Continúa el legado
[ COLUMNAS HPLC ]
de las columnas HPLC
Creación de una cromatografía excepcional
La reputación de Waters se basa en la cromatografía, pero nosotros no
creamos cromatografía: ese es su papel. El pensamiento innovador que
surge de su laboratorio crea los análisis y los métodos cromatográficos
que sustentan su negocio. Los parámetros de su éxito se controlan a
través de los métodos y los resultados que obtiene y la columna de
HPLC que seleccione hoy tiene que respaldar su éxito en el futuro.
Los científicos eligen la gama completa de modernas columnas HPLC
de fase reversa e HILIC que ofrece Waters porque entienden que el
rendimiento y la innovación están vinculados y que su éxito depende
de ellas.
Columnas HPLC
2
CORTECS
XBridge
XSelect
Atlantis
SunFire
Symmetry
XTerra
Waters Spherisorb
Nova-Pak
Resolve
Delta-Pak
µBondaPak/BondaPak
µPorasil/Porasil
3
Las columnas con partículas de núcleo sólido CORTECS® de 2,7 µm maximizan la resolución y la capacidad de picos para todas las sepa-raciones por LC y están optimizadas para incrementar el rendimiento de los instrumentos HPLC. La innovadora tecnología de núcleo sólido y la química enlazada que utilizan las columnas CORTECS le pueden ayudar al proporcionar:
■■ Reducción de la contrapresión de trabajo: menor
contrapresión sin sacrificar la eficacia
■■ Aumento de la sensibilidad: mejora de la relación señal-ruido
para las aplicaciones LC-MS
■■ Simplificación de las transferencias de métodos: compatibilidad con una amplia gama de sistemas
cromatográficos
La selección de columnas CORTECS de 2,7 µm, tanto de fase reversa como de fases HILIC, le aportan flexibilidad para separar rápidamente una amplia gama de clases de compuestos. La mejora de la eficacia de las columnas con núcleo sólido CORTECS de 2,7 µm produce picos mejor definidos y estrechos si se comparan con los que generan las columnas que utilizan substratos totalmente porosos; asimismo, le permiten utilizar caudales más rápidos para poder incrementar la velocidad de análisis de muestras.
Reducción de la contrapresión Las columnas CORTECS reducen la contrapresión de trabajo, lo que
le permite analizar métodos con instrumentos LC convencionales
sin comprometer la eficacia ni la resolución. Además, se pueden usar
columnas más largas para mejorar la resolución de los picos que
coeluyen en mezclas complejas de muestras.
Caudal (mL/min)
2,1 x 50 mm 0,17 0,35 0,52 0,69 0,87 1,043,0 x 50 mm 0,35 0,71 1,06 1,41 1,77 2,124,6 x 50 mm 0,83 1,66 2,49 3,32 4,15 4,99
Caudal (mL/min)
2,1 x 50 mm 0,17 0,35 0,52 0,69 0,87 1,043,0 x 50 mm 0,35 0,71 1,06 1,41 1,77 2,124,6 x 50 mm 0,83 1,66 2,49 3,32 4,15 4,99
Ventajas de las columnas CORTECS de 2,7 µm en cuanto a la eficacia
Ventajas de las columnas CORTECS de 2,7 µm en cuanto a la contrapresión
Efic
acia
(US
P)
Mejor eficacia de su clase
CORTECS C18+, 2,7 μm
C18 totalmente poroso, 2,5 μm
C18 de núcleo sólido del competidor A, 2,6 μm
C18 de núcleo sólido del competidor B, 2,7 μm
Velocidad lineal (cm/min)
Caudal (mL/min)
2,1 x 50 mm 0,17 0,35 0,52 0,69 0,87 1,043,0 x 50 mm 0,35 0,71 1,06 1,41 1,77 2,124,6 x 50 mm 0,83 1,66 2,49 3,32 4,15 4,99
Pre
sión
de
la c
olum
na (p
si)
Un 25% menos contrapresión que la columna de partículas de núcleo sólido de 2,6 µm de la competencia
CORTECS C18+, 2,7 μmC18, totalmente poroso, 2,5 μmC18 de núcleo sólido del competidor A, 2,6 μmC18 de núcleo sólido del competidor B, 2,7 μm
Velocidad lineal (cm/min)
Caudal (mL/min)
2,1 x 50 mm 0,17 0,35 0,52 0,69 0,87 1,043,0 x 50 mm 0,35 0,71 1,06 1,41 1,77 2,124,6 x 50 mm 0,83 1,66 2,49 3,32 4,15 4,99
Las columnas CORTECS de 2,7 µm muestran una eficacia excelente si se comparan con las columnas con partículas de núcleo sólido y totalmente porosas de tamaño similar. Condiciones experimentales: columnas: 2,1 x 50 mm; fase móvil: agua/acetonitrilo (25/75, v/v); temperatura de la columna: 30 ˚C; detección: UV a 254 nm; volumen de inyección: 0,5 µL; compuestos: acenafteno (200 µg/mL), octanofenona (100 µg/mL).
Las columnas CORTECS de 2,7 µm consiguen reducir la contrapresión de trabajo en un 25% sin sacrificar la eficacia. Condiciones experimentales: columnas: 2,1 x 50 mm; fase móvil: agua/acetonitrilo (25/75, v/v); temperatura de la columna: 30 ˚C; detección: UV a 254 nm; volumen de inyección: 0,5 µL; compuestos: acenafteno (200 µg/mL), octanofenona (100 µg/mL).
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
OSi
O
OO
SiO
O
CORTECS C18+ C18 HILIC
Tipo de ligando C18 trifuncional C18 trifuncional Ninguno
Densidad del ligando 2,4 µmol/m2 2,6 µmol/m2 N/A
Carga de carbono 5,7% 6,6% No enlazada
Tipo de recubrimiento final
Patentado Patentado Ninguno
Clasificación USP L1 L1 L3
Rango de pH 2–8 2–8 1–5
Límite de temp. a pH bajo
45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C
Límite de temp. a pH alto
45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C
Diámetro de poro 90 Å 90 Å 90 Å
4
Aumento de la sensibilidad La tecnología de superficie cargada mejora la forma de los picos y la carga de compuestos al usar fases móviles con baja fuerza iónica, tales como
las preparadas con ácido fórmico. La carga superficial permanente de bajo nivel usada durante el proceso de enlace del C18+ mejora la relación señal-
ruido al no tener que utilizar aditivos ni reactivos de par iónico que, de otro modo, afectarían negativamente a las aplicaciones LC-MS.
Forma de pico excelente para el análisis de impurezas a concentraciones bajas
El análisis por HPLC-UV/MS de la imipramina, un antidepresivo básico de baja fuerza iónica, revela la presencia de una impureza de baja concentración. El uso de la columna CORTECS C18+ de 2,7 µm, diseñada para utilizarse con fases móviles ácidas de baja fuerza iónica, da como resultado picos más estrechos y una mejor relación señal-ruido.
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
Condiciones de LCColumnas: 3,0 x 50 mmFase móvil A: ácido fórmico al 0,1% en aguaFase móvil B: ácido fórmico al 0,1% en acetonitriloGradiente: del 25 al 35% de B en 4,6 minutosCaudal: 0,8 mL/minTemp. de la columna: 30 SDgrCDetección: UV a 254 nm y ESI+ MSVolumen de inyección: 10 μL
Compuestos Imipramina (0,5 mg/mL) Impureza adicionada al 0,1% (0,5 μg/mL)
%
0
100
1: SIR de 1 canal ES+TIC (impureza adicionada al 0,1%)
3,68e7
1: SIR de 1 canal ES+TIC (impureza adicionada al 0,1%)
3,68e7
0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 min
(1) PDA, canal 1, 254 nm a 4,8 nmRango: 1
Impureza adicionada al 0,1%PW13,4%: 0,089 min
Relación S/N: 180Relación S/N: 113
0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 min
0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 min0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 min
UA
0,0
5,0e-3
1,0e-2
1,5e-2
2,0e-2
2,5e-2
3,0e-2
3,5e-2
4,0e-2
(1) PDA, canal 1, 254 nm a 4,8 nmRango: 8e-1
Impureza adicionada al 0,1%PW13,4%: 0,132 min
C18 de núcleo sólido de la competencia, 2,6 μmPresiónmáx: 3250 psi
CORTECS C18+, 2,7 μmPresiónmáx: 2750 psi
Aumento del 60% en la relación S/N
Reducción del 35% en la anchura del picoImipramina Imipramina
5
6
www.waters.com/cortecs
Transferencia de métodos sencilla Se puede usar una selección específica de 3 fases para separar una amplia gama de clases
de compuestos. Las fases enlazadas de fase reversa CORTECS C18 y C18+ proporcionan a los
técnicos en cromatografía un perfil de retención equilibrado de ácidos, bases y compuestos
neutros, mientras que la fase CORTECS HILIC ortogonal no enlazada ofrece una retención
superior de analitos polares. Gracias a tamaños de partículas que son compatibles con las
plataformas HPLC, UPLC® y UHPLC, cualquier método desarrollado puede transferirse de
forma óptima y sencilla sin que surjan limitaciones por el tamaño de partícula, la configura-
ción de la columna o el fabricante del instrumento.
Se pueden escalar y transferir métodos desarrollados con columnas totalmente porosas de 5 µm a columnas más cortas de 2,7 µm. Para mejorar aún más la eficacia y la productividad, se pueden usar columnas UPLC con tamaños de partícula inferiores a 2 µm, lo que permite una mayor flexibilidad y reproducibilidad de métodos al realizar la transferencia entre laboratorios de una misma organización o a socios con vinculación contractual.
1
2
34
5
UA
0,00
0,01
0,02
UA
0,00
0,01
0,02
UA
0,00
0,01
0,02
12,0 14,0 16,0 18,0 20,0 22,0 24,0 26,0 28,0 30,0 min
3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 7,5 8,0 min
UA
0,00
0,01
0,02
3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 7,5 8,0 min
1,8 2,0 2,2 2,4 2,6 2,8 3,0 3,2 3,4 3,6 min
C18 totalmente poroso, 5 μm, 4,6 x 150 mmCaudal: 1,00 mL/minVolumen de inyección: 8 μLSistema: Alliance® HPLC
CORTECS C18+, 2,7 μm, 4,6 x 75 mmCaudal: 1,85 mL/minVolumen de inyección: 4 μLSistema: Alliance® HPLC
CORTECS C18+, 2,7 μm, 4,6 x 75 mmCaudal: 1,85 mL/minVolumen de inyección: 4 μLSistema: ACQUITY UPLC® H-Class
CORTECS UPLC C18, 1,6 μm, 2,1 x 50 mmCaudal: 0,65 mL/minVolumen de inyección: 0,6 μLSistema: ACQUITY UPLC H-Class
Método original
Transferencia a 2,7 µm
Método 4 veces más rápido
Dos veces menos eluyente
Compatible con sistemas
HPLC, UHPLC y UPLC
Transferencia a 1,6 µm
Método 9 veces más rápido
12 veces menos eluyente
Transferencia de métodos USP de abacavir en función del tiempo y del consumo de eluyente
Compuestos 1. Desciclopropilabacavir 2. Abacavir 3. 1R,4R trans-abacavir 4. o-(4-cloro-2,5-diaminopirimidina)-abacavir 5. o-t-butilo-abacavir
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
Condiciones de LCFase móvil A: ácido trifluoroacético al 0,1% en aguaFase móvil B: metanol al 85% en aguaColumna A: columna C18 totalmente porosa de 5 μm,
4,6 x 150 mmColumna B: columna CORTECS C18 de 2,7 μm, 4,6 x 75 mmColumna C: columna CORTECS C18 de 1 6 μm, 2,1 x 50 mmGradientes escalados geométricamente (es decir, los mismos volúmenes de columna por paso de gradiente):Columna A: del 5 al 30% de B en 23,6 minutos y del 30 al 90% de B en 14,8 minutosColumna B: del 5 al 30% de B en 6,4 minutos y del 30 al 90% de B en 4,0 minutosColumna C: del 5 al 30% de B en 2,5 minutos y del 30 al 90% de B en 1,6 minutosFase móvil A: ácido trifluoroacético al 0,1% en aguaFase móvil B: metanol al 85% en agua
[ENCABEZADO INTERIOR DEL FOLIO]
7
* Valor esperado o aproximado.
Las columnas para HPLC XBridge® están concebidas para un único propósito: maximizar la productividad. Tanto si su objetivo es crear un método de control de calidad como desarrollar un ensayo LC/MS de vanguardia, las columnas XBridge le pueden
ayudar al proporcionar:
■■ Mejora de la estabilidad frente al pH: aumento de la vida
útil de la columna
■■ Mejora de la fiabilidad de la columna: análisis más
robustos
■■ Maximización de la eficacia de las partículas: forma y
capacidad de picos inigualables
Con una selección de 10 fases enlazadas diferentes para aplicaciones de uso general y específicas, que abarcan la gama más amplia de tamaños de partículas que se encuentra disponible, ninguna otra familia de columnas HPLC le proporciona las herramientas necesarias para los retos cromatográficos más exigentes. Tanto si se necesitan métodos HPLC robustos, una transferencia óptima a UPLC® o un escalado preparativo para el aislamiento de productos, se puede contar con la versatilidad de una columna XBridge.
XBridge C18 C8 Shield RP18 Fenilo HILIC Amida Péptidos BEH C18, 130 Å Péptidos BEH C18, 300 Å Proteínas BEH C4, 300 Å Oligo BEH C18
Tipo de ligando C18 trifuncional C8 trifuncionalGrupo polar integrado
monofuncional Fenilo-hexilo trifuncional
Partícula BEH no enlazada
Amida C18 trifuncional C18 trifuncional C4 monofuncional C18 trifuncional
Densidad del ligando* 3,1 µmol/m2 3,2 µmol/m2 3,3 µmol/m2 3,0 µmol/m2 N/A 7,5 µmol/m2 3,1 µmol/m2 3,1 µmol/m2 2,4 µmol/m2 3,1 µmol/m2
Carga de carbono* 18% 13% 17% 15% No enlazada 12% 18% 12% 8% 18%
Tipo de recubrimiento final Patentado Patentado TMS Patentado N/A Ninguno Patentado Patentado Ninguno Patentado
Clasificación USP L1 L7 L1 L11 L3 - L1 L1 L26 L1
Rango de pH 1–12 1–12 2–11 1–12 1–9 2–1 1–12 1–12 1–10 1–12
Límite de temp. a pH bajo 80 °C 60 °C 50 °C 80 °C 45 °C 90 °C 80 °C 80 °C 80 °C 80 °C
Límite de temp. a pH alto 60 °C 60 °C 45 °C 60 °C 45 °C 90 °C 60 °C 60 °C 50 °C 60 °C
Diámetro de poro* 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 300 Å 300 Å 130 Å
Área superficial* 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 90 m2/g 90 m2/g 185 m2/g
Tamaño de partícula2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5 µm 3,5; 5; 10 µm 3,5; 5; 10 µm 3,5 µm 2,5 µm
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
Prueba acelerada de estabilidad a pH alto de las columnas de la competencia
0 50 100 150 200 horasHoras con 50 mM de TEA, pH 10, 50 °C
Analito: Acenafteno
30
50
70
90
110
% N
5s in
icia
lXBridge C18
XTerra® MS C18
Gemini™ C18
Luna® C18(2)
YMC™ Pro C18
Zorbax® Extend C18
Los cromatogramas, obtenidos a intervalos regulares durante el estudio de vida útil a pH alto, demuestran que el 86% de la eficacia original de las columnas XBridge se mantiene después de 300 horas a un pH de 10 y a una temperatura elevada, con pocos cambios en la forma de los picos o en el tiempo de retención.
Estabilidad frente al pH Las columnas XBridge se han diseñado de manera específica para contener las fases enlazadas cromatográficas más estables desde el punto de vista químico que se encuentran disponibles, lo que le permitirá explorar todas las ventajas que aporta el poder utilizar fases móviles con un amplio rango de pH (1-12). La estabilidad química, especialmente para los valores extremos de pH, se incorpora a las partículas durante el proceso de síntesis y no se puede reproducir mediante el proceso convencional de enlace a la base de sílice. Ninguna otra columna puede igualar la estabilidad química de una columna XBridge.
8
Fiabilidad de la columna La mayoría de los costes derivados del desarrollo de un método
cromatográfico están asociados con el riguroso proceso de
evaluación y validación del método final. Entendemos que
la revalidación del método no es una opción, de modo que
evaluamos meticulosamente cada lote de columnas y fases
enlazadas para garantizar las columnas más reproducibles que se
encuentran disponibles. Con una columna XBridge, puede estar
seguro de que el método que desarrolle hoy será reproducible
durante toda la vida útil del análisis.
Eficacia de las partículas Las partículas híbridas con puentes de etileno (BEH) ofrecen
muchas ventajas con respecto a las partículas basadas en sílice
convencionales, incluida la capacidad para controlar la actividad
silanólica con gran precisión. Al controlar la actividad silanólica,
se controlan y reducen las interacciones silanólicas no deseadas
que aumentan la asimetría de los picos.
Factores de asimetría USP de la familia XBridge
1
2
3
C8 Zorbax®
SB-C18
Desipramina
Amitriptilina
pH 3 pH 7
Nortriptilina
Amitriptilina
Fact
or d
e as
imet
ría (T
f)
Fenilo Shield RP18 C18
XBridge C18 C8 Shield RP18 Fenilo HILIC Amida Péptidos BEH C18, 130 Å Péptidos BEH C18, 300 Å Proteínas BEH C4, 300 Å Oligo BEH C18
Tipo de ligando C18 trifuncional C8 trifuncionalGrupo polar integrado
monofuncional Fenilo-hexilo trifuncional
Partícula BEH no enlazada
Amida C18 trifuncional C18 trifuncional C4 monofuncional C18 trifuncional
Densidad del ligando* 3,1 µmol/m2 3,2 µmol/m2 3,3 µmol/m2 3,0 µmol/m2 N/A 7,5 µmol/m2 3,1 µmol/m2 3,1 µmol/m2 2,4 µmol/m2 3,1 µmol/m2
Carga de carbono* 18% 13% 17% 15% No enlazada 12% 18% 12% 8% 18%
Tipo de recubrimiento final Patentado Patentado TMS Patentado N/A Ninguno Patentado Patentado Ninguno Patentado
Clasificación USP L1 L7 L1 L11 L3 - L1 L1 L26 L1
Rango de pH 1–12 1–12 2–11 1–12 1–9 2–1 1–12 1–12 1–10 1–12
Límite de temp. a pH bajo 80 °C 60 °C 50 °C 80 °C 45 °C 90 °C 80 °C 80 °C 80 °C 80 °C
Límite de temp. a pH alto 60 °C 60 °C 45 °C 60 °C 45 °C 90 °C 60 °C 60 °C 50 °C 60 °C
Diámetro de poro* 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 130 Å 300 Å 300 Å 130 Å
Área superficial* 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 90 m2/g 90 m2/g 185 m2/g
Tamaño de partícula2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5 µm 3,5; 5; 10 µm 3,5; 5; 10 µm 3,5 µm 2,5 µm
O Si O
O
O
NH 2Link
er
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
OSi
O
O
OSiO
O
OSiO
O
OSi
CH Polar Group
3
CH3
OSi
CH 3
CH3
OSi
CH 3
C4
C4
H 9
H 9
CH3
La combinación de la excelente estabilidad tanto de los ligandos como de las partículas, así como la elevada eficacia cromatográfica, convierte a las columnas XBridge en la elección ideal para los métodos a pH bajos e intermedios.
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
9
www.waters.com/xbridge
Condiciones de LC Sistema: ACQUITY UPLC con detector TUV Columnas: XBridge C18, 5 μm, 2,1 x 150 mm XBridge C18, 3,5 μm, 2,1 x 100 mm XBridge C18, 2,5 μm, 2,1 x 75 mm ACQUITY UPLC BEH C18, 1,7 μm, 2,1 x 50 mm Fase móvil A: ácido fórmico al 0,1% en aguaFase móvil B: ácido fórmico al 0,1% en acetonitriloCaudal: consultar el cromatograma anterior Volumen de inyección: consultar el cromatograma anteriorIsocrática: 95% A:5% BDiluyente de la muestra: acetonitrilo al 3% en agua con ácido fórmico al 0,1%Conc. de la muestra: 25 μg/mLTemp. de la columna: 38 °CDetección: UV a 280 nmVelocidad de adquisición: 40 pts/s Constante de tiempo: 0,05
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0
0,0 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 min
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 min
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 min
1,1 min
1,7 µm – 50 mmInyección: 1,7 µL
Caudal: 0,6 mL/min
5 µm – 150 mm Inyección: 5,0 µL
Caudal: 0,2 mL/min
2,5 µm – 75 mmInyección: 2,5 µL
Caudal: 0,5 mL/min
3,5 µm – 100 mmInyección: 3,3 µL
Caudal: 0,3 mL/min
Transferencia de métodos con columnas de 2,5 μm Todas las columnas para HPLC XBridge y XSelect® (que se describen en la siguiente página) se ofrecen con los formatos eXtended Performance [XP] de 2,5 µm a fin de ayudarle a transferir los métodos de los instrumentos HPLC a los UPLC. Las columnas XP de 2,5 µm mejoran el rendimiento de los instrumentos HPLC actuales y permiten conseguir una efica-cia de separación máxima mediante la tecnología ACQUITY UPLC con tamaños de partícula
inferiores a 2 µm.
Columnas de diferentes longitudes y tamaños de partículas se han utilizado para reducir satisfactoriamente los tiempos de análisis y mantener la resolución.
Separaciones escalables
10
[ENCABEZADO INTERIOR DEL FOLIO]
11
OSi
FF
F
FF
O
OO
SiO
OO
SiO
OO
SiO
OO
SiO
OO
SiO
OO
Si
FF
F
FF
O
OO
SiCN
* Valor esperado o aproximado.
Los substratos o partículas base influyen de manera
fundamental en la selectividad del analito; el ligando enlazado
ejerce una influencia secundaria. Cada uno de ellos, cuando
se usa por separado, no genera cambios de selectividad
notorios; sin embargo, juntos, el substrato y el ligando crean
las herramientas definitivas para mejorar la selectividad del
analito. Es por este motivo que la familia de columnas XSelect
contiene tanto la tecnología de partículas de sílice de alta
resistencia (HSS) como la de partículas híbridas de superficie
cargada (CSH™) con una optimización única de ligandos
enlazados. El resultado es una gran reproducibilidad y una alta
selectividad.
Las columnas para HPLC XSelect están concebidas para los
científicos encargados de desarrollar métodos, que exigen la
selección más diversa de fases enlazadas para separar con
facilidad las coeluciones de analitos más dificultosas. Las
columnas XSelect son herramientas que están:
■■ Diseñadas para la selectividad: mejoran la capacidad para
separar picos que eluyen muy cerca
■■ Concebidas para el aislamiento y la purificación:
proporcionan la mayor capacidad de carga de analito que se
encuentra disponible
■■ Ideales para el rápido desarrollo métodos: reducen el
tiempo y los costes asociados al desarrollo de métodos
XSelect CSH C18
CSH fenilo-hexilo
CSH fluorofenilo
HSS T3 HSS C18 HSS C18 SB HSS PFP HSS CN
Tipo de ligando C18 trifuncionalC6 fenilo trifun-
cionalPropilfluorofenilo
trifuncionalC18 trifuncional C18 trifuncional C18 trifuncional
Pentafluorofenilo trifuncional
Cianopropilo monofuncional
Densidad del ligando* 2,3 µmol/m2 2,3 µmol/m2 2,3 µmol/m2 1,6 µmol/m2 3,2 µmol/m2 1,6 µmol/m2 3,2 µmol/m2 2,0 µmol/m2
Carga de carbono* 15% 14% 10% 11% 15% 8% 7% 5%
Tipo de recubrimiento final
Patentado Patentado Ninguno Patentado Patentado Ninguno Ninguno Ninguno
Clasificación USP L1 L11 L43 L1 L1 L1 L43 L10
Rango de pH 1–11 1–11 1–8 2–8 1–8 2–8 2–8 2–8
Límite de temp. a pH bajo
80 ˚C 80 ˚C 60 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C
Límite de temp. a pH alto
45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C
Diámetro de poro* 130 Å 130 Å 130 Å 100 Å 100 Å 100 Å 100 Å 100 Å
Área superficial* 185 m2/g 185 m2/g 185 m2/g 230 m2/g 230 m2/g 230 m2/g 230 m2/g 230 m2/g
Tamaño de partícula2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm 2,5; 3,5; 5 µm
12
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 min
1
2
3 45,6 7
34
34 56 7
12
34 5
6 7
12
34
56
7
5,6
12
3 4
5,67
HSS C18 SB
HSS C18
HSS T3
HSS CN
HSS PFP
CSH fluorofenilo
CSH fenilo-hexilo
CSH C18
Condiciones de LC Sistema: ACQUITY UPLC con detector PDA Columnas: 2,1 x 50 mm Fase móvil A: 10 mM de formiato de de amonio, pH de 3,0Fase móvil B: metanol Caudal: 0,4 mL/min Volumen de inyección: 1 μLDiluyente de la muestra: aguaTemp. de la columna: 30 °C
Gradiente: Tiempo(min)
%A %B
0,00 70 303,00 15 853,50 15 853,51 70 304,50 70 30
Detección: UV a 260 nmVelocidad de adquisición: 20 pts/sRespuesta del filtro: normal
Mejora de la selectividad La selectividad y la capacidad de retención son las herramientas más poderosas que poseen los desarrolladores de métodos para influir en el comportamiento cromatográfico. La familia XSelect ofrece una variada gama de columnas C18 de fase reversa (por ejemplo, CSH C18, HSS C18 y HSS C18 SB) para separaciones de fines generales, así como columnas que proporcionan un incremento de la retención polar (T3) y mayores opciones de selectividad (fenilo-hexilo, fluorofenilo y ciano) para el desarrollo de métodos.
Las columnas XSelect proporcionan diversas selectividades de analitos
UA
0,00
0,02
0,04
0,06
0,08
Imip
ram
ina
Imip
ram
ina
2,0%
1,0%
0,5% 0,1%
2,0% 1,0%
0,5% 0,1%
Amitriptilina
Concentraciones de imipraminamantenidas constantes a 0,5 mg/mL
Amitriptilina
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 min
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 min
ACQUITY UPLC CSH C18
UA
0,00
0,02
0,04
0,06
0,08
Kinetex® C18
Condiciones de LCSistema: ACQUITY UPLC H-Class con detector PDA para ACQUITY UPLCColumnas: 2,1 x 50 mmFase móvil A: aguaFase móvil B: acetonitriloFase móvil C: ácido fórmico al 2% en aguaGradiente: Tiempo
(min)Flujo
(mL/min) %A %B %C Curva
inicial 0,6 70 25 5 inicial2,0 0,6 60 35 5 63,0 0,6 0 95 5 63,1 0,6 70 25 5 65,0 0,6 70 25 5 6
Volumen de inyección: 5 μLDiluyente de la muestra: aguaConc. de la muestra: imipramina: 0.5 mg/mL; amitriptilina: como se indica (% de la imipramina)Temp. de la columna: 40 °CDetección: UV a 254 nmEluyente de lavado: acetonitrilo/agua 50/50 Eluyente de purga: acetonitrilo/agua 50/50
Aislamiento y purificación Las aplicaciones de alta capacidad de carga, como la purificación de compuestos, la obtención de perfiles de impurezas y las pruebas de disolución, exigen que las columnas tengan un excelente rendimiento. En el caso de estos tipos de aplicaciones, la carga de la columna está limitada por su incapacidad para mantener una forma de picos simétrica. Esto se pone de manifiesto por el excesivo ensanchamiento del pico del compuesto principal, el cual, con frecuencia, oculta las impurezas traza que se tratan de eliminar durante la purificación. Las columnas XSelect CSH proporcionan de forma sistemática picos estrechos bajo condiciones de carga altas y otorgan al técnico en cromatografía la posibilidad de separar productos de degradación o impurezas a nivel de trazas y, por tanto, permiten una
mayor capacidad de carga reduciendo el tiempo y el consumo de eluyente.
Mantenimiento de la forma de los picos con una alta capacidad de carga
Diferencias de selectividad observadas para una mezcla de analitos básicos. Compuestos: [1] aminopirazina, [2] pindolol, [3] quinina, [4] labetalol, [5] verapamilo, [6] diltiazem, [7] amitriptilina.
La mejora de la capacidad de carga de las columnas XSelect permite la separación, identificación y cuantificación de productos de degradación o impurezas que eluyen muy cerca.
13
Desarrollo y transferencia de métodos Al desarrollar métodos, los técnicos en cromatografía experimentados se dan cuenta de que el desarrollo de cualquier método que utilice únicamente columnas selectivas debe poder transferirse con facilidad entre un laboratorio y otro, independientemente de la plataforma de LC usada. Las columnas XSelect se han diseñado para el desarrollo de métodos y son completamente compatibles con todos los modos de detección modernos.
Condiciones de LCSistema: ACQUITY UPLC con detector PDA para ACQUITY UPLC Columnas: 2,1 x 50 mmCaudal: 0,5 mL/minFase móvil A: 15,4 mM de formiato de amonio, pH de 3,0Fase móvil B: acetonitriloGradiente: lineal del 5% al 90% de B en 5 minutosVolumen de inyección: 5 μLDiluyente de la muestra: aguaTemp. de la columna: 30 °CDetección: UV a 254 nmVelocidad de adquisición: 20 pts/sRespuesta del filtro: normal
Separaciones reproducibles y escalables
3,5 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 4,0 min
1 2
3 4
5 6
7
8
9
10 XSelect CSH fluorofenilo, 5 µm
XSelect CSH fluorofenilo, 3,5 µm
ACQUITY UPLC CSH fluorofenilo, 1,7 µm
Reproducibilidad y escalabilidad de separaciones por gradiente con columnas de 2,1 x 50 mm que contienen nueve lotes diferentes de CSH fluorofenilo que representan tres tamaños de partículas (1,7, 3,5 y 5 µm).
Compuestos 1. Tiourea2. Resorcinol3. Metoprolol4. 3-nitrofenol5. Ácido 2-clorobenzoico6. Amitriptilina7. Dietilftalato8. Fenoprofeno9. Dipropilftalato10. Ácido pirenosulfónico
www.waters.com/xselect14
[ENCABEZADO INTERIOR DEL FOLIO]
15
* Valor esperado o aproximado.
Atlantis T3 dC18 HILIC Silica
Densidad del ligando*
1,6 µmol/g 1,6 µmol/g N/A
Carga de carbono* 14% 12% N/A
Tipo de recu-brimiento final
Patentado Patentado N/A
Clasificación USP L1 L1 L3
Rango de pH 2–8 3–7 1-5
Límite de temp. a pH bajo
45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C
Límite de temp. a pH alto
45 ˚C 45 ˚C 45 ˚C
Diámetro de poro* 100 Å 100 Å 100 Å
Área superficial* 330 m2/g 330 m2/g 330 m2/g
Tamaño de partícula 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm
OSiO
O
Las columnas para HPLC Atlantis® no solo ofrecen un rendimiento,
una versatilidad y una retención excepcionales para los
compuestos polares, sino además una retención equilibrada para
las mezclas complejas de analitos. Compatibilidad con fases móviles totalmente acuosas Para maximizar la retención de los compuestos polares con
métodos de fase reversa, es posible utilizar las columnas
HPLC de fase reversa Atlantis con tampones y fases móviles
muy acuosas sin correr el riesgo de que se produzca la
deshumectación de los poros ni el colapso hidrofóbico de la fase
estacionaria.
Larga vida útil de las columnas con fases móviles de pH bajo Las columnas Atlantis resisten la hidrólisis del ligando cuando se usan
fases móviles muy ácidas, lo que mantiene la eficacia del método, la
retención del compuesto y la selectividad crítica del analito.
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
20 horas de exposición a TFA al 0,5% y a una temperatura de 60 °C
Atlantis
T3
SunFire C 18
Pheno
menex
® Syn
ergi™
Hyd
ro-RP
Shis
eido C
apce
ll PAK
® AQ
Pheno
menex
® Synerg
i™ P
olar-R
P
Agilen
t Zorb
ax E
clips
e® Plus
Atlantis
dC 18
Pheno
menex
® Aqu
a
YMC Hyd
rosph
ere™
C18
GL Scie
nces
Inert
sil® O
DS-SP
YMC-Pac
k™ O
DS AQ™
Durante esta prueba acelerada, las columnas se expusieron a unas condiciones de pH bajo y alta temperatura para determinar la influencia de la pérdida del ligando a causa de la hidrólisis. El enlace de la columna Atlantis T3 resiste la hidrólisis del ligando y mantiene la retención del analito bajo condiciones extremadamente adversas de la fase móvil.
% d
e pé
rdid
a de
rete
nció
n pa
ra e
l met
ilpar
aben
o
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
16
Retención de compuestos polares sin reactivos de par iónico La eliminación de los reactivos de par iónico mejora los límites de detección, así como la robustez y la reproducibilidad del método; al mismo tiempo, reduce las labores de mantenimiento del instrumento debidas a las condiciones adversas de la fase móvil.
20 horas de exposición a TFA al 0,5% y a una temperatura de 60 °C
Condiciones de LC Columna: 4,6 x 150 mmFase móvil: 10 mM de formiato de amonio, pH de 3,0Caudal: 1,3 mL/min para 3 µmVolumen de inyección: 2,0 µLTemp. de la columna: 30 °CDetección: 254 nmVelocidad de adquisición: 10 pts/sSistema: Alliance 2695 con detector de absorbancia de doble longitud de onda 2487Compuestos1. Tiourea2. 5-fluorocistina3. Adenina4. Guanosina-5'-monofosfato5. Timina
Retención de compuestos polares
Separación de analitos muy polares con la columna Atlantis T3 y con columnas de la competencia. Los científicos confían en la forma de picos y en la retención inigualables que solo pueden ofrecer las columnas Atlantis.
1 2 3 4
5
12
43,5
1
2
3,4
5
1 2
4
3
5
1 23
45
0 1 2 3 4 5 6 7 8 min
Atlantis T3
Agilent Zorbax® SB-AQ
Thermo Hypersil Gold AQ™
Phenomenex® Synergi™ Hydro-RP
Shiseido Capcell PAK® C18 AQ
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
www.waters.com/atlantis17
* Valor esperado o aproximado.
SunFire C8 C18 Sílice
Densidad del ligando*
3,5 µmol/g 3,5 µmol/g N/A
Carga de carbono* 12% 16% N/A
Tipo de recu-brimiento final
Patentado Patentado N/A
Clasificación USP L7 L1 L3
Rango de pH 2–8 2–8 2–8
Límite de temp. a pH bajo
40 ˚C 50 ˚C 55 ˚C
Límite de temp. a pH alto
40 ˚C 40 ˚C 45 ˚C
Diámetro de poro* 100 Å 100 Å 100 Å
Área superficial* 340 m2/g 340 m2/g 340 m2/g
Tamaño de partícula2,5; 3,5; 5;
10 µm2,5; 3,5; 10 µm 2,5; 3,5; 10 µm
OSiO
CH 3O
SiO
CH 3
Separación isocráticaFase móvil A: 20 mM de fosfato de dipotasio al 35%/ 20 mM de fosfato monopotásico con un pH de 7,0Fase móvil B: metanol al 65%Longitud de onda: 254 nmCaudal: 1,0 mL/minVol. de inyección: 14 µLTemp. de la columna: 23 ˚CSistema: Alliance 2695 con detector de absorbancia de doble longitud de onda 2487Compuestos1. Uracilo 2. Propranolol 3. Butilparabeno 4. Naftaleno
0
12
3
4
5 6
5 10 15 20 25 30 35 40 min
TUSP – 1,26
TUSP – 1,35
TUSP – 1,79
SunFire C18 4,6 x 150 mm, 5 µm
Phenomenex® Luna® C18 (2) 4,6 x 150 mm, 5 µm
ACT® Ace® C18 4,6 x 150 mm, 5 µm
Es posible que las separaciones mostradas en las comparativas no sean representativas de todas las aplicaciones.
Las columnas SunFire™ se han convertido en el estándar de referencia de las columnas para HPLC de sílice enlazada a C18 y C8 más modernas. Gracias a varios años de investigación y desarrollo de productos, las columnas SunFire son el resultado de lo mejor de los conocimientos técnicos en cuanto a partículas y enlaces; asimismo, ofrecen un nivel de rendimiento cromatográfico líder en el sector.
Excelente estabilidad a pH bajos Con fases móviles de pH bajo, las columnas SunFire tienen una
vida útil que supera a la de muchas marcas de columnas para
HPLC basadas en sílice. Alta eficacia Se precisa una combinación sinérgica de síntesis de partículas,
tecnología de relleno e ingeniería de hardware para lograr
una eficacia alta. Las columnas SunFire Intelligent Speed™
(IS™) y Optimum Bed Density (OBD™) se han desarrollado
específicamente a partir de estos conocimientos. Formas de picos excelentes Durante años, las columnas SunFire han proporcionado picos
simétricos para mejorar la resolución de los compuestos ácidos,
neutros y básicos a rangos de pH bajos y moderados (2–8).
Comparación entre las formas de picos de las columnas SunFire
18
www.waters.com/sunfire
0 5 10 15 20 25 30 35 40 min
Lote 112 (2005)
Lote 118 (2007)
Lote 130 (2007)
Lote 134 (2008)
Reproducibilidad entre lotes de las columnas SunFire
Esta excelente reproducibilidad es consecuencia de nuestro compromiso de mantener las especificaciones más estrictas en el sector de las columnas HPLC. Las columnas SunFire parten de materias primas de alta pureza y se producen mediante procesos de fabricación y procedimientos de empaquetado de columnas controlados que ofrecen a los científicos actuales las mejores y más reproducibles columnas para HPLC que se encuentran disponibles.
Reproducibilidad entre lotes Waters se compromete con el mantenimiento de las
especificaciones más estrictas en el sector de la HPLC. Los
procesos de fabricación y los procedimientos de empaquetado
de columnas controlados le aseguran que recibirá la mejor y
más reproducible columna HPLC que se encuentra disponible.
19
Symmetry Symmetry
C18
Symmetry C8
SymmetryShield RP18
SymmetryShield RP18
Symmetry300 C18
Symmetry300 C4
Tamaño de partícula 3,5; 5µm 3,5; 5 µm 3,5 µm 5 µm 3,5 µm 5 µm
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 100 Å 100 Å 100 Å 100 Å 300 Å 300 Å
Carga de carbono 12% 12% 15% 17% 8,5% 2,8%
Recubrimiento final Si Si Si Si Si Si
OSi
CH3
CH3
OSi
CH 3
CH 3
OSi
CH 3
CH 3
OSi
CH3
CH3
OSi
CH Polar Group
3
CH 3O
SiCH Polar G
roup
3
CH 3
Las columnas Symmetry® se fabrican con sílice de alta pureza y mediante procesos de fabricación controlados de forma estricta para garantizar que recibirá una columna que supere los estándares establecidos para el rendimiento de las columnas HPLC. Ninguna otra marca de columnas para LC basadas en sílice puede igualar la reproduc-ibilidad entre columnas y entre lotes de la familia Symmetry. Las columnas Symmetry están disponibles en formatos de columna,
de cartucho y de precolumna:
■■ Columnas Symmetry C18 y C8:
ofrecen la máxima reproducibilidad
■■ Columnas SymmetryShield™ RP18 y RP8:
ofrecen una forma de picos excelente
■■ Columnas Symmetry300™ C18 y C4: ofrecen recuperaciones
elevadas de péptidos y proteínas
0,0
1 2
3
4
1,50 3,0 4,5 6,00 7,5 9,0 10,5 12,0
Lote 136 (1998)
Lote 142 (1998)
Lote 149 (1999)
Lote 151 (2000)
Lote 156 (2001)
13,5 15,0 min
Reproducibilidad sin igual un año tras otro.
Reproducibilidad entre lotes de las columnas Symmetry
Condiciones de LCColumna: Symmetry C18, 5 µm, 4,6 x 150 mm Fase móvil A: aguaFase móvil B: acetonitriloFase móvil C: pH de 3,75; 100 mM de formiato de amonio en agua Caudal: 1,4 mL/minIsocrática: 30% A; 60% B; 10% C
RSD para tiempos de retención1. Terbinafina HCI 0,7% 2. Ibuprofeno 0,8%3. Lovastatina 0,6%4. Simvastatina 0,7%
Columnas Symmetry para la máxima reproducibilidad Puede confiar en las columnas para HPLC Symmetry si desea que
el rendimiento sea robusto y reproducible. Los estrictos intervalos
de las especificaciones de las columnas minimizan la variación
y le ofrecen la seguridad de que, el día de mañana, podrá seguir
utilizando los métodos que usa hoy en día.
Volumen de inyección: 5,0 µLTemperatura: 30 °CDetección: UV a 233 nm
20
Symmetry Symmetry
C18
Symmetry C8
SymmetryPrep™ C18
SymmetryPrep C8
SymmetryShield RP18
SymmetryShield RP18
Symmetry300 C18
Symmetry300 C4
Tamaño de partícula 3,5; 5 µm 3,5; 5 µm 7 µm 7 µm 3,5 µm 5 µm 3,5 µm 5 µm
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 100 Å 100 Å 100 Å 100 Å 100 Å 100 Å 300 Å 300 Å
Carga de carbono 12% 12% 19% 12% 15% 17% 8,5% 2,8%
Recubrimiento final Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí
Columnas Symmetry para formas de picos excelentes Las columnas SymmetryShield incorporan la tecnología de grupos
polares integrados patentada por Waters; dicha tecnología protege los
silanoles residuales de la sílice de los analitos muy básicos y mejora la
forma general de los picos. Además, al colocar el grupo polar integrado
cerca de la superficie de sílice, la actividad de los silanoles superficiales
se reduce aún más. De este modo, se confiere una selectividad y una
retención diferentes de las del ligando Symmetry C18.
Reproducibilidad sin igual un año tras otro.
Reproducibilidad entre lotes de las columnas Symmetry
RSD para tiempos de retención1. Terbinafina HCI 0,7% 2. Ibuprofeno 0,8%3. Lovastatina 0,6%4. Simvastatina 0,7%
La tecnología de grupos polares integrados mejora la selectividad y las formas de los picos cromatográficos.
Las columnas SymmetryShield ofrecen una selectividad única
Factor de asimetría USP = 1,2
SymmetryShield RP18
Factor de asimetría USP = 1,9
Symmetry C18
0 5 10 15 20 25
12
3
4
5
7 6
0 5 10 15 20 25
1 2
3
4
56
7
UA
UA
30 min
30 min
Condiciones de LCColumna: SymmetryShield RP18, 5 µm, 3,9 x 150 mm Symmetry C18, 5 µm, 3,9 x 150 mm Fase móvil: metanol al 65%; 20 mM de fosfato monopotásico al 35%/ fosfato de dipotasio con un pH de 7Caudal: 1,0 mL/minDetección: UV a 254 nmTemp. de la columna: 23 °C
Compuestos 1. Uracilo2. Propranolol3. Butilparabeno4. Dipropilftalato5. Naftaleno6. Amitriptilina7. Acenafteno
Volumen de inyección: 5,0 µLTemperatura: 30 °CDetección: UV a 233 nm
www.waters.com/symmetry21
Las columnas XTerra® MS, Shield RP y Phenyl combinan las mejores propie-
dades de la sílice y de las fases enlazadas poliméricas con la tecnología
patentada de partículas híbridas, que reemplaza uno de cada tres silanoles
por un grupo metilo durante la síntesis de partículas. Solo se puede con-
seguir dicho reemplazo durante la síntesis de partículas inicial; asimismo,
la inclusión de este grupo metilo es una parte integral de la estructura de
las partículas base. El resultado es un partícula mecánicamente fuerte que
puede usarse para separaciones a pH altos; como consecuencia, se mejora
la carga y las formas de picos de los compuestos básicos.
La eficacia de la sílice con la estabilidad de los polímeros La gran mayoría de las separaciones HPLC de fase reversa tienen lugar
en fases estacionarias basadas en sílice. A la sílice se le ha atribuido
durante mucho tiempo una eficacia elevada y una gran resistencia
mecánica. Sin embargo, la sílice tiene como inconvenientes la obten-
XTerra MS C18 RP18 RP8 Fenilo
Tamaño de partícula 2,5; 3,5; 5; 10 µm
3,5; 5; 10 µm
3,5; 5; 10 µm 3,5; 5 µm
Forma de las partículas
Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 125 Å 125 Å 125 Å 125 Å
Carga de carbono 15,5% 15,0% 13,5% 12,0%
Recubrimiento final Sí Sí Sí Sí
Proceso de fabricación tradicional de la sílice Partículas de sílice enlazadas y con recubrimiento final
Proceso de fabricación del relleno híbrido de primera generación (XTerra) Mucho más que una modificación de la superficie Partículas XTerra enlazadas y con recubrimiento final
ción de formas de picos deficientes para las bases y un rango de pH
limitado. Una de las formas con la que los técnicos en cromatografía
han tratado de superar estas limitaciones ha sido la utilización de fases
estacionarias basadas en polímeros. Los polímeros, no obstante, no
han gozado de la aceptación de la sílice debido a su poca eficacia, a su
baja resistencia mecánica y a un orden de elución de picos impredecible
cuando se transfieren métodos de columnas poliméricas a columnas
basadas en sílice.
La tecnología de partículas híbridas supera estas limitaciones; no solo
combina los mejores atributos de ambos materiales, sino que subsana
las debilidades de cada material. El resultado es un material robusto
con una resistencia mecánica elevada, una eficacia alta, una forma de
picos excelente para las bases y un escalado sencillo de la cromato-
grafía analítica a la preparativa.
Comparación entre el proceso de fabricación del relleno híbrido de primera generación (XTerra) y el de la sílice
Si
CH 3
Polar Group
CH 3
O Si
CH 3
Polar Group
CH 3
O OSi
C H 3
C H 2C H
C H 3O
n■■La cobertura homogénea más alta
n 1/3 menos de silanoles
n■Excelente forma de picos
n■Rango de pH entre 1 y 12
n La cobertura superficial
más baja
n Forma de picos
deficiente
n Rango de pH entre 2 y 8
PartículaXTerra
no enlazada
Metilpolietoxisilano(MPEOS)
Tetraetoxisilano(TEOS)
Metiltrietoxisilano(MTEOS)
Partícula de sílice no enlazada
Politoxisilano(PEOS)
Tetraetoxisilano(TEOS)
* Valor esperado o aproximado.
OH
SiO O
OO
SiO
OH
OSi
O
OH
OSi
O
OO
Si
OSi
O
OH
SiOH
O
Si
OO
Si
Si
Si OH
O O
Si OO
Si
SiSi
Si
Si
Si
SiHO
Si
SiO
O
SiO
O
Si O
HO O
SiSi
Si
SiOHO
O
Si
SiO
HO
OSi
O
HO
HO
Si
Si
OSi
O
OH
O
Si
Si
OH
O O
O
SiOH
OO
Si
Si
Si OH
OO
SiO
OSi OH
O
Si
Si
SiSi
OH
SiO O
O
SiOO
SiO
OHO
Si O
OO
Si
OSi
O
OH
SiO
Si
O
O
O
Si
Si
Si
O O
Si OO
Si
SiSi
Si
Si
Si
Si
HOSi
O
SiO
O
SiO
O
Si O
HO O
SiSi
Si
SiO
O
Si
SiO
HO
OSi
O
HOSi
Si
OSi
O
OHO
Si
Si
OH
O
O
SiOO
Si
Si
Si OH
OO
SiO
OSi OH
O
Si
Si
SiSiH3C
H3C CH3
H3C
H3C
H3C
CH3CH3
H3C
CH3
CH3
CH3
H3C
H3C
CH3
CH3
22
Separaciones con la eficacia típica de la sílice trabajando a pH típicos de rellenos poliméricos
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
1
3
2
4
6
5
10 20
UA
6
54
3
2
1UA
0
0,4
0,8
1,2
10 20 min min
Condiciones de LCFase móvil A: 20 mM de NH4OH, pH de 10,7 Fase móvil B: acetonitriloCaudal: 3 mL/min Gradiente: Tiempo Perfil (min) %A %B 0,00 70 30 25,00 40 60 28,00 40 60Volumen de inyección: 5 µL Temperatura: ambiente Detección: UV a 220 nm Instrumento: detector de matriz de fotodiodos
2690 y 996 de Waters
Compuestos 1. Codeína2. Yohimbina 3. Tebaína4. Cocaína5. Reserpina6. Metadona
XTerra RP18: 4,6 x 150 mm pH 10,7
Columna polimérica: 4,1 x 150 mm pH 10,7
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
1
3
2
4
6
5
10 20
UA
6
54
3
2
1UA
0
0,4
0,8
1,2
10 20 min min
www.waters.com/xterra23
COLUMNAS WATERS SPHERISORB Las columnas Waters Spherisorb® son una de las columnas HPLC más citadas en la literatura científica. Existen más de
2000 resúmenes analíticos publicados que mencionan las columnas Waters Spherisorb, lo que brinda un intervalo extraordinario de
aplicaciones y métodos validados que le pueden servir de ayuda durante el proceso de desarrollo de métodos.
Las columnas Waters Spherisorb se fabrican en un rango amplio de tamaños de partícula (3, 5 y 10 µm) y de fases enlazadas para satisfacer
cualquier necesidad cromatográfica. Además, las fases enlazadas de calidad superior de las columnas Waters Spherisorb ofrecen muchas
selectividades de separación diferentes y únicas. Las columnas analíticas Waters Spherisorb se suministran con conectores de columna de
estilo Parker, que constituyen el estándar del sector. Los cartuchos de columna Waters Spherisorb precisan conectores de cartucho de estilo
Parker reutilizables.
Spherisorb
Tipo de ligando ODS2 (C18) ODS1 (C18) ODSB (C18) C8 C6 C1 NH2 (amino)
Tamaño de partícula 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 5 μm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm
Área superficial 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å
Carga de carbono 11,5% 6,2% 11,5% 7,75% 4,7% 2,15% 1,9%
Cobertura del ligando
2,98 µmol/m2 1,49 µmol/m2 2,98 µmol/m2 3,12 µmol/m2 3,36 µmol/m2 2,97 µmol/m2 2,64 µmol/m2
Recubrimiento final Sí No Sí Sí Sí No No
Tipo de ligando Fenilo CN (nitrilo) OD/CN W (sílice) SCX SAX
Tamaño de partícula 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 5 μm 3; 5; 10 µm 5; 10 µm 5; 10 µm
Área superficial 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g
Forma de las partículas
Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å
Carga de carbono 2,5% 3,1% 5% N/A 4% 4%
Cobertura del ligando
2,72 µmol/m2 3,29 µmol/m2 1,15 µmol/m2 N/A – –
Recubrimiento final No No Sí N/A No No
www.waters.com/spherisorb
24
Spherisorb
Tipo de ligando ODS2 (C18) ODS1 (C18) ODSB (C18) C8 C6 C1 NH2 (amino)
Tamaño de partícula 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 5 μm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm
Área superficial 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å
Carga de carbono 11,5% 6,2% 11,5% 7,75% 4,7% 2,15% 1,9%
Cobertura del ligando
2,98 µmol/m2 1,49 µmol/m2 2,98 µmol/m2 3,12 µmol/m2 3,36 µmol/m2 2,97 µmol/m2 2,64 µmol/m2
Recubrimiento final Sí No Sí Sí Sí No No
Tipo de ligando Fenilo CN (nitrilo) OD/CN W (sílice) SCX SAX
Tamaño de partícula 3; 5; 10 µm 3; 5; 10 µm 5 μm 3; 5; 10 µm 5; 10 µm 5; 10 µm
Área superficial 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g 220 m2/g
Forma de las partículas
Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å 80 Å
Carga de carbono 2,5% 3,1% 5% N/A 4% 4%
Cobertura del ligando
2,72 µmol/m2 3,29 µmol/m2 1,15 µmol/m2 N/A – –
Recubrimiento final No No Sí N/A No No
Nova-Pak
Química C18 C8 Fenilo CN Sílice Prep HR C18 Prep HR Sílice
Tamaño de partícula 4 µm 4 µm 4 µm 4 µm 4 µm 6 µm 6 µm
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 60 Å 60 Å 60 Å 60 Å 60 Å 60 Å 60 Å
Carga de carbono 7% 4% 5% 2% N/A 7% N/A
Recubrimiento final Sí Sí Sí Sí N/A Sí N/A
COLUMNAS NOVA-PAK Las fases enlazadas de las columnas Nova-Pak® cuentan con tamaños de partículas de 4 y 6 µm que ofrecen una resolución elevada, así como una
cromatografía más rápida y eficaz. El tamaño de partícula más pequeño, en combinación con unas longitudes más cortas de columnas, se puede
usar para reducir el consumo de eluyente, así como para mantener la resolución en el caso de las mezclas complejas. Las columnas analíticas que
tienen un relleno con un tamaño de partícula de 4 µm se encuentran disponibles como columnas de acero con longitudes de 75, 150 y 300 mm.
Las columnas de cartucho de acero con conectores reutilizables se encuentran disponibles en longitudes de 50, 100, 150 y 250 mm. Las columnas
semipreparativas Prep Nova-Pak HR se empaquetan con rellenos que tienen un tamaño de partícula de 6 µm y proporcionan un intervalo inigualable
de posibilidades de separación. El relleno de alta eficacia de las columnas Prep Nova-Pak HR ofrece separaciones más rápidas utilizando menos
eluyente, así como la ventaja adicional que aportan unas fracciones más concentradas; por tanto, reduce el coste de la cromatografía preparativa.
Todas las columnas Nova-Pak se empaquetan utilizando rigurosos procedimientos de control de calidad que se llevan a cabo en nuestras fábricas de
acuerdo con las buenas prácticas de fabricación actuales (cGMP); de esta forma, se garantiza la reproducibilidad entre lotes.
www.waters.com/nova-pak
25
COLUMNAS RESOLVE El relleno Resolve™ sin recubrimiento final es considerablemente diferente de otros materiales de relleno de Waters. El cambio en el
comportamiento cromatográfico se detecta, por lo general, en compuestos polares que normalmente se retienen más. Se pueden obtener
cromatogramas de compuestos básicos mediante modificadores de fase móvil, como es el caso de reactivos de par iónico que reducen la
asimetría excesiva de picos. Las columnas Resolve C18 y de sílice están disponibles para aplicaciones que precisan una resolución elevada.
COLUMNAS DELTA-PAK Las columnas Delta-Pak™ son ideales para la separación y el aislamiento de péptidos, proteínas y productos naturales; cuentan con dos
tamaños de poro diferentes que están optimizados para las separaciones de moléculas grandes. Las columnas Delta-Pak son conocidas por el
escalado sistemático y predecible entre formatos de columna, lo que ofrece a los científicos encargados de la purificación la posibilidad de
aislar los compuestos diana con cantidades que van desde varios miligramos a varios gramos. La sílice enlazada de las columnas Delta-Pak,
que es muy estable, dispone de tamaños de partícula muy eficaces de 5 y 15 μm.
Resolve
Tipo de ligando Sílice C18 C8 CN
Tamaño de partícula 5; 10 µm 5; 10 µm 10 µm 10 µm
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 90 Å 90 Å 90 Å 90 Å
Carga de carbono 10% 10% 5% 3%
Recubrimiento final N/A No No No
Delta-Pak
Tipo de ligando C18 C18 C4 C4
Tamaño de partícula 5; 15 µm 5; 15 µm 5; 15 µm 5; 15 µm
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 100 Å 300 Å 100 Å 300 Å
Carga de carbono 17% 7% 7% 3%
Recubrimiento final Sí Sí Sí Sí
www.waters.com/delta-pak
www.waters.com/resolve
26
Resolve
Tipo de ligando Sílice C18 C8 CN
Tamaño de partícula 5; 10 µm 5; 10 µm 10 µm 10 µm
Forma de las partículas Esférica Esférica Esférica Esférica
Tamaño de poro 90 Å 90 Å 90 Å 90 Å
Carga de carbono 10% 10% 5% 3%
Recubrimiento final N/A No No No
Tecnología de partículas irregulares Los primeros materiales de relleno de HPLC constaban de partículas con formas irregulares y no esféricas. Por lo general, estas columnas reducen la estabilidad mecánica y hacen que disminuya la eficacia en comparación con las columnas empaquetadas con partículas esféricas. Sin embargo, incluso con estas limitaciones, existen muchos métodos que precisan el uso de dichas fases enlazadas. Como principal fabri-cante de sorbentes y fases enlazadas, Waters ha mostrado durante más de 40 años que sus columnas ofrecen un rendimiento sistemático y
fiable; por este motivo, continuará respaldando a estas marcas en el futuro.
Columnas µBONDAPAK/BONDAPAK Si su método es adecuado para una columna μBondapak®, solo existe una columna que contenga el material de relleno μBondapak C18. Muchas empresas afirman contar con una selectividad "similar a μBondapak", pero ninguna ha superado las rigurosas pruebas de control de calidad a las que se ven sometidos los lotes de Waters. Los materiales de relleno μBondapak o BondaPak® han demostrado su reproducibilidad un año tras otro desde 1973, lo que ha favorecido que las columnas μBondapak sean la marca de columnas HPLC que con más frecuencia se
ha citado.
Columnas µPORASIL/PORASIL Las partículas μPorasil™ y Porasil™ fueron de los primeros materiales de relleno totalmente porosos que se pusieron a la venta para las
separaciones por LC. Por contraste con la capacidad de separación de fase reversa de μBondapak C18, el material no enlazado basado en sílice
de las columnas μPorasil se creó para proporcionar separaciones de fase normal para una amplia gama de tipos de muestras.
µBondapak/Bondapak
Tipo de ligando C18Fenilo CN NH2
Tamaño de partícula 10 μm 10 μm 10 μm 10 μm
Forma de las partículas Irregular Irregular Irregular Irregular
Tamaño de poro 125 Å 125 Å 125 Å 125 Å
Carga de carbono 10% 8% 6% 3,5%
Recubrimiento final Sí Sí Sí No
www.waters.com/bondapak
µPorasil/Porasil
Tipo de ligando Sílice
Tamaño de partícula 10, 15-20 μm
Forma de las partículas Irregular
Tamaño de poro 125 Å
Carga de carbono N/A
Recubrimiento final N/A
www.waters.com/delta-pak
www.waters.com/resolve
www.waters.com/porasil
27
Nombre del producto
Uso previsto Modo cromatográfico Sistemas Contenido
QCRM de compuestos neutros
Proporciona información del rendimiento cromatográfico independientemente del pH de fase móvil usando 3 compuestos neutros.
Fase reversaTodos los sistemas de UPLC/HPLC con detector UV
Mezcla de 3 componentes que incluye:10 μL/mL de acetona, 0,25 mg/mL de naftaleno y0,4 mg/mL de acenafteno
En una solución de 2 mL de 50/50 acetonitrilo/agua. Almacenar a temperatura ambiente.
QCRM de fase reversa
Proporciona información del rendimiento cromatográfico, incluido el pH de fase móvil, usando 1 marcador de volumen muerto, 3 compuestos neutros, 1 compuesto ácido y 2 compuestos básicos.
Fase reversaTodos los sistemas de UPLC/HPLC con detector UV
Mezcla de 7 componentes que incluye:0,016 mg/mL de uracilo, 0,02 mg/mL de butilparabeno, 0,06 de mg/mL naftaleno,0,4 mg/mL de propranolol, 0,34 mg/mL de dipropilftalato,0,2 mg/mL de acenafteno y 0,1 mg/mL de amitriptilina
En una solución de 2 mL de 65/35 metanol/20 mM de tampón de K2HPO4 a un pH de 7. Almacenar a temperatura ambiente.
HILIC QCRM
Proporciona información del rendimiento cromatográfico del modo HILIC, incluido el pH de fase móvil, usando 1 marcador de volumen muerto, 1 compuesto neutro polar y 2 compuestos básicos polares.
HILIC
Todos los sistemas de UPLC/HPLC con detector UV
Mezcla de 4 componentes que incluye:0,0190 mg/mL de acenafteno, 0,0037 mg/mL de timina0,0037 mg/mL de adenina y 0,0077 mg/mL de citosina
En una solución de 1 mL de 20/80 acetonitrilo/agua. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C tras su recepción.
QDa QCRM
Proporciona información cromatográfica y de espectrometría de masas de cuadrupolo usando una mezcla de 8 componentes para cubrir un amplio rango de m/z de ESI (+-) a una concentración optimizada. Esta solución contiene 1 par crítico para medir el rendimiento cromatográfico.
Fase reversa Todos los sistemas de UPLC/HPLC con el detector ACQUITY® QDa®
Mezcla de 9 componentes que incluye:100,0 μg/mL de paracetamol, 45,0 μg/mL de cafeína, 50,0 μg/mL de sulfaguanidina, 10,0 μg/mL de sulfadimetoxina, 25,0 μg/mL de val-tyr-val, 6,0 μg/mL de verapamilo, 6,0 μg/mL de terfenadina,25,0 μg/mL de leucina-encefalina y 19,0 μg/mL de reserpina
En una solución de 1 mL con 23,5% de acetonitrilo de calidad LC-MS, 76,5% de agua de calidad LC-MS y 0,007% de ácido fórmico. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C.
Quad LCMS QCRM
Proporciona información cromatográfica y de espectrometría de masas de alto rendimiento usando una mezcla de 9 componentes a una concentración optimizada. Esta solución contiene 2 pares críticos para medir el rendimiento cromatográfico.
Fase reversaTodos los sistemas de UPLC/HPLC con espectrómetro de masas de cuadrupolo
Mezcla de 8 componentes que incluye:100 µg/mL de paracetamol, 50 µg/mL de sulfaguanidina,10 µg/mL de sulfadimetoxina, 25 µg/mL de val-tyr-val,6 µg/mL de verapamilo, 6 µg/mL de terfenadina,25 μg/mL de leucina-encefalina y 8 μg/mL de reserpina
19/81 acetonitrilo/agua, 0,008% de ácido fórmico. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C tras su recepción.
LCMS QCRM
Proporciona información cromatográfica y de espectrometría de masas de alto rendimiento usando una mezcla de 9 componentes a una concentración optimizada. Esta solución contiene 2 pares críticos para medir el rendimiento cromatográfico.
Fase reversa Todos los sistemas de UPLC/HPLC con espectrómetro de masas de alto rendimiento
Mezcla de 9 componentes que incluye:10,0 µg/mL de paracetamol, 1,5 µg/mL de cafeína,5,0 μg/mL de sulfaguanidina, 1,0 μg/mL de sulfadimetoxina,2,5 µg/mL de val-tyr-val, 0,2 µg/mL de verapamilo,0,2 µg/mL de terfenadina, 2,5 µg/mL de leucina-encefalina y0,6 μg/mL de reserpina
En una solución de 500 μL de 5,7% de acetonitrilo y 94,3% de agua. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C tras su recepción.
Los estándares de referencia QCRM contienen mezclas de patrones seleccionadas de forma específica para ofrecer una manera sencilla y fiable de controlar el rendimiento de cualquier sistema cromatográfico. El uso de los QCRM le puede servir para asegurarse de que la columna y el sistema estén preparados para analizar las muestras. El uso regular de QCRM también proporciona una oportunidad para optimizar los sistemas cromatográficos y consultar la evolución del rendimiento de dichos sistemas a lo largo del tiempo, lo que facilita la identificación de problemas de forma proactiva y la posibilidad de resolverlos con mayor rapidez.
Dado que los análisis cromatográficos son complejos y dependen de muchas variables diferentes, como la composición de la fase móvil, el tipo de columna y el método de detección, Waters ha formulado mezclas de QCRM específicas diseñadas para evaluar los sistemas teniendo en cuenta estas diferencias.
Para obtener más información acerca de los estándares específicos para la calibración, la cualificación y el ajuste de instrumentos y detectores, así como una lista más completa de los estándares y reactivos que se encuentran disponibles, visite asr.waters.com.
¿Cómo puede saber que su sistema cromatográfico funciona de forma adecuada?
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Nombre del producto
Uso previsto Modo cromatográfico Sistemas Contenido
QCRM de compuestos neutros
Proporciona información del rendimiento cromatográfico independientemente del pH de fase móvil usando 3 compuestos neutros.
Fase reversaTodos los sistemas de UPLC/HPLC con detector UV
Mezcla de 3 componentes que incluye:10 μL/mL de acetona, 0,25 mg/mL de naftaleno y0,4 mg/mL de acenafteno
En una solución de 2 mL de 50/50 acetonitrilo/agua. Almacenar a temperatura ambiente.
QCRM de fase reversa
Proporciona información del rendimiento cromatográfico, incluido el pH de fase móvil, usando 1 marcador de volumen muerto, 3 compuestos neutros, 1 compuesto ácido y 2 compuestos básicos.
Fase reversaTodos los sistemas de UPLC/HPLC con detector UV
Mezcla de 7 componentes que incluye:0,016 mg/mL de uracilo, 0,02 mg/mL de butilparabeno, 0,06 de mg/mL naftaleno,0,4 mg/mL de propranolol, 0,34 mg/mL de dipropilftalato,0,2 mg/mL de acenafteno y 0,1 mg/mL de amitriptilina
En una solución de 2 mL de 65/35 metanol/20 mM de tampón de K2HPO4 a un pH de 7. Almacenar a temperatura ambiente.
HILIC QCRM
Proporciona información del rendimiento cromatográfico del modo HILIC, incluido el pH de fase móvil, usando 1 marcador de volumen muerto, 1 compuesto neutro polar y 2 compuestos básicos polares.
HILIC
Todos los sistemas de UPLC/HPLC con detector UV
Mezcla de 4 componentes que incluye:0,0190 mg/mL de acenafteno, 0,0037 mg/mL de timina0,0037 mg/mL de adenina y 0,0077 mg/mL de citosina
En una solución de 1 mL de 20/80 acetonitrilo/agua. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C tras su recepción.
QDa QCRM
Proporciona información cromatográfica y de espectrometría de masas de cuadrupolo usando una mezcla de 8 componentes para cubrir un amplio rango de m/z de ESI (+-) a una concentración optimizada. Esta solución contiene 1 par crítico para medir el rendimiento cromatográfico.
Fase reversa Todos los sistemas de UPLC/HPLC con el detector ACQUITY® QDa®
Mezcla de 9 componentes que incluye:100,0 μg/mL de paracetamol, 45,0 μg/mL de cafeína, 50,0 μg/mL de sulfaguanidina, 10,0 μg/mL de sulfadimetoxina, 25,0 μg/mL de val-tyr-val, 6,0 μg/mL de verapamilo, 6,0 μg/mL de terfenadina,25,0 μg/mL de leucina-encefalina y 19,0 μg/mL de reserpina
En una solución de 1 mL con 23,5% de acetonitrilo de calidad LC-MS, 76,5% de agua de calidad LC-MS y 0,007% de ácido fórmico. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C.
Quad LCMS QCRM
Proporciona información cromatográfica y de espectrometría de masas de alto rendimiento usando una mezcla de 9 componentes a una concentración optimizada. Esta solución contiene 2 pares críticos para medir el rendimiento cromatográfico.
Fase reversaTodos los sistemas de UPLC/HPLC con espectrómetro de masas de cuadrupolo
Mezcla de 8 componentes que incluye:100 µg/mL de paracetamol, 50 µg/mL de sulfaguanidina,10 µg/mL de sulfadimetoxina, 25 µg/mL de val-tyr-val,6 µg/mL de verapamilo, 6 µg/mL de terfenadina,25 μg/mL de leucina-encefalina y 8 μg/mL de reserpina
19/81 acetonitrilo/agua, 0,008% de ácido fórmico. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C tras su recepción.
LCMS QCRM
Proporciona información cromatográfica y de espectrometría de masas de alto rendimiento usando una mezcla de 9 componentes a una concentración optimizada. Esta solución contiene 2 pares críticos para medir el rendimiento cromatográfico.
Fase reversa Todos los sistemas de UPLC/HPLC con espectrómetro de masas de alto rendimiento
Mezcla de 9 componentes que incluye:10,0 µg/mL de paracetamol, 1,5 µg/mL de cafeína,5,0 μg/mL de sulfaguanidina, 1,0 μg/mL de sulfadimetoxina,2,5 µg/mL de val-tyr-val, 0,2 µg/mL de verapamilo,0,2 µg/mL de terfenadina, 2,5 µg/mL de leucina-encefalina y0,6 μg/mL de reserpina
En una solución de 500 μL de 5,7% de acetonitrilo y 94,3% de agua. Almacenar a una temperatura refrigerada de 2–5 °C tras su recepción.
Herramientas on-line
Waters Reversed-P hase Column Selectivity Chart (Gráfico de selectividad de las columnas de fase reversa de Waters)
www.waters.com/selectivitychart
Waters Part Selector and Selectivity Chart for iPad® (Selector de piezas y gráfico de selectividad de Waters para iPad)
www.waters.com/apps
Waters Column Advisor (Asesor de columnas de Waters)
www.waters.com/columnadvisor
Para obtener una lista con los números de referencia de todas las columnas mencionadas en este folleto, visite waters.com/findmycolumn.
Recursos adicionales
Descripción Referencia
Documentación técnica sobre patrones de referencia QCRM y la optimización del rendimiento del instrumento 720004535EN
Nota de aplicación sobre la resolución de problemas habituales del sistema con los patrones de referencia QCRM de compuestos neutros 720004635EN
Guía de selección de reactivos, patrones analíticos y columnas de Waters 720002241EN
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www.waters.com/hplccolumns
OFICINAS DE VENTAS:
Austria 43 1 877 18 07
Australia 61 2 9933 1777
Bélgica y Luxemburgo 32 2 726 1000
Brasil 55 11 4134 3788
Canadá 1 800 252 4752
China 86 21 6156 2666
República Checa 420 2 617 11384
Dinamarca 45 46 59 8080
Finlandia 358 9 5659 6288
Francia 33 1 30 48 72 00
Alemania 49 6196 400 600
Hong Kong 852 2964 1800
Hungría 36 1 350 5086
India 91 080 49292200 03
Irlanda 353 1 448 1500
Israel 9723 3731391
Italia 39 02 265 0983
Japón 81 3 3471 7191
Corea 82 2 6300 9200
México 52 55 52 00 1860
Países Bajos 31 76 508 7200
Noruega 47 6 384 6050
Polonia 48 22.101 5900
Portugal 351 21 893 61 77
Puerto Rico 1 787 747 8445
Rusia/CEI 7 495 727 4490 / 336 7000
Singapur 65 6593 7100
España 34 93 600 9300
Suecia 46 8 555 115 00
Suiza 41 56 676 7000
Taiwán 886 2 2508 5500
Reino Unido 44 208 238 6100
Estados Unidos 1 800 252 4752
Waters Corporation 34 Maple Street Milford, MA 01757 EE. UU. TEL 508 478 2000 Fax: 508 872 1990 www.waters.com
Waters, The Science of What’s Possible, CORTECS, UPLC, Alliance, ACQUITY UPLC, XBridge, XSelect, Atlantis, Symmetry, XTerra, Waters Spherisorb, Nova-Pak, BondaPak, µBondaPak, QDa y ACQUITY son marcas comerciales registradas de Waters Corporation. BEH Technology, CSH, SunFire, Intellignet Speed, IS, OBD, SymmetryShield, Symmetry300, µPorasil, Porasil, Resolve, Delta-Pak y SymmetryPrep son marcas comerciales de Waters Corporation. Todas las demás marcas comerciales pertenecen a sus respectivos propietarios.
©2014 Waters Corporation. Impreso en EE. UU.Septiembre de 2014 720003995ES AO-SIG
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