Preparacin y Procesamiento
de Componentes SanguneosJonathan Strohm
Director del Centro N. Londres
Qu cubrimos Produccin de componentes sanguneos Tipos de bolsas Especificaciones y consideraciones del
procesamiento Conceptos y prcticas de monitoreo de calidad
y qu no cubrimos
Usos de los componentes sanguneosvCJD
Producto Inicial
Volumen (405-495ml) Conc.de Hb Seguridad Velocidad Temperatura - (no menor a
20oC para produccin de plaquetas)
Resumen Procesamiento
Leucodeplecin Retiro de los leucocitos de todos los componentes
clnicos (excepto granulocitos clnicos!) Generalmente se hace a travs de fitracin En el RU un componente leucodepletado contiene
Tipos de Bolsas de Sangre
Filtro de Sangre Total (WBF)
Gbulos rojos Crioprecipitado PFF
Filtracin antes del procesamiento
Top and Bottom (TAB)
Buffy coat plaquetas Glbulos rojos (PFF)
Filtracin de productos terminados
Bolsa con filtro de sangre total
XXXX
X
XXXXX XXXXXXXXXX
Collection bag SAGM
Plasma
Bolsa Top and Bottom (TAB) Collection bag
SAGMPlasma
CentrifugacinSepara:Los elementos celulares del plasmaTipos celulares de acuerdo al tamao y densidadTemperatura controlada
SeparacinSe requieren programas desarrollados cuidadosamente Se depositan los glbulos rojos y blancosSe dejan las plaquetas suspendidas en el plasma
Glbulos Rojos
Suspendidos en SAGM aditiva Salino, Adenina, Glucosa, Manitol
Vida til de 35 das Volumen: 220 - 340ml Hematocrito: 0.50 - 0.70 Rcto blancos: 40g
1. Plasma congelado2. Produccin crioprecipitado3. PFF & pool Cro
Vida til 2 aos congelados
Plasma para fraccionamientoOriginalmente enviado a fbricaPooleado y procesado, para fabricar:
Concentrado de factores de coagulacinInmunoglobulinasAlbmina
Actualmente plasma del RU se descarta debido al riesgopotencial de vCJD en los productos pooleados
La planta de fraccionamiento procesaplasma de EEUU
Pooling4 BCs + 1 plasma de un donante hombre
Del mismo grupo ABORh y CMV slo neg si todos negSe genera un nmero nico de pool
Conexin estrilUne tubuladuras de manera asptica
Hoja de cobre desechableSe crea un tren
PoolingLos Buffy coat se vacian a una bolsaSe usa plasma para enjuagar a travs de los buffy y maximizar la recuperacin
Plaquetas de AfresisDosis doble o tripleLeucodepletadas durante coleccinUtil para pediatra y HLA
Especificacin
Volumen: 150 - 340ml Contenido de plaquetas: >240x109 por
dosis pH: 6.4 - 7.4 (actualmente medido al final
de la vida til) Recuento de leucocitos:
Irradiacin GammaProductos irradiados en stockVida til de los glbulos rojos reducida a 14 das, las plaquetas se mantienen 5 dasLa irradiacin es apoyada a travs de PulseSe irradian aproximadamente 20000 componentes al mes en Colindale
Inactivacin de patgenos
Actualmente slo utilizada para PFF El agente activo es Azul de Metileno Se est usando PFF congelado de Austria Centralizada en Colindale y Manchester
Cmo funciona?
85g de AM (hidrochlorid, anhidr.)
Entrega una concentracin de 1M en un plasma dede volumen promedio
Sistema seco para facilitar el almacenamiento
El sistema de Procesamiento
Filtracin de Priones Total de casos de vCJD en RU
hasta Marzo 2010Primarios = 169 Secundarios (transfusin) = 3
Rendimiento anual
1.9 millones de donaciones de sangre total procesadas en: 1.8 millones de glbulos rojos 50 000 glbulos rojos neonatales
320 000 PFF 7 000 PFF neonatales
75 000 crioprecipitados
Produccin de plaquetas
750 000 buffy coats convertidos en 155000 pools
100 000 dosis de plaquetas de afresis 10 000 componentes plaquetarios
neonatales
Monitoreo de CalidadMnimo 1% de los productos son monitoreadosLa mayora testeados sin destruirlosRepartidos durante el mes
VolumenHematocritoRecuento de plaquetaspHConc. de FVIII & fibringeno
Monitoreo de Procesos Estadsticos En este momento slo usado para LDMonitorea el proceso, no el productoSistema de alerta tempranaCitometra de flujo usada para recuento de leucocitos
Qu es un producto especializado?
Es un trmino no estandarizado que identifica principalmente productos no relacionados
De baja demanda No se mantienen en stock Con frecuencia tienen una vida til corta Implican un procesamiento extra significativo
Productos Especializados
Glbulos rojos lavados en salino Plaquetas suspendidas en PAS (solucin
aditiva ) Glbulos Rojos
Congelados/Descongelados
Glbulos Rojos Lavados en Salino Se agrega 0.9% de salino a los glbulos rojos
(conexin estril) Centrifugacin Se retira sobrenadante Repetir proceso (2 bolsa de lavado) Dejar ~2cm de sobrenadante en el producto
final para corregir Hcto Tomar muestra para protenas totales (menos
de 0.5g/bolsa) Expiracin a las 24 horas desde el comienzo del
proceso.
El futuro
Procesamiento automatizado de clulas lavadas usando flujo continuo
Resuspensin en SAGM proporcionando 14 das de vida til
Producto en stock
Plaquetas en PAS
Transferencia estril a bolsa de plaquetas Centrifugar Remover todo el plasma con cuidado Agregar PAS (llamado previamente PSM) Dejar reposar durante 30 minutos para que
las plaquetas se desagreguen Expiracin en 24 horas desde el comienzo
del proceso
Por qu se requieren estos productos ?
Transfusin de receptores IgA deficientes con anticuerpos anti-IgA para prevenir reacciones anafilcticas (cuando no hay disponibles unidades IgA deficientes).
Transfusin de otros pacientes con reacciones alrgicas severas a los constituyentes del plasma.
Glbulos Rojos congelados
Glbulos rojos congelados dentro de los 5 primeros das despus de la colecta
Si los gbulos rojos son mayores de 5 das, pueden ser rejuvenecidos para restaurar los niveles de ATP y 2.3 DPG
Centrifugar para remover el exceso de plasma Anteriormente en sistema abierto
Haemonetics ACP 215
Adicin controlada de glicerol.
Sistema cerrado que usa filtros bacterianos y equipo de conexin estril.
Ocupa poco espacio
Las unidades se llenan al vaco y se ponen en un liner de cartn
Congelados a -80oC Muy frgiles cuando estn congelados
Una vez congelados se les asigna una posicin en un congelador para su futuro retiro
almacenamiento congelado por 10 aos (al menos)
Para hacer la compatibilidad se pueden usar muestras congeladas de las unidades consideradas aptas,
Las unidades se retiran del congelador (-80oC) Se descongelan en el bao termorregulado (y
se entibian) Se deglicerolizan y lavan usando ACP215
Descongelamiento
Descongelamiento Se utiliza un kit autnomo
para el procesamiento. Se usa salino 12% para
retirar lentamente el glicerol de los glbulos rojos.
Concentracin del remanente con salino al 0.9%
Lavar con 2l salino Resuspender en SAGM
Se toman muestras para Recuento globular y Hb sobrenadante
Vida til hasta 7 das debido al SAGM 20% de prdida de glbulos rojos durante el
proceso (principalmente hemlisis) Remocin casi completa de leucocitos,
plaquetas & plasma
Usos de los glbulos rojos congelados/descongelados
Mantencin de un banco de fenotipos raros (U-, Bombay etc.)
Tambin para fenotipos menos comunes con mltiples antgenos negativos
Autlogo (menos probable actualmente) Militar