V. ESQUEMA DE TRABAJO
Paso 1: Desinfectar el área de trabajo, con la finalidad de no agregar carga bacteriana procedente
del ambiente o de nosotros mismos, esto reduce el error que se comete al realizar esta técnica.
Así solo contabilizaremos los microrganismo existentes en la muestra. La desinfección debe
hacerse con un mechero y alcohol yodado.
Paso 2:Al realizarlas diluciones se debe tener en cuenta las características que presente la
muestra. En este caso se realizaron dos dilucionesAcá se procede a tomar 1 ml de muestra con la
pipeta y colocar en 1º lugar a uno de los dos tubos que contienen a la solución salina fisiológica
para obtener la 1º solución 10-1 y de donde después se a de tomar 1 ml par ser agregado en 2º
lugar al segundo tubo para obtener la 2º solución10-2:
Paso 3.Aquí se tomo como 1 ml de cada solución y se coloco en una placa Petri que a su vez contenía de 12 a 15 ml de agar. En este caso se graficado como si se hubiese realizado en dos placas pero en realidad
solo se realizo una en la primera fecha del experimento:
Paso 4: Como paso final se coloco a las placas Petri en una estufa a 37º C x 48 horas para que incube y
así puedan formar las colonias
VI. RESULTADOS
Dilución 10-1 = 68 u. f. c X 10 = 680
68x10 u. f. c /ml de muestra
VII. COMENTARIOS
En la muestra original no se pudo realizar el recuento debido a que esta presentaba mas
de 300 u. f. c. y en la dilución 10-2 tampoco porque presentaba menos de 30 u. f. c. y
sabemos que el rango estándar va entre 30 y 300 u. f. c.
El recuento en placa solo nos permite contabilizar los microrganismos que se desarrollan
a las condiciones del medio y factores externos en este caso solo se desarrollaron
mesofilos.
Si bien es cierto que el recuento en placas te da un resultado confiable referente al
conteo, tiene sus deficiencias ya que se puede cometer error durante el conteo, al tener
resultados poco visibles o en algunos casos superpuestos contados como una sola unidad.
Colombia: Se permite un maximo de 100 colonias por cm3
Perú: Se permite un maximo de 100 colonias por cm3
Según nuestrios resultado tenemos 680 u. f. c. por cm3 eso nos dice que el agua a superado
los limites permitidos hasta casi 7 veces.
VIII. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el fundamento del método de recuento en placa?
La técnica de conteo por recuento en placa permite contar la presencia de microrganismos en una
muestra, el desarrollo de los microrganismos se dará solo si nuestro medio y factores externos
son las adecuadas para el desarrollo de estos microrganismos.
La finalidad es determinar que tan contaminada esta nuestra muestra.
2. Porque, para el recuento se bacterias viables, se escogen las placan que han desarrollado
entre 30 y 300 u.f.c?
Por razones estadísticas. Para obtener resultados estadísticamentesignificativos. Para que ello sea
posible, en el momento de la siembra debetenerse una idea aproximada del número de bacterias
presentes en la muestra a finde realizar las diluciones adecuadas que dependen de las
características que presente la muestra, turbidez, olor, etc. .
Y porque en este rango de crecimiento significa que los microrganismos presentes tuvieron las
mismas posibilidades de desarrollarse.
3. ¿Cuales son las ventajas y desventajas de las siembras por incorporación y superficie?
INCORPORACION SUPERFICIE
Mayor cantidad de muestra a procesar Menor cantidad de muestra a procesar.
Menor error Mayor error
Mejor aprovechamiento de nutrientes por
parte de los microrganismos.
Peor aprovechamiento de nutrientes por
parte de los microrganismos
Dificultad para subcultivar colonias. Facilidad para subcultivar colonias.
Difícil visualización de colonias. Fácil visualización.
La temperatura del agar puede afectar a
ciertos m.o.
No se afectan las células termosensibles
Se desarrollan microaerofílicos. En aerobiosis solo crecen aerobios y
anaerobios facultativos.
4. ¿Por qué se utiliza el termino “unidades formadoras de colonias”?
Estetérmino se utiliza pues las colonias pueden originarse tanto de la célula
como deun grupo de células. Además en las colonias son formadas a partir
de unmicroorganismo y se multiplican tan rápido hasta formar una colonia
5. ¿Por qué el método de recuento en placa, no nos permite determinar el total de la
población viable de bacterias presentes en nuestra muestra de alimentos?
Un recuento de viables mide sólo las células vivas de una población,es decir,
aquellas capaces de reproducirse (viable significa "que puede vivir"),bajo las
condiciones del medio. Se basa en el principio de que una única célulaviable
originará una colonia visible, cuando se siembre en una placa de agar; porlo
tanto no será posible la determinación del total de viables, debido a que en
unalimento existe una variada gama de microorganismos con
requerimientos nutritivosy ambientales diferentes, si alguno de ellos posee
las condiciones adecuadas parasu desarrollo, otro de ellos puede no contar
con estas.
ANEXOS
Figura 1. Microrganismos presentes en la muestra original
Figura 2.Microorganismos presentes en la Dilucion al 10-1
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Normas oficiales para la calidad de Agua en colombia. Disponible en:http://www.imta.gob.mx/cotennser/images/docs/NOI/Normas_oficiales_para_la_calidad_del_agua_colombia.pdf
Normas de calidad para el agua potable en Perú. Disponible en:http://derecho.itam.mx/cursos/materiales/cursos/CURSO%20DE%20ESPECIALIZACION/matcurso/modulo%202/segundaparte/Anexo%204-%20Anexo%20C%20del%20Contrato%20de%20Concesion.pdf
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