1. En estas diapositivas dedicadas a las tcnicas histolgicas
sedescribirn los procesos experimentales necesarios paraobtener
secciones teidas y listas para observar al microscopiopartiendo de
tejidos vivos extrados de un animal o de unaplanta. Por tanto,
dedicaremos espacios a la obtencin,fijacin, inclusin, corte y
tincin de los tejidos.
2. Denominamosprocesohistolgico a unaserie de mtodos ytcnicas
utilizadospara poderestudiar lascaractersticasmorfolgicas
ymoleculares de lostejidos.
3. El proceso histolgico comienza con la obtencin del
tejidoobjeto de estudio. En el caso de los tejidos
vegetalesdirectamente se toman muestras de los distintos rganosque
componen el cuerpo de la planta, mientras que para lostejidos
animales podemos optar por dos opciones: coger unaporcin del tejido
u rgano y procesarla o procesar primeroel animal completo y luego
extraer la muestra que nosinterese.
4. Todos los tejidos, cuando seextraen de un organismo o
biencuando el organismo en el queestn muere, sufren dos tipos
deprocesos degradativos: autolisis yputrefaccin. Adems,
elprocesamiento histolgicoposterior del tejido supone unametodologa
que puede degradarlas estructuras tisulares. Fijar un tejido es
preservar suscaractersticas morfolgicas ymoleculares lo ms
parecidasposibles a las que posea en suestado vivo.Formaldehido,
uno de losfijadores mas utilizados enel procesamiento
demuestras.
5. Una vez fijado el tejido tenemos que procesarlo para su
observacin conel microscopio. Ello implica hacer secciones para
teirlas primero yposteriormente observarlas. La inclusin es el
mtodo ms comn de endurecer el tejido y consiste eninfiltrar la
muestra con sustancias lquidas que tras un proceso depolimerizacin
o enfriamiento se solidifican, sin afectar a lascaractersticas del
tejido. Con ello se consigue obtener cortes del ordende m a nm
6. La inclusin conparafina es la tcnicamas utilizada En la
imagen seobserva un protocolode trabajo desde lafijacin hasta
lacreacin de un bloquede parafina
7. En el microscopio ptico soloes posible observar
seccionesdelgadas de tejido, es poreso que es necesario
cortarnuestro tejido. Esto se hace a travs delmicrtomo,
aparatomecnico que permite cortarsecciones de 4um de grosorMicrtomo
rotatoriode Minot, masutilizado para cortesde parafina.
8. Los tejidos animales son en su granmayora incoloros,
exceptoaquellos que poseen algn tipo depigmento como la sangre o
lamelanina de la epidermis. Es por esto que se debi recurrir aluso
de colorantes naturales ytextiles para teir los tejidos yrealizar
una observacin con masdetalle. Entre los colorantes mas usados
seencuentra la Hematoxilina Eosina, la que permite obtener
unacoloracin de las clulas de colorrosa y de los ncleos de
colorviolceo.Seccin de un glomrulo de un rin demamfero obtenida a
partir de una inclusinen parafina y teido con
hematoxilina-eosina.Los ncleos aparecen de color
violceo(hemtoxilina) y el citoplasma de color rosado(eosina).
Imagen inferior modificada.
9. Procedimientoestndar de tincincon HematoxilinaEosina
10. El ltimo paso de todoproceso histolgico es laobservacin
delresultado producido porla tcnica realizada. Esta, se realiza a
travsdel microscopio, aparatoque permite aumentar laresolucin de
lasestructuras masdiminutasPartes de un microscopiosimple
11. Imagen obtenida a partir de una seccin de leon, la cual fue
obtenida a travsde una inclusin en parafina y tincin de
hematoxilina eosina. Imagen de laderecha se encuentra
modificada
12. La informacion e imgenes presentadasfueron obtenida del
sitiohttp://webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html, elcual presenta una
licencia de tipo:
