Guías de Instrumentación Química I

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PRACTICA No 4

DETERMINACION DE FÓSFORO POR ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE

1. OBJETIVOS

Determinar la cantidad de fósforo presente en una muestra problema por el método de adiciónestándar.

2. FUNDAMENTO

La curva de calibración y adición estándar son dos procedimientos muy utilizados en el análisisinstrumental. Esta última se utiliza en casos que haya interferencia de la matriz en las medidas, yrequiere además que las medidas obtenidas se encuentren en el rango lineal. Este método tiene ladesventaja que consume mucho reactivo y tiempo por cada muestra, por lo que en general en ellaboratorio se adecua el procedimiento para utilizar la curva de calibración.

En la presente práctica determinaremos fósforo en muestra de alimentos. La determinaciónespectrofotométrica de fósforo en diversos tipos de muestras puede efectuarse mediante elreactivo molibdato de amonio. Las reacciones que se producen son las siguientes:

7 PO43- + 12 (NH4)6Mo7O24 + 36 H2O 7 (NH4)3PO4.12 MoO3 + 51 NH4

+ + 72 OH-

(NH4)3PO4.12 MoO3 + agente reductor Complejo de Mo (II)

El complejo es azul y absorbe a 840 nm obedeciendo la ley de Lambert – Beer

3. INSTRUMENTOS, MATERIALES Y REACTIVOS

- Espectrofotómetro UV-visible con celdas de vidrio de 1 cm.- Baño maría.- Material de vidrio de laboratorio (lavar los materiales con ácido diluido y NO lavar con

detergente).- 06 erlenmeyers de 60 mL- 02 fiola de 200 mL- 02 fiolas de 100 mL- 08 fiolas de 25 mL- 03 vasos de 50 mL- 01 bureta de 25 mL- 01 probeta de 25 mL- 01 pipeta volumétrica de 2 mL- 01 pipeta volumétrica de 5 mL- 01 piceta de 500 mL- 01 pinza para bureta- 01 bagueta

- Ácido sulfúrico 5N (50 mL).- Solución de molibdato de amonio (NH4)6Mo7O24·4H2O 1% en acido sulfúrico 5N (25 mL).- Solución de clorhidrato de hidracina (NH2)2.2HCl 0.2% (25 mL).- Solución patrón de fosfato 200 g/mL a partir de KH2PO4 (200 mL).- Solución diluida de fosfatos 10 g/mL (100 mL) a partir de la solución patrón.- Mezcla de reactivos, mezclar 20 mL de solución de molibdato con 2 mL de hidracina en una

fiola de 200 mL (esta solución se prepara al instante).

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4. PROCEDIMIENTO

4.1 Determinación de la Longitud de Onda de Máxima Absorción

Medir 3 mL de la solución estándar de fosfatos en un erlenmeyer de 60 mL, llevar el volumenaproximado a 8 mL con agua destilada. Agregar 15 mL de la mezcla de reactivos. Calentar en unbaño Maria, por un tiempo de 20 minutos hasta que se desarrolle completamente el color azul,dejar enfriar y transferir las soluciones a fiolas de 25 mL. Completar volumen con agua destilada.Medir y registrar su absorbancia con respecto al blanco de reactivos en el rango de longitud deonda comprendido entre 500 y 900 nm.

4.2 Muestra Problema

En 4 erlenmeyers de 60 mL, agregar a cada uno 3 mL de la muestra problema y 0, 1, 2 y 3 mL dela solución diluida de fosfatos, completar a 8 mL y seguir el mismo procedimiento anterior como enla determinación del max.

Leer las absorbancias de cada una de las muestras contra el blanco de reactivos a la longitud deonda de máxima absorción.

5. TAREA

Determinar la longitud de onda de máxima absorbancia (max) y la absortividad molar Graficar lo siguiente:

Absorbancia versus ug de P agregado Absorbancia versus ppm de P agregadoCalcular la concentración de P en la muestra original.

Determinar los siguientes datos estadísticos: coeficiente de correlación r, la recta de regresiónde y sobre x.

Calcular la desviación estándar de la muestra problema debido a los errores por uso de lacurva de calibración y sus límites de confianza

6. CUESTIONARIO

a. Investigar otros métodos espectrofotométricos de determinación de P.b. Porqué es importante el P en la dieta humana?c. La concentración de plata en una muestra de deshechos fotográfica fue determinada por

espectrofotometría Visible por el método de adiciones estándar. Se obtuvieron los siguientesresultados:

Ag añadida: g por mL desolución de muestra original

0 5 10 15 20 25 30

Absorbancia 0.32 0.41 0.52 0.60 0.70 0.77 0.89

Determinar la concentración de plata en la muestra, y obtener los límites de confianza al 95 %para esta concentración.