Clasificación e

Identificación

bacteriana Tema 3.

Clasificación bacteriana

Tamaño

Morfología

Características de tinción

En función de…

1.Tamaño

2.Forma

3.Características de tinción

Tinción de Gram

Tinción de Ziehl-Neelsen

Otras tinciones: Blanco de Calcoflúor Panóptico Azul de Lactofenol etc.

Diferencias constitutivas en la estructura de

la pared bacteriana

Tinción de Gram

http://www.youtube.com/watch?v=XouOC0gRfyc

(lugol)

Parásitos y bacterias contienen ácidos grasos (ác. micólico)

(Cryptosporidium spp., Micobacterium spp., Nocardia spp.,

Actinomices spp.)

Resisten la decoloración con alcohol-ácido (BAAR)

Requiere calor

Tinción de Ziehl-Neelsen

Añadir fucsina-fenicada (5 min)

Calentar hasta la emisión de vapores (3-5 min)

Decolorar con alcohol-ácido (1-3 min)

Aplicar azul de metileno (1 min)

Identificación de bacterias

MUESTRA

COLONIA

EN

CULTIVO PURO

MATERIAL

GENÉTICO

Métodos fenotípicos

Pruebas rápidas

Catalasa

Coagulasa

Oxidasa

Prueba de la catalasa

Agua oxigenada diluida + emulsionar colonia bacteriana

Aparición de burbujas de oxígeno por la

acción de la catalasa del m.o. sobre el H2O2

Negativo

Positivo

- La catalasa es una enzima que protege a las células frente al peróxido

de hidrógeno producido en el metabolismo del oxígeno

- Cataliza la formación de agua y oxígeno a partir del peróxido de

hidrógeno

Cocos Grampositivos

H2O2 H2O + O2

Prueba de la coagulasa

Coagula el plasma por la presencia

de la enzima plasmocoagulasa

La coagulasa es una enzima capaz de desnaturalizar la fibrina del plasma

Se añade una suspensión densa de bacterias a un tubo

pequeña con plasma y se incuba a 37 oC.

Bacilos/Cocos Gramnegativos

Detecta la presencia de “citocromo C oxidasa” en la cadena de

trasporte de electrones

Puede detectarse en el laboratorio utilizando un aceptor de electrones

artificial (p-fenilendiamina)

Prueba de la Oxidasa

Se utiliza para diferenciar Pseudomonas spp (+) de Enterobacterias (-)

Serotipo:

-Según los, antígenos presentes en la superficie celular También, según factores de virulencia, lipopolisacáridos en bacterias gram-, presencia de

exotoxinas, plásmidos, bacteriófagos, etc.

- Permite diferenciar organismos a nivel de subespecie

- Diferencia subpoblaciones con pruebas serológicas (Las respuestas inmunitarias del organismo frente a un serotipo de un microorganismo

(p.e. la gripe) pueden no proteger frente a otro serotipo de la misma especie)

Otras identificaciones de las bacterias

Genotipo: contenido genético fenotipo

Serogrupo: definidos por el polisacárido capsular

(Neisseria meningitidis 13 serogrupos)

Clasificación Bacteriana

Cocos

Grampositivos

Bacilos

Grampositivos

Bacterias

Grampositivas

Aerobios

Anaerobios

Aerobios

Anaerobios

Cocos

Gramnegativos

Bacilos

Gramnegativos

Bacterias

Gramnegativas

Aerobios

Anaerobios

Aerobios

Anaerobios

Cocos Grampositivos

Estafilococos (Staphylococcus spp.)

- En tétradas ó racimos

- Catalasa positivos

- 2 clases: Coagulasa negativos: SCN

Coagulasa positivos: S. aureus

Estreptococos (Streptococcus spp. / Enterococcus spp)

- Catalasa negativos

- En parejas ó cadenas

- -hemólisis (alfa-hemólisis), -hemólisis

(beta-hem.) ó - hemólisis (no hemólisis)

Hemólisis

Capacidad de lisar los hematíes mediante la producción de

hemolisinas

-hemólisis /

hemólisis total -hemólisis /

No hemólisis

-hemólisis /

hemólisis parcial

Bacilos Grampositivos

Según características morfológicas :

• Corineformes ( No esporulados)

• Familia Bacillaceae (Esporulados)

Esporulados (aerobios o anaerobios)

No esporulados (aerobios o anaerobios)

Cocos Gramnegativos

Género Neisseria

Bacilos Gramnegativos

Otras bacterias

■ Bacterias ácido alcohol resistentes

■ Bacterias Gramnegativos curvadas

■ Espiroquetas

■ Bacterias de crecimiento intracelular obligado

Otras bacterias

Otras bacterias