CHECKPOINTS DEL CICLO CELULAR

1. DNA no replicado2. Ensamblaje de huso acromático3. Segregación de los cromosomas4. Reparación de daño al DNA

Previene activación de CycA-Cdk1 y CycB-Cdk1Inhibe entrada a Mitosis

Inhibición de activación de APCNO PoliUb de securina (cromosomasen huso) NO entrada a Anafase

Se inhibe PoliUb de CycB y NO hay telofase

En G1, entre G1 y S, entre S y Gy para entrar a M

Pi a p53 la estabiliza

Informaciónexterna

Presencia oausencia demoléculas

señalizadorassolubles

Presencia oausencia deinteracción cotras células

Presencia oausencia de inter-acción c sustratos

Informacióninterna

GenotipoLinaje celularEstadío desarrolloEstadío ciclo celularEstado metabólicoDaño al DNA, etc

Genes que median omodulan apoptosis

Fas/Apo-1 bcl-2myc bl-xras baxp53 etc

Mitosis

Respuestascelulares

Apoptosis

z z z

Quiescencia

Diferenciación

Respuestas celulares a señales externas e internas

Proliferación Muerte

Desórdenes deacumulación de

células

Desórdenes depérdida de

células

Homeostasis

(a) Células necróticas(b) Células apoptóticas en cultivo(c) Células apoptóticas en tejido en desarrollo

NECROSIS:• Célula de “hincha”• Mitocondria se dilata• Organelas se disuelven• Membrana plasmática se rompe• Respuesta inflamatoria

APOPTOSIS:• Citoplasma se “encoje”• Cromatina se condensa• Organelas retienen su integridad• Membrana plasmática se “encarruja” (blebbing)

Bioquímicamente: • activación de endonucleasas• Degradación de DNA en fragmentos oligonucleosomales• Activación de caspasas

1090 - 131Ced-3 y Ced-4 : proapoptosisCed-9: antiapoptosis; Bcl-2

(a) Mutaciones en gen ced-3 bloquea muerte celular programada

(a)Caspasas Iniciadoras: Casp2, 8,9, 10

(b)Caspasas Efectoras: 3, 6, 7

CED3: única, ambas funciones

Iniciadora: Región N-term posee dominios adaptadoresAutoactivadas

Efectora: 20-30 aa N-term – secuencia prodominioActivadas x Iniciadoras

CASPASAS

D

D

D

D

Asp-X

Asp-X

Asp

-X

Asp

-X

R-TNF, Fas

DD

D

ED

DD

D

ED

AdaptadorFADD/MORT1

DE

D DE

D

PROENZIMA (caspasa 8)Granzima B

proteasa Asp-x

Caspasa-3, 7

Heterodímeroactivo

p35XIAP

Ac-DEVD-CHO

Apoptosis

Proteínablanco

Apoptosis: Señal de muerteFalta de señal de sobrevivencia

Mecanismo molecular de activación de caspasas efectoras

(a) Estructura de caspasa 7 unida covalentemente a un péptido inhibidor

p20p10

inhibidor

(b) Configuración de todas las caspasas activas está conservada

(c) Estructura de zimógeno procaspasa 7

FAMILIA BCL-2

•Reguladores de muerte y supervivencia celular

•Proteínas pro- y anti-apoptóticas

•Miembros proapoptóticos: Bid, Bax, Bad, Bak, Bik, Birn

•Miembros antiapoptóticos: Bcl-2, Bcl-xL, Bcl-w, Mcl-1, A1

•Poseen dominios de homología con Bcl-2 (dominios BH)

•Pueden hetero u homodimerizar