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UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa Mdica
Prueba de Compatibilidad Pretransfusional
Leonor Armanet BernalesUniversidad de Chile
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Abordaremos
Riesgos asociados a la transfusin de GR
Concepto y elementos que incluye
Prueba cruzada o crossmatcho Mtodos
o Modalidades
o Control de Calidad
Control de calidad y seguimiento
Algunos problemas
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Frecuencia de Reaccin Adversa a la Transfusin (RAT)
Frecuencia de Reaccin Adversa a la Transfusin (RAT)
Generalmente no ocurren, cuando
aparecen son benignas.
Algunas pueden causar Morbilidad
severa o mortalidadSntomatologa a menudo muy similar
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RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA
Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85
RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA
Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85
N de muertes (%) Causa Comentarios159 (48.5%)
23 (7.0)55.5%
Hemlisis inmune agudaHemlisis retardada
Principalmente incomp. ABOMuerte de causa mltiple,pero asociada a nuevosanticuerpos: Rh, Kell, Duffy yKidd
73 (22.2) Enf transmisibles portransfusion
Hepatitis NANB, B, VIH
33 (10.1) Edema agudo pulmonar26 (7.9) Contaminacin bacteriana Bacterias Gram + y Gram -
aerbicas y anaerbicas14(4.2) Anafilaxis, Hemlisis
externa, GVHD
Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa Mdica182 Muertes debida a hemlisis postransfusional182 Muertes debida a hemlisis postransfusional
Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990
N de muertes Grupo ABO delReceptor
Grupo ABOtransfundido
82208611118
OOOAABB
Desconocido
AB
ABB
O*A
ABDesconocido
14 Diferentes causas Informacin insuficiente8 Acs diferentes a ABO 5 anti-Kell
1 anti-e1 anti-Fya1 anti-Jka+b
*Sangre total
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaRIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)*
BJM 1999;319:16-19 (3 July)RIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)*
BJM 1999;319:16-19 (3 July)
62 ABO incompatible:Error de identificacin en cualquier etapa del proceso3 muertes
4 bacterianas7 virales1 malaria
164 hospitales341 casos en 6 millones
analizados (en 2 aos)22 muertes
*
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*
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*
*Serious Hazards of Transfusion
52%
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaReacciones transfusionales
hemolticas tardas
8 muertes
o 53% anti-Jka/Jkbo 38% anti-Rh
14% errores podran haber sido evitados
mejorando los procesos de laboratorio. o Error humano
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Calidad y Seguridad Transfusional
Regulaciones Recomendaciones internacionales (OMS,AABB,ISBT, otras)
Normativas, Estndares, Orientaciones Nacionales.o (Servicios de Sangre, Bioseguridad)
Controleso Control de los procesos de toda la cadena transfusional.
o Control de Calidad de los procedimientos.Garanta de Calidad
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Riesgo: 1% por unidad transfundida (Issit).o Pacientes generales: 3%o Politransfundidos: 35%o Anemia Falciform: 35%.o Talasmicos 10%o >60% receptores crnicos (otra serie)
Puede ocurrir por transfusin, embarazo o aborto
2 exposicin al mismo ag rpida respuesta imune destruccin g.rojos transfundidos.
Prevalencia de Sensibilizacin de Receptores
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Prevalencia de Inmunizacin 3% - 8.4% receptores eventuales
Persistencia del Ac (26% a los 10 meses hasta aos)o Anticuerpos Kidd: < tiempo de deteccin
Respuesta inmune en 7 dias o Anti-Jka en 4 dias
1 2% de los potenciales receptores tendrn aloanticuerpos significativos diferentes a anti-Do 75% de dichos acs. con especificidad Rh o Kell.
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Anticuerpos clnicamentesignificativos
Causan destruccin de los GR incompatibles
Cruzan la placenta y causan EHRN
Importante recordar que la unin de anticuerpos a los eritrocitos no les causa dao directo
Respuesta es heterognea, depende de mltiples variables
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Factores que influencian la destruccininmune de GR
1. Concentracin plasmtica y avidz del Ac.
2. Rango trmico del Ac.
3. Clase y subclase de la inmunoglobulina
4. Densidad del Ag. en la membrana del GR
5. Volumen de eritrocitos transfundidos
6. Presencia de Ag en el plasma
7. Actividad del sistema fagocitario mononuclear
8. Sensibilidad de eritrocitos al complemento
9. Grado de activacin del complemento
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Importancia clnica de los Alo Acs Transfusin solo tomado en cuenta tipificacin ABO y Rh: 98% de seguridad
Acs. siempre asociados a potenciales riesgos
transfusionales:o ABO, Rh, Kell, Duffy, Kidd, SsU, Di,
Acs. a veces asociados a riesgo transfusional:o Lea , MN, P1, Lutheran (Lua, Lub), Cartwright ( Yta), Sda, Bg(HLA), Ge, Vel
Rara vez asociado a riesgo transfusional:o Leb, Chido/Rodgers, York (Yka), Sda, Xga, Bg, HTLA, Csa, Kna, JMH, Jra
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Inmunogenicidad relativa de antgenoseritrocitarios
D> K> c> E> k> e> Fya > C> Jka > S> Jkb > s
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Test de Compatibilidad PretransfusionalTest de Compatibilidad Pretransfusional
Serie de procesos y procedimientos cuyo objetivo final es asegurar el mejor resultado posible de una Transfusin sangunea. Ausencia de RPTH
Su aplicacin es para aumentar la seguridad transfusional, ya que no pueden garantizar una sobrevida normal de los GR transfundidos.
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Elementos de la P de C1. Indicacin de Transfusin 2. Identificacin del Receptor
1. En la muestra2. En la solicitud3. Del receptor
3. Anlisis a realizar a la muestra del R1. Caractersticas y condiciones de la muestra2. Grupo ABO y RhD3. Deteccin de Acs Irregulares4. Identificacin de Anticuerpos5. Comparacin con resultados previos
4. Seleccin de la unidad a transfundir1. Confirmacin ABO y RhD del Componente
5. Prueba Cruzada o Crossmatch1. Serolgico2. Electrnico
6. Etiquetado de componente a transfundir
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaIdentificacin del Receptor
Dispositivos para mejorar identificacin del paciente
Vox Sanguinis (2006) 91, 97101
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Identificacin pre transfusional Recordar:
o La mayora de las RPTH ocurren por una errada identificacin del paciente o de la Unidad a transfundir
Cada SS debe:o Establecer e implementar el procedimiento para una identificacin segura del paciente, muestra y producto
Puede ser solamente de lectura visual o visual y electrnica
Uso de N nico de identificacin
Definir sistema de ID para pacientes inconscientes
Datos de ID en la muestra (EJ:cdigo de barras)
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La muestra
Correctamente tomada, etiquetada y apta para el anlisis que se va a realizar. o Plasma (EDTA), Suero o Volumen
o Carctersticas: definir limitaciones y excepciones
Presencia de hemlisis visible
Presencia de lipemia
Presencia de un buffy coat anormalmente grande
Presencia de cogulos
Bajo volumen
Una razn clula:plasma, inesperadamente grande
Tiempo:
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Dos Modelos
Paciente transfundido dentro de: La muestra se debe tomar no ms de:
3 14 das 24 horas antes de la transfusin
15 28 das 72 horas antes de la transfusin
29 das - 3 meses 1 semana antes de la transfusin
o Pctes transfundidos o embarazadas en los ltimos 3 meses: NO MAS DE 3 DIAS al momento de la transfusin, para reflejar el estado inmunolgico del paciente
o Sin esta restriccin para otro tipo de pacientes
o Pctes sin historia clnica o transfusional demostrable, usar criterio de 3 das
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Cunto tiempo guardar la muestra pretransfusional?
Almacenar por 7 das en refrigeracin (AABB)
Otras referencias 3 das
Muestra del donante (tubuladura)
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaSeleccin de la unidad a
transfundir
ISOGRUPO
Aspecto o Hemlisis, contaminacin, aire
Circuito cerradoo Indemnidad del equipo
o No abierto
Das de almacenamiento, segn condicin del receptor
Tipo de paciente: Pediatrico, adulto
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaComponentes compatibles para transfusin
1 opcin: ISOGRUPO
Grupo del receptor
Plasma / crioprecipitado compatible
GR compatibles
Plaquetas compatibles 1 opcin
Plaquetas compatibles 2 opcin
A A, AB A, O A, AB B, O
B B, AB B, O B, AB A, O
O O, A, B, AB O O A, B, AB
AB AB AB, A, B, O AB A, B, O
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaTiempos de prueba estimado y riesgo
de los diferentes mtodos
Procedimiento Tiempo que requiere, desde recepcin de
solicitud a trmino de pruebas compatibilidad
(min)
Riesgo de hemlisis, %
Inmediata, sin pruebas 5 > 5
Solo ABO y Rh D 5 a 10 2-5
Type and screen 30 a 45 < 0,1
Type and screen +prueba cruzada
serolgica
30 a 45 < 0,1
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Preparacin de los hemates de la tubuladura del componente
La principal dificultad reside en lograr la identificacin segura
de la tubuladura y del tubo secundario utilizado en el test, a
partir del nmero en cdigo de barra del producto: Recontrol
ABO y RhD.
Preparacin de los GR: lavado con PBS resuspensin 5%.
Mantener circuito cerrado del componente por seguridad.
Utilizar dispositivos limpios/ desechables para cortar la
tubuladura.
Mantener la cadena de fro.
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Prueba Cruzada o Crossmatch Es una investigacin de anticuerpos irregulares (TAI)
personalizada, se usan los GR del D y plasma del R. Controla compatibilidad ABO entre R y D, de forma inmediata.
El plazo de validez de este anlisis es de 72 horas.
Hay que disponer de:o POE, CC con aplicacin y programa computacional para cada test
o Reactivos aptos y suficientes
o Equipos aptos y suficientes
o Material apto y suficiente
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Ejecucin tcnica
La prueba cruzada se efecta en iguales condiciones tcnicas que el TAI, utilizando un suero AGH humana poliespecfico, con incubacin a + 37C.o Si reaccin positiva >>> componente incompatibleo Si reaccin negativa >>> componente compatible
Pd ser en tubo o en gel.
Pd ser Manual o automatizada
Se puede usar LISS para disminuir tiempo de incubacin y aumentar sensibilidad.
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Modalidadestcnicas
UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaMtodo type and screen
(Clasificacin y Deteccin)
Realizar ABO, Rh D y TAI a todo potencial receptor de transfusin
Guardar la muestra para crossmatch por posible transfusino En caso de TAI (-) Se transfunde componente isogrupo ABO / Rh D, con
crossmatch salino. Muy rara vez se requiere transfusin tan urgente como para no hacer clasificacin ABO / D toma 5 10 min.
o Mantener un stock suficiente de GR para pacientes que se operan con esta modalidad.
o En caso de TAI positivo identificar los anticuerpos, y PC completa
o Si hay anticuerpos significativos, seleccionar unidades antgeno negativo.
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Un type and screen es vlido hasta por 72 horas (3 das), si el paciente no ha recibido una transfusin o no ha estado embarazada en los ltimos 3 meses.
Mtodo type and screen(Clasificacin y Deteccin)
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Uso de Prueba Cruzada completa
Obligatorio en :
o Paciente que haya desarrollado un aloanticuerpo anti eritrocitario : TAI +
o Recin nacido con un TAD positivo uso de muestra de la madre.
o Recin nacido cuya madre est aloinmunizada
o Pacientes con AHAI
Recomendado en (puede usar T/S):
o En pacientes no transfundidos
o En pacientes con TAI negativo
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MSBOSMaximum Surgical Blood Order Schedule
Definido por Comit Hospitalario de Transfusin.
Corresponde la lista de cirugas electivas ms comunes, con el nmero mximo de unidades que deben estar disponibles para la operacin.
Se recomienda para procedimientos que requieren poca sangre (menos de 0.5 unidades de glbulos rojos/ paciente/ procedimiento).
Disminuye costos en PC Disminuye reservas innecesarias de unidades
Preparar con T/S + PC salino el nmero especfico de unidades requeridas de acuerdo al MSBOS.
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UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaDespacho electrnico
Electronic cross match
Paciente con type and screen previo en 2 ocasiones. o Si ambos son negativos, est registrado en el sistema y no ha sido transfundido en ese periodo, se transfunde con componente ABO compatible elegido por computacin y no se le hacen ms pruebas.
Es muy rpido y ahorra tiempo.
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Esquemas para Test Pretransfusionales
AABB
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Casos complejos
Sueros conteniendo Acs. mltiples Anticuerpos contra antgenos de alta frecuencia Transfusin en AHAI
GR raros es la unidad de componente sanguneo negativo para los antgenos de alta frecuencia y
mezcla de antgenos mas comunes.
(AABB)
Raro:< 1/5.000 Difcil manejo:
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Casos complejosAc contra Ag de alta frecuencia
Difcil identificacin
Difcil encontrar la GR compatibles
Ac contra Ag de baja frecuencia
Algunas veces de difcil identificacin
Fcil encontrar la GR compatibles
Ac Mltiples
Algunas veces de difcil identificacin
Muchas veces difcil encontrar GR compatibles
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Antgenos raros en panel de ID
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SELECCIN DEL MEJOR MTODO
Uso de metodologas sensibleso Deben ser tan buenas como el test de AGH con LISS (LISS-IAT) en el uso de rutina. (Gold Standard)
o Entregar resultados reproducibles
o Costo efectivas
o No detectar Ac. sin importancia clnica (crioaglutininas)
o Tubo, Gel, Microplacas, molecular, etc.
Automatizacin de procesos permiteo Mejor utilizacin del tiempo, recursos humanos y econmicos
o Lectura objetivada
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Procedimiento para la validar tcnicas inmunohematolgicas
Lectura y anlisis de insertos o Tubo, columna o microplaca
Sensibilidad: o Usar un panel de Acs. dbiles (no usar Acs. diluidos ya que tienen una alta afinidad por el Ag. y
son fcilmente detectados). Si se puede cuantificar el anti-D, debe ser 0,1 - 0,2 iu/ml o 20 - 40 nanogramos/ml
o Enfrentarlos a un panel de GR heterocigotos para los Ags. Importantes
Validacin de resultados negativos (tubo):o Usar GR sensibilizados con IgG (1+/2+)
Determinar la sensibilidad del test LISS-AGH:o Realizar tablero de ajedrez usando anti-D, anti-K y/o anti-Fya
Estudio de falsos positivos por AGH:o Realizar pruebas cruzadas usando suero fresco, permite detectar exceso de anti-C3d en el
sistema. (mtodos automatizados utilizan suero, anti-Jka y anti-Jkb se detectan por la presencia de un Ac. Anti-cadena liviana)
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Estudio rutinario en paralelo (gran N de tests):o Conocer las fortalezas y debilidades del sistema en el trabajo diario del laboratorio
o Determinar incidencia de reacciones falsas positivas y negativas.
Estudio del efecto de dosis:o Comparar reactividad de Acs. Dbiles frente a GR homo y heterocigotos para varios Ags.
Procedimiento para la validar tcnicas inmunohematolgicas
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CONCLUSIONES
NO EXISTE UN MTODO UNICO QUE SEA CAPAZ DE DETECTAR TODOS LOS ACS. DE IMPORTANCIA.o ELEGIRLO EN BASE A UN ANLISIS DE CALIDAD Y COSTO-BENEFICIO EN CADA INSTITUCION.
o MUCHA DEDICACION Y TRABAJO
EDUCACION Y CAPACITACION DEL PERSONAL DEL SS Y DEL HOSPITAL
Indicacin de la Transfusin
Pesquisa, manejo y estudio de RPT
Comit Hospitalario de Transfusiones
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Muchas Gracias
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Grupo internacional de serologistas y cientficos.
Programa de intercambio de Sueros, Clulas y Fludos Raros.
Inclusin del participante en el programa.
Los participantes pueden pedir sueros/ hemates de inters
directamente en la pgina del programa.
Los participantes deben enviar anualmente sueros y/o
hemates en la pagina del programa para los que puedan
interesarse.
S.C.A.R.F.(Serum Cels and Rare Fluids Exchange Program)
http://scarfex.jove.prohosting.con/
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de cambio de muestras