ProcariotasLa replicacin empieza en un nico punto tambin llamado origen de replicacin2 horquillas de replicacinFragmentos de Okazaki poseen entre 1000 y 2000 nucleotidosPor ser ADN circular no se produce acortamiento en los extremosNo se necesita desempaquetamiento complejo para replicacion

EucariotasLa replicacin inicia desde centenares o miles de sitios Muchas horquillas de replicacionFragmentos de Okazaki poseen entre 100 y 200 nucleotidosPor ser ADN lineal se acorta el extremo de las hebras en cada ciclo de replicacin al eliminarse el ARN cebador terminalRequiere desempaquetamiento para su replicacin

Principios de la PCR La PCR se basa en el mecanismo de la replicacin in vivo del ADN: el ADN bicatenario se desenrolla y pasa a ADN monocatenario, se duplica y se vuelve a enrollar. Esta tcnica consiste en ciclos repetitivos de: desnaturalizacin del ADN por fusin a temperatura elevada, a fin de convertir el ADN bicatenario en ADN monocatenario; unin (anillamiento) de dos oligonucletidos, utilizados como cebadores, al ADN diana; extensin de la cadena de ADN por adicin de nucletidos a partir de los cebadores utilizando ADN polimerasa como catalizador, en presencia de iones Mg2+. Los oligonucletidos consisten normalmente en secuencias relativamente cortas, que son diferentes entre s y complementarias de los sitios de reconocimiento que flanquean el segmento de ADN diana que debe amplificarse. Las fases de desnaturalizacin del ADN molde, anillamiento del cebador y extensin del cebador constituyen un ciclo del mtodo de amplificacin por PCR. La figura 5 ilustra las tres fases principales del proceso de amplificacin por PCR.