UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
MODALIDAD: (INVESTIGACIÓN)
TEMA:
“COMPARACIÓN DEL EFECTO CICATRIZANTE DE LOS EXTRACTOS
HIDROALCOHÓLICOS DE ESCANCEL (Aerva sanguinolenta L) y
LLANTÉN (Plantago major L) EN ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN”
TRABAJO DE TITULACIÓN PRESENTADO COMO REQUISITO PREVIO
PARA OPTAR AL GRADO DE QUÍMICO Y FARMACÉUTICO
AUTORES:
KATHERINE PAULINA PALACIOS VILLAMAR
LUIS DAVID PROAÑO VEGA
TUTOR:
Q.F ZORAIDA BURBANO M.Sc
CO-TUTOR
Q.F GLENDA SARMIENTO M.Sc
GUAYAQUIL - ECUADOR
2018
FICHA DE REGISTRO DE TESIS/TRABAJO DE GRADUACIÓN
TÍTULO Y SUBTÍTULO: COMPARACIÓN DEL EFECTO CICATRIZANTE DE LOS EXTRACTOS HIDROALCOHÓLICOS DE ESCANCEL (Aerva sanguinolenta L) y LLANTÉN (Plantago major L) EN ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN
AUTOR(ES) (apellidos/nombres): PALACIOS VILLAMAR KATHERINE PAULINA PROAÑO VEGA LUIS DAVID
REVISOR(ES)/TUTOR(ES) (apellidos/nombres):
PAVLO CHACÓN Ph.D (REVISOR) ZORAIDA BURBANO M.Sc (TUTORA)
INSTITUCIÓN: UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
UNIDAD/FACULTAD: FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
MAESTRÍA/ESPECIALIDAD:
GRADO OBTENIDO: TERCER NIVEL – QUIMICO FARMACEUTICO
FECHA DE PUBLICACIÓN: 14 DE MARZO 2018 No. DE PÁGINAS: 94
ÁREAS TEMÁTICAS: FITOQUÌMICA Y FARMACOLOGICA
PALABRAS CLAVES/ KEYWORDS:
EXTRACTO, FLAVONOIDES, CICATRIZACION, COSTRA.
RESUMEN/ABSTRACT (150-250 palabras):
ADJUNTO PDF: SI NO
CONTACTO CON AUTOR/ES: Teléfono:
0960050730
0985778061
CONTACTO CON LA INSTITUCIÓN:
Nombre: SEDE CIENCIAS QUIMICAS
Teléfono: 052970459
E-mail: www.fcq.ug.edu.ec
X
IV
AGRADECIMIENTO
Primeramente, agradezco a Dios por haberme ayudado en cada paso de mi vida
y darme la fuerza durante esta etapa que eh culminado.
A mi familia y todas las personas que me han apoyado y animado a lo largo de
esta etapa.
A los docentes que forman parte de nuestra facultad por guiarme durante el inicio,
desarrollo y culminación de este trabajo.
Al Instituto Nacional de Investigación en Salud Pública (INSPI), por la donación de
los animales para la realización del trabajo de titulación y así contribuir a nuestra
formación educativa integral.
A mis queridas tutoras Q.F Zoraida Burbano M.Sc y, Q.F. Glenda Sarmiento MsC.
Por guiarnos a lo largo de este camino y brindarnos las directrices correctas.
Katherine Paulina Palacios Villamar
V
AGRADECIMIENTO
Agradezco a Dios, por el tengo la vida y las fuerzas para vencer cualquier
obstáculo que se presentó en el transcurso del camino.
A mis padres por ser el pilar fundamental en mi vida, a pesar de las limitaciones
económicas que se presentaron siempre aproveche al máximo y gracias a ellos
aprendí en no rendirme en seguir adelante, siempre dar lo mejor de mí, llevo en
mente sus palabras “Te apoyaremos siempre hijo mío, aunque sea poco pero te
ayudaremos “también adquirí valores que he puesto en práctica en el diario vivir
por aquello me he ganado la estima de docentes y amigos.
A mis hermanos, al ser menor siempre estuvieron al pendiente de mí,
brindándome los ánimos en seguir adelante.
A mis amigos que se convirtieron como mi familia, me brindaron ánimos, a la Sra.
Petita Beltrán se ganó mi estima y aprecio, su humildad es única, siempre estaré
agradecido con ella toda mi vida, varios docentes me dieron consejos aparte de
ser un profesor se convirtieron en mis mejores amigos.
Luis David Proaño Vega
VI
DEDICATORIA
Este trabajo está dedicado a mis padres William Palacios y Reina Villamar que
junto a mis hermanos Tatiana Palacios y Andrés Palacios me han apoyado a lo
largo de toda mi carrera universitaria.
A mis sobrinos por darme ese amor incondicional y ayudarme en los momentos
más difíciles, brindándome esa alegría y esperanza de cada día.
A mi querido novio Gregorio Wong por motivarme y brindarme su amor
incondicional a lo arduo de este camino. Gracias por seguir a mi lado después de
todo el camino que hemos pasado.
A mi compañero de tesis Luis Proaño. Gracias por estar en los malos y peores
momentos orgullosamente podemos decir ¡LO LOGRAMOS!
Katherine Paulina Palacios Villamar
VII
DEDICATORIA
Dedico este trabajo a Dios, sin él no sería posible haber culminado, me brindo paz,
alegría; sobre todo las fuerzas y el conocimiento en el transcurso de mi carrera
universitaria y en el diario vivir.
A mis padres Génito Proaño y Wilma Vega, son los ángeles de mi guarda cada
paso que fui dando estuvieron presentes y por ellos tengo la satisfacción de estar
culminando mis estudios universitarios.
A mi compañera de tesis Katherine Palacios. Cada paso que dimos fue con
seguridad y confianza, gracias a ello hemos cumplido una meta más.
Siempre estas frases estuvieron en mi mente:
“Mientras haya vida los sueños, la fe y la esperanza continúan”- “Nada es fácil ni
difícil depende del esfuerzo y dedicación que tengas en el diario vivir”
Luis David Proaño Vega
INDICE
APROBACIÓN DEL TUTOR ................................................................................ I
CERTIFICADO DEL TRIBUNAL .......................... ¡Error! Marcador no definido.
CARTA DE AUTORIA DE TITULACIÓN .............. ¡Error! Marcador no definido.
AGRADECIMIENTO ........................................................................................... IV
DEDICATORIA ................................................................................................... VI
ÍNDICE DE TABLAS .......................................................................................... IV
ÍNDICE DE FIGURAS ........................................................................................ VI
ÍNDICE DE GRÁFICOS ...................................................................................... VI
RESUMEN ........................................................................................................ VIII
ABSTRACT ........................................................................................................ IX
INTRODUCCIÓN ................................................................................................. 1
PROBLEMA ........................................................................................................ 2
FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ..................................................................... 2
JUSTIFICACIÓN ................................................................................................. 3
HIPÓTESIS ......................................................................................................... 3
OBJETIVOS ........................................................................................................ 4
General ............................................................................................................ 4
Específicos ....................................................................................................... 4
CAPÍTULO I ........................................................................................................ 5
MARCO TEÓRICO .............................................................................................. 5
I.1 Escancel ................................................................................................ 5
I.1.1 Descripción botánica ................................................................ 5
I.1.2 Taxonomía ................................................................................. 6
I.1.3 Hábitat........................................................................................ 6
I.1.4 Actividad farmacológica ........................................................... 7
I.1.5 Composición química ............................................................... 7
I.1.6 Mecanismo de acción de los compuestos químicos .............. 7
I.1.7 Usos etnomedicinales .............................................................. 9
I.2 Llantén ................................................................................................ 10
I.2.1 Descripción botánica .............................................................. 10
I.2.2 Taxonomía ............................................................................... 11
I.2.3 Hábitat...................................................................................... 12
I.2.4 Actividad farmacológica ......................................................... 12
I.2.5 Composición química ............................................................. 13
I.2.6 Usos etnomedicinales ............................................................ 14
I.3 Cicatrices ............................................................................................. 14
I.3.1 Definición: ............................................................................... 14
I.3.2 Fases de cicatrización cutánea .............................................. 15
I.3.3 Problemas ............................................................................... 15
I.3.4 Tratamiento ............................................................................. 16
CAPITULO II ..................................................................................................... 19
METODOLOGÍA................................................................................................ 19
II.1 Tipo de investigación ........................................................................... 19
II.2 Variables de la investigación ............................................................... 19
II.2.1 Variable dependiente .............................................................. 19
II.2.2 Variable independiente ........................................................... 19
II.2.3 Variable interviniente .............................................................. 20
II.2.4 Operalización de las variables ............................................... 20
II.3 Materiales y Métodos ........................................................................... 21
II.3.1 Recolección de la materia vegetal ......................................... 21
II.3.2 Obtención de los extractos hidroalcohólicos ....................... 21
II.3.3 Tamizaje fitoquímico ............................................................... 22
II.3.4 Parámetros de control de calidad realizada en las hojas
pulverizadas de Escancel y Llantén ........................................................ 25
II.3.5 Pruebas de control de calidad en los extractos de Escancel y
Llantén ………………………………………………………………………...28
II.3.6 Parámetros Macromorfológicos de las especies vegetales ....... 34
II.3.7 Efecto cicatrizante de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel (Aerva sanguinolenta L) y Llantén (Plantago major L). ......... 34
CAPITULO III .................................................................................................... 36
RESULTADOS Y DISCUSIÓN .......................................................................... 36
III.1 Análisis organoléptico .......................................................................... 36
III.2 Tamizaje fitoquímico ............................................................................ 37
III.3 Humedad ............................................................................................. 38
III.4 Cenizas Totales ................................................................................... 39
III.5 Cenizas Insolubles en HCl ................................................................... 40
III.6 Sustancias solubles ............................................................................. 41
III.7 Densidad ρ=25°C ........................................................................ 42
III.8 pH ........................................................................................................ 42
III.9 Índice de refracción ............................................................................. 43
III.10 Solidos totales .................................................................................. 44
III.11 Cuantificación de Flavonoides.......................................................... 44
III.12 Determinación de Flavonoides ......................................................... 46
III.13 Parámetros macromorfológicos ........................................................ 47
III.14 Proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de Escancel
y Llantén en animales de experimentación ..................................................... 48
CAPITULO IV .................................................................................................... 59
CONCLUSIONES Y RECOMEDACIONES ....................................................... 59
BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................. 61
ANEXOS ........................................................................................................... 66
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla I: Clasificación taxonómica del Escancel ................................................... 6
Tabla II: Clasificación taxonómica del Llantén ................................................... 11
Tabla III: Fases de la cicatrización cutánea ....................................................... 15
Tabla IV: Diferentes tratamientos utilizados para la cicatrices ........................... 17
Tabla V: Operalización de las variables: Conceptualización e indicadores ........ 20
Tabla VI: Evaluación del Ensayo preclínico del efecto cicatrizante en cada grupo
de experimentación mediante las aplicaciones de los tratamientos establecidos
.......................................................................................................................... 35
Tabla VII: Análisis organoléptico realizado en los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén. ............................................................................................ 36
Tabla VIII: Tamizaje fitoquímico realizado a los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén. ............................................................................................ 37
Tabla IX: Resultados de Humedad de las hojas secas y pulverizadas de Escancel
y Llantén ............................................................................................................ 38
Tabla X: Resultados de las Cenizas Totales de las hojas secas y pulverizadas
de Escancel y Llantén ........................................................................................ 39
Tabla XI: Resultados de las Cenizas insolubles en HCl de las hojas secas y
pulverizadas de Escancel y Llantén ................................................................... 40
Tabla XII: Resultados de sustancias solubles de las hojas secas y pulverizadas
de Escancel y Llantén ........................................................................................ 41
Tabla XIII: Resultados de densidad y densidad relativa de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén. ............................................................ 42
Tabla XIV: Lectura de pH de los extractos hidroalcohólicos de Escancel y Llantén
.......................................................................................................................... 42
Tabla XV: Lectura del índice de refracción de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén ............................................................................................. 43
Tabla XVI: Resultados de sólidos totales de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén ............................................................................................. 44
Tabla XVII: Lectura de las absorbancias mediante método espectrofotométrico de
las especies vegetales de Escancel y Llantén ................................................... 45
Tabla XVIII: Resultados del contenido de flavonoide en cada 100 g de hoja
pµLverizada de Escancel y Llantén .................................................................. 45
Tabla XIX: Resultados de la determinación de flavonoide mediante cromatografía
capilar en sílica gel. ........................................................................................... 46
Tabla XX: Estudio Macromorfológicos de las plantas de Escancel y Llantén. ... 47
Tabla XXI: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en animales de experimentación (Día 1).
.......................................................................................................................... 48
Tabla XXII: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación
(Día 2). .............................................................................................................. 49
Tabla XXIII: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación
(Día 3). .............................................................................................................. 50
Tabla XXIV: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación
(Día 4). .............................................................................................................. 51
Tabla XXV: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación
(Día 5). .............................................................................................................. 52
Tabla XXVI: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación
(Día 6). .............................................................................................................. 53
Tabla XXVII: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación
(Día 7). .............................................................................................................. 54
Tabla XXVIII: Relación entre los días de tratamiento del ensayo preclínico con las
fases del proceso de cicatrización. .................................................................... 55
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1 : Planta de Escancel (Aerva sanguinolenta L) ...................................... 5
Figura 2: Estructura química de la Quercetina ................................................... 8
Figura 3: Estructura química del Acido Tánico ................................................... 9
Figura 4: Planta de Llantén (Plantago major L) ................................................ 11
ÍNDICE DE GRÁFICOS
Gráfico I: Curva estándar de Flavonoides con sus respectivas concentraciones y
absorbancias ..................................................................................................... 44
VIII
RESUMEN
El presente estudio tiene como objetivo establecer preclínicamente el tiempo de
cicatrización en heridas de piel mediante la aplicación de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel (Aerva sanguinolenta L.) y Llantén (Plantago major
L); a los extractos y droga cruda se les realizó: tamizaje fitoquímico y parámetros
de control de calidad. En el ensayo preclínico se utilizó ratones machos (CD-1);
se anestesió y rasuró 3 cm en la región escapular posteriormente se realizó la
técnica de punch, se aplicó diariamente: 0.25 % β-Sitosterol, extracto de Llantén
y Escancel (10, 20, 30 µL); se evaluó por siete días: tamaño de herida, formación
de costra, inflamación, humedad; se logró concluir que el extracto de Llantén tiene
mayor efecto cicatrizante presentando 100 % formación de costra en el cuarto día
en comparación del extracto de Escancel que fue de 100 % en el quinto día.
Palabras claves: extracto, flavonoides, cicatrización, costra
IX
ABSTRACT
The aim of this research is to establish preclinically the healing time in skin wounds
through the application of the hydroalcoholic extracts of Escancel (Aerva
sanguinolenta L.) and Llantén (Plantago major L); The extracts and raw drug were
made: phytochemical screening and quality control parameters. In the preclinical
trial, male mice (CD-1) were used; 3 cm was anesthetized and shaved in the
scapular region, then the punch technique was performed, it was applied daily:
0.25% β-Sitosterol, extract of Llantén and Escancel (10, 20, 30 µL); it was
evaluated for seven days: wound size, scab formation, inflammation, humidity; It
was concluded that the Llantén extract has a greater cicatrizing effect, presenting
100% scab formation on the fourth day compared to the Escancel extract, which
was 100% on the fifth day.
Key words: extract, flavonoids, scarring, crust
1
INTRODUCCIÓN
Las plantas medicinales juegan un papel muy importante en la salud que
ha sido utilizado desde tiempos remotos por nuestros ancestros hasta la
actualidad, gracias a los beneficios y acciones farmacológicas que presentan.
El hombre está expuesto a múltiples peligros que pueden provocar
lesiones cutáneas como: cortaduras, mordeduras, dado estos inconvenientes ha
surgido la necesidad de buscar un producto de origen vegetal que sea eficaz y
autosustentable como lo son los extractos hidroalcohólicos de dos plantas
provenientes de la región sierra como es el Escancel y Llantén, que ayudan a una
pronta cicatrización de la herida.
El Escancel es utilizado como planta ornamental, sirve de adorno en casas
y parques de diferentes ciudades del país pero en los pueblos indígenas utilizando
la planta como medicina natural para aliviar dolores de cabeza, resfríos y también
para cicatrizar heridas (Gutiérrez, 2013).
El Llantén es una de las plantas que ha sido utilizada con fines medicinales
mundialmente en varias farmacopeas; es conocido por sus propiedades como
cicatrizante, diurética y para problemas cutáneos, su uso externo es
principalmente para todo tipo de problemas a la piel. Astringente, regenerativa,
contrae los tejidos y es efectivo con las erupciones cutáneas (Yambay, 2013).
El presente documento se comparara el tiempo de cicatrización en heridas
inducidas en la piel mediante estudios preclínicos provenientes de los extractos
hidroalcohólicos de las especies vegetales Llantén y Escancel.
2
PROBLEMA
Según Herranz et al, (2012) La cicatriz cutánea se define como la alteración
macroscópica de la estructura y función normales de la piel, originada por la
aparición de tejido dérmico fibroso de reemplazo, que se desarrolla tras la curación
de una herida, bien traumática, quirúrgica o por quemadura. El proceso fisiológico
de cicatrización tras una lesión traumática o, de cualquier otra naturaleza, afecta
a todos los órganos del cuerpo humano.
Cuando se produce una herida o lesión, se desencadenan los procesos de
reparación cutánea para mantener la homeostasis interna, con la formación de
una cicatriz local, que es inevitable cuando el daño inicial alcanza un tercio del
grosor de la piel. Su aparición conlleva con frecuencia una serie de efectos
secundarios indeseables, tanto por ser sintomáticas (prurito, fragilidad y dolor o
sensación de quemazón) como por su repercusión estética (Machón & Xatruch,
2007).
La cantidad y calidad de la cicatriz pueden ser variable, dependiendo de
los individuos, y se valora a partir de estudios histológicos y escalas clínicas en
las que constan parámetros como el volumen, contorno, color o consistencia de la
cicatriz. El tiempo de cicatrización depende del individuo (Herranz & Santos,
2012).
FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
¿Cuál será el tiempo de cicatrización que presentan los animales de
experimentación tratados con los extractos hidroalcohólicos de Escancel (Aerva
sanguinolenta L.) y Llantén (Plantago major L)?
3
JUSTIFICACIÓN
El Escancel ayuda en la reepitalización de la piel la cual es debido a su
composición fitoquímica que presenta una mayor cantidad de flavonoides de esta
manera se le otorga la actividad cicatrizante y a su vez antiséptica además la
presencia de minerales que ayuda en la coagulación; el extracto de esta especie
vegetal es utilizado para la cicatrización de heridas (Org, 2005).
El Llantén gracias a las propiedades hemostáticas ayuda en la coagulación
de la sangre y evita hemorragias, las hojas contienen las propiedades apropiadas
para desinfectar las heridas y para estimular la regeneración de células
epidérmicas como acción cicatrizante, gracias al alto contenido en taninos y
flavonoides (Olguin, 2012).
HIPÓTESIS
Los extractos hidroalcohólicos de las hojas del Llantén reducen
significativamente el tiempo de cicatrización en las heridas producidas en los
ratones en relación al Escancel
4
OBJETIVOS
General
Comparar preclínicamente el tiempo de cicatrización en heridas de piel
mediante la aplicación de los extractos hidroalcohólicos de Escancel
(Aerva sanguinolenta L.) y Llantén (Plantago major L).
Específicos
Realizar el tamizaje fitoquímico y los parámetros de control de calidad de
los extractos hidroalcohólicos.
Determinar la acción farmacológica cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos del Escancel (A. sanguinolenta L.) y Llantén (P. major L),
a partir de las concentraciones aplicadas en la herida.
Analizar estadísticamente los resultados obtenidos en los diferentes
tratamientos de acuerdo al tiempo de cicatrización.
5
CAPÍTULO I
MARCO TEÓRICO
I.1 Escancel
I.1.1 Descripción botánica
Escancel (Aerva sanguinolenta L) (Figura 1) pertenece a la familia
Amaranthaceas, es un hierba o arbusto postrada o ascendente, rojizo, entrenudos
los cuales son largos y gruesos. Tallos que arraigan en los nodos al tocar el suelo.
Las hojas opuestas, ovadas, 5 cm de largo, rojo o marrón en ambos lados, y con
una extremidad aguda. Las flores pequeñas, blancas y en cabezas axilares; la
cabeza es ovoide y de 2 cm de largo con un pedúnculo de 5 cm de largo (Chua,
2013).
Figura 1 : Planta de Escancel (Aerva sanguinolenta L)
6
I.1.2 Taxonomía
En la Tabla I se expone la clasificación taxonómica de la especie
Tabla I: Clasificación taxonómica del Escancel
Clasificación Científica
Reino Plantae
División Magnoliophyta
Clase Magnoliopsida
Orden Caryophyllales
Familia Amaranthaceae
Genero Aerva
Especie sanguinolenta
Nombre científico Aerva sanguinolenta
Aerva sanguinolenta L
Tomado de: (Chua, 2013)
Denominación o nombre común:
Aadaanpaaki (India), Escancel (Ecuador), gondang kasih (Java),
Gorakshaganjaa (India), kapok bush (English), mao vi dô (vietnamesisch),
Paashaanabheda (India), Shatkabhedi (India), Sirupeelai (Siddha/Tamil)
(Feiertag, 2016).
I.1.3 Hábitat
Aerva sanguinolenta L puede encontrarse en bosques; crece en suelos
húmedos, arcillosos o en algunos casos al borde de las quebradas,
principalmente es de clima templado o subtropical. Este tipo de planta
perteneciente a la Amaranthaceas puede estar distribuida en distintos lugares del
mundo, en América del sur como en Ecuador, Colombia, Guatemala.
Además está disponible en los países de Asia tales como: Japón, Bhután,
India, Nepal, Pakistán y también en China, Malasia e Indochina en China se
7
conoce como Baihuami, en Maharashtra como Burval, en Uttarakhand como
Sufedphulia y en Assam como SoruAraksan (Kundu et al , 2015).
I.1.4 Actividad farmacológica
Esta especie presenta diversos beneficios en la salud debido a los
diferentes compuestos químicos que se está en la hierba, es usado
tradicionalmente como antiparasitario, antipirético, alivia los problemas
pulmonares por sus propiedades expectorantes: resfriados, dolores de pecho,
catarro y neumonía.
También es beneficiosa para prevenir afecciones en la vesícula biliar,
hígado, riñones (enfermedades renales), además usado como antiinflamatorio y
diurético.
Según Feiertag, (2016), el extracto del Escancel es utilizado en el sur de
Asia principalmente en el país de Pakistán para sanar heridas e inclusive en la
cicatrización de la misma.
I.1.5 Composición química
Según Kundu, et al (2015), el Escancel mediante un screening fitoquímico
indicó la presencia de compuestos bioactivos como derivados fenólicos:
flavonoides y taninos.
I.1.6 Mecanismo de acción de los compuestos químicos
Compuestos fenólicos
Martínez et al, (2000), señala que los compuestos fenólicos constituyen
una gran familia de micronutrientes distribuidos en todo el reino vegetal, están
8
constituidos de varias sustancias químicas o también llamados metabolitos
secundarios.
Flavonoides
Pertenecen a un grupo de sustancias las cuales son esenciales en el reino
vegetal se encuentran en flores, verduras, semillas, hojas; son metabolitos
secundarios responsables de su color característico; los flavonoides se los suele
encontrar libremente como, glucósidos, polímeros perteneciendo a una amplia
familia de compuestos polifenólicos (Prieto et al, 2013; Casariego, 2016).
Quercetina (Figura 2) es un flavonoide tricíclico polihidroxilado, se
encuentra glicosilado formando parte de la rutina (quercetin-3-rutinósido), de la
isoquercitrina (quercetin-3-O-glucósido) o de otros glucósidos siendo la aglicona
de todos ellos, presenta actividad antioxidante, cardiovascular, antitumoral,
inmunológica, antiviral; la actividad antinflamatoria y cicatrizante es debido a los
efectos inhibidores de las enzimas de citoquinas inflamatorias como la
ciclooxigenasa o lipoxigenasa de tal maneras que inhibe la liberación de histamina
por los mastocitos y basófilos (IQB, 2010).
Figura 2: Estructura química de la Quercetina
Taninos
Son compuestos polifenólicos de elevado peso molecular que se
encuentran distribuidos en el reino vegetal, se caracterizan por ser astringentes y
presentar un sabor amargo las cuales sirven como medio de defensa para algunos
animales herbívoros son conocidos por ser antidiarreicos (uso interno) y
cicatrizantes (uso externo), presentan números grupos hidroxilos unido a
estructuras fenólicas tienden a formar proteínas, minerales (Vázquez et al , 2012).
9
El Ácido Tánico (Figura 3) conocido como ácido digálico y galactónico, se
encuentras en cortezas, raíces de frutos, plantas, y en las hojas se le atribuyen
propiedades antioxidante y astringente; produce la formación de costras
impidiendo el desarrollo de bacterias, ayudando a la coagulación de la sangre y
permitiendo la cicatrización de heridas (Ecured, 2017; Botanical, 2017).
Figura 3: Estructura química del Ácido Tánico
I.1.7 Usos etnomedicinales
En algunos pueblos indígenas y en diversos lugares del mundo se utiliza
como una medicina alternativa toda la planta como tónico, sedante, diurético,
demulcente y en la dermatitis.
La infusión de las hojas sirve para expulsar parásitos, aliviar dolores de
cabeza, depresión, infecciones de la vejiga, las hojas y raíz de la planta utilizado
tradicionalmente para el dolor corporal, cicatrización de heridas, como agente para
aliviar áreas inflamadas, lesiones por caídas, artritis reumática, dolor muscular y
también al preparar pasta de la hoja y la raíz se aplica en afecciones en heridas
(Lalee et al , 2012).
10
I.2 Llantén
I.2.1 Descripción botánica
Plantago major L (Figura 4) es una hierba perenne, planta de fácil
localización posee una altura de 15-30 cm su ciclo de vida es entre 6 – 7 meses,
casi no se cultiva porque se la considera como una maleza.
El tallo mide aproximadamente 15 cm de longitud suele ser un rizoma de
color amarillo, las raíces son de tamaño uniforme de color blancas surgen del tallo
subterráneo
Las hojas son de color verde, ovaladas, se caracterizan por ser glabras con
una longitud de 50 cm y 20 cm de ancho; las cuales se unen al tallo por el peciolo.
Nacen del suelo de forma vertical y en roseta, con margen liso, los peciolos miden
15 cm y son lisos.
La inflorescencia es de tipo espiga la cual se cubre de una pequeñas flores
de una coloración café verdosa, corola amarilla y pequeña de 3 mm de diámetro ,
anteras de color lila luego se vuelven amarillas, pedúnculos nacen de los peciolos
se caracterizan por ser de mayor longitud.
El fruto es un cápsula pequeña al madurar, de la cual caen
aproximadamente 20.000 semillas; estas son de forma ovalada, pequeñas. El
endosperma es la mayor parte de la semilla cubre al embrión, está constituido por
gruesas paredes de celulosa y del lumen celular contiene proteínas y aceites
(Blanco, 2008).
11
Figura 4: Planta de Llantén (Plantago major L)
I.2.2 Taxonomía
En la Tabla II se expone la clasificación taxonómica de la especie
Tabla II: Clasificación taxonómica del Llantén
Clasificación científica
Reino Plantae
Subreino Tracheobionta
División Magnoliophyta
Clase Magnoliopsida
Subclase Asteridae
Orden Lamiales
Familia Plantaginaceae
Género Plantago
Especie major
Nombre científico Plantago major
Plantago major L
Tomado de: (Marroquín, 2014).
Nombres comunes: llantén mayor, llantén común, llantén grande
12
I.2.3 Hábitat
Plantago major L es un hierba perenne perteneciente a la Plantagináceas
se la puede hallar en laderas, bosques y en bordes de los caminos, se encuentra
distribuida en Europa, África del norte, Asia occidental y América del norte
(México), América latina (Colombia, Ecuador, Costa Rica), generalmente se ubica
en regiones de clima templado y no demasiados calurosos, pero en países del
Viejo Mundo en trópicos y subtrópicos (Samuelsen, 2000; Yambay, 2013).
I.2.4 Actividad farmacológica
Según Renteira, (2011), menciona que el llantén es conocido como la
planta curativa porque presenta varias acciones farmacológicas debido a los
metabolitos presentes en toda la planta. A continuación se presentaran las
actividades farmacológicas en las diferentes partes de Plantago major L:
Planta entera: inhibición de mediadores proinflamatorios,
quimiopreventivo/quimioprotector, disminución de la permeabilidad capilar,
antimalárico, disolución de cálculos en riñones, antiparasitario.
Hojas: antitumoral, inmunomodulador, antidiarreico, antihistamínico,
citotóxico sobre células cancerígenas, antihipercolesteolemico, analgésico,
antiulceroso, cicatrizante, genotóxico, antimicrobiano.
Partes aéreas: antiinflamatorio, antifúngico, y sus semillas: laxante,
antihemorrágico, cicatrizante, genotóxico, antimicrobiano (Renteira, 2011).
Según Mengarelli et al, (2013), P. major L es utilizada como medicina
natural como astringente, antiinflamatorio y cicatrizante. Contiene flavonoides, los
cuales poseen propiedades antioxidantes, cicatrizantes, dadas por la
aucubigemina la cual es responsable de la actividad antibacteriana.
13
I.2.5 Composición química
P. major L tiene numerosos estudios fitoquímicos de sus hojas, semillas y
raíces, los cuales determinaron que poseen propiedades medicinales y también
pueden usarse como marcadores taxonómicos (Samuelsen, 2000).
Las semillas poseen adenina, aucubina, colina, mucílago, pectina, taninos,
ácidos succínico y plantenólico, planteasa, almidón y un aceite comestible que no
se seca, azucares reductores (0,18 %) y no reductores (0,28%) (Pinto &
Bustamante, 2008).
Las hojas de P. major L contienen taninos, sales de potasio, cumarinas,
enzimas, mucílago, flavonoides, apigenina, glucósidos, ácidos benzoico,
cinámico, fumárico, clorogénico, gentísico, salicílico, tirosol, plantagonina,
planteosa y alcaloides (Vicente, 1996).
Su principal principio activo es la acubigemina procedente de compuestos
inactivos como polímeros y la acubina. Cuando se produce su catabolismo por
medio de hidrolisis se origina un dialdehído el cual tiene propiedad bactericida, si
se calienta la planta se produce la perdida de este efecto terapéutico (Blanco,
2008).
El llantén contiene propiedades hemostáticas que elevan la coagulación
sanguínea cuando se ha producido una herida, así impidiendo hemorragias. El
principal responsable del efecto cicatrizante y hemostático se debe a su alto
contenido en taninos y a la presencia de alantoína la cual se caracteriza por
regenerar células epidérmicas (Pinto & Bustamante, 2008).
Debido a su contenido de flavonoides y antioxidantes se le atribuye su
poder cicatrizante. Los flavonoides que posee son la luteolina y la noscapina.
Además de poseer las propiedades mencionadas el llantén contiene vitamina C
14
entre sus componentes, ésta se localiza especialmente en sus hojas (Redrobán,
2012).
I.2.6 Usos etnomedicinales
Estudios etnofarmacológicos muestran que el llantén se utiliza en
diferentes lugares del mundo en el tratamiento de diversas enfermedades como
las siguientes: enfermedades en la piel, infecciones, problemas relacionados
estomacales, respiratorios, vías urinarias, la circulación, contra tumores, para
aliviar el dolor y para reducir la fiebre (Samuelsen, 2000).
I.3 Cicatrices
I.3.1 Definición:
Las cicatrices se originan como parte de la respuesta funcional corriente
del organismo a una variación de la estabilidad de los tejidos que lo componen
que pueden ser provocadas por acontecimientos como: quemaduras,
enfermedades, etc. cuyo progreso depende del daño que haya sufrido la dermis
(Herranz & Santos, 2012).
El proceso de cicatrización se divide dependiendo del tipo de tejido
involucrado y de las condiciones del cierre. Este proceso tiene diferentes tipos de
como: (Salem et al,2000).
cicatrización primaria (primera intención).
cicatrización secundaria (segunda intención).
cicatrización terciaria o por tercera intención (cierre primario
diferido).
15
I.3.2 Fases de cicatrización cutánea
Este proceso se dará en el mismo intervalo en que se da una lesión
cutánea y este mecanismo consta de las siguientes fases (Tabla III):
Tabla III: Fases de la cicatrización cutánea
Fases Mecanismo Tiempo
Fase I -
Respuesta
inflamatoria
Se produce la inflamación dada por los leucocitos
cuando van hacia la zona afectada. Los monocitos se
transforman en macrófagos, y producen enzimas
proteolíticas. Las células basales van a la herida para
taponar la superficie de la herida.
1 a 2 días
Fase II –
Migración /
Proliferación
Los fibroblastos van a la herida junto a las enzimas
sanguíneas, células de tejido circundante forman
colágena, fibrina y fibronectina. Las cuales unen a los
fibroblastos al sustrato y se da la contracción de la
herida.
3 a 14
días
Fase III –
Maduración /
Remodelación
Se produce la epitelización y se eleva progresivamente
la fuerza tensil de la piel (70-90% de la potencia original).
A continuación, se da la regeneración del colágeno y la
retracción endotelial.
14 días en
adelante
Tomado de: (Mas , 2008)
I.3.3 Problemas
Aun si se tiene un correcto manejo y tratamiento, las heridas poseen un
complejo proceso de curación el cual si no transcurre adecuadamente de lugar a
patologías en el proceso de cicatrización (Garcia, 2000).
16
I.3.3.1 Cicatrices patológicas
I.3.3.1.1 Cicatrices hipertróficas
Se caracterizan debido a que pueden crecer excesivamente de forma
espontánea y su tiempo puede ser tardío. La cicatriz hipertrófica adopta un
aspecto exuberante, pero esta cicatriz se producirá en el área del traumatismo
primario que la produjo (Aliaga & Vistós, 2010).
I.3.3.1.2 Cicatrización Queloides
Consiste en el descontrol del crecimiento en los bordes fuera del inicio
herida, esta deja de crecer después usualmente luego de años (Machón &
Xatruch, 2007).
I.3.3.1.3 Cicatrización atrófica o dolorosa.
Se presentan como cicatrices delgadas a diferencia a los contornos de la
piel sana. Se dará un adelgazamiento en la piel y disminuirá su densidad en fibras
de colágeno y de fibroblastos en la central de cicatrización final (Taboada , 2013).
I.3.4 Tratamiento
Existen diversos tipos de tratamientos para tratar las cicatrices. Se
debe enfatizar que por ningún método una cicatriz conseguirá ser eliminada
por completo, pero si podrá disminuirse para que esta sea imperceptible o
mínima. Para el tratamiento de cicatrices pueden clasificarse en tratamientos
invasivos, no invasivos y otros (Tabla IV).
Tabla IV: Diferentes tratamientos utilizados para la cicatrices
Tratamiento Tipos de
cicatrices Modo de uso Efectividad Tiempo
No
invasivos
Vendaje
compresivo
Heridas de
quemadura
Consiste en la aplicación de una venda
comprimida que debe tener al momento de
aplicarse una presión de entre 24-30
mmHg para la disminución del flujo
sanguíneo.
65%-75% Debe aplicarse
durante el día y la
noche, durante un
mínimo de 3
meses.
Gel de
silicona
Tratamiento
de las
quemaduras
Es equivalente a la venda compresiva,
pero contiene un gel de silicona. Debe
aplicarse día y la noche, mínimo 18 h cada
día.
60% Durante un
mínimo de 3
meses
Ungüentos
tópicos
Para mejorar
el aspecto de
las lesiones
posquirúrgicas
Se debe aplicar de 2 a 3 veces al día,
haciendo masajes en las áreas afectadas.
Variable Mínimo 2 meses
18
Tabla IV cont….
Invasivos
Cirugía Cicatrices
queloides e
hipertróficas
La extracción quirúrgica de la cicatriz
mediante cirugía.
Es posible que vuelva
aparecer
Corticoides
inyectados
Cicatrices
queloides e
hipertróficas
Infiltración de corticoides en la zona
afectada que son dirigidos de forma
intralesional o perilesional. El más usado
es la triamcinolona de concentración 10-80
mg/mL semanalmente durante 2-5
semanas.
50% a 100% Durante 6 a 8
meses
Crioterapia Diferentes
cicatrices
Se dan por procedimiento físico, en el cual
se elimina de manera controlada
específicamente tipos de lesiones de
manera que se aplica el frío a temperatura
bajo cero
50% De 2 a 10
sesiones
Láser Todo tipos de
cicatrices
El láser quema al absorber la luz. El cual
debe estar pulsado de 585 nm, y mejorara
el volumen, la elasticidad y los síntomas
de la mayoría de los casos tratados.
Dependerá de la
amplitud de onda
aplicada y del tipo de
tejido sobre el que se
aplica.
Dependerá de la
amplitud de la
cicatriz
Tomado de: (Bernabéu, 2009)
CAPITULO II
METODOLOGÍA
II.1 Tipo de investigación
Este estudio se fundamenta en la evaluación de la actividad cicatrizante de
los extractos de Llantén y Escancel sobre heridas producidas a los animales de
experimentación, lo que implica también observación diaria de los parámetros a
evaluar. Es cuantitativa debido a que dentro de esta exploración se realizaran
mediciones que son las variables a medir como porcentaje de humedad,
inflamación, presencia de costra en relación al tiempo, comparación de las
respuestas entre los tratamientos, es hipotética debido a que se planteó la
hipótesis de trabajo con respuesta anticipada los cuales presentan la actividad
cicatrizante en menor tiempo que los fármacos convencionales que se utilizan con
este propósito. La recogida de las lecturas diarias se hará en formatos que
contengan al final de la experiencia los datos para el respectivo análisis con el
uso de un paquete estadístico.
II.2 Variables de la investigación
II.2.1 Variable dependiente
Tiempo de cicatrización
II.2.2 Variable independiente
Concentración de los extractos hidroalcohólicos
Tamaño de la herida
Inflamación
Humedad
Formación de costra
20
II.2.3 Variable interviniente
Condiciones ambientales
II.2.4 Operalización de las variables
En la Tabla V se detalla las Operalización de las variables
Tabla V: Operalización de las variables: Conceptualización e indicadores
Variables Conceptualización Indicadores
Dependiente
Tiempo de
cicatrización
Magnitud física que sirve
para la medición o duración
de alguna eventualidad que
llegase a presentarse de los
cambios sujetos a
observación.
Días
Independiente
Concentración
de los extractos
hidroalcohólicos
Relación existente entre la
cantidad de soluto y la del
solvente
mg/mL
Tamaño de la
herida
Dimensión de la lesión que
puede producirse en
cualquier lugar del cuerpo
Centímetros
(cm)
Inflamación Respuesta por parte del
sistema inmunológico de un
organismo al daño causado
a sus células y tejidos
vascularizados.
Porcentaje (%)
21
Humedad Cantidad de agua u otro
liquido presente en una
superficie, cuerpo o aire.
Porcentaje (%)
Formación de
costra
Formación cutánea de color
rojo o pardo que cubre una
herida al momento de
cicatrizarse
Porcentaje (%)
Interviniente Condiciones
ambientales
Aquellos factores naturales,
sociales y culturales que se
encuentra expuesto un
producto o ser vivo.
--------------
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
II.3 Materiales y Métodos
II.3.1 Recolección de la materia vegetal
Las plantas de Escancel (Aerva sanguinolenta L) y Llantén (Plantago major
L) serán recolectadas en la Provincia de Bolívar – Cantón Caluma; para
posteriormente realizar una clasificación botánica en el Herbario de la Facultad de
Ciencias Naturales para su respectiva clasificación.
II.3.2 Obtención de los extractos hidroalcohólicos
La obtención de los extractos hidroalcohólicos de Escancel y Llantén,
tamizaje fitoquímico se realizara en el Laboratorio de productos naturales –
Proyectos de Investigación Docentes Estudiantiles en la Facultad de Ciencias
Químicas de la Universidad de Guayaquil.
Tabla V cont….
22
Las hojas de ambas especies se las secara expuestas al sol, colocadas
sobre papel en donde cada cierto tiempo se las cambia de posición para un buen
secado.
Maceración: Se pesará 100 g de cada planta seca y se eliminan residuos,
luego se coloca en una solución de alcohol (Etanol 96 %) /agua proporción (1:1),
en un frasco de vidrio ámbar (1000 mL) y se dejara macerar por siete días agitando
15 min dos veces al día. Se filtra, el filtrado pasa a un decantador para separar
la clorofila en un tiempo de 4 días sin tener ningún movimiento (Gutiérrez, 2013).
II.3.3 Tamizaje fitoquímico
Todos los procedimientos descritos para la realización del tamizaje
fitoquímicos serán tomados del Manual de prácticas de Laboratorio de
Farmacognosia y Fitoquímica además de Gutiérrez, (2013).
II.3.3.1 Ensayo de Shinoda (Flavonoides)
Se colocaran 20 mL del extracto hidroalcohólico en un tubo de ensayo se
agregan de dos a tres virutas de magnesio y unas gotas de ácido clorhídrico
concentrado observe el cambio de coloración de rojo a magenta. Si se trata de
un extracto acuoso, a la alícuota se le añade 1 gota de HCl concentrado.
Identificación: Rojo: presencia de flavonoides; Rosa intenso: presencia de
flavonas.
II.3.3.2 Ensayo de Mayer, Dragendorff y/o Wagner. (Alcaloides)
Ensayo de Dragendorff: Permite reconocer en un extracto la presencia
de alcaloides, para ello, si la alícuota del extracto esta disuelto en un solvente
orgánico, este se debe evaporarse en baño de agua y el residuo redisolverse en
1 mL de ácido clorhídrico al 1% en agua. Si el extracto es acuoso, a la alícuota se
le añade 1 gota de ácido clorhídrico concentrado, (calentar suavemente y dejar
23
enfriar hasta temperatura ambiente).Con la solución acuosa acida se realiza el
ensayo, añadiendo 3 gotas del reactivo de Dragendorff, Observar: Si hay
opalescencia (+), turbidez definida (++), precipitado anaranjado marrón (+++).
Ensayo de Mayer: Proceda de la forma descrita anteriormente. Hasta
obtener la solución acida. Añada una pizca de cloruro de sodio en polvo, agite y
filtre. Añada 2 o 3 gotas de la solución reactiva de Mayer. Observar: Si hay
opalescencia (+), turbidez definida (++), precipitado coposo o flatulento marrón
(+++).
Ensayo de Wagner: Se parte al igual que en los casos anteriores de la
solución acida, añadiendo 2 o 3 gotas del reactivo de Wagner. Observar: Si hay
opalescencia (+), turbidez definida (++), precipitado o una opalescencia blanca
(+++).
II.3.3.3 Ensayo de Liberman- Buchard (Triterpenos Y/O Esteroides)
Si la alícuota no se encuentra en cloroformo debe evaporarse el solvente
en baño de agua y el residuo disolverse en 1 mL de cloroformo. Se adiciona 1 mL
de anhídrido acético y se mezcla bien. Por la pared del tubo de ensayo se coloca
2-3 gotas de H2SO4 concentrado sin agitar. Un ensayo positivo se tiene por un
cambio rápido de coloración.
Observar: Rosado – azul muy rápido; Verde intenso- visible aunque rápido;
Verde oscuro-negro-final de la reacción. Para realizar este ensayo no puede haber
agua en el medio de reacción pues ésta con el ácido sulfúrico reacciona de forma
violenta y puede ocurrir un accidente.
24
II.3.3.4 Ensayo de Borntrager (Quinonas)
Si la alícuota no se encuentra en cloroformo debe evaporarse el solvente
en baño de agua y el residuo disolverse en 1mL de cloroformo. Se adiciona 1mL
de hidróxido de sodio, hidróxido de potasio o amonio al 5 %. Se agita mezclando
las fases y se deja en reposo hasta su ulterior separación. Observar: Positivo
cuando la fase acuosa alcalina (superior) se colorea de rosado (++), rojo (+++).
II.3.3.5 Ensayo de resinas
Para detectar este tipo de compuestos se adicionan a 2 mL, de la solución
alcohólica, 10 mL, de agua destilada. Observar: Positivo la aparición de un
precipitado.
II.3.3.6 Ensayo de Baljet (Cumarinas)
Si la alícuota de la muestra a probar no está en alcohol, debe evaporarse
el solvente en baño de agua y redisolviendo en 1mL de alcohol. Seguidamente,
se añade 1mL del reactivo. Observar: Positivo cuando aparece una coloración o
precitado de color rojo (++ y +++).
II.3.3.7 Ensayo de Espuma (Saponinas)
Si la alícuota se encuentra en alcohol, se diluye con 5 veces su volumen
en agua y se agita la mezcla fuertemente durante 5-10 min. Observar: Positivo si
aparece espuma en la superficie del líquido de más de 2 mm de altura y
persistente por más de 2 min.
25
II.3.3.8 Ensayo de Cloruro Férrico (Taninos)
Si el extracto de la planta se realiza con alcohol, el ensayo determina tanto
fenoles como taninos. A una alícuota del extracto alcohólico se adicionan 3 gotas
de una solución de tricloruro férrico al 5 % en solución salina fisiológica (cloruro
de sodio al 0.9 % en agua). Si el extracto es acuoso el ensayo determina
fundamentalmente taninos. A una alícuota del extracto se añade acetato de sodio
para neutralizar y 3 gotas de una solución de tricloruro férrico al 5 % en solución
salina fisiológica. Observar: Positivo coloración rojo-vino compuestos fenólicos
general. Coloración verde intensa, taninos del tipo pirocatecólicos. Coloración
azul, taninos tipo pirogalotánicos.
II.3.3.9 Ensayo de Antocianidinas
Permite conocer en los extractos vegetales la presencia de estas
estructuras de secuencia C6C3-C6 del grupo de los flavonoides.
Se calientan 2 mL del extracto etanólico por 10 minutos, con 1mL, de HCl
concentrado. Dejar enfriar y luego adicionar 1mL, del agua y 2 mL, de alcohol
amílico. Agitar y dejar separar las 2 fases. Observar: Positivo la aparición de color
rojo a marrón en la fase amílica
II.3.4 Parámetros de control de calidad realizada en las hojas
pulverizadas de Escancel y Llantén
Las pruebas de control de calidad son de suma importancia para poder
conocer las condiciones sanitarias e higiénicas de la droga. Las determinaciones
se realizarán en el Laboratorio de PROGECA en la Facultad de Ciencias Químicas
de la Universidad de Guayaquil.
26
Para realizar las pruebas de control de calidad en las hojas pulverizadas y
los extractos hidroalcohólicos del Escancel y Llantén se utilizara como referencia
(Martínez et al, 2015) para los experimentos descritos a continuación.
II.3.4.1 Determinación de humedad
Se lleva la cápsula de vidrio a la estufa a 105 °C por 15 minutos.
Posteriormente se lleva al desecador hasta alcanzar la temperatura ambiente
luego se pesa la cápsula vacía, después se pesan sin tarar 2 g de muestra con
desviación permisible de 0.5 mg; seguidamente se lleva a la estufa a 105ºC
durante 3h. La cápsula se coloca en la desecadora donde se deja enfriar a
temperatura ambiente y se pesa.
Formula correspondiente:
% 𝑯𝒖𝒎𝒆𝒅𝒂𝒅 =𝑴𝟐 − 𝑴𝟏
𝑴𝟐 − 𝑴 𝒙 𝟏𝟎𝟎
M2 = masa de la cápsula con la muestra de ensayo (g)
M1 = masa de la cápsula con la muestra de ensayo desecada (g)
M = masa de la cápsula vacía (g)
100 = factor matemático
II.3.4.2 Determinación de cenizas totales
Se lleva los crisoles a la estufa a 105 °C por 15 minutos posteriormente se
lleva al desecador hasta alcanzar la temperatura ambiente y luego se pesa el crisol
vacío, después sin tarar continuación se introduce en los crisoles
aproximadamente 2 g de muestra y se pesa de nuevo. Se introduce en la mufla a
27
700 ºC durante 4 horas. Transcurrido dicho tiempo se llevan las cápsulas a un
desecador hasta que alcancen la temperatura ambiente y se pesan.
Formula correspondiente:
% 𝑪𝒆𝒏𝒊𝒛𝒂𝒔 =𝑷𝟑 − 𝑷𝟏
𝑷𝟐 − 𝑷𝟏 𝒙 𝟏𝟎𝟎
P1= peso de la cápsula vacía (g)
P2= peso de la cápsula con la muestra (g)
P3= peso de la cápsula con la muestra calcinada (g)
100 = factor matemático
II.3.4.3 Determinación de cenizas insolubles en ácido clorhídrico
A las cenizas totales obtenidas, se añaden de 2 - 3 gotas de HCl al 10 %.
El crisol se tapa con un vidrio de reloj y se coloca a baño de agua hirviendo durante
10 minutos, posteriormente se lava el vidrio reloj con 5 mL de agua caliente y se
une al contenido del crisol, la solución se filtra utilizando papel filtro libre de
cenizas, posteriormente volver a ponerlo en la mufla por 700 °C por 3 horas volver
a pesar y sacar el porcentaje por formula.
Formula correspondiente:
𝑩 =𝑴𝟐 − 𝑴𝟏
𝑴 − 𝑴𝟏 𝒙 𝟏𝟎𝟎
B= cenizas insolubles en ácido clorhídrico en base hidratada (%)
M= masa del crisol con la porción de ensayo (g)
M1= masa del crisol vacío (g)
M2= masa del crisol con la ceniza insoluble en HCl (g)
100 = factor matemático
28
II.3.4.4 Determinación de sustancias solubles
De la muestra de ensayo previamente pulverizada y tamizada se pesa 5 g
y se transfiere a un frasco cónico con tapa con capacidad de 250 mL. Se añaden
100 mL de agua y se agita constantemente durante 6 horas. Dejar en reposo 24
horas, luego se agitan 30 minutos y se filtra por papel. Se toma una alícuota de 20
mL, se transfiere a una cápsula de porcelana previamente tarada, evaporar sobre
baño de agua, se deseca en estufa a 105ºC, durante 3 horas, se enfría en un
desecador y se pesa.
Formula correspondiente:
%𝑺𝒔 =𝑹 𝒙 𝟓𝟎𝟎 𝒙 𝟏𝟎𝟎
𝑴 𝒙(𝟏𝟎𝟎 − 𝑯)
Ss.= porcentaje de sustancias solubles en base hidratada (%)
H= humedad (%)
R= residuo de la muestra en %
M= masa de la muestra de ensayo (g)
II.3.5 Pruebas de control de calidad en los extractos de Escancel y
Llantén
II.3.5.1 Análisis organoléptico
Para las determinaciones de las características organolépticas se deberán
cumplir los requisitos establecidos.
Para las determinaciones de las características organolépticas del llantén
no se encuentran parámetros establecidos. Sin embargo esta investigación tomo
como referencia los resultados obtenidos en investigaciones Gutiérrez, (2013) y
Yambay, (2013).
29
Olor: En este parámetro los extractos hidroalcohólicos de las plantas
deberán poseer un olor herbáceo característico.
Color: Para determinar este análisis sensorial se procederá a examinar la
mezcla hidroalcohólicos del Llantén la cual deberá poseer una coloración ámbar
variando su intensidad. En el extracto de Escancel la coloración podría variar de
dependiendo de la ubicación demográfica de la planta pudiendo ser su coloración
verde oscuro o café oscuro.
Sabor: El sabor característico en los extractos de Escancel y Llantén será
amargo.
Aspecto: Su aspecto deberán ser líquidos para cualquiera de las dos
especies vegetales.
II.3.5.2 Determinación de pH
Se procede a calibrar el potenciómetro con los buffer (medio alcalino,
neutro, básico) posteriormente se toma un cantidad considerable del extracto para
la lectura del pH, se introduce el electrodo en el extracto y se anota el resultado.
II.3.5.3 Determinación de la densidad relativa
Se basa en el mismo principio de la técnica pero solamente en vez de
tomar un picnómetro se realizara en una probeta de 10 mL.
30
Se tomará cuidadosamente el picnómetro para su respectivo lavado y
secado, se colocara en la estufa durante una hora. Luego se pesara el picnómetro
(M), colocar agua destilada hasta enrase dentro del picnómetro, se seca y se pesa
(M1). Se descartan el contenido del picnómetro y llenarlo nuevamente con la
muestra (extracto). Enrasar el picnómetro con el extracto, secarlo y pesarlo (M2).
Formula correspondiente:
𝑫𝟐𝟓 =𝑴𝟏 − 𝑴 𝑴𝟐 − 𝑴
𝑴𝟐 − 𝑴 𝑴𝟏 − 𝑴
M1= peso del picnómetro con agua destilada (g).
M2= peso del picnómetro con la muestra de ensayo (g).
M= peso del picnómetro vacío (g).
II.3.5.4 Determinación del índice de refracción
Se calibra el equipo con una gota de agua destilada sobre el prisma de
medición, se ajusta el equipo seleccionado la zona del espectro visible que
aparece en a la línea límite del campo visual, moviendo el compensador cromático
y colocando la intersección del retículo sobre la línea límite de los campos claro y
oscuro.
Después de haber realizado el ajuste del refractómetro, se coloca una gota
de la muestra de ensayo sobre el prisma de medición, se cierra y ese enfoca, de
modo tal que la misma incida sobre la apertura de entrada del prisma de medición
y se procede de la misma forma que con en el agua.
31
Formula correspondiente:
𝑵𝒅𝟐𝟓 = 𝑵𝒅
𝟐𝟓 + 𝟎. 𝟎𝟎𝟎𝟒𝟒𝟎(𝒕 − 𝟐𝟓)
(N) 20 = índice de refracción corregido
(Nt) d = índice de refracción determinado
0.00044 y 20 = factores de corrección matemático
T = temperatura a la que se realiza la lectura.
II.3.5.5 Determinación de sólidos totales
Se lleva la cápsula de vidrio a la estufa a 105 °C por 15 minutos
posteriormente se lleva al desecador hasta alcanzar la temperatura ambiente y
luego se pesa la cápsula vacía, luego adicionar 5 mL de muestra y llevar a baño
María. Completar la evaporación en estufa a 105ºC durante 3 horas. Los
resultados se expresan en porcentaje de sólidos totales y se reportan en cifras
enteras, según su fórmula.
Formula correspondiente:
𝑺𝒕 =𝑷𝒓 − 𝑷
𝑽𝒙 𝟏𝟎𝟎
St= sólidos totales.
Pr= masa de la cápsula más el residuo (g).
P= masa de la cápsula vacía (g).
V= volumen de la porción del ensayo en mL.
100= factor matemático.
32
II.3.5.6 Determinación de flavonoides
Cromatografía por capa fina
Pesar 1g de la especie vegetal en polvo con 10mL de metanol por 5 min
en un baño de agua (60ºC), luego tomar un alícuota 5 mL de la solución y
concentrar hasta sequedad. Adicionar 2mL de agua y 10mL de acetato de etilo,
agitando por 10 min. Después separamos la fase de acetato de etilo y concentrar
hasta obtener un volumen de 1mL. Usar el concentrado para la cromatografía,
aplicar 10 µL del concentrado en una placa cromatográfica de silica gel 60F254
con la ayuda de un capilar.
Secar después de cada aplicación, se introduce la placa en la cuba
cromatográfica, hasta que el solvente recorra la ¾ partes de la placa. Retirar de la
cuba y dejar secar para luego observar en una lámpara de UV 365nm, revela la
placa y dejar secar, anotar los Rf.
Sistema de solventes que se utilizará será: cloroformo, acetato de etilo,
proporción (1:2).
Formula correspondiente:
𝑹𝒇 =𝒇𝒓𝒆𝒏𝒕𝒆 𝒅𝒆 𝒍𝒂 𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂
𝒇𝒓𝒆𝒏𝒕𝒆 𝒅𝒆𝒍 𝒔𝒐𝒍𝒗𝒆𝒏𝒕𝒆
II.3.5.7 Cuantificación de flavonoides
Curva estándar de flavonoide – Quercetina
Solución Madre: pesar 20 g de Quercetina y llevar a volumen en un
matraz de 25 mL con metanol (concentración 800 µg/mL).
33
Dilución primaria: tomar una alícuota de 2,5 mL de la solución Madre y
llevar a volumen en un matraz de 25 mL con metanol (concentración 80 µg/mL).
Posteriormente de la dilución primaria se tomaran alícuotas de 0.250 µL
,0.350 µL, 0.450 µL, 0.550 µL, 0.650 µL, 0.750 µL; luego se agrega los reactivos
cromóforos (200 µL de Acetato de potasio 1M, 200 µL de Nitrato de aluminio 10
%) y se llevaran a volumen en un matraz de 10 mL con etanol 96%, reposar por
40 minutos y leer en el espectrofotómetro a 415 nm utilizando como blanco Etanol
96 %.
Muestras por triplicado
Añadir 1 g de la muestra y 10 mL de etanol al 96% en un tubo de
eppendorf y llevar al vortéx (agitar 3 minutos), posteriormente filtrar y el filtrado se
deposita en un matraz de 25 mL, luego se coloca el residuo del papel filtro en el
mismo tubo de eppendorf y se añade 10 mL de etanol al 96% y llevar al vortéx
(agitar 3 minutos), se filtra llevando a volumen final en el mismo matraz de 25 mL
con Etanol 96 % (Solución A). Repetir el mismo proceso para las réplicas B y C.
De cada una de las réplicas, se toma 400 µL y se agrega los reactivos
cromóforos (200 µL de Acetato de potasio 1M, 200 µL de Nitrato de aluminio 10
%) y se lleva a volumen en un matraz de 25 mL con Etanol 96%, reposar por 40
minutos y leer en el espectrofotómetro a 415 nm utilizando como blanco Etanol 96
%.
34
II.3.6 Parámetros Macromorfológicos de las especies vegetales
Para la realización de los parámetros macromorfológicos de las especies
vegetales de Escancel y Llantén se tomarán en cuenta las formas de la raíz, tallo,
hojas y flores vistas en el estereoscopio.
II.3.7 Efecto cicatrizante de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel (Aerva sanguinolenta L) y Llantén (Plantago major L).
El método de referencia que se utilizara es del PUNCH que se fundamenta
en la producción de la herida. La biopsia punch es una técnica simple, de fácil
manejo y rápida ejecución, mediante la cual se logrará obtener muestras
procedentes para el estudio del proceso de cicatrización, la evaluación del
mecanismo de inflamatorias, entre otras (Navarrete et al , 2016).
La presente investigación se realizará en el Bioterio de la Facultad de
Ciencias Químicas de la Universidad de Guayaquil. Los animales que se utilizaran
son elegidos aleatoriamente; ratones CD-1 machos de 4 – 6 semanas con un
peso promedio de 20 - 25 g, son colocados en jaula para el periodo de a
climatización (siete días) bajo las siguientes condiciones climáticas: 23 - 25 0C
humedad 30 - 70%, cada uno será identificado con un numero único en la cola.
El ensayo preclínico se realizará con 8 grupos de experimentación cada
uno de 6 ratones con un total de 48 animales que serán sometidas a diferentes
tratamientos y concentraciones como son los extractos de Escancel, Llantén y
MEBO (ungüento tópico de origen natural- 0.25 % β-Sitosterol).
Producción de la herida.
Se deja en ayunas a los animales previo al inicio de la prueba, se anestesia
con ketamina dosis 50 mg/kg + maleato de acepromazina, se rasura
35
aproximadamente 3 cm en la región escapular y, con un formador de disco de 0.5
cm se procede a realizar el punch (producción de herida abierta en la piel).
Inmediatamente, después se procede a medir el tamaño de la herida, se coloca
los diferentes tratamientos en los grupos correspondientes (Tabla VI).
Tabla VI: Evaluación del Ensayo preclínico del efecto cicatrizante en cada grupo
de experimentación mediante las aplicaciones de los tratamientos establecidos.
Grupos Concentración (mg) Volumen administrado (µl)
A Control Negativo -------------- --------------------
B Control Positivo
(0.25% β-Sitosterol)
0.05 20
C Llantén 0.00288 10
D Llantén 0.00576 20
E Llantén 0.00864 30
F Escancel 0.00233 10
G Escancel 0.00446 20
H Escancel 0.00669 30
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
A continuación se evalúa el grado de humedad, inflamación. Por siete días
consecutivos se aplicarán los respectivos tratamientos a los grupos y se
registraran lo controles diarios realizados a cada animal en cuanto a porcentajes
inflamación, humedad, tamaño de la herida y formación de costra.
Finalmente, con aplicación de los principios éticos se da eutanasia a los
animales, se corta el área de la herida cicatrizada, debidamente identificada se la
coloca en formol al 10% para su evaluación histopatológica.
36
CAPITULO III
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
A continuación se detalla los resultados de control de calidad realizados en
las hojas pulverizadas y extractos hidroalcohólicos de Escancel y Llantén, así
mismo sobre el ensayo preclínico realizado en los animales de experimentación
(ratones machos CD-1).
III.1 Análisis organoléptico
Tabla VII: Análisis organoléptico realizado en los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
PARÁMETRO LLANTEN ESCANCEL
Aspecto líquido líquido
Color café claro verde oscuro
Olor característico característico
Sabor amargo amargo
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
En la Tabla VII se detalla el análisis organoléptico realizado a los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén para los cuales no se necesita tener
estándares de comparación, debido en que los parámetros organolépticos son
propios de cada especie vegetal; con respecto al Llantén, presenta un olor
característico (floral – dulce) puede ser a la presencia de azúcares, ambos
extractos tienen sabor amargo debido en que su composición presenta sales de
magnesio y principios amargos.
37
III.2 Tamizaje fitoquímico
Tabla VIII: Tamizaje fitoquímico realizado a los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
ENSAYO METABOLITO LLANTEN ESCANCEL
Espuma Saponinas + +
Resinas - -
Cloruro férrico Taninos +++ +++
Antocianinas - -
Shinoda Flavonoides ± ±
Borntrager Quinonas - -
Dragendorff Alcaloides +++ +++
Mayer Alcaloides +++ +
Wagner Alcaloides +++ +++
Liberman y
Buchardart
Triterpenos y/o
esteroides - +
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
(-) Negativo; (+) Baja Presencia; (++) Presencia; (+++) Alta Presencia; ±
(dudoso)
En la Tabla VIII se detallan los resultados del tamizaje fitoquímico
mediante la presencia o ausencia de los metabolitos secundarios de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén, este tipo de ensayo sirve para conocer de
manera cualitativa (mediante la percepción de cambios de coloración) si en el
extracto de cualquier especie vegetal existen estos metabolitos.
Con respecto al extracto hidroalcohólico de Llantén existe una alta
presencia de taninos y alcaloides, baja presencia de saponinas y ausencia
(negativo) de resinas, antocianinas, quinonas y triterpenos o esteroides, mientras
tanto en el extracto hidroalcohólico de Escancel se observa presencia alta de
taninos, alcaloides y, baja de saponinas, triterpenos; ausencia (negativo) de
38
resinas, quinonas, los resultados obtenidos fueron comparados con Gutiérrez,
(2013) y Yambay, (2013) presentado cierta similitud con la literatura expuesta.
Cabe resaltar que el ensayo de Shinoda para flavonoides no se logro
realizar debido que los extractos de ambas especies vegetales presentaron una
coloracion muy fuerte y el cambio de coloracion no era perceptible a simple vista,
pero este ensayo se lo puede corroborar con la Ilustración 1, Tabla XVII, Tabla
XVIII, en las que se detalla la cuantificacion de flavonoides; esto nos demuestra
que en el extracto hidroalcohólico de Escancel y Llanten existe una alta presencia
de Flavonoides a los cuales se les atribuye el efecto cicatrizante, objeto de este
estudio de investigación.
III.3 Humedad
Tabla IX: Resultado de Humedad de las hojas secas y pulverizadas de Escancel
y Llantén
LLANTEN ESCANCEL
REPLICA 1 4,64 % 4,30 %
REPLICA 2 4,70 % 4,19 %
REPLICA 3 4,75 % 4,14 %
TOTAL 4,70 % 4,21 %
D.S. 0,04 % 0,06 %
C.V. 0,80 % 1,37 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados detallados en la Tabla IX indican el porcentaje de humedad
de Llantén 4,70 % y Escancel 4,21 % los cuales fueron realizados por triplicado
para obtener una buena reproducibilidad, comparando los resultados obtenidos
con (Gutiérrez, 2013;Yambay, 2013) tomarón las especificaciones de la USP #28
teniendo como Limite hasta el 14 %; siendo así los resultados expuestos del
presente estudio de investigacion se encuentran acordes a la literatura comparada
39
y de esta manera los % de humedad obtenidos señalan que existe menor cantidad
o presencia de agua en este caso el agua libre, se deduce por que hubo un buen
secado de las hojas, mediante esto se conserva las hojas de las especies
vegetales y sus principos activos; ademas podemos mencionar ciertos parámetros
estadisticos que fueron considerados como fue desviaciación estandar y
coeficiente de variacion cuyo valor debe ser ≤ 10%.
III.4 Cenizas Totales
Tabla X: Resultados de las Cenizas Totales de las hojas secas y pulverizadas
de Escancel y Llantén
LLANTEN ESCANCEL
REPLICA 1 9,75 % 8,64 %
REPLICA 2 10,40 % 9,85 %
REPLICA 3 10,25 % 9,60 %
TOTAL 10,13 % 9,36 %
D.S. 0,26 % 0,48 %
C.V. 2,54 % 5,17 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
En la Tabla X se detallan los resultados de porcentaje de cenizas totales
de Llantén 10,13 % y Escancel 9,36 %, las muestras fueron realizadas por
triplicado para una excelente reproducibilidad, cuyos resultados fueron
comparados con Gutiérrez, (2013) y Yambay, (2013) tomarón las especificaciones
de la USP #28 teniendo como limite hasta el 14 %; de esta manera los resultados
obtenidos se encuentran dentro del valor de referencia en la literatura expuesta ;
ademas el % de Cenizas Totales nos permite conocer la ausencia o presencia de
materia ya sea arcillosa , arenosa o ferrosa que se puede encontrar al momento
de la recoleccion de las especies vegetales, posteriormente se tomó en
consideración parámetros estadísticos que son fundamentales al momento de
40
reportar los resultados como es la desviacion estandar y el coeficiente de variacion
el mismo que debe tener un valor ≤ 10%.
III.5 Cenizas Insolubles en HCl
Tabla XI: Resultados de las Cenizas insolubles en HCl de las hojas secas y
pulverizadas de Escancel y Llantén
LLANTEN ESCANCEL
REPLICA 1 1,20 % 1,11 %
REPLICA 2 1,15 % 1,15 %
REPLICA 3 1,15 % 1,00 %
TOTAL 1,17 % 1,09 %
D.S. 0,02 % 0,06 %
C.V. 1,88 % 5,34 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados expuestos en la Tabla XI indican el porcentaje de cenizas
insolubles en HCl de Llantén 1,17 % y Escancel 1,09 %, en el cual las muestras
fueron realizadas por triplicado para obtener una reproducibilidad, el resultados
del % Escancel fue comparado con el resultados de Gutiérrez, (2013) y el %
Llantén tambien se los considero la especificacion de la USP 28 teniendo como
Limite hasta el 5 %; siendo asi los resultados de las muestras del presente trabajo
de investigacion se encuentran dentro del valor referencial, este ensayo permite
conocer la presencia de sílice, proveniente de arena o tierra que se encuentra
presente en la parte aérea de las plantas, además se utilizaron parámetros
estadísticos para la evaluación de los resultados como la desviación estándar y el
coeficiente de variación cuyo valor debe ser ≤ 10%.
41
III.6 Sustancias solubles
Tabla XII: Resultados de sustancias solubles de las hojas secas y pulverizadas
de Escancel y Llantén
LLANTEN ESCANCEL
REPLICA 1 4,20 % 1,57 %
REPLICA 2 4,49 % 1,70 %
REPLICA 3 4,30 % 1,93 %
TOTAL 4,33 % 1,73 %
D.S. 0,10 % 0,13 %
C.V. 2,42 % 7,71 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
En la Tabla XII se exponen los resultados del porcentaje de sustancias
solubles de Llantén 4,33 % y Escancel 1,73 %, cuyos resultados fueron
comparados con los estudios realizados por Gutiérrez, (2013) y Yambay, (2013)
en el cual existe similitud, se observa que hay un mayor % de sustancias solubles
en el Llantén, esto demuestra que este tipo de extracto presenta una mayor
cantidad de compuestos a diferencia del Escancel.
42
III.7 Densidad ρ=25°C
Tabla XIII: Resultados de densidad y densidad relativa de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén.
LLANTEN ESCANCEL
Densidad Densidad
relativa
Densidad Densidad
relativa
REPLICA 1 0,929 g/mL 0,9997 g/mL 0,920 g/mL 0,9996 g/mL
REPLICA 2 0,925 g/mL 0,9995 g/mL 0,926 g/mL 0,9995 g/mL
REPLICA 3 0,936 g/mL 0,9998 g/mL 0,922 g/mL 0,9997 g/mL
TOTAL 0,930 g/mL 0,9997 g/mL 0,922g/mL 0,9996 g/mL
D.S. 0,003 % 0,0001 % 0,002 % 0,0001 %
C.V. 0,312 % 0,0089 % 0,224 % 0,0077 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados que se encuentran en la Tabla XIII indica los valores
correspondientes a la densidad para la obtención del mismo se tomaron los
valores correspondientes del extracto y la probeta mientras tanto en la densidad
relativa se tomó en consideración el valor del agua, extracto y probeta los cuales
presentan cierta similitud en sus resultados, llevándose a cado el ensayo por
triplicado y utilizando parámetros estadísticos como la desviación estándar el
mismo que debe ser ≤ 10%.
III.8 pH
Tabla XIV: Lectura de pH de los extractos hidroalcohólicos de Escancel y Llantén
DETERMINACIÓN
MUESTRA pH °C- ATC
Llantén 6,81 24,1
Escancel 6,80 24,5
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
43
La Tabla XIV señala los valores de las lecturas del pH de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén tomados a una temperatura de 24 - 24,5
°C, según Orlandi, (2014) Médico dermatólogo señala que la piel tiene un pH que
oscila entre los 4.5 - 5.9, los expertos recomiendan que deben utilizarse productos
para la piel con un pH comprendido entre 5-7; siendo así el pH de los extractos
hidroalcohólicos serían óptimos para uso tópico.
III.9 Índice de refracción
Tabla XV: Lectura del índice de refracción de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén
MUESTRA I.R DETERMINADA I. R CORREGIDA
Llantén 1,358 1,358
Escancel 1,359 1,359
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
La Tabla XV se encuentran los resultados de las lecturas del índice de
refracción correspondientes de los extractos hidroalcohólicos de Escancel y
Llantén; los valores detallados en la presente investigación fueron comparados
con los estudios realizados por Gutiérrez, (2013) y Yambay, (2013) siendo 1,353
Llanten y 1,351 Escancel presentan cierta similitud entre los resultados de la
literatura expuesta, este tipo de ensayo es una medida y un parámetro de calidad
que ayuda a controlar la adulteración.
44
III.10 Solidos totales
Tabla XVI: Resultados de sólidos totales de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén
LLANTEN ESCANCEL
REPLICA 1 1,30 % 1,30 %
REPLICA 2 1,26 % 1,30 %
REPLICA 3 1,26 % 1,32 %
TOTAL 1,27 % 1,31 %
D.S. 0,02 % 0,01 %
C.V. 1,40 % 0,77 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados detallados en la Tabla XVI señalan los porcentajes de
solidos totales realizado en los extractos hidroalcohólicos de Llantén 1,27 % y
Escancel 1,31 % cuyas muestras fueron realizados por triplicado obteniéndose
una buena reproducibilidad, además este ensayo sirve para estimar la cantidad
de materia disuelta y suspensión que se pueden encontrar en agua o en cualquier
otro liquido en este caso seria los extractos de las especies vegetales
III.11 Cuantificación de Flavonoides
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
0
0,099
0,140,172
0,219
0,258
0,304y = 0,0502x - 0,0019
R² = 0,9988
-0,05
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0 1 2 3 4 5 6 7
AB
SO
RB
AN
CIA
CONCENTRACIÓN
CURVA ESTANDAR FLAVONOIDES - QUERCETINA
Gráfico I: Curva estándar de Flavonoides con sus respectivas concentraciones y
absorbancias
45
Tabla XVII: Lectura de las absorbancias mediante método espectrofotométrico de
las especies vegetales de Escancel y Llantén
MUESTRA ABSORBANCIAS
Llantén 0,289 0,285 0,283
Escancel 0,146 0,145 0,149
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Tabla XVIII: Resultados del contenido de flavonoides en cada 100 g de hoja
pulverizada de Escancel y Llantén
LLANTEN ESCANCEL
REPLICA 1 905,44 mg/100 g hoja 460,35 mg/100 g hoja
REPLICA 2 892,99 mg/100 g hoja 457,23 mg/100 g hoja
REPLICA 3 886,77 mg/100 g hoja 469,68 mg/100 g hoja
TOTAL 895,07 mg/100 g hoja 462,42 mg/100 g hoja
D.S. 6,92 % 4,84 %
C.V. 0,77 % 1,05 %
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
En el Gráfico I representa a la gráfica de la curva estándar de Flavonoides
utilizando como patrón la Quercetina; observándose un R² = 0,9988 este valor
señala que existe una linealidad pertinente entre cada uno de los puntos de
intersección en la curva.
En la Tabla XVII señala las absorbancias del extracto de la hoja del
Escancel y Llantén que fueron obtenidas mediante el método espectrofotométrico
leídas a 415 nm cuyas muestras fueron ensayas por triplicado para la obtención
de una reproducibilidad confiable cuyos resultados de las absorbancias, oscilan
de 0,283 -0,289 en el caso del Llantén y 0,145 – 0,149 del Escancel; esta tabla
de datos se encuentra relacionada con el Gráfico I porque se puede deducir con
la lectura de absorbancias y concentración que el Llantén posee mayor
46
concentración de flavonoides entre el 5,2 – 6 µg/mL mientras el Escancel presenta
una menor cantidad de flavonoides entre 3,6 – 4,4 µg/mL en las diluciones
preparadas.
La Tabla XVIII señala los resultados de la cantidad de Flavonoides
expresados en mg en cada 100 g de hoja seca de Escancel y Llantén, de esta
manera el Llantén posee 895,07 mg/100 g hoja y el Escancel 462,42 mg/100 g
hoja siendo así, podemos suponer que el Llantén presentará mayor actividad
farmacológica porque posee mayor cantidad de flavonoides que ayudará en el
efecto cicatrizante aplicado en el ensayo preclínico en los ratones CD-1 machos.
III.12 Determinación de Flavonoides
Tabla XIX: Resultados de la determinación de flavonoides mediante cromatografía
capilar en sílica gel.
FRENTE DE LA MUESTRA Rf
MUESTRA A B C
FRENTE DEL
SOLVENTE A B C
Llantén 4 cm 11 cm 13,5 cm 14,5 cm 0,28 0,76 0,93
Escancel 4,5 cm 8 cm 13 cm 14,5 cm 0,31 0,55 0,90
Eluyentes: Cloroformo: acetato de etilo (1:2)
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados expuestos en la Tabla XIX conciernen a los RF obtenidos
en la cromatografía capilar en silica gel, se utilizó en la preparación de la fase
móvil solventes que son utilizados en la determinación de flavonoides, de esta
manera se observó la separación de 3 manchas, no se puede detallar con
exactitud el tipo de flavonoides separados.
47
III.13 Parámetros macromorfológicos
Tabla XX: Estudio Macromorfológicos de las plantas de Escancel y Llantén.
PARÁMETRO LLANTEN ESCANCEL
Raíz
Tamaño uniforme de color
blanco o grises
Tamaño uniforme de color café
Tallo
Aproximadamente 15 cm de
longitud suele ser un rizoma
de color amarillo
Tallo rojo a rojizos con nudos
evidentes
Hojas
Espiralas, suberectas hasta
divergentes, lamina ovada,
venas secundarias
ascendentes, glabras.
Simples, decusadas, lamina
elíptica, base cuneada, margen
ondeada, ápice acumado, haz
verde y envés rojo – purpura con
pubescencia adpresa,
Flores
No vistas
Pequeñas, blancas, cabezas
axilares; la cabeza es ovoide y de 2
cm de largo, pedúnculo de 5 cm de
largo
Frutos
Cápsula r, elíptico 1 mm de
longitud , las semillas
pueden variar planas en la
cara interna, superficie
irregular
No vistas
Inflorescencia Central, erecta, que excede
a las hojas No vistas
Elaborado por: Cornejo, (2017); Palacios & Proaño, (2017)
La Tabla XX señala los resultados obtenidos sobre el estudio
macromorfológico de las plantas de Escancel y Llantén las mismas que tienen
cierta similitud según lo expuesto por Gutiérrez, (2013) y Yambay, (2013); según
el Botánico Xavier Cornejo del Herbario GUAY de la Facultad de Ciencias
Naturales de la Universidad de Guayaquil.
48
III.14 Proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén en animales de experimentación
PRIMER DÍA:
A continuación se detallan los resultados obtenidos en el primer día de
evaluación en el proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
Tabla XXI: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en animales de experimentación (Día 1).
GRUPO
PARAMETROS p > q 0.05 HUMEDAD
(%) COSTRA
(%) INFLAMACIÓN
(%) TAMAÑO HERIDA
(cm)
A (Control negativo)
100 0 100 0,5 A
B (Control positivo)
100 0 100 0,5 A
C (Llantén 10 µL)
100 0 100 0,5 A
D (Llantén 20 µL)
100 0 100 0,5 A
E (Llantén 30 µL)
100 0 100 0,5 A
F (Escancel 10 µL)
100 0 100 0,5 A
G (Escancel 20 µL)
100 0 100 0,5 A
H (Escancel 30 µL)
100 0 100 0,5 A
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
En el primer día de inducción, todos los grupos presentaron un 100 % de
humedad, inflamación, ausencia de costra y 0,5 cm del tamaño de herida.
49
SEGUNDO DÍA:
En la siguiente tabla se detallan los resultados obtenidos en el segundo día
de evaluación del proceso de cicatrización en el cual se observa poca presencia
de costra una vez aplicado los extractos hidroalcohólicos de Escancel y Llantén.
Tabla XXII: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación (Día
2).
GRUPO PARAMETROS
p > q 0.05
HUMEDAD (%)
COSTRA (%)
INFLAMACIÓN (%)
TAMAÑO HERIDA (cm)
A (Control negativo)
50±6,3 0 30 0,5 A,D,B,-
B (Control positivo)
10 0 70 0,5 D,D,A,-
C (Llantén 10 µL)
5 8 ± 2,6 7± 2,6 0,5 D,C,D,-
D (Llantén 20 µL)
0 12 ± 2,6 0 0,5 D,B,E,-
E (Llantén 30 µL)
0 20 0 0,5 D,A,E-
F (Escancel 10 µL)
10 0 9 ±2,0 0,5 B,D,C,-
G (Escancel 20 µL)
4 ± 2,0 0 6 ± 2,0 0,5 C,D,D,-
H (Escancel 30 µL)
0 0 0 0,5 D,D,E,-
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados obtenidos en porcentajes para los grupos fueron los
siguientes: Humedad, A presentó (50±6,3); B (10), C (5), D, E (0); mientras tanto
F (10), G (4 ± 2,0) y H (0). Con respecto a la presencia de costra, A y B (0), C (8
± 2,6), D (12 ±2,6), E (20), F, G, H (0). Inflamación, A (30), B (70), C (7±2,6), D y
E (0), F (9 ± 2,0), G (6 ± 2,0), H (0). En cuanto al tamaño de la herida, A, B, C, D,
E, F, G, H (0,5 cm).
50
TERCER DÍA:
A continuación se detalla los resultados obtenidos en el tercer día de
evaluación en el proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
Tabla XXIII: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación (Día
3).
GRUPO PARAMETROS
p > q 0.05
HUMEDAD (%)
COSTRA (%)
INFLAMACIÓN (%)
TAMAÑO HERIDA (cm)
A (Control negativo)
30 ± 6,3 0 10 0,5 A,F,B,A
B (Control positivo)
5 0 50 ± 8,9 0,5 B,F,A,A
C (Llantén 10 µL)
0 33 ± 8,2 2 ± 2,6 0,5 C,C,CD,B
D (Llantén 20 µL)
0 53 ± 5,2 0 0,4 C,B,D,C
E (Llantén 30 µL)
0 73 ± 5,2 0 0,4 C,A,D,C
F (Escancel 10 µL)
5 10 4 ± 2,0 0,5 B,E,D,A
G (Escancel 20 µL)
0 23±5,2 1 ± 2,4 0,5 C,D,CD,A
H (Escancel 30 µL)
0 30 0 0,5 C,C,D,A
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados que se encuentra en la Tabla XXIII detalla los porcentaje
de los parámetros que se evaluaron en los grupos siguientes: Humedad, A (30 ±
6,3), B (5), C, D, E (0), F (5), G y H (0). Presencia de costra A y B (0), C (33 ± 8,2),
D (53 ± 5,2), E (73 ± 5,2), F (10), G (23±5,2), H (30). Inflamación A (10), B (50 ±
8,9), C (2 ± 2,6), D, E (0), F (4 ± 2,0), G (1 ± 2,4) y H (0). El tamaño de la herida
A, B, C, F, G, H (0,5 cm), D, E (0,4 cm).
51
CUARTO DÍA:
A continuación se detalla los resultados obtenidos en el cuarto día de
evaluación en el proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
Tabla XXIV: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación (Día
4).
GRUPO PARAMETROS
p > q 0.05
HUMEDAD (%)
COSTRA (%)
INFLAMACIÓN (%)
TAMAÑO HERIDA (cm)
A (Control negativo)
2 ± 2,6 10 3 ± 2,7 0,5 -,E,B,A
B (Control positivo)
1 ± 2,0 10 13 ± 5,2 0,5 -,E,A,A
C (Llantén 10 µL)
0 60 ± 9,0 0 0,4 -,C,C,B
D (Llantén 20 µL)
0 85 ± 5,5 0 0,4 ± 0,1 -,B,C,C
E (Llantén 30 µL)
0 100 0 0,2 -,A,C,D
F (Escancel 10 µL)
0 37 ± 5,2 0 0,4 ± 0,1 -,D,C,B
G (Escancel 20 µL)
0 55 ± 5,5 0 0,4 -,C,C,B
H (Escancel 30 µL)
0 85 ± 5,5 0 0,4 ± 0,1 -,B,C,C
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados de los grupos de estudio tenemos los siguientes
porcentajes según los parámetros que fueron medidos: Humedad A (2 ± 2,6), B
(1 ± 2,0) y los demás grupos (0). Presencia de costra A, B (10), C (60 ± 9,0), D (85
± 5,5), E (100), F (37 ± 5,2), G (55 ± 5,5), H (85 ± 5,5). Inflamación A (3 ± 2,7), B
(13 ± 5,2) C, D, E, F, G, H (0). Tamaño de la herida A y B (0,5), C (0,4), D (0,4 ±
0,1), E (0,2), F (0,4 ± 0,1), G (0,4), H (0,4 ± 0,1).
52
QUINTO DÍA:
A continuación se detalla los resultados obtenidos en el quinto día de
evaluación del proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
Tabla XXV: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación (Día
5).
GRUPO PARAMETROS
p > q 0.05
HUMEDAD (%)
COSTRA (%)
INFLAMACIÓN (%)
TAMAÑO HERIDA (cm)
A (Control negativo)
0 40 0 0,4 -,D,B,A
B (Control positivo)
0 38 ± 4,1 7 ± 2,6 0,4 -,D,A,A
C (Llantén 10 µL)
0 85 ± 5,5 0 0,4 ± 0,1 -,B,B,B
D (Llantén 20 µL)
0 100 0 0,3 -,A,B,C
E (Llantén 30 µL)
0 100 0 0,3 ± 0,1 -,A,B,C
F (Escancel 10 µL)
0 58 ± 7,5 0 0,4 -,C,B,A
G (Escancel 20 µL)
0 85 ± 5,5 0 0,4 ± 0,1 -,B,B,B
H (Escancel 30 µL)
0 100 0 0,3 -,A,B,C
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
Los resultados de los porcentajes según los parámetros que fueron
evaluados son los siguientes: Humedad todos los grupos (0). Presencia de costra
A (40), B (38 ± 4,1), C (85 ± 5,5), D, E (100), F (58 ± 7,5), G (85 ± 5,5), H (100).
Mientras tanto la inflamación solo el B (7 ± 2,6) y los demás grupos (0). El tamaño
de la herida A y B (0.4), C (0,4 ± 0,1), D (0,3), E (0,3 ± 0,1), F (0,4), G (0,4 ± 0,1),
H (0,3).
53
SEXTO DÍA:
A continuación se detalla los resultados obtenidos en el sexto día de
evaluación en el proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
Tabla XXVI: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación (Día
6).
GRUPO
PARAMETROS p > q 0.05 HUMEDAD
(%) COSTRA
(%) INFLAMACIÓN
(%)
TAMAÑO HERIDA
(cm)
A (Control negativo)
0 90 0 0,3 -,B,-,C
B (Control positivo)
0 75 ± 5,5 10 0,4 -,D,-,A
C (Llantén 10 µL)
0 100 0 0,3 -,A,-,C
D (Llantén 20 µL)
0 100 0 0,2 ± 0,1 -,A,-,D
E (Llantén 30 µL)
0 100 0 0,2 -,A,-,D
F (Escancel 10 µL)
0 85 ± 5,5 0 0,4 ± 0,1 -,C,-,B
G (Escancel 20 µL)
0 100 0 0,3 -,A,-,C
H (Escancel 30 µL)
0 100 0 0,2 ± 0,1 -,A,-,D
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
De los resultados que los porcentajes presentados por los grupos fueron
los siguientes: Humedad A, B, C, D, E, F, G, H (0). Presencia de costra A (90), B
(75 ± 5,5) C, D, E (100), F (85 ± 5,5), G y H (100).Con respecto a la inflamación
solo B (10) los demás grupo (0). El tamaño de la herida A (0,3), B (0,4), C (0,3), D
(0,2 ± 0,1), E (0,2), F (0,4 ± 0,1), G (0,3), H (0,2 ± 0,1).
54
SEPTIMO DÍA:
A continuación se detalla los resultados obtenidos en el séptimo día de
evaluación en el proceso de cicatrización de los extractos hidroalcohólicos de
Escancel y Llantén.
Tabla XXVII: Promedios y desviación estándar y comparación de medias según
ANOVA de los parámetros medidos en el efecto cicatrizante de los extractos
hidroalcohólicos de Escancel y Llantén en los animales de experimentación (Día
7).
GRUPO PARAMETROS
p > q 0.05
HUMEDAD (%)
COSTRA (%)
INFLAMACIÓN (%)
TAMAÑO HERIDA (cm)
A (Control negativo)
0 100 0 0,3±0,1 AB
B (Control positivo)
0 100 0 0,3±0,1 AB
C (Llantén 10 µL)
0 100 0 0,3±0,1 B
D (Llantén 20 µL)
0 100 0 0,2 C
E (Llantén 30 µL)
0 100 0 0,1 D
F (Escancel 10 µL)
0 100 0 0,3 AB
G (Escancel 20 µL)
0 100 0 0,3 A
H (Escancel 30 µL)
0 100 0 0,2 C
*Letras iguales en la columna no presenta diferencia significativa entre los grupos
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017)
De acuerdo con los resultados de los parámetros según los grupos de
experimentación son los siguientes: todos no presentaron humedad ni inflamación
(0) además 100 en las presencia de costra y en tamaño de la herida A, B, C (0,3
± 0,1), D (0,2), E (0,1), F, G (0,3) y H (0,2).
55
Tabla XXVIII: Relación entre los días de tratamiento del ensayo preclínico con las
fases del proceso de cicatrización.
FASES DEL PROCESO DE CICATRIZACIÓN
GRUPO INFLAMATORIA PROLIFERACIÓN MADURACIÓN Y REMODELADO
A (Control negativo)
Día 1 - 3 Día 4 - 5 Día 6 - 7
B (Control positivo)
Día 4 - 6 Día 7
C (Llantén 10 µL)
Día 1 - 2 Día 2 - 5 Día 6 – 7
D (Llantén 20 µL)
Día 1
Día 2 - 4 Día 5 – 7
E (Llantén 30 µL)
Día 2- 3 Día 4 – 7
F (Escancel 10 µL)
Día 1 – 2
Día 3 - 6 Día 7
G (Escancel 20 µL)
Día 3 – 5 Día 6 – 7
H (Escancel 30 µL)
Día 3 – 4 Día 5 – 7
Elaborado por: Palacios & Proaño, (2017).
De acuerdo con los días de experimentación del ensayo preclínico se
observó las diferentes fases del proceso de cicatrización en los grupos de
tratamiento de esta manera la fase inflamatoria inició desde el primer día de
inducción de la herida en todos los grupos, la fase de proliferación en el segundo
día en el Llantén, tercer día en el Escancel, A y B a partir del cuarto día; la fase de
maduración y remodelación el Llantén en el cuarto ( 30 µL), quinto ( 20 µL) y sexto
día (10) mientras que el Escancel a partir del quinto (30 µL), sexto (20 µL) y
séptimo día (10 µL ) y por último el grupo A como cicatrización natural en el sexto
día y la herida con 0.25 % β- Sitosterol en el séptimo día. Además todos los
grupos hasta el séptimo día tenían formado la costra disminuyendo notablemente
el tamaño de la herida.
56
DISCUSIÓN
En el presente estudio de investigación se realizó el ensayo preclínico
mediante la inducción de heridas en piel en diferentes grupos de animales y
posteriormente la aplicación de tratamientos como fue: 0.25 % β–Sitosterol,
extractos de Escancel y Llantén; durante 7 días (Tabla VI).Mediante el transcurso
de los días de experimentación se obtuvieron resultados reproducibles y
comparables entre cada grupo de tratamiento de esta manera se detalla lo
siguiente:
PRIMER DÍA: todos los grupos presentaron un 100 % de humedad e
inflamación, debido a que los vasos sanguíneos y membranas celulares liberaron
factores inflamatorios (tromboxanos y prostaglandinas) posteriormente ocurrió la
vasodilatación y vasoconstricción en la cual la histamina hace que los vasos
sanguíneos que se encuentran en la herida se vuelva edematoso es decir
permitiendo la acumulación de líquido o humedad en el espacio de la herida, por
tal motivo no hubo presencia de costra ni disminución en el tamaño de herida
además la presencia de monocitos se transforman en macrófagos los mismos que
permiten que la herida causada este limpia de bacterias y residuos (Tabla XXI;
Tabla XXVIII).
SEGUNDO DÍA: solo los grupos de Llantén (C, D, E) presentaron
formación de costra a diferencia de los demás grupos de estudio, esto se debe
porque se da el proceso de angiogénesis donde existe la proliferación de
fibroblastos los cuales se dirigen a la herida de tal manera formando la matriz de
colágeno para posteriormente dar paso a la formación del tejido granular aunque
en los demás grupos aún existía humedad (presencia de histaminas – tejido
edematoso), inflamación (factores inflamatorios : tromboxanos y prostaglandinas)
(Tabla XXII; Tabla XXVIII).
57
TERCER DÍA: hubo poca producción de histaminas debido que solo
observó bajo % de humedad en el Grupo A, B y F, el grupo de Llantén (C, D, E)
continuaba con la formación del tejido granular a diferencia de los demás grupos,
mientras que el grupo A, B ,C, F y G presentaban inflamación (factores
inflamatorios: tromboxanos y prostaglandinas), solo el grupo de Llantén (D, E)
disminuyó 0,1 cm en el tamaño de la herida con respecto a los demás grupo (Tabla
XXIII; Tabla XXVIII).
CUARTO DÍA: aún se observó la producción de histaminas y factores
inflamatorios en los grupos A y B, el grupo de Llantén (E) existe un 100% de
formación de costra este ocurre cuando existe una igualdad entre los niveles de
producción y a su vez la degradación de colágeno permitiendo la reparación del
tejido (herida) mientras que el grupo de Escancel (F, G, H) no presentaron similitud
con el grupo de Llantén, conforme a este día el tamaño de las heridas del grupo
de Llantén fueron disminuyendo satisfactoriamente a diferencia de los demás
grupos de tratamiento (Tabla XXIV; Tabla XXVIII).
QUINTO DÍA: ningún grupo de tratamiento presentó humedad en las
heridas realizadas, pero los grupos de Llantén (D, E) y Escancel (H) se observó
100% en la formación de costra y el tamaño de las heridas disminuyeron
considerablemente de 0.5 cm a 0,3 cm estos observaciones realizadas se
presenta debido a la ausencia de histaminas y de factores inflamatorios y a su vez
a la formación considerable de tejido granular a diferencia del grupo A y B (Tabla
XXV; Tabla XXVIII).
SEXTO DÍA: no se observó humedad e inflamación aunque en el grupo B
a un prevalece un 10 % de inflamación, los grupos de Llantén y Escancel hay
totalmente la formación de costra y disminución del tamaño de las heridas pero el
grupo D (Llantén 0.00576mg/20 µL) y grupo E (Llantén 0.00864 mg/30 µL) tiene
menor diámetro en la herida 0,2 cm y el grupo H (Escancel 0.00669mg /30 µL)
también 0,2 cm , la disminución considerable de las heridas se presenta cuando
58
los fibroblastos se convierten en miofibroblastos y las heridas comienzan a
contraerse totalmente (Tabla XXVI; Tabla XXVIII).
SEPTIMO DÍA: ausencia de humedad e inflamación y todos los grupos de
tratamiento presentan formación de costra totalmente y disminución del tamaño
de las heridas, cabe resaltar que el grupo E (Llantén 0.00864 mg/30 µL) presentó
menor diámetro de la herida de 0,1 cm y el grupo H (Escancel 0.00669mg /30 µL)
0,2 cm; mientras que los demás grupos 0,3 cm, al ocurrir todo lo observado en el
ensayo de preclínico se debe cuando los miofibroblastos tienen cierta atracción
por la fibronectina y conectada con la fibrina alcanzan los bordes de la herida luego
al contraerse la actina principalmente en los miofibroblastos los bordes donde
ocurrió la herida se junta y existe una igualdad entre producción, degradación de
colágeno formando nuevos tejidos y reparando totalmente la herida (Tabla XXVII;
Tabla XXVIII).
59
CAPITULO IV
CONCLUSIONES Y RECOMEDACIONES
CONCLUSIONES
De los hallazgos a partir del tamizaje fitoquímico se encontró metabolitos
secundarios como taninos, alcaloides, saponinas. Los resultados obtenidos de los
parámetros de control de calidad tanto a las hojas secas, pulverizadas y a los
extractos hidroalcohólicos fueron de total aceptación, están dentro de los rangos
establecidos según la USP 28. Se cuantificó la presencia de flavonoides
presentes en las especies vegetales de esta manera el Llantén (895,07 mg/100 g
hoja) presenta mayor cantidad de flavonoides a diferencia del Escancel (462,42
mg/100 g hoja).
Se determinó la acción farmacológica cicatrizante, de esta manera se
observó que el extracto de Llantén presenta mayor rapidez en el proceso de
cicatrización; mientras que el extracto de Escancel tomó más tiempo
conjuntamente con los demás tratamientos.
Se estableció el tiempo de cicatrización mediante la comparación de los
resultados obtenidos en el ensayo preclínico, de esta manera se concluye que el
extracto de Llantén tiene mayor efecto cicatrizante porque a partir del segundo día
inició el proceso de cicatrización, mientras que los demás tratamientos no
presentaron cambio alguno, no obstante en el cuarto día el Llantén (0.00864
mg/30 µL) tenía 100 % y el Escancel entre 37 – 85 % de formación de costra,
pero los grupos de control tanto positivo (herida) y negativo (0.25 % β- Sitosterol),
leve formación de costra, en el quinto día el Escancel (0.00669mg /30 µL)
presentaba 100 % de formación de costra a diferencia del control positivo y
negativo; el sexto, séptimo día de experimentación todos los grupos presentaron
totalmente el proceso de cicatrización 100 % presencia de costra, 0 % humedad
e inflamación, y disminución parcial de la herida.
60
RECOMENDACIONES
Se recomienda realizar estudios con respecto a la cuantificación y
determinación de flavonoides es decir saber específicamente los tipos de
flavonoides que están presentes en la composición fitoquímica de las plantas de
Escancel (Aerva sanguinolenta L) y Llantén (Plantago major L).
Elaborar productos farmacéuticos a partir de las plantas mencionadas del
presente estudio de investigación, aplicando las BPM (Buenas Prácticas de
Manufactura) de esta manera se garantizará eficacia y seguridad a los pacientes
para su consumo.
Realizar comparaciones de las diferentes actividades farmacológicas de
las plantas de Escancel y Llantén de esta manera se pretenderá conocer el
comportamiento de cada planta en beneficio de la salud en las personas.
Continuar con estudios referentes de las variedades de especies de
Escancel y Llantén en conjunto con la ubicación geografía, porque pueden
presentar diferencias significativas con respecto a las concentraciones de los
metabolitos secundarios.
Hacer ensayos sobre los estudios histopatológicos para conocimiento de
las diferentes fases en el proceso de cicatrización.
61
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66
ANEXOS
RECOLECCION DE LAS HOJAS DE ESCANCEL Y LLANTÉN
SECADO DE LAS HOJAS DE LAS ESPECIES VEGETALES
ESCANCEL LLANTÉN
72
CONTROL DE CALIDAD
HOJAS PULVERIZADAS DE LAS ESPECIES VEGETALES (DROGA CRUDA)
HUMEDAD
SUSTANCIAS SOLUBLES
79
ESTUDIO MACROMORFOLÓGICO DE LAS ESPECIES VEGETALES
LLANTEN
Hoja
Inflorescencia – fruto
Raíz
Tallo
ESCANCEL
Hoja
Flores
Raíz
Tallo
89
DOCUMENTO DE LAS IDENTIFICACION Y DESCRIPCIÓN TAXONOMICA
POR EL BOTÁNICO XAVIER CORNEJO – HERBARIO GUAY
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