Aplicacciones tecnológicas de las
Bacterias del Ácido Láctico
PLANO DA APRESENTAÇÃO
Bactérias LácticasUtilização tradicionalNovas utilizações das BLL. lactis
Clonagem e ExpressãoSistemas de expressãoSistemas de endereçamento
USINA CELULAR
Fisiologia
BioquímicaMicrobiologia
Tecnología del ADN recombinante
Genética
INTEGRACIÓN
Nuevas utilización de BAL
Producción de proteínas heterologas de interes biotecnológico
ENZIMASENZIMAS-TecnológicaTecnológica- TerapueticaTerapuetica
(Probióticos GM)(Probióticos GM)
ANTÍGENOSANTÍGENOS- Veículos vacunales- Veículos vacunales
((vacunas oralesvacunas orales))
USINA
• Bacteria ampliamente utilizada en la industria
alimentaría
• De fácil manipulación dentro de las LAB
• Sólo la proteína USP45 es secretada en cantidades
suficientes para observarse mediante tinción de
Coomassie blue
• Información genética disponible
Orden de la membrana Capítulo VILactococcus lactis Expresión de capa S de L. brevisLactococcus lactis: BAL MODELO
MOTIVOS DE DIRECCIONAMIENTO PROTÉICO
Sistema NICE de direccionamiento protéico (Le Loir et al., 2001)
Membrana
Citoplasma
Parede celular
Medio extra-celularNuc
cwaM6
PnisA
nucspUsp45
Membrana
Citoplasma
Parede celular
Medio extra-celularNuc
spUsp45 nuc
PnisA
Membrana
Citoplasma
Parede celular
Medio extra-celular
Nuc
nuc
PnisA
pCYT:Nuc
pSEC:Nuc
pANC:Nuc
MOTIVOS DE ENDEREÇAMENTO PROTÉICO
Proteína secretada Proteína anclada
precursorSP
sobrenadante
parede celular
membrana
citoplasma
LPXT
Ancla
CWA
Expresión direccionada
Secretada
Citoplasmática
Anclada
Sistema de expresión NICE
Cmr PxylT rbsusp45 Slp T
spusp45Membrana
Citoplasma
Pared celular
Medio extra-celularNuc
• Cmr : Resistencia a Cloranfenicol
•PXyl T: Promotor de la Xilosa permeasa
•rbs usp45: Sitio de Unión al Ribosoma del gen usp45
•SP usp45: Péptido señal de la proteína USP45
Sistema de expresión XIES
BAL como vehículos vacunales
L. LactisL. Lactis
• Se encuentra en números productos lácteos fermentados
• Hay una lisis parcial en el intestino
• No coloniza el epitelio intestinal
• Tiempo de transito es discreto
• Efecto se produce en un tiempo limitado
1. Expresión de antígenos en forma citoplasmática
Al ocurrir la lisis parcial en el intestino los antígenos son liberados
BAL como vehículos vacunales
2. Expresión de antígenos en forma secretada
Los antígenos interactúan directamente formando parte de la partícula completa o de los
fragmentos luego de la lisis parcial
BAL como vehículos vacunales
1. Expresión de antígenos en forma secretada
BAL como vehículos vacunales
Los antígenos se van liberando para interactuar conel sistema inmune en todo el proceso
BAL como vehículos vacunales
Antígeno en forma secretada
BAL como vehículos vacunales
Antígeno en forma secretada
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