Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
ESTUDIO Y DESCRIPCIÓN DE LAS BACTERIAS Y HONGOS COMUNES DE ESTUDIO EN EL
LABORATORIO Y MUESTRAS DE ORIGEN AMBIENTAL.
La descripción de la morfología y conformación tanto microscópica como macroscópica de los
aislamientos y cepas de estudio, es un primer paso en el estudio y caracterización de los
microrganismos, conducente a su clasificación y profundización en sus fisiología y propiedades
susceptibles de ser valoradas o aplicadas en diferentes casos.
A continuación vamos a describir algunas pautas para este estudio:
1. Descripción Macroscópica de las Colonias
Se puede realizar a simple vista, como también utilizando una lupa o un estereoscopio. Se debe
realizar sobre una superficie de color blanco y pareja, con luz suficiente. Se anota todas las
características relevantes y particulares: color, forma, elevación, bordes, diámetro de la colonia,
textura, presencia de mucosidad, manchas o puntos, olor ¿?, iridiscencia, presencia de pigmentos
difundidos en el medio. Algunas formas características de las colonias tanto bacterianas, de
levaduras y hongos:
Figura No. 1. Elementos morfológicos utilizados para la descripción de colonias: forma,
elevación y márgenes
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
1.1. Descripción de la morfología de las colonias de Bacterias y Levaduras. Una colonia es una
agrupación de bacterias formada a partir de la reproducción de una Unidad Formadora de Colonia
(UFC) sobre un medio sólido; aunque varía de tamaño generalmente es visible a simple vista. Una
UFC puede ser un solo microorganismo o bien un grupo de microorganismos de una misma
especie como en el caso de bacterias que tienen tendencia a permanecer unidas como los
estafilococos o los estreptococos. Las colonias bacterianas tienen una medida, forma, textura y en
algunos casos color característicos, que aunque puede variar de acuerdo al medio en que se
encuentren, es constante bajo condiciones controladas y depende de la especie bacteriana que la
forme. Debido a que las características de las colonias ocurren en varios grados y combinaciones
dependiendo de las bacterias y son a menudo muy uniformes, sirven para identificar bacterias en
cultivos mezclados. Sin embargo, además de éstas características es necesario estudiar su
morfología microscópica, fisiología, propiedades inmunológicas y hasta conformación genética,
para lograr una clasificación adecuada y precisa de las cepas aisladas.
En el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la sustancia capsular en
aquellas bacterias con cápsula muy grande.
Medida o diámetro de las colonias. ésta característica es bastante constante dentro de las
especies y puede ir desde colonias muy diminutas hasta un diámetro de varios milímetros.
Forma. Está determinada por su borde y su espesor (Ver Figura No. 1) se pueden observar
varias formas, elevaciones y bordes de colonias bacterianas.
Consistencia y textura. Las colonias bacterianas pueden tener una consistencia variable,
desde seca y frágil a grasienta y cremosa o viscosa y pegajosa. Esta característica sólo se
aprecia cuando tocamos las colonias con el asa de siembra. Podremos observar colonias
"duras" que se deslizan fácilmente por la superficie del medio, siendo difícil manipularlas
con el asa. A menudo estas colonias se fragmentan al intentar cogerlas.
Otras colonias tienen apariencia cremosa, con superficie brillante generalmente y fáciles
de manipular con el asa. La mayoría de las colonias tienes consistencia mantecosa, siendo
muy fácil obtener pequeñas porciones de la misma, que quedan bien adheridas al asa de
siembra.
En algunas ocasiones las colonias son extremadamente viscosas y tienden a formar
filamentos mucosos cuando intentamos retirarlas con el asa.
La superficie puede ser uniforme y lisa, rugosa o estriada con muescas concéntricas o
quebradas. Al examinar la colonia con luz transmitida puede aparecer con textura granular
o amorfa.
Pigmentación. Esta característica es muy común en las bacterias saprófitas en las que las
colonias aparecen rojas, anaranjadas, amarillas, etc. Se especifica si el pigmento producido
es difusible o no.
Luz Transmitida: Al observar a través de la colonia, se determina si es Opaca (no permite
el paso de luz), Traslúcida (deja pasar la luz sin permitir la completa visibilidad de los
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
objetos observados a través de la colonia o Transparente (deja pasar la luz permitiendo
ver claramente los objetos observados a través de la colonia.
Luz Reflejada: Al observar la superficie de la colonia se determina si es opaca o brillante
De los microorganismos patógenos uno de los pigmentados más importantes es Staphylococcus
aureus que tiene un color amarillo dorado. El pigmento no se aprecia en las células individuales a
que se debe a gránulos intracelulares muy pequeños para verse con luz transmitida.
Para optimizar espacio, materiales y tiempo, se puede también realizar ciertas observaciones y
determinativas con las cepas ya aisladas transferidas a medios de cultivos en tubos líquidos y
solidos/semi-solidos.
Figura No. 2. Observación de crecimiento en Tubos con Agar inclinado
Ramificado Puntiforme Puntiaguda Uniforme Rizoide Extendido
Figura No.3. Tipos de crecimiento en tubos con medio líquido
Sin
crecimiento
Turbio Floculación Película Anillo Precipitació
n
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Figura No.4. Tipos de motilidad en medio semi-solido
No motil Motilidad leve Motil
A menos que se tenga un cultivo fresco de 24 hrs directo de la incubadora, no se verá muchos
tubos con turbidez. Esto es porque las bacterias tienden a depositarse o a precipitarse cuando se
refrigeran por varios días. Después de fijarse si se formó un anillo o una película en la superficie
del tubo, tomar los tubos y observar si se presenta el fenómeno de precipitación. Una vez que se
completó este paso, mezclar las bacterias agitando, dando pequeños golpes, rodando el tubo en la
palma de la mano. No agitar el tubo de manera que la tapa se contamine con el caldo. Una vez
mezclado, se puede observar turbidez, floculación, o una apariencia de hilo dentro del caldo.
1.2. Morfología microscópica de las Bacterias. Las diferencias en el tamaño, forma y ciertos
detalles estructurales son características de los principales grupos de bacterias, y proporcionan las
bases fundamentales para su estudio sistemático e identificación. De la misma forma, las colonias
bacterianas, compuestas por masas de células individuales, tienen características de tamaño,
consistencia, textura y color que poseen un valor sistemático, pero no tienen la importancia
fundamental de la morfología celular.
• Tamaño de las células bacterianas. El tamaño de las células bacterianas se mide
habitualmente en micrómetros(equivalente a una millonésima parte de un metro),
oscilando entre los 1 x 10 µm de los bacilos grandes como Bacillus anthracis, y los 0,2 x 0,7
µm de Francisella tularensis.
Existen ligeras variaciones de tamaño de las células bacterianas dentro de algunas
especies, siendo mayores las fluctuaciones entre las formas bacilares que entre las formas
esféricas. Los límites de tamaño entre las células bacterianas y los virus no tienen una
frontera bien definida, pues curiosamente existen virus mas grandes que ciertas bacterias.
• Formas de las bacterias. Desde el punto de vista microscópico, la diferencia mas
importante entre las bacterias es su forma, existiendo tres tipos morfológicos claramente
distinguibles:
• Formas esféricas o cocos: Las bacterias esféricas son las mas homogéneas con respecto al
tamaño, presentando un diámetro medio de 0,6 a 1,0 µm. La forma no siempre es
exactamente esférica, observándose como las más comunes las siguientes variaciones:
Formas lanceoladas, formas en grano de café y formas cocobacilares (achatadas)
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Las diferencias entre los subtipos de cocos se basan en los agrupamientos celulares. Estos
aparecen como consecuencia de dos factores: el plano o planos de división celular y la tendencia
de las células hijas a permanecer unidas entre si, una vez que se completa la división. Los cocos
que se separan completamente después de la división aparecen individualmente, y a esta forma se
le llama coco. Cuando hay una ligera tendencia a que las células hijas permanezcan unidas y la
división celular ocurre en un solo plano, los cocos se agrupan predominantemente en pares,
llamados diplococos. Si la unión es mas marcada, se ven largas cadenas de cuatro cocos o más;
estos agrupamientos se conocen como estreptococos. Cuando los cocos se dividen en varios
planos, y hay una elevada tendencia a que permanezcan unidos, aparecen racimos irregulares de
cocos, semejantes a racimos de uvas; estos agrupamientos se denominan estafilococos.
• Formas alargadas o bacilos. Las formas alargadas o bacilares agrupan una gran cantidad
de subtipos morfológicos. Las diferencias en anchura, longitud y forma de los extremos de
la célula proporcionan una considerable heterogeneidad a la forma bacilar. En función de
la tendencia de las celulas hijas a permanecer unidas, los bacilos presentan también
agrupaciones celulares características, citando como ejemplo las formas en empalizada (
///// ) o en V ( <<< ) o en letras chinas. Aunque son hasta cierto punto característicos, los
agrupamientos de células bacilares no tienen la misma importancia morfológica que el
agrupamiento de cocos.
Figura No. 5. Formas y arreglos microscópicos de las Bacterias
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
• Formas curvadas, comas o espirilos: El tercer tipo morfológico es la forma espirilar, que
puede considerarse como un bacilo que se ha torcido adoptando la forma de hélice.
Aunque la curvatura se observa ocasionalmente en muchas formas bacilares, en el genero
Vibrio es suficientemente constante como para tener importancia diferencial. Los vibrios
pueden presentar una forma espirilar si las células permanecen unidas por sus extremos.
Las verdaderas bacterias espirilares pueden ser de dos tipos: con espira rígida o con espiral
flexible. Al conjunto de las formas espirilares flexibles se le conoce como espiroquetas. La
clasificación y diferenciación de las espiroquetas patógenas se basa en criterios
morfológicos tales como la longitud de vuelta, el ángulo en los extremos de la célula, la
presencia de una envuelta externa y la composición del filamento axial.
1.3. Descripción de la morfología de colonia en los hongos: Se realiza observando tanto en el
anverso como el reverso, se describe la textura la define la altura del micelio aéreo y se describe
como: algodonosa, granular o polvosa, afelpada y glabrosa.
Textura algodonosa: Se caracteriza por un micelio aéreo denso y muy alto, con aspecto de
algodón.
Textura granular o polvorosa: con facilidad se desmenuzan por la excesiva producción de
conidias. Con frecuencia estos dos términos se intercambian, sin embargo la textura
granular es más rugosa semejante al azúcar granulado, mientras que la polvosa parece
harina.
Textura afelpada: Produce micelio aéreo bajo, con aspecto de felpa o terciopelo.
Textura glabrosa o cerosa: No producen micelio aéreo, por lo tanto tienen una superficie
pareja. Generalmente se presentan en las colonias de levaduras.
La topografía describe las desigualdades presentes en la superficie de la colonia, se observa
generalmente por el reverso de la caja, debido a que usualmente el micelio encubre esta
característica. Se describe como verrucosa o cerebriforme, rugosa y lisa.
Topografía rugosa: tiene pliegues irregulares que irradian el centro de cultivo.
Topografía verrucosa o cerebriforme: Posee una superficie delgada que semeja un
cerebro.
Topografía lisa: No posee irregularidades en su superficie.
1.4. Morfología microscópica de Hongos y Levaduras: Poseen pared celular contiene quitina un
polisacárido que le da rigidez y es responsable de su morfología y en ocasiones celulosa. Algunos
hongos presentan cápsula, formada por polisacáridos, con propiedades inmunógenas y
antifagocitarias. La estructura o cuerpo vegetativo de un hongo se denomina talo. El talo esta
formado por filamentos, o hifas, de unas 5 µm de diámetro, que generalmente están ramificadas.
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Las hifas son tubos largos que están formadas por la pared celular de quitina (componente
mayoritario) y el citoplasma con sus inclusiones y núcleos con la información genética. Las hifas
pueden estar separadas en células por paredes transversales (septos) en los hongos superiores
(Eumicetos), o carecer de paredes en los hongos inferiores (Ficomicetos). El conjunto de hifas se
llama micelio. En el micelio se distinguen dos partes: una que penetra en el medio de cultivo y se
extiende por su superficie (micelio vegetativo), y otra que se proyecta y contiene las esporas
(micelio reproductor o aéreo). Los hongos crecen por el extremo de las hifas (crecimiento apical).
Una pequeña cantidad de micelio es suficiente para la formación de un nuevo talo.
Las esporas son estructuras unicelulares de resistencia que contienen toda la información genética
necesaria para el desarrollo completo de un nuevo hongo. La estructura del hongo que produce
las esporas asexuales se denomina conidiófora. Se forman por estrangulamiento del extremo de
las hifas. Los conidióforos son hifas especializadas que presentan gran diversidad de forma, color,
tamaño, tipo de septación, etc. Dichas estructuras formadoras de esporas tienen gran importancia
en la determinación taxonómica de los hongos. Las agrupaciones de esporas que allí se forman se
denominan conidios. Otros tipos de estructuras formadoras de esporas son los Esporangios,
Clamidosporas, etc.
Figura No. 6. Principales características de los hongos verdaderos o Eumycetes
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Las Levaduras son hongos que crecen generalmente por gemación, en forma de agregados sueltos
de células independientes, que pueden ser globosas, ovoides, cilíndricas o alargadas. En algunos
casos, forman cadenas de células alargadas (pseudohifas8), adheridas de modo suelto
(blastospora), semejantes a un micelio, por lo que se les denomina pseudomicelio. Algunas
especies forman breves extensiones de verdadero micelio, con frecuencia septado (tabicado). Hay
especies de levaduras esporógenas. No existe, por tanto, un límite de separación definido entre
levaduras y otros hongos que forman un micelio típico. Algunos hongos patógenos para el
hombre presentan dimorfismo, pueden existir en la naturaleza en forma de levadura (forma
parasitaria) o en forma filamentosa (forma saprófita).
Las levaduras, cuando crecen sobre medios sólidos, forman colonias de aspecto característico que
recuerdan a las colonias bacterianas. En casi todas las especies de interés industrial, el modo
habitual de reproducción vegetativa es por gemación. A diferencia de los mohos, las levaduras no
pueden identificarse solamente por sus caracteres morfológicos; se precisa la ayuda de pruebas
bioquímicas para la identificación específica.
Figura No. 7. Morfología microscópica de las Levaduras
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Figura No. 8. Morfología microscópica de los Hongos más comunes
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Tabla Descripción Morfología Bacterias
Origen de la muestra:
Fecha de aislamiento:
Fecha de descripción:
Código:
Morfología Macroscópica Descripción
En caja de Petri Medio:_________________
Forma:
Elevación:
Margen:
Diámetro:
Consistencia/textura:
Superficie:
Pigmentación:
Otras características
En Tubo Medio:_________________ En Agar inclinado:
En medio liquido:
En medio semi-solido (motilidad):
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Morfología Microscópica Descripción
__X
Forma:
Arreglo:
Color sin tinción:
Gram:
Otras observaciones
Tinción empleada:
Generalidades encontradas en literatura:
Posible grupo/genero o Nombre científico (si ya esta clasificada):
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Tabla Descripción Morfología Hongos
Origen de la muestra:
Fecha de aislamiento:
Código:
Morfología Macroscópica Descripción
En caja de Petri
Medio:_________________
Forma:
Elevación:
Margen:
Diámetro:
Textura:
Topografía:
Pigmentación:
Otras características
En Tubo
Medio:_________________
En Agar inclinado:
Diversidad Microbiana, elementos descriptivos y estudio Microbiología
Departamento de Biología - FACENED
Mb. Bibiana Duarte Restrepo
Morfología Microscópica Descripción
__X
Tipo de hifa:
Tipo de conidias/esporas
Otras observaciones
Tinción empleada:
Generalidades encontradas en literatura:
Posible grupo/genero o Nombre científico (si ya esta clasificada):
Top Related