TALLER 2

Cocos Gram PositivoStaphylococcus y Streptococcus

Maracaibo, 4 de mayo de 2011

Victor Urdaneta

Maite Trompiz Stefany

Troconis

Isabel Urdaneta María

Urdaneta

tipo morfológico de bacteria esférica(del griego kókkos, grano)

Cocos

Diplococo Estafilococo EstreptococoTetracoco

EstafilococosStaphylococcus

esféricas anaerobio facultativas de casi 1mm de diámetro dispuestas en grupos

irregulares y son Gram positivas

Son

Por ello se observan de color púrpura

Características de los Staphylococcus* Son inmóviles. * No presentan endosporas.

* Presentes en la piel y en la mucosa del ser humano (Staphylococcus epidermidis).

* Existen Staphylococccus capsulados que son algunas cepas del S. aureus.

* Fermentan carbohidratos y producen pigmentos que van

y

* Producen coagulasa que los protege de la fagocitosis.

* Causan hemolisis por acción de la toxina α y β.

* Producen toxinas exfoliativas que provocan la descamación generalizada del síndrome de la piel escaldada.

Amarillo intenso

peróxido de hidrógeno (antígeno)* Producen catalasa que convierte el

Blanco

* El Staphylococcus aureus es resistente a la penicilina por la producción de β-lactamasa.

Especies de StaphylococcusNombre Características Hábitat Enfermedades

Staphylococcus epidermidis

-Gram positivos-Catalasa Positivos

- Desoxirribonucleasa Negativo- Coagulasa Negativo

- Sensibles a la novobiocina -No Hemolítico

-No fermenta manitol. -No es pigmentado.

-Capsulado

Flora normal de piel aparatos respiratorios

y gastrointestinal humano

Infecciones de catéter

Infección de implante

Infección de herida

Cistitis

Endocarditis

Staphylococcus saprophyticus

- Gram positivos- Catalasa Positivos

- Coagulasa Negativo - No posee capsula

- No pigmentado- Resistente a la novobiocina,

penicilina y meticilina - Sensible a la vancomicina

- Desoxirribonucleasa Negativo - Sensible al óxido nítrico

- No hemolítico

No se conoce con exactitud

Causa infecciones en el aparato urinario femenino,

uretritis en varones

Staphylococcus aureus

- Gram positivos- Coagulasa Positivos- Catalasa positivos

- Resistente a la Penicilina- Algunas cepas son capsuladas

- Fermentan el manitol- Desoxirribonucleasa Positivo

- Resistente al óxido nítrico (lactato-deshidrogenasa,)

- Sensibles a la Vancomicina

Flora normal de la piel humana

Síndrome de piel escaldada

Síndrome del shock tóxico

Gastroenteritis

Neumonía

Pruebas diagnósticas de laboratorio

Pus

Frotis Pus

Esputo

-No se pueden determinar si son patógenos o saprófitos

-Solo se observa la forma, agrupación, comportamiento al Gram de los Staphylococcus

Cultivo

Agar sangre

Sangre

Líquido cefalorraquídeo

Esputo

A las 18 hrs. de incubación Se observan las colonias típicas

Se observan hemólisis y producción de pigmentos

Agar sal y manitol

Para detectar el Staphylococcus aureus

A los días

mixtaNo tienen

requerimientos nutricionales altos

Muestras

Prueba de la catalasa

Método 2:

Método 1:Portaobjeto

oGota de peróxido

de hidrógeno tubo de ensayo

Solución de peróxido de hidrógeno

Prueba de coagulasa

Plasma citratado 1:5- Caldo de cultivo

- Colonias en crecimiento en Agar

Agar inclinado

37° C Formación de coágulo

4 hrs.

Prueba de la presencia de desoxirribunocleasa

Se siembra Staphylococcus en

una placa que contiene ADN y verde de metilo

Se incuba por 18 hrs.

Si se forma un halo transparente alrededor

de la siembra

EstreptococosStreptococcus, griego streptos significa que se dobla o retuerce con facilidad

Son cocos Gram positivos agrupados en cadena

Son mas complejos que los Staphylococcus y se clasifican según el

grado de hemólisis

Se clasifican en:

Streptococcus pyogenes representan a la gran mayoría de los patógenos humanos son sensibles a la bacitracina

Streptococcus agalactiae forma parte de la flora natural de las vías urinarias femeninas en ocasiones son sensibles a la bacitracina

Se pueden encontrar en la faringe y causar sinusitis, bacteriemia y endocarditis y se pueden confundir con los estreptococos del grupo A

Streptococcus bovis y Streptococcus equinus

Es difícil encontrarlos en enfermedades humanas

Enterococos

No enterococos

Streptococcus faecalis y Streptococcus faeciumSon inhibidos pero no destruidos por la penicilina

Son destruidos por la penicilina

Grupo

Grupo

Grupo y

Grupo

Grupo

y

,,

-

β-hemolíticosProducen hemólisis total de los glóbulos rojos

observándose como un halo transparente alrededor de las colonias

Se libera hemoglobina

α-hemolíticos Producen hemólisis parcial de los glóbulos rojos (α hemolíticos)

Grupo

Grupo

Streptococcus viridans: constituyen la flora normal de las vías respiratorias y son importantes en el estado de salud de las mucosas pueden llegar a la sangre por lesiones traumáticas

Streptococcus salivarius

Streptococcus mitis

Streptococcus mutans

Streptococcus sanguis

En caso de llegar a la cavidad bucal

Por la producción de polisacáridos

Son α-hemolíticos pero se comportan como enterococos

*Poseen diferente capacidad para producir hemólisis

*Es raro encontrarlos en enfermedades humanas

*Se conocen como Estreptococos lácticos porque cortan la leche

*Se desarrollan bajo condiciones anaerobias

*Hemólisis variable

*Se encuentran en la flora normal de intestino y vías urinarias femeninas

No produce constituyendo los δ hemolíticosLiberando pigmento

verde

Peptoestreptococo

Enfermedades causadas por StreptococcusStreptococcus β-hemolíticos

Infecciones de heridas traumáticas o quirúrgicas

Enfermedades por invasión del Streptococcus

Enfermedades por infección local del Streptococcus

Faringitis estreptocócica, es la infección mas común causada por el Streptococcus β-hemolíticos.

Puede causar Pioderma estreptocócica

Streptococcus pyogenes

Erisipela

Fiebre peuperal

Infecciones generalizadas

Útero

Piel

Produce:

Erupciones cubiertas de costras

Impétigo

Endocarditis infecciosa

Afectan las válvulas cardiacas normales o con deformaciones

Afectan las válvulas cardiacas anormales

que llega a la sangre por lesiones traumáticas

causada por flora normal de

Endocarditis bacteriana aguda

Endocarditis bacteriana subaguda

β-hemolíticos α-hemolíticos

Sensibilidad a la bacitracina

Hidrólisis del PYR

Prueba de CAMP

Bilis esculina

Prueba de tolerancia a la sal (Caldo salado)

PYR

Sensibilidad a la optoquina

Pruebas diagnósticas de laboratorio

β-hemolíticos

Sensibilidad a la bacitracina Se usa para separar a los Streptococcus pyoneges de los demás β-hemolíticos

Sembrar un gran inóculo en una placa de Agar sangre se coloca el disco de bacitracina

Se forma un halo de inhibición de crecimiento de cualquier diámetro

Hidrólisis del PYR

Se usa para separar a los Streptococcus pyoneges y Enterococos de los demás β-hemolíticos

Porque tienen la capacidad de hidrolizar el sustrato PYR gracias a la enzima L-piroglutamil

(Pirridonil β-naftilamida)

Si hay un cambio de color

Se incuba de 18-24hrs a 37° C

Se usa para separar a los Streptococcus agalactiae de los demás β-hemolíticos

CAMP ( Factor de monofosfato de adenina cíclica)

Consiste en sembrar una estría de Staphylococcus productor de betalicina en Agar sangre

Si hay una zona de potenciación de hemólisis en forma de punta de flecha

Se incuba de 18-24hrs a 37° C

Perpendicular a esta de 3-4mm de distancia una estría de Streptococcus β-hemolíticos del grupo B

Prueba de CAMP

α y δ hemolíticos

Bilis esculina Separa los Streptococcus del grupo D de los demás grupos de Streptococcus

Si se torna negro el medio

Sensibilidad a la optoquinaSe usa para diferenciar el Streptococcus neumoniae de los demás α hemolíticos

Estriar una placa de Agar sangre con una suspension de Mc Farland 0.5

Sembrar el inoculo en tubos de Agar bilis esculina inclinado pero la concentración de la bilis el al 40%

Colocar un disco de optoquina

Se incuba de 18-24hrs a 37° C

Si hay un halo de inhibición mayores de 15mm es característicos del Streptococcus neumoniae

Prueba de tolerancia a la sal (Caldo salado)

Separar los Enterococos capaces de crecer en caldo salado de otros Streptococcus del grupo D

Si aparece turbidez con o sin acidificación del medio

Se le agrega un indicador de pH Púrpura de bromocresol

Se incuba de 18-24hrs a 35° C

Se inocula el caldo salado con la cepa del Streptoccocus del grupo D a estudiar

Staphylococcus Streptococcus

*Su agrupación es en forma de racimos

*Su agrupación es en forma de cadenas

*No presentan grupos de clasificación *Se clasifican en grupos tomando en cuenta su grado de hemólisis

*Sus requerimientos nutricionales son bajos por lo que pueden cultivarse en

medios simples

*Tienen requerimientos nutricionales exigentes por lo que se necesitan medios de cultivo enriquecidos para su desarrollo

*Producen catalasa, enzima que cataliza la descomposiocion del peroxido de

hidrogeno en H2O

*No producen catalasa por lo que son catalasa negativos

*Producen la coagulasa, rodeándose de un coagulo de fibrina y protegerse de la

fagocitosis*No producen coagulasa

Diferencias

Semejanzas

Son bacterias Gram positivas Son anaerobias facultativas

Son de forma esférica por eso reciben el nombre de cocos

Obtienen energía mediante la fermentación de los carbohidratos

Pueden ser diagnosticados mediante frotis y cultivos

* Diplococos encapsulados

Permite tipificarlos con antisueros específicos

* Son habitantes normales de las vías respiratorias superiores de los humanos

Pueden causar:

* Gram positivos

Cápsula de

polisacáridos

* Se observan en cadenas cortas

Impide su reconocimiento por parte del hospedador, eludiendo su fagocitosis

Neumonía, sinusitis, otitis, bronquitis, meningitis y otros procesos infecciosos

Streptococcus pneumoniae (Neumococo)

Se observan con frecuencia en muestras

De cultivo joven

Esputo Pus

Lisis de los neumococos en minutos al añadir bilis de Buey (10%) o desoxicolato sódico (2%) a un caldo de cultivo o suspensión de

microorganismos con pH neutro

Sobre medio solido el crecimiento de ellos se inhibe alrededor de un disco de optoquina

Identificación de laboratorio

Virulencia casi uniforme en ratones cuando se inyectan vía intraperitoneal

Factores que disminuyen la resistencia al Neumococo

40-70% de los humanos son portadores del neumococo virulento en algún momento

Dinámica circulatoria

anormal

Congestión pulmonar

Insuficiencia cardiaca

Intoxicación alcohólica o con drogas

Deprime actividad fagocitaria

Disminuye el reflejo de la tos

Facilita la aspiración de materiales extraños

acumulación anormal de moco

Anormalidades del aparato respiratorio e

infecciones virales

Neumococos alcanzan el torrente sanguíneo por la vía de drenaje linfático de los pulmones.

Células mononucleares fagocitan activamente los residuos y gradualmente se reabsorbe esta fase liquida

Los fagocitos captan y digieren en su interior los neumococos.

Exudación de líquido fibrinoso edematoso a los alveolos seguidos por eritrocitos y leucocitos que producen

consolidación en el pulmón

Bacteriemia

Patología

Se extrae sangre para cultivo y se recolecta esputo para demostrar la presencia de neumococos mediante frotis y cultivos.

Pruebas diagnosticas de laboratorio:

- Meningitis neumónica: examen y cultivo del LCR

- Prueba de tumefacción de cápsula: esputo fresco que se mezcla con antisuero

Se observa tumefacción de la capsula o el exudado peritoneal también se usa (opcional)

- Cultivos: esputo sobre agar sangre e incubado en CO2 con la técnica de la vela. Hemocultivo.

- Frotis con tinción de Gram

Examen de esputo :

Colonización y migración

- Adhesinas Protéicas- Neumolisina

Destrucción Tisular

- Ácido Teicoico- Neumolisina - Peróxido de Hidrógeno

Supervivencia frente a fagocitosis

- Cápsula- Neumolisina

Factor virulencia

Patogenia

Ausencia de anticuerpos anticapsulares

Envejecimiento del sistema inmune

Disminución en la producción de anticuerpos