DETERMINACION DE CREATININA Y ACIDO ÚRICO EN

SUERO

UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO

PROGRAMA FARMACIABIOQUÍMICA

DETERMINACIÓN DE CREATININA

Creatinina

La creatinina (anhídrido de creatina) es un compuesto orgánico de desecho, generado a partir de la degradación de la creatina es producida por el cuerpo en tasa muy constante normalmente filtrada por los riñones y excretada por la orina.

Estructura de la creatinina

Síntesis de la creatinina

Metabolismo de la creatinina

La creatinina es un producto final del metabolismo muscular.

Se origina a partir de la creatina por pérdida de una molécula de agua. A su vez, la creatina se produce por hidrólisis del fosfato de creatina, por acción de la creatin-fosfokinasa (CPK), apareciendo como metabolitos de dicha reacción el fosfato Energético y la creatina

Significado clínico

Los niveles elevados de creatinina serica están por lo general asociados a trastornos renales,

como consecuencia el significado clínico del nivel de creatinina en suero o plasma se mide conjuntamente con el nivel de urea plasmática,

VALORES DE REFERENCIASuero, plasma Hombres 0,70-1,20 mg/dL (62-106 mol/L) Mujeres 0,50-0,90 mg/dL (44-80 mol/L)

Orina Hombres 14-26 mg/Kg/24-h (124-230 mol/Kg/24-h) Mujeres 11-20 mg/Kg/24-h (97-117 mol/Kg/24-h)

Prueba de Depuración Hombres 97-137 mL/min. Mujeres 88-128 mL/min.

Valores anormales de creatinina

Una de las causas de aumento de creatinina en sangre es la insuficiencia renal.

Causas de insuficiencia renal:

Enfermedades (diabetes, paperas, sarampión, tifoidea, etc.)

Sustancias químicas, incluyendo a los medicamentos (antiinflamatorios no asteroideos, etc.)

Fundamento

Este procedimiento está basado en una modificación de la reacción original del picrato (Jaffe) La creatinina en condiciones de alcalinidad reacciona con los iones picrato con formación de un complejo rojizo.

Composición de los reactivos

R1 Acido pícrico. Acido pícrico 40 mmol/L, ferricianuro potásico 40 μmol/L

R2 Tampón alcalino. Tampón Fosfato/Borato 300 mmol/L pH 12,7, SDS 2,0 g/L (p/v).

CAL Patrón de Creatinina. Creatinina 2 mg/dL (177 μmol/L). Patrón primario de matriz orgánica.

Procedimiento

1. Preincubar el reactivo de trabajo, muestras y patrón a laTemperatura de reacción (37ºC).

2. Ajustar a 0 el fotómetro con agua destilada

3. Pipetear en una cubeta:

Reactivo de trabajo 1,0 mL Muestra o Patrón 0.1 mL

4. Mezclar con suavidad. Insertar la cubeta en el compartimientotermostatado del instrumento y poner el cronómetro en marcha.

5. Registrar el aumento de la absorbancia respecto al tiempo de laMuestra y el patrón a 510 nm a los 30 segundos (A1), yExactamente a los 90 segundos siguientes (A2).

El riñón

GeneralidasdesAnatomía

Funciones enfermedades

Generalidades Los riñones son

órganos excretores de los vertebrados con forma de judía o habichuela. En el hombre, cada riñón tiene, aproximadamente, el tamaño de su puño cerrado

Generalidades Los riñones filtran la sangre del aparato circulatorio

y permiten la excreción, a través de la orina, de diversos residuos metabólicos del organismo (como son la urea, la creatinina, el potasio y el fósforo) por medio de un complejo sistema que incluye mecanismos de filtración, reabsorción y excreción. Diariamente los riñones procesan unos 200 litros de sangre para producir unos 2 litros de orina

Generalidades Puede ocurrir la ausencia congénita de uno o

ambos riñones, conocida como agenesia renal unilateral o bilateral. En casos muy raros, es posible haber desarrollado tres o cuatro riñones.

Las especialidades médicas que estudian los riñones y las enfermedades que afectan al riñón se llaman urología y nefrología, esta última proviene del nombre griego antiguo para el riñón. El significado del adjetivo "relacionado con el riñón" proviene del latín renal

Anatomía Los riñones tienen de 10 a 12 cm de largo, 5 a 6

cm de ancho y de 3 a 4 cm de espesor (más o menos el tamaño de un puño cerrado)

Cada uno pesa unos 150 gramos. Se rodean de una fina cápsula renal. Están divididos en tres zonas diferentes: corteza,

médula y pelvis. Son dos glándulas en forma de habichuela. Son de color rojo oscuro y se sitúan a ambos lados

de la columna vertebral. En la parte superior de cada riñón se encuentran

las glándulas suprarrenales.

Anatomía 1: pirámide renal 2: arteria interlobular 3: arteria renal 4: vena renal 5: hilio renal 6: pelvis renal 7: uréter 8: cáliz menor 9: cápsula renal 10: polo renal inferior 11: polo renal

superior 12: vena interlobular 13: nefrona 14: cáliz mayor 15: cáliz menor 16: papila renal 17: columna renal.

Funciones del riñon Excretar los desechos mediante la orina. Regular la homeostasis del cuerpo. Secretar hormonas: la eritropoyetina, la

renina y la vitamina D Regular el volumen de los fluidos

extracelulares. Regular la producción de la orina. Participa en la reabsorción de los

electrolitos

Funciones del riñón filtración

La filtración ocurre en pequeñas unidades colocadas dentro de los riñones llamadas nefronas. Cada riñón tiene alrededor de un millón de nefronas. En la nefrona, el glomérulo -que es un pequeño ovillo de capilares sanguíneos- se entrelaza con un pequeño tubo colector de orina llamado túbulo. Se produce un complicado intercambio de sustancias química a medida que los desechos y el agua salen de la sangre y entran al aparato excretor.

Funciones del riñón filtración Al principio, los túbulos reciben una mezcla

de desechos y sustancias químicas que el cuerpo todavía puede usar. Los riñones miden las sustancias químicas, tales como el sodio, el fósforo y el potasio, y las envían de regreso a la sangre que las devuelve al cuerpo. De esa manera, los riñones regulan la concentración de esas sustancias en el cuerpo. Se necesita un equilibrio correcto para mantener la vida, pero las concentraciones excesivas pueden ser perjudiciales.

Funciones del riñón filtración

Funciones del riñón filtración

Enfermedades del riñón

Cálculo renal Nefropatía diabética Glomerulonefritis Hipertensión arterial Enfermedades hereditarias o

congénitas de los riñones Insuficiencia renal Lupus

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO EN SUERO

ÁCIDO ÚRICO Es del orden de

0.7g. pH6urato soluble

de Na o K. La excreción de

ácido úrico. Mayor producción

de ácido úrico.

En animales, aves reptiles y muchos artrópodos.

Uricotelicos. El guano como

fertilizante en la agricultura.

Existen 2 fuentes:- Endógena.- Exógena.

¿DE DONDE PROVIENE EL ÁCIDO ÚRICO?

Degradación de ADN y ARN (Acido Desoxirribonucleico y ac. ribonucleico).

Se convierten en nucleótidos genera un proceso metabólico (catabolismo).

Un adulto normal puede producir alrededor de 500mg por día.

80% es excretado por orina y el resto se degrada en nuestro organismo.

METABOLISMO DE PURINAS

En la enfermedad llamada gota, que es un error innato del

metabolismo de las purinas, parece existir una producción

excesiva y una excreción insuficiente de urato.

Compuesto nitrogenado, blanco, inoloro e insípido. Es creado cuando el cuerpo descompone sustancias llamadas purinas, las cuales se encuentran en algunos alimentos y bebidas, como el hígado, las anchoas, la cerveza y el vino.

CARACTERÍSTICAS

La mayor parte del ácido úrico se disuelve en la sangre

viaja a los riñones, donde sale a través de la orina

Si el cuerpo produce demasiado ácido úrico o no lo elimina lo suficiente, la persona se puede enfermar.

VALORES NORMALES Los valores normales de ácido úrico en la sangre están entre 3,0 y 7,0 mg/dL.

VALORES ANORMALES Los niveles de ácido úrico por encima de lo normal (hiperuricemia) pueden deberse a: • Acidosis• Alcoholismo • Diabetes• Gota• Hipoparatiroidismo• Intoxicación con plomo• Leucemia• Nefrolitiasis• Policitemia vera • Insuficiencia renal• Toxemia de embarazo• Dieta rica en purinas • Ejercicio excesivo

Es un análisis de laboratorio que se realiza por separado o en una petición general de bioquímica sanguínea.

El nivel de concentración de ácido úrico en la sangre esta influido de manera importante por la dieta. La cantidad total de ácido úrico en el plasma circulante depende de la síntesis, del catabolismo endógeno, así como también de la ingesta y del aclaramiento renal de las purinas.

Las purinas que lo originan proceden de:

a. Alimentos ingeridosb. Formación en el propio

organismo

IMPORTANCIA CLINICA

La acumulación de ácido úrico en pacientes con gota puede realizarse a través de varios mecanismos posibles : se ha excluido la ingestión aumentada de ácidos nucleicos en la dieta; se ha descartado como causa primaria de la gota en aumento de la degradación constante de ácido nucleicos endógenos, como ocurre en pacientes con gota secundaria. Por lo tanto, quedan como posibles mecanismos la sobreproducción del ácido úricoa partir de las purinas precursoras o una alteración en los procesos de eliminación.Se han determinado detalladamente las vías bioquímicas de la síntesis del ácido úrico. Se forma a partir de precursores simples como la glicina, el ácido aspártico, el bióxido de carbono y la glutamina.

ALTERACIÓN DEL METABOLISMO

LOS MÉTODOS PARA LA DETERMINACIÓN DEL ÁCIDO ÚRICO

Se basan generalmente en su acción reductora sobre el acido fosfotúngstico.

Cianuro para intensificar la coloración obtenida.

Salicilato y carbonato de sodio.

Prueba de murexida.

Prueba de ácido úrico.

FUNDAMENTO DEL METODO

Acido úrico + O2 +2H2O uricasa Alantoina +CO2 +H2O2

2H2O2+ 4-Aminoantipirina + DCFS Peroxidasa Quinonaimina + 4H2O

Cálculos

La concentración de acido úrico en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula general:

LA GOTA

¿Qué es la gota?Se entiende por gota (del latín gutta que significa

líquido o derrame) la inflamación articular aguda o crónica causada por la presencia de cristales de ácido úrico dentro de la articulación. Estos cristales actúan como un ¨cuerpo extraño¨ que desencadenan la activación de una serie de mecanismos celulares y liberación de sustancias químicas por parte de éstas responsables de la inflamación. El término Hiperuricemia significa niveles de ácido úrico elevados en sangre y es importante destacar que no todos los individuos con hiperuricemia hacen gota. Sin embargo cuanto más alto el ácido úrico en sangre mayor es la posibilidad de desarrollar artritis secundaria a ésta, o sea gota.

Clasificación

La gota se clasifica como primaria, secundaria o idiopática.

Gota primaria: Incluye, tanto los trastornos del metabolismo de las purinas idiopáticas o hereditarias que cursan con hiperproducción de ácido úrico, clásicamente llamada gota metabólica primaria como, en segundo lugar, el efecto selectivo de la secreción tubular de ácido úrico o gota renal primaria; Es la más frecuente y se presenta porque el organismo produce más ácido úrico o porque se elimina poca cantidad.

Clasificación

Gota secundaria: Comprende los casos de gota en los que el origen de la hiperuricemia es adquirido, es decir, secundario a otros procesos. Es debida a otras enfermedades o al consumo de ciertos medicamentos que disminuyen su expulsión por el riñón (diuréticos, salicilatos, incluida la aspirina).

Gota idiopática: se emplea para los casos no clasificables.

Causas La gota es causada por una acumulación del ácido

úrico que ocurre cuando el cuerpo tiene dificultad el analizar las sustancias de la proteína llamadas purines que se encuentran naturalmente en alimentos. Comiendo ciertos alimentos tales como el salmón, el hígado, los arenques o las sardinas y beber mucho alcohol pueden accionar un episodio de la gota.

En todo caso la alteración del metabolismo es causante de las 2/3 partes del nivel de ácido úrico circulante.

Síntomas Por lo general, se presentan dolores

intensos y repentinos en una o más articulaciones (sobre todo por las noches), que aumentan progresivamente y son, a menudo, insoportables.

La articulación se hincha La piel circundante se vuelve roja o púrpura,

tirante y brillante, con sensación de calor Produce mucho dolor al tacto.

Síntomas Afecta con mayor frecuencia a la

articulación de la base del dedo gordo del pie

Otros síntomas pueden ser: Fiebre Escalofríos Sensación de malestar general Aceleración de los latidos del corazón

(taquicardia).

Diagnosticose basa en la observación de los síntomas

característicos y el examen de la articulación. Un exceso de ácido úrico en la sangre apoya el diagnóstico; sin embargo, estos valores son frecuentemente normales durante un ataque agudo. El diagnóstico se confirma mediante la identificación de los cristales de urato en forma de aguja en una muestra de líquido articular extraída por succión (aspirada) con una aguja. Este líquido se examina con un tipo especial de microscopio que utiliza luz polarizada.

Cristales de urato monosódico: vistos al microscopio.

¿Quién esta en riesgo? La gota ocurre más a menudo en los

hombres mayores de 40 años de edad, pero puede afectar a personas de cualquier edad. Las mujeres son más susceptibles después de la menopausia.

La gota es más común en la gente que es gorda.

Personas con ciertas condiciones médicas sin tratamientos

¿Puede ser prevenida?

No hay manera segura de prevenir la gota. Sin embargo, si hay diagnósticos temprano, los efectos que inhabilitan la gota se pueden prevenir con las medicinas, dieta apropiada, la pérdida del peso, limitando o evitando el alcohol y bebiendo bastantes líquidos.

Tratamiento

Los tratamientos más comunes: Altas dosis de las drogas antiinflamatorias

sin-esteroides. Inyecciones de las drogas de

corticoesteroides Colchicina o colquicina La educación de la artritis Programas de ejercicio

Tratamiento

Descanso Relajación Control de la tensión Comiendo comidas bien-balanceadas Manteniendo el peso apropiado Los dispositivos o aparatos de asistencia