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PROCESO

Congelar elagua libre delas células

Eliminación del agua

 Agua congelada Vapor de agua

Sublimación

1ª Fase de laDesecación

2ª Fase de laDesecación

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Tipos de Liofilizadores

Liofilizador concentrifugación Se utilizan ampollas de vidrio

taponadas La suspensión se centrifuga

durante la 1ª fase de ladesecación

Se estrechan las ampollas y,después de conectarlas a una

bomba de vacío, se sellan. Ventajas: Se utiliza la centrifugación para

que el proceso de congelación sea suave y de forma homogénea

Liofilizador con estantes La suspensión se prepara en

 viales y es precongelada a Tª

muy bajas antes de aplicar el vacío.

La segunda etapa de ladesecación se realizatambién en el liofilizador.

 Ventajas: La Desecación es demanera progresiva y continuada

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¿Cuándo aplicar la Liofilización?Es un método ampliamente utilizado para conservar distintosMicroorganismos.

SI NO

-Bacterias,Levaduras,Hongos,Algunos virus,Algas

-Dificultad de un crecimiento Adecuado.-Microorganismos delicadosque no resisten el paso decongelación.-A tamaños de células mayores,

menos efectivo es el procesoProtozoos,Células animales,Células vegetales,Arqueobac-terias y bacterias delicadas

Ejemplos:Rhodospirillum, ,Azospirillum, vibrio y demásbacterias marinas.-Levaduras miceladas con difi-cultad en la esporulación.-Hongos con grandes conidios ocon dificultad en la esporulación. 

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FACTORES IMPLICADOS EN LA CONSERVACIÓN POR EL

PROCESO DE LIOFILIZACIÓN

Condiciones de CultivoEl medio de cultivo

Dependerá del tipo de microorganismo y susrequerimientos nutricionales.

Fase de crecimiento del cultivo.F.exponencial. Suspenciones celulares de 108-109

Células/ml en bacterias, algo inferiores enhongos y levaduras.

Condiciones de incubación.Tª,aerobiosis, anaerobiosis, etc.

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FACTORES IMPLICADOS EN LA CONSERVACIÓN POR EL PROCESO

DE LIOFILIZACIÓN

Temperatura durante la sublimación.Debe ser lo más baja posible, sin subir por encima de –50ºC.

Grado de deshidratación alcanzado.Lo más alto posible.

 Atmósfera de oxígeno en el tubo.Las células liofilizadas se guardan en tubos al vacío para evitar

Rehidratación o presencia de gases (como el oxígeno) que puedendañar las células.

Condiciones de almacenamiento.La temperatura debe ser constante a 18ºC y sin bajar de los 0ºC

 y, en oscuridad

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Debe trabajarse, por tanto, por debajo del

punto triple del agua (273,16 K y 6,105 kPa).

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 DESVENTAJAS 

-El alto coste inicial delequipo.

-La preparación de formaincorrecta de los distintoslotes puede desembocar enun estancamiento de la

 viabilidad y/o en pérdidas

en la estabilidad de loscaracteres de losmicroorganismos

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