.parlade@irta.cat
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Objectius
1) evaluar les dinamiques estacionals del miceli de Tuber melanosporum en plantatió 2) desenvolupar i validar un sistema per reinocular tòfona negra en plantacions preproductives per afegir el sexe complementari 3) Determinar la biodiversitat d´altres fongs en tofoneres d´arbres productius i no productius i analitzar com aquesta es veu afectada quan introduim més espores
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala Camps d´assaig
2 plantacions amb sòls francs 2013, 2014
Granollers: 10 anys Q. ilex, sense reg - Concentració de miceli al llarg de l´any - Metagenomica – biodiversitat fúngica Batea: 4 anys Q. ilex, reg gota a gota - Concentració de miceli al llarg de l´any - Metagenomica – biodiversitat fúngica - Pous-reinoculacions esporals
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Quantificació biomassa miceliar al sòl (qPCR)
kit Power Soil (MoBio) 0,25 g. Soil. sondes Taqman-MGB, for T. melanosporum, Standard curves with known mycelium quantities for each trial site. Parladé et al. 2013. Mycorrhiza 23:99–106.
Distance to tree (m)
Concentration of mycelum mg/g *
0,2 8,090 1,5 0,008
n=6 per cada tractament
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Evolució concentració miceli tòfona al llarg de l´any
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Evaluació de la diversitat fúngica Plataformes Metagenomiques
n=6 per tractament + control. Mostres barrejades per un sol anàlisi (no replicat)
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala Diversitat fúngica
plantació Q. ilex de 10 anys x T. Melanosporum
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala Diversitat fúngica
plantació Q. ilex de 10 anys x T. Melanosporum
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Substrats especials per truficultura
Millorar contingut orgànic
Millorar textura y
forma de la tòfona
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Pous amb substrat
CONTRES PROS
menys Leiodes
Millors collites
Tòfona extra
Es cullen tòfones inmadures
Reducció pH
Introducció altres tòfones o plagues
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Com s´apliquen aquests substrats?
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Sovint no podem mecanitzar o no podem fer els pous a finals de campanya…
Vam voler analitzar: • Efecte dosis • Efecte moment de reinocular
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
qPCR després reinoculations
Concentració miceli de T. melanosporum al juny. Control vs. Inoculacions en camp(5g/tree) a l´abril. Diferencies significatives
Concentració de miceli T. Melanosporum Control vs. Inoculacions en camp al Juny Dosi 1, 2 i 3 corresponen a 9, 5 i 2 grams de tòfona/arbre No hi ha diferencies significatives
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala METAGENOMICA
biodiversitat després de les reinoculacions Plantació 4 anys no productiva
2 mesos després pous
4 mesos després pous
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Conclusions
• Reg gota a gota sembla no afavorir expansió miceli al sòl. 1000 vegades menys fora la bossa de humitat! • Hi ha diferencies estacionals en la concentració de miceli de tòfona al sòl. Dinàmica depenent de reg. • Significativament més miceli i sequencies als arbres productius. • Idem per Scleroderma. Podría ser un fong amb efectes positius? • Fer pous a l´abril augmenta les sequencies de Tuber sp. i la concentració de miceli dos mesos després.
Quan inoculem al juny amb 5grams/arbre arribem a la mateixa quantitat de sequencies, però no a menor dosi. No tindria sentit treballar a dosis molt altes d´espores.
No obstant les inoculacions a l´abril foren les recomenables per no trepitjar amb tractors ni afectar el miceli actiu al juny.
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Poden aquestes corves ser utilitzades com a referencia?
Future
Els valors absoluts que ens dónen les PCR quantitatives són dificilment comparables entre zones geogràfiques distants o quan mostrejades en diferents moments. Però és una molt bona eina per comparar tractaments de una mateixa plantació quan es mostrejen alhora. Aquests resultats tenen aplicació directe en truficultura: - Traçabilitat del miceli de tòfona al sòl - Mètodes per incrementar la collita - Evaluar els efectes dels tractaments en les comunitats microbianes beneficioses per la
tofonera.
Els resultats metagenomics són quantitatius, ens permetrien detectar especies fúngiques o bacterianes associades (positiva o negativament) a la producció de tòfones.
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
Nuev
a Zela
nda
Suec
ia
Finlan
dia
China
Nica
ragu
a
Sibe
ria
Chile
Japó
n
Guate
mala
marcosmorcillo@micofora.com xavier.parlade@irta.cat
Project Gencat 3844 Funded by