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CARACTERSTICAS MORFOLGICASY AISLAMIENTOS DE Cercospora sojinaCARACTERSTICAS MORFOLGICAS
Y AISLAMIENTOS DE Cercospora sojinaDra. Alicia Luque
CEREMIC(Centro de Referencia de Micologa)
Fac. Cs. Bioq. y Farm. UNREE--mail: mail: agluquear@yahoo.com.aragluquear@yahoo.com.ar
Taxonoma de Cercospora sojina HaraTaxonoma de Cercospora sojina Hara
Dentro del gnero Cercospora se han nombrado ms de 3000 especies (Pollack, 1987). Recientemente ese nmero fue reducido a 659 especies (Crous & Braun 2003), con 281
especies consideradas morfolgicamente indistinguibles de Cercospora apii
El gnero Cercospora es reconocido como uno de los gneros ms grandes dentro de los Hyphomycetes
Taxonoma de Cercospora sojina HaraTaxonoma de Cercospora sojina Hara
CLASIFICACIN TAXONMICA: Phylum : Ascomycota.
Clase: Dothideomycetes.
Orden: Capnodiales.
Familia: Mycosphaerellaceae.
Gnero: Cercospora .
Especie: sojina.
El estado sexuado de este hongo hasta el momento es desconocido.
Cercospora gnero de hongos anamrficos (asexuados) vinculado con ascomicetes teleomorfos (sexuados) relacionados a
Mycosphaerella
Taxonoma de Cercospora sojina HaraTaxonoma de Cercospora sojina Hara
Cercospora sojina presenta gran nmero de razas que difieren en su capacidad de causar enfermedad en un amplio rango de
genotipos de soja
Es un hongo genticamente muy variable
Esto nos indica la posible existencia de reproduccin sexuadaen C. sojina
Los estudios genticos realizados en Cercospora beticolasugieren que algunas poblaciones se reproducen sexualmente
(Groenewald et al., 2007)
Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaMacromorfologa
AZAPG
Temperatura: 25C 1C
Luz
Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaMicromorfologa
Chupp, 1953
Conidiforos: 52-120 x 4-6 m
Conidios: 0-10 septos, 24-108 x 3-9 mRango ms frecuente:40-60 x 6-8 m
Tamao y forma de los conidios y conidiforos puede variar dependiendo del sustrato
Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaMicromorfologa: Conidios
Conidios: 0-22 septos, 50-375 x 2.5-5 m
Cercospora kikuchiiCercospora sojina
Conidios: 0-10 septos, 24-108 x 3-9 m
Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaLesiones foliares- Micromorfologa: Conidiforos
Conidiforos: 110 a 203 m.
Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaLesiones foliares- Micromorfologa: Conidios
Conidios: 1-9 septos, 26-111(47,3 14,7)5,2-7,4 m (6,1 0,7)
Mtodos de aislamiento de Cercospora sojinaMtodos de aislamiento de Cercospora sojinaAislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas
Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa
Transferencia directa de conidios, a medios de cultivo agarizados:
3. Se distribuye el trocito agarizado en forma de estras en una placa de APGS. Se incuban a 25C 2C, con 12 hs de luz fluorescente y 12 hs de oscuridad.
1. Se seleccionan las lesiones ms esporuladas de C. sojina y con el menor grado de microorganismos contaminantes, observados bajo microscopio esterescpico.
2. Posteriormente se toman conidios con la aguja histolgica con un trocito de medio de cultivo, dentro de una cmara de flujo laminar.
Este mtodo ha demostrado ser el ms exitoso
Mtodos de aislamiento de Cercospora sojinaMtodos de aislamiento de Cercospora sojinaAislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas
Trocitos de tejidos previamente desinfestados superficialmente :
II. Los trocitos de tejido vegetal se pueden colocar en cmara hmeda para lograr fructificaciones del hongo a las 48 horas y transferir las estructuras a medio de cultivo.
Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa
I. Aislar en medios de cultivo: APG 2% acidificado, Agar Extracto de Tomate (AET) y Agar Caldo de Verduras (ACV). Incubar a 26C 3C durante 48 hs en oscuridad y luego en condiciones de mesada de laboratorio durante 10 das.
Mtodos de aislamiento de Cercospora sojinaMtodos de aislamiento de Cercospora sojinaAislamiento a partir de lesiones foliares, de tallos y vainas
Carmona, Formento, Scandiani 2010 en prensa
Debido a que Cercospora sojina crece ms lentamente que otros microorganismos contaminantes
Observar los cultivos cada 2 das, durante 10 das para detectar colonias sospechosas de Cercospora sojina, las cuales deben ser
repicadas en forma inmediata
Mtodo de dilucin en placaCultivos puros
Mtodos de conservacin de Cercospora sojinaMtodos de conservacin de Cercospora sojinaSubcultivos peridicos
En aguabloques de agar sumergidosen agua estrila temperatura ambiente
Luque, Tartabini, Lo Piccolo
Crecimiento en medios de cultivo apropiados y transferencia peridicaa medio de cultivo fresco
En agar Agar V8 a 25C en oscuridad transferido cada 30 da s,para mantener la esporulacin
En agar bajo capa de aceite columna de agar con capa de aceite mineral
Aislamientos argentinos de Cercospora sojinadepositados en la Coleccin de Cultivos del CEREMIC
Aislamientos argentinos de Cercospora sojinadepositados en la Coleccin de Cultivos del CEREMIC
147 aislamientosAislados de semillas: 9Aislados de hojas: 138
31
6328
19
4 2
CrdobaBs. As.
Sta. Fe
Tucumn
E. Ros
Sgo. Del Estero
Luque, Tartabini, Lo Piccolo
Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos
Condiciones de incubacin:Medios de cultivo: Agar papa glucosa, Agar harina de avena, Agar zanahoria, Agar hojas de zanahoria, Agar V8, Agar plantas senescentes de soja.
Iluminacin: Luz continua, Luz oscuridad alternados, Oscuridad continua.
Obtener cultivos esporulados
Mejorar la conservacin de los aislamientos Realizar ensayos de patogenicidad Estudiar el comportamiento de los genotipos de soja Realizar pruebas de fungitoxicidad para controlar al patgeno
La transferencia de conidios en lugar de micelio produce cultivos ms esporulados
Temperatura: 25C 1C
Luque, Tartabini
Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres macromorfolgicos
AZ AV8 APG
LuzMayor velocidadde crecimiento
Oscuridad
Luque, Tartabini
Aislamientos seleccionados de las distintas provincias presentaron caracteres macromorfolgicos similares
Caracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos de Cercospora sojinaCultivos- Micromorfologa: Conidios
Conidios: 1-9 septos,20-125 x 3-8 m
AZ AV8
Luque, Tartabini
Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos: micromorfologa
Luque, Tartabini
Cantidad de conidios(Esporulacin)
Temperatura: 25C 1C
Medios de cultivoAZAV8APG
Iluminacin Luz continuaOscuridad continua
Conidios
Aislamientos seleccionados de las distintas provincias presentaron caracteres micromorfolgicos similares
Longitud media: 48,8-62,7m
Ancho medio: 5,0-6,4m
Aislamientos argentinos de Cercospora sojinaAislamientos argentinos de Cercospora sojinaCaracteres morfolgicos
SNA
Temperatura: 25C 1CLuz
Luque, Tartabini
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina
Reconocimiento de caracteres morfolgicos de
Cercospora sojina
Observacin:Lupa estereoscpicaMicroscopio
Aislamiento:Obtencin de cultivos puros y esporuladosMedios de cultivoT. de incubacinIluminacin
Conservacinadecuada
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y AISLAMIENTOS DECercospora sojina
Aislamientos de Cercospora sojina
Estudios taxonmicos Taxonoma clsicaTaxonoma molecular
Ensayos de patogenicidad
Pruebas de fungitoxicidad
Estudios del comportamiento de los genotipos de soja
Realizacin de investigaciones con aislamientos locales para dar soluciones concretas a nuestros problemas