UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE LA MIXTECA

MAESTRÍA EN CIENCIAS: PRODUCTOS NATURALES Y ALIMENTOS

MÉTODOS INSTRUMENTALES MODERNOS

ARTÍCULO A REVISAR:

Rapid Determination of α-Tocopherol in Vegetable Oils

by Fourier Transform Infrared Spectroscopy Autores: Sandra D. Silva & Nuno F. Rosa & António E.

Ferreira & Luís V. Boas & Maria R. Bronze

DORA JHANINA RODRÍGUEZ FERNÁNDEZ

CONTENIDO

• Introducción

• Materiales y métodos

• Resultados

• Discusión

• Conclusiones

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INTRODUCCIÓN

Tocoferoles α- tocoferol : R1=R2=R3=CH3

β- tocoferol : R1=R3=CH3; R2=H δ- tocoferol : R1=R2=H; R3=CH3

Parte lipofílica Scavenger (antiradicalari

a)

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Actividad antioxidante de formas de la Vitamina E

(γ-tocoferol)

Qing Jiang (2014) 4

Métodos para su determinación: Esquema simplificado de un cromatógrafo de gases

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Métodos para su determinación: Esquema simplificado de cromatografía en capa delgada

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Métodos para su determinación: Espectrómetro infrarrojo -Transformada de Fourier

Da Wen-Sun (2009)

MATERIALES Y METODOS

• Preparación de muestra para HPLC

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13 botes con aceite

Pre-tratamiento: n-hexano (BHT) y

2-propanol

Análisis por HPLC/DF

• Características del equipo HPLC y condiciones cromatográficas

Columna : C18 de 5µm, 250 x 4mm diámetro interno T° de separación : 35°C Flujo : 1.5ml/min Solvente A : Agua y ácido fosfórico Solvente B : Acetonitrilo Detector : Arreglo de diodos.

Técnica de reflexión usada : Reflexión total atenuada (ATR)

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RESULTADOS • Validación del método HPLC/FD:

– Linealidad : De 1-90mg/L, r2= 0.997

– Precisión (Repetibilidad como %RSD= 3.6%) – Reproductibilidad : 6.1%

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Cromatograma obtenido por HPLC/DF de α-tocoferol estándar (50 mg/L)

50mg/L

Continuación:

– Exactitud:

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• Cuantificación HPLC/DF

– Fase reverse:

• Fase estacionaria : n-hexano

• Fase móvil : 2-propanol

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Cromatograma obtenido por HPLC/FD para aceite de girasol, mezcla A, cacahuate, soya y maíz

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Tocoferol[β+γ]>del [α], [δ]

Tocoferol[β+γ]>del [α], [δ]

Tocoferol [α] = del [β+γ]

Espectro Infrarrojo-Transformada Fourier de aceite de maíz, cacahuate, mezcla A, girasol y soya a 3100 -2700 cm-1 (cristal ATR de 45°)

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Espectro α-tocoferol obtenido por infrarrojo-transformada de Fourier (cristal de 60°)

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OH-

Vibración: Estiramiento asimétrico CH3 -

CH2- C6H5-

Vibración: Flexión asimétrica CH3 -

Valores predictivos para calibración del PLS FT-IR (cristal de 45° y 60°) vs datos de HPLC

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Exactitud estimada por calibración de FT-IR

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Comparación de métodos: FT-IR vs HPLC/DF

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CONCLUSIÓN

• Es un procedimiento rápido de control de calidad, como alternativa al HPLC.

• Está implementada la metodología para FT-IR.

• Es una alternativa para el análisis de α-tocoferoles en aceites vegetales.

• No se usa disolventes peligrosos.

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BIBLIOGRAFÍA ADICIONAL

• Qing Jiang.(2014).Natural forms of vitamin E: Metabolism, antioxidant, and antinflammatory activities and their role in disease prevention and therapy, Free Radical Biology and Medicine, 72:76–90

• Da-Wen Sun (2009). Infrared spectroscopy for food quality analysis and control. Elsevier.

• Sandra D. Silva & Nuno F. Rosa & António E. Ferreira & Luís V. Boas & Maria R. Bronze.(2009).Rapid Determination of α-Tocopherol in Vegetable Oils by Fourier Transform Infrared Spectroscopy. Food Anal. Methods , 2:120–127

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