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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE … · A mi tutor Dr. Fabricio Cevallos por brindarme...
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1
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGIA
CARRERA DE ODONTOLOGÌA
INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO DE STREPTOCOCCUS SANGUINIS
MEDIANTE COLUTORIO COMERCIAL FENÓLICO VS INFUSIONES
NATURALES (MENTA, EUCALIPTO, ALOE VERA)
Proyecto de investigación presentado como requisito previo a la obtención del título de
odontólogo
Autor: Chochos Muyòn Joe Avelino
Tutor: Cevallos Gonzales Fabricio Marcelo
Quito 2016
2
AUTORIZACIÓN DE LA PROPIEDAD INTELECTUAL
Yo Joe Chochos Muyón en calidad de autor del trabajo de investigación: “Inhibición del
crecimiento de Streptococcus sanguinis mediante colutorio comercial fenólico vs
infusiones naturales (menta, eucalipto, aloe vera)” autorizo a la Universidad Central del
Ecuador a hacer uso del contenido total o parcial que me pertenecen, con fines
estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponde, con excepción de la presente autorización,
seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5,6 8, 19 y
demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su Reglamento.
También autorizo a la Universidad Central del Ecuador realizar la digitalización y
publicación de este trabajo de investigación en el repositorio virtual, de conformidad a lo
dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.
JOE AVELINO CHOCHOS MUYÓN
17201346736
3
APROBACIÓN DE TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
Yo Fabricio Marcelo Cevallos Gonzáles en mi calidad de tutor del trabajo de titulación,
modalidad Proyecto de Investigación, elaborado por JOE AVELINO CHOCHOS
MUYÓN; cuyo título es: INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO DE
STREPTOCOCCUS SANGUINIS MEDIANTE COLUTORIO COMERCIAL
FENÓLICO VS INFUSIONES NATURALES (MENTA, EUCALIPTO, ALOE
VERA), previo a la obtención de Grado de Odontólogo, considero que el mismo reúne los
requisitos y méritos necesarios en el campo metodológico y epistemológico, para ser
sometido a la evaluación por prte del tribunal examinador que se designe, por lo que lo
APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para continuar con el proceso de
titulación determinado por la Universidad Central del Ecuador.
En la ciudad de Quito, a los 7 días del mes de diciembre de2016
Dr. Fabricio Marcelo Cevallos Gonzáles
DOCENTE-TUTOR
1313427492
4
APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN TRIBUNAL
El tribunal constituido por Dr. Edison López, Dra. María Isabel Zambrano, Dra. Nilda
Navarrete.
Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención de
Odontólogo presentado por el señor Joe Avelino Chochos Muyón.
Con el título
Emite el siguiente veredicto: Aprobado
Fecha: 16 de diciembre de 2016
Para constancia de lo actuado firman:
Calificación Firma
Presidente: Dr. Edison López 20
Vocal 1 Dra. María Isabel Zambrano 19
Vocal 2: Dra. Nilda Navarrete. 19
5
DEDICATORIA
A Dios por sobre todas las cosas, por brindarme fe, salud, sabiduría y guiarme en todo
momento.
A mis padres José y Beatriz por el apoyo incondicional, sus consejos y experiencias
transmitidas
A mis hermanos y sobrinos Rosa, Tania, Yolanda, Eduardo, Henry, Daniel y Jeremy por
brindarme apoyo, alegría y fortaleza durante todo el periodo educativo.
A Amanda por servirme de soporte para lograr este objetivo.
Joe Chochos Muyón.
6
AGRADECIMIENTO
A mi familia por su apoyo, confianza, cariño y por enseñarme que las metas se alcanzan
con paciencia, esfuerzo, constancia.
A mi tutor Dr. Fabricio Cevallos por brindarme sus conocimientos para cumplir con uno de
mis objetivos más anhelados.
A la Facultad de Odontología por abrirme sus puertas del saber para culminar la profesión
más maravillosa de todas.
Joe Chochos Muyón
7
INDICE DE CONTENIDOS
DEDICATORIA .................................................................................................................... 5
AGRADECIMIENTO ........................................................................................................... 6
INDICE DE CONTENIDOS ................................................................................................. 7
INDICE DE TABLAS ......................................................................................................... 10
INDICE DE GRAFICOS .................................................................................................... 11
INDICE DE FIGURAS ....................................................................................................... 12
ÍNDICE DE ANEXOS ........................................................................................................ 13
RESUMEN .......................................................................................................................... 14
ABSTRACT ........................................................................................................................ 15
INTRODUCCION ............................................................................................................... 16
CAPÍTULO 1 ...................................................................................................................... 17
1. DESCRIPCIÓN DE LA INVESTIGACIÓN ....................................................... 17
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ........................................................ 17
1.2 JUSTIFICACIÓN .............................................................................................. 18
1.3 OBJETIVOS ....................................................................................................... 19
1.3.1 Objetivo General ........................................................................................ 19
1.3.2 Objetivos Específicos .................................................................................. 19
1.4 HIPÓTESIS ........................................................................................................ 20
1.4.1 HIPÓTESIS NULA .................................................................................... 20
CAPÍTULO II ...................................................................................................................... 21
2. MARCO TEÓRICO ............................................................................................... 21
2.1 Placa bacteriana ................................................................................................. 21
2.1.1 Concepto ....................................................................................................... 21
2.1.2 Características ............................................................................................... 22
2.1.3 Tipos ............................................................................................................. 22
2.1.4 Metabolismo ................................................................................................. 23
2.1.5 Métodos de diagnóstico ................................................................................ 23
2.1.6 Métodos de eliminación ............................................................................... 24
2.1.7 Composición ................................................................................................. 24
2.1.8 Formación ..................................................................................................... 25
2.2 Streptococcus sanguinis ..................................................................................... 29
2.2.1 Características ............................................................................................... 29
2.2.2 Importancia ................................................................................................... 29
2.3 Enjuagues bucales .............................................................................................. 30
8
2.3.1 Generalidades ........................................................................................... 30
2.3.2 Propiedades ............................................................................................... 31
2.3.3 Definición ................................................................................................. 31
2.3.4 Tipos ......................................................................................................... 32
2.4 Enjuagues comerciales .................................................................................. 32
2.4.1 Generalidades ........................................................................................... 32
2.4.2 Composición ............................................................................................. 33
2.5 Colutorios naturales ...................................................................................... 36
2.5.1 Generalidades ........................................................................................... 36
2.5.2 Menta ........................................................................................................ 37
2.5.3 Eucalipto ................................................................................................... 38
2.5.4 Aloe vera................................................................................................... 39
2.6 Infusiones naturales ....................................................................................... 41
2.7 Medios de cultivos bacteriológicos ............................................................... 42
2.7.1 Generalidades ........................................................................................... 42
2.7.2 Requisitos Generales ................................................................................ 42
2.7.3 Tipos ......................................................................................................... 43
2.7.4 Métodos de siembra .................................................................................. 43
CAPÍTULO III…………………………………………………………………………45
3. METODOLOGÍA……………………………………………………………..45
3.1 Tipo de investigación ..................................................................................... 45
3.2 Población y muestra ....................................................................................... 45
3.2.1 Selección y tamaño de la muestra ......................................................... 45
3.2.2 Criterios de Inclusión ............................................................................. 46
3.2.3 Criterios de Exclusión ............................................................................ 46
3.2.4 Variables .................................................................................................. 47
3.3 Materiales y métodos ..................................................................................... 48
3.3.1 Recursos materiales ................................................................................ 48
3.3.2 Recursos humanos .................................................................................. 51
3.4 Estandarización .............................................................................................. 51
3.4.1 Estandarización para preparación de colutorios naturales ................ 51
3.4.2 Estandarización para elaboración de cultivo microbiológico ............ 52
3.5 Procedimiento ................................................................................................. 52
3.5.1 Adquisición cepas ..................................................................................... 52
3.5.2 Fase en laboratorio.................................................................................... 53
9
3.6 ASPECTOS ÉTICOS ........................................................................................ 60
CAPÍTULO IV ................................................................................................................... 61
4. ANÁLISIS DE DATOS .......................................................................................... 61
4.1 ANÁLISIS ESTADÍSTICO .............................................................................. 62
4.2.1 Pruebas no paramétricas: Kruskal-Wallis ............................................... 65
4.3 DISCUSIÓN ....................................................................................................... 70
CAPÍTULO V ..................................................................................................................... 73
5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ................................................... 73
5.1 CONCLUSIONES ............................................................................................. 73
5.2 RECOMENDACIONES ................................................................................... 74
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ................................................................................ 75
ANEXOS ............................................................................................................................. 79
10
INDICE DE TABLAS
Tabla 1: Resultados medición halos .............................................................................. 61
Tabla 2: Resultado medición halos sustancias control .................................................. 62
Tabla 3: Media o promedio entre halos de inhibición ................................................... 62
Tabla 4: Mediana y moda .............................................................................................. 63
Tabla 5: Pruebas de normalidad .................................................................................... 64
Tabla 6: Prueba de Kruskal- Wallis .............................................................................. 66
Tabla 7: Prueba dos a dos .............................................................................................. 68
11
INDICE DE GRAFICOS
Gráfico 1: Esquema formación biofilm ......................................................................... 25
Gráfico 2: Esquema mecanismos de adhesión película adquirida................................. 26
Gráfico 3: Esquema colonización primaria ................................................................... 27
Gráfico 4: Esquema modo de siembra........................................................................... 44
Gráfico 5: Media de halos de inhibición ....................................................................... 63
Gráfico 6: Curvas de normalidad .................................................................................. 65
Gráfico 7: Prueba de Kruskal-Wallis ............................................................................ 67
Gráfico 8: Comparaciones por parejas de sustancias .................................................... 68
12
INDICE DE FIGURAS
Figura 1: Sustancias a investigar ................................................................................. 48
Figura 2: Cepas puras S. sanguinis y discos en blanco ............................................... 48
Figura 3: Agar Muller Hinton ..................................................................................... 49
Figura 4: Incubadora ................................................................................................... 49
Figura 5: Esterilizadora ............................................................................................... 50
Figura 6: Micropipeta .................................................................................................. 50
Figura 7: Implementos de Bioseguridad ..................................................................... 51
Figura 8: Cepas Streptococcus sanguinis .................................................................... 52
Figura 9: Hisopado agar sangre ................................................................................... 53
Figura 10: Envasado y rotulado infusiones naturales.................................................... 54
Figura 11: Medición de turbidez Mc Farland................................................................ 55
Figura 12: Inoculación en agar Müller Hinton .............................................................. 55
Figura 13: Colocación soluciones en discos blanco ...................................................... 56
Figura 14: Control positivo (clorhexidina).................................................................... 57
Figura 15: Control negativo (suero fisiológico) ............................................................ 57
Figura 16: Rotulación de discos 1 menta, 2 eucalipto, 3 aloe vera, 4 colutorio fenólico, 5
control positivo, 6 control negativo ................................................................................ 58
Figura 17: Medición halos de inhibición ...................................................................... 59
Figura 18: Colocación de desechos en contenedor ....................................................... 60
13
ÍNDICE DE ANEXOS
Anexo 1: Aceptación de tutoría...................................................................................... 79
Anexo 2: Cambio de tema .............................................................................................. 80
Anexo 3: Formato para recolección de datos ................................................................. 81
Anexo 4: Manejo de desechos ....................................................................................... 82
Anexo 5: Solicitud uso de laboratorio ............................................................................ 83
Anexo 6: Certificado autentificación streptococcus sanguinis ...................................... 84
Anexo 7. Certificado estadístico .................................................................................... 85
Anexo 8: Certificado comité de ética ............................................................................. 86
Anexo 9: Certificado antiplagio ..................................................................................... 87
14
TEMA: “INHIBICION DEL CRECIMIENTO DE STREPTOCOCCUS SANGUINIS
MEDIANTE COLUTORIO COMERCIAL FENOLICO VS INFUSIONES
NATURALES (MENTA, EUCALIPTO, ALOE VERA).”
Autor: Joe Avelino Chochos Muyón
Tutor: Fabricio Marcelo Cevallos Gonzales
RESUMEN
El Streptococcus sanguinis se muestra como el microorganismo pionero en la
formación de biofilm, entidad con gran prevalencia, por lo que se han dispuesto sustancias
para su control como los colutorios con bases sintéticas e inclusive elementos naturales
como infusiones. Es así que el objetivo de esta investigación fue valorar la inhibición del
crecimiento de S. sanguinis mediante un colutorio comercial fenólico vs infusiones
naturales de menta eucalipto y aloe vera. Para esto se realizó cultivos bacterianos de
Streptococcus sanguinis en agar Müller Hinton a los que se colocó discos de papel
impregnados en las sustancias antes mencionadas y al cabo de 24 horas se midió los
milímetros de los halos de inhibición dando como resultado que el aloe vera formó 9 mm,
eucalipto 8.5 mm, colutorio fenólico 8.41 mm y menta 8.25 mm. Por lo que se concluyó
que las infusiones naturales poseen cierto grado de superioridad sobre enjuagatorios
sintéticos para inhibir S. sanguinis.
PALABRAS CLAVE: COLUTORIO, INFUSIONES, STREPTOCOCCUS
15
TITLE: “INHIBITION OF STREPTOCOCCUS SANGUINIS GROWTH USING A
PHENOLIC MOUTHWASH VS NATURAL INFUSIONS (MINT, EUCALYPTUS,
ALOE VERA)
Author: Joe Avelino Chochos Muyòn
Tutor: Fabricio Marcelo Cevallos Gonzales
ABSTRACT
Streptococcus sanguinis is the leading and prevailingmicroorganism in the formation of
oral plaque , which is why products have been developeed in order to control it. These
products include synthetic-based mouthwashes and natural elements such as herbal
infusions. In this sense, this study has the goat of assessing growth inhibition of S.
sanguinius, comparing a comercial phenolic mouthwash whit natural mint, eucalyptus and
aloe vera infusions. To this end we produced Muller Hinton cultures on wich we planed
paper discs impregnated whit the abovementioned substances; the correspondig inhibition
halos were measured 24 hours later. The resulting inhibition halos were 9mm for aloe vera,
8.5mm for eucalyptus, 8.41mm for phenolic mouthwash, and 8.25mm for mint. Therefore,
this study concludes that the naturale infusiones are, to a certain degrre, superior to the
comercial mouthwashes in inhibiting the growth of S. sanguinis.
KEYWORDS: STREPTOCOCCUS, MOUTHWASH, INFUSIONS
16
INTRODUCCION
Hace algunos años atrás se consideraba a la película bacteriana como un núcleo
de aspecto viscoso y amorfo capaz de crear enfermedad dental,(1)
con la ayuda de los
avances tecnológicos se la puede describir como una pared sin color, aglutinada al
diente, constituida por células descamadas, glóbulos blancos, macrófagos y bacterias
dentro de un centro de proteínas y polisacáridos.(2) Para que se forme es necesaria la
aparición de bacterias como el Streptococcus sanguinis quien se adhiere a las
glicoproteínas de la película adquirida,(3) razón por la cual este microorganismo toma
mención especial ya que es el pionero en la conformación de biofilm.
Esta placa dentobacteriana al ser una de las principales causas de patología
gingival y dental requiere de control y eliminación a través de técnicas que incluyen el
cotidiano cepillado dental, aunque con la desventaja de dejar restos bacterianos (4)
,
debido a que las personas carecen de tiempo y estimulación para hacerlo de forma
correcta y continua (5)
se observa como consecuencia que este método sea exiguo para
su fin y que se necesite del manejo de otras estrategias como el uso de colutorios que
posean grandes beneficios para los individuos no solo a nivel clínico sino también a
nivel socioeconómico.
Es así que en la presente investigación se realizó un estudio comparativo de la
eficacia de colutorios comerciales con bases fenólicas vs infusiones naturales (menta,
eucalipto, aloe vera) para inhibir la primera bacteria en aparecer durante la formación
de biofilm como es el Streptococcus sanguinis, mediante la realización de cultivo
bacteriano en el laboratorio microbiológico, a los que se les introdujo un disco de
papel filtro impregnados en cada una de las sustancias expuestas, luego de cierto
tiempo se midió el diámetro en milímetros de los halos de inhibición producidos en
cada uno de ellos.
Todo con el propósito de identificar el colutorio más idóneo para la población
actual de acuerdo a ventajas y desventajas que cada uno posee, facilitando de este
modo la selección del colutorio no solo a ser utilizado sino incluso a ser recomendado
por alumnos, docentes y profesionales de la carrera de Odontología.
17
CAPÍTULO 1
1. DESCRIPCIÓN DE LA INVESTIGACIÓN
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Gracias a estudios recientes se expone que toda superficie bucal está constituida
por una película adquirida, compuesta por una serie de glicoproteínas a las cuales se
adhiere el Streptococcus sanguinis, quien es el primero en aparecer incluso después de
un par de horas de una limpieza profesional, este recibe mención especial en este
contexto puesto que permite la colonización de otras bacterias no patógenas (S. mitis,
S. oralis y otras) y estas a su vez consienten la adhesión de microorganismos
patógenos, lo cual resulta en la formación de placa bacteriana. (6)
Es así que el biofilm se constituye como uno de los principales agentes
desencadenantes de afecciones e infecciones bucodentales como la inflamación
gingival y enfermedad cariosa, puesto que presenta un alto grado de prevalencia en el
común de las personas, inclusive desde la infancia, lo cual es resultado del escaso,
pobre o nulo conocimiento que ellos poseen acerca de cómo eliminar o controlar la
placa dentobacteriana, sumado además a otros factores que incluyen el tiempo, el
estrés bajo el que viven y las múltiples ocupaciones que poseen. De hecho el control y
la eliminación de biofilm se realizan mediante una serie de métodos y técnicas que
incluyen el uso de colutorios, estos deben satisfacer las necesidades no solo clínicas
sino también socio-económicas requeridas por la población del mundo actual. (5)
Es así que surge la interrogante: ¿Entre los colutorios a base de infusiones
naturales y el enjuague de composición fenólica, cuál será el más eficaz para inhibir
Streptococcus sanguinis?
18
1.2 JUSTIFICACIÓN
A lo largo de los últimos años se ha dispuesto una variedad de mecanismos para
prevenir la exacerbación de placa bacteriana, como lo es el uso de colutorios sin
embargo hasta hace pocos años no se conocía ni el tipo ni la funcionalidad de cada
microorganismo presente en dicho biofilm, por lo que al inicio los enjuagues orales
poseían sustancias nocivas para los tejidos orales. Luego, con el avance tecnológico se
dio a conocer que una de las bacterias pioneras en la formación de placa
dentobacteriana es el Streptococcus sanguinis quien permite la adhesión de muchas
otras bacterias. (6) (7)
En este sentido el presente trabajo investigativo se realizó el análisis del tamaño
de halos de inhibición formados alrededor de cepas puras de Streptococcus sanguinis
en cultivos bacterianos realizados en el laboratorio microbiológico, cada uno con
cuatro discos de papel filtro embebidos en infusión de menta, eucalipto, aloe vera y
enjuague de compuestos fenólicos, respectivamente.
De esta manera esta investigación estuvo encaminado a la utilización de una de
las metodologías alternativas a la odontología tradicional para control y eliminación de
placa bacteriana mediante la inhibición de colonizadores primarios, con el uso de
colutorios naturales, con el fin de que los pacientes eviten el uso de enjuagues bucales
con bases químicas no solo por sus efectos adversos sino también por sus altos costos.
Además se busca despertar el interés por parte de alumnos y docentes, a que se
preocupen en el futuro éxito que podría tener el uso de colutorios a base de plantas
naturales como una estrategia en la solución de problemas odontológicos,
concretamente la placa bacteriana, aumentado la frecuencia de recomendación a
pacientes sobre dichos métodos.
19
1.3 OBJETIVOS
1.3.1 Objetivo General
Analizar la inhibición del crecimiento de cepas de Streptococcus sanguinis a
través del uso de colutorio comercial fenólico vs infusiones naturales de menta,
eucalipto y aloe vera mediante la medición de halos inhibitorios en cultivos
bacterianos.
1.3.2 Objetivos Específicos
Medir los halos de inhibición producidos por los colutorios naturales y fenólicos
utilizados por medio de una regla milimetrada.
Determinar la capacidad inhibitoria de Streptococcus sanguinis a través de
infusiones naturales realizadas con menta, eucalipto y el aloe vera mediante la
medición de halos de inhibición.
Establecer la capacidad para la inhibición del crecimiento de Streptococcus
Sanguinis de los enjuagues comerciales fenólicos por medio de la medición de
halos de inhibición.
Comparar la eficacia del enjuague bucal comercial fenólico frente a infusiones
naturales (menta, eucalipto y aloe vera) para inhibir cepas de Streptococcus
sanguinis.
20
1.4 HIPÓTESIS
H1: Los enjuagues bucales a base de infusiones naturales tendrán mayor
efectividad para inhibir el crecimiento de cepas de Streptococcus sanguinis en
comparación con colutorios orales comerciales a base de compuestos fenólicos.
1.4.1 HIPÓTESIS NULA
H0: Los colutorios preparados con plantas naturales NO tendrán mayor
capacidad para inhibir el crecimiento de cepas de Streptococcus sanguinis en
comparación con colutorios orales comerciales a base de compuestos fenólicos.
21
CAPÍTULO II
2. MARCO TEÓRICO
2.1 Placa bacteriana
Fuente: https://mireiasalvador.wordpress.com/2013/09/15/placa-dental-biofilm-oral-o-placa-bacteriana/
Autor: El investigador
2.1.1 Concepto
La placa bacteriana es un concepto muy antiguo ya que fue considerada por
Leeuwenhoek en 1683 como un conjunto de microbios y residuos alimenticios
dispuestos como un depósito inconsistente, y por Black en 1898 como láminas
suaves y amorfas. (1)
Tiempo después se la describe como una pared clara sin color
aglutinada al diente, constituida por bacterias y células descamadas, glóbulos
blancos, macrófagos, situadas en un centro de proteínas y polisacáridos. (2)
Hoy en
día se especifica aún más al decir que se trata de una biopelícula o biofilm, ya que
se determina que esta no solo se adhiere al diente sino también a cualquier material
no exfoliativo y que se trata de un ecosistema ecológico. (3)
22
2.1.2 Características
La placa bacteriana se describe como una sustancia que ofrece gran
resistencia, que posee un color amarillo-grisáceo y que además tiene la capacidad
de adherirse tanto a la superficie dental como a ciertos materiales utilizados para la
rehabilitación de pacientes edéntulos; esta aparece incluso después de pocas horas
de haber realizado un cuidadoso y exhaustivo aseo de la cavidad oral, (8)
y se
advierte además que se la puede hacer visible mediante ciertas sustancias que
actúan como tinción para revelar el lugar exacto donde se ubica el biofilm. (9)
Dentro de las cualidades más sobresalientes y que es motivo de estudio, está
el hecho de que la biopelícula es la causante de enfermedades del periodonto dentro
de las que resalta la gingivitis. (3)
En el mismo contexto se expone que la placa
dentobacteriana tiene las características esenciales que posee cualquier biopelícula
tales como poseer un gradiente de concentración para el O2, contener canales de
agua e incluso mantener comunicaciones íntimas entre las células que la componen.
(10)
2.1.3 Tipos
Dentro de lo concerniente al tipo se puede citar que el biofilm se lo considera
de acuerdo a su localización en placa supragingival la cual se ubica en toda la
corona clínica de la pieza dental y en placa subgingival que se extiende apical al
margen gingival. (11)
La primera se compone de bacterias, células epiteliales,
glóbulos blancos y macrófagos inmersas en una matriz orgánica que se forma de
acuerdo a los aspectos que se indican más adelante. (8)
En el segundo caso comienza
su formación a partir de la aparición de la película supragingival la cual influye en
su composición aunque en general la biopelícula subgingival se compone de
bacterias Gram negativas, y anaerobios. (12)
23
2.1.4 Metabolismo
Los microorganismos de la placa dentobacteriana enfrentan un terreno hostil
lleno de dificultades como el pH o la temperatura por ejemplo, para lo cual
necesitan encontrar un lugar seguro denominado nicho biológico donde se realiza
además simbiosis frente a bacterias ajenas a cada colonia. (13)
Pero para esto los
microbios requieren de una fuente de energía sino no podrían subsistir, la cual es
suministrada principalmente por alimentos a base sobre todo de carbohidratos. (14)
Es así que una vez que el individuo ingiere alimentos las bacterias
descomponen los elementos orgánicos y los sintetiza en metabolitos ayudados de la
glucólisis anaerobia. Sin embargo la difusión en la placa bacteriana de los
carbohidratos de elevado peso molecular no es posible, contrario a lo que ocurre
con la sacarosa y la lactosa. Por otra parte cabe mencionar que el Streptococcus
mutans es capaz de formar polisacáridos extracelulares que se ubican en la matriz
para ser usados cuando exista escases de azúcares. (11)
2.1.5 Métodos de diagnóstico
En ocasiones para diagnosticar la presencia de biofilm únicamente es
necesaria la inspección ya que esta se presenta de un color que difiere al de la pieza
dental, mostrándose como coloraciones grisáceas o amarillentas de acuerdo al
estadío en el que se encuentra. (10)
Sin embargo está técnica visual suele ser muy
generalizada ya que no provee una buena delimitación, por lo que el profesional
utiliza elementos de tinción, como es el caso de la eritrosina que se presenta como
pastillas o como líquido. (8)
Además también se puede identificar la placa
dentobacteriana mediante el uso de un explorador, al pasarlo por las caras
vestibulares de las piezas dentales y observando la acumulación de material
amarillento en el extremo cóncavo de dicho instrumental para registrar los
resultados en el denominado IHOS (Índice de Higiene Oral Simplificado). (9)
24
2.1.6 Métodos de eliminación
Al hablar de la eliminación de placa bacteriana se debe tomar en cuenta
diferentes tipos de técnicas para lograr dicho objetivo, así se tiene el lavado
mecánico, ya sea con ayuda de limpieza técnica realizada por el profesional o
simplemente mediante el uso cotidiano de cepillo dental ayudado de elementos
químicos como es la pasta o dentífrico. (11)
Además del uso diario de hilo dental y
coadyuvado en la mayoría de los casos por elementos denominados colutorios
quienes permiten la remoción de placa dentobacteriana que no se eliminó con los
métodos antes mencionados. (5)
Elementos que se denominan colutorios o
enjuagatorios, que están dispuestos por una serie de sustancias bases quienes les
proveen de sus características diferenciales, y que se pondrá en consideración más
adelante.
2.1.7 Composición
La placa dentobacteriana consta en su mayoría de microorganismos, es así
que un gramo de película bacteriana puede llegar a poseer 1010
microbios
acomodadas de forma definida y complicada. (12)
Estas bacterias incluyen sobretodo
Streptococcus, Actinomyces, enterococcus y bacterias filamentosas Gram positivas
así como microorganismos Gram negativos como Neisserias por ejemplo, en la
superficie supragingival, y Prevotella, Porphyromonas y fusobacterias, y muchas
otras de tipo anaerobio en la zona subgingival. (11)
Además posee células epiteliales,
glóbulos blancos y macrófagos; todos estos elementos inmersos en una matriz
intracelular que contiene elementos orgánicos e inorgánicos. (15)
Orgánicos como
hidratos de carbono y proteínas en su mayoría y lípidos en menor cantidad, e
inorgánicos como calcio, fósforo en mayor proporción y magnesio potasio y sodio
en menor número. (16)
25
2.1.8 Formación
Gráfico 1: Esquema formación biofilm
Fuente: Katz 1989
Autor. El investigador
Al hablar de la formación de placa bacteriana se puede citar que para que
ocurra son necesarios una serie de factores ayudados de varios procesos complejos
que involucran una gran variedad de microorganismos y de un huésped que sería la
cavidad oral. (13)
Estas bacterias que actúan de manera conjunta entran en contacto
de forma fortuita con la zona orgánica que se encuentra en la superficie dental. (17)
Por otra parte como dato extra se expone que la formación de biofilm es más rápida
en la noche debido a la acción mecánica de alimentos y el flujo salival de la
masticación. (16)
De este modo se podría pensar que el estudio de la formación de la
biopelícula dental es extremadamente difícil, sin embargo se ha descrito una
secuencia un tanto más simplificada que hace que este evento sea más
comprensible. (9)
Así se tiene una formación de película dental adquirida como
26
inicio de todo el proceso, que se basa en el hecho de que todas las superficies de la
cavidad oral se encuentran revestidas de una superficie de material orgánico. (10)
Seguida por una colonización de microorganismos, lo que ya en sí es la verdadera
formación de placa con los esenciales procesos de adhesión microbiana y su
actividad metabólica. Y finalmente una fase de crecimiento y maduración dada por
la multiplicación bacteriana, en un inicio aquella con microorganismos más
comunes y por último aquellas englobadas en la ecología alogénica y autogénica.
(13)
2.1.8.1 Película adquirida
Fuente: Harris & García-Godoy 2001
Autor: el investigador
Se forma sobre la superficie de los dientes incluso a pocos minutos
después de una limpieza con el profesional, además esta membrana es la que
permite la adhesión selectiva de microorganismos pioneros como el Streptococcus
sanguinis, mitis y oralis. Se encuentra constituida por elementos tales como: iones
de calcio, sodio, potasio, entre otros; lípidos y proteínas como las sialomucinas, y
otras ricas en glicosiltransferas, prolina y lactoferrina, entre las más
sobresalientes, quienes son los verdaderos puentes de unión entre la película
adquirida y los microorganismos. (7)
Gráfico 2: Esquema mecanismos de adhesión película adquirida
27
2.1.8.2 Colonizadores primarios o pioneros
Como ya se mencionó, la segunda y tercera etapa de formación de placa
bacteriana consta de manera más específica de la colonización de bacterias en el
huésped (superficie dental), esta inicia inmediatamente después de la formación
de la película adquirida mediante las glicoproteínas, (18)
cuando aparece en la
cavidad bucal la especie talvez más común de la flora oral denominada
Streptococcus (19)
dentro de la cual el primero en aparecer es el Streptococcus
sanguinis incluso de 2 a 4 horas después de realizarse una limpieza profesional,
(20) con el pasar de los minutos aparecen además los Streptococcus oralis, mitis e
inclusive el S. mutans, quien es talvez el microorganismo bucal más estudiado de
los últimos tiempos, acompañados además de Actinomices naeslundii, como los
más reconocidos. (21)
Fuente: Barrancos & Barrancos 2006
Autor: El investigador
Gráfico 3: Esquema colonización primaria
28
2.1.8.3 Colonizadores secundarios
Todos los mecanismos y secuencias de conformación de placa bacteriana en
su segundo estadío contribuyen a la formación de un ambiente idóneo para que
bacterias más complejas lleguen hasta el huésped, es así que las bacterias pioneras
como el S. sanguinis por ejemplo, libera una serie de sustancias y elementos (20)
que atraen a más bacterias como el S. mutans y S. salivarius quienes a su vez
atraen mediante adhesinas, polisacáridos, lectinas, fimbrias y enzimas, a aquellas
que se denotan como más patógenas como es el caso de las Porphyromonas,
Agragatibacter, Veillonella, Neisserias (7)
quienes llegan a colonizar la cavidad
oral al cabo de pocos días, en condiciones en las que el individuo no se realice
una correcta limpieza oral. (22)
2.1.8.4 Adhesión bacteriana
Para que se pueda realizar el segundo y tercer periodo de formación de placa
es necesaria la adhesión, que en sus etapas iniciales suele ser reversible, esta se
da entre las cuatro horas inmediatas a la formación de la película adquirida.
(23)Donde actúan una serie de elementos como las adhesinas específicas, que son
el ligando más definido de este proceso, las mismas que unen las bacterias a la
superficie dental. (22)
Así como uniones electrostáticas o las fuerzas de Van der
Waals; además es necesario considerar que en esta unión tan compleja pueden
actuar inclusive ácidos teicoicos y lipoteicoicos. (9)
La adhesión permite en sí la
agregación y coagregación bacteriana.
2.1.8.5 Matriz extracelular
La matriz extracelular de la placa dentobacteriana también actúa en la
adhesión microbiana puesto que en su conformación se presentan proteínas,
polisacáridos y ADN, además debido a que suministra una alta densidad a las
células constituyentes de la placa, por lo que se menciona que además permite la
agregación y coagregación, puesto que le proporciona también una especie de
retención mecánica y una protección a todas las bacterias que conviven en su
29
interior. Además participa del metabolismo bacteriano puesto que proporciona
una especie de red para compuestos orgánicos e inorgánicos. (7)
2.2 Streptococcus sanguinis
Fuente: http://higienistabucodental.blogspot.es/categoria/general/4
Autor: El investigador
2.2.1 Características
El S. sanguinis fue descrito en 1990 y se expone que se trata de un
microorganismo de la especie Streptococcus porque se exhibe al microscopio como
una cadena, además se evidencia como positivo ante la tinción Gram, (24)
es un
aerobio facultativo, pudiendo desarrollarse en medios aerobios y anaerobios, su
metabolismo lo hace mediante el consumo de sacarosa y está previsto de proteínas
y genes como el SrtA quienes le sirven en el proceso de adhesión con otras
bacterias, (25)
por último se menciona que aunque no sea patógeno se lo ha
encontrado no solo en la superficie oral sino también en la superficie cardiaca de
algunas endocarditis. (26)
Asimismo en un estudio realizado en 2007 por científicos
estadounidenses se describió la presencia de este microorganismo en cavidades
cariosas acompañando al Streptococcus mutans.
2.2.2 Importancia
Este microorganismo merece una especial mención en este ámbito puesto que
a pesar de formar parte de la flora oral normal y no ser patógeno o virulento, es la
30
primera bacteria que se adhiere a la superficie dental mediante una serie de
mecanismos que se describieron anteriormente, y es esta la que permite o facilita la
adhesión de muchas otras bacterias entre patógenas y habituales, (16)
quienes serán
las encargadas de permitir asimismo la adhesión y coagregación de más bacterias
pero netamente patógenas, por lo que se evidencia de esta manera la importancia
del Streptococcus sanguinis al ser el pionero en la formación de biofilm. (22)
2.3 Enjuagues bucales
Fuente: http://www.imujer.com/salud/5073/agua-oxigenada-como-enjuague-bucal
Autor: el investigador
2.3.1 Generalidades
La remoción cotidiana de biofilm está dada principalmente por métodos
mecánicos como los más aceptados (cepillado e hilo dental), pero estos no pueden
llevarse a cabo de forma eficiente o solitaria por los individuos, ya que consta de
varias aptitudes y destrezas difíciles en ciertos casos de conseguir, por lo que es
necesario el apoyo de métodos más sencillos como es el uso de colutorios.
(27)Puesto que estos no requieren de mucho tiempo o una gran habilidad para su
utilización y además debido a que ejecutan un trabajo directo contra las bacterias
de la boca. (28)
De esta manera los enjuagues orales van tomando espacio por las
personas al momento de pensar en la higiene oral ya que estos se transforman en
una alternativa verdaderamente atrayente. (1)
31
De hecho la humanidad ha utilizado sustancias como enjuagues orales desde
hace mucho tiempo atrás, incluso previo a los estudios realizados por Joseph Lister
y Louis Pasteur que evidenciaban a las bacterias como promotoras de enfermedad.
(28)Aunque se los consideraba en un principio como un simple medio cosmético ya
que su única función era proveer frescura y contrarrestar el mal aliento. (14)
Por lo
que en los últimos años y gracias a la evidencia científica se ha tomado a los
enjuagatorios más bien como métodos terapéuticos y coadyuvantes en la
disminución de placa. (13)
2.3.2 Propiedades
De esta manera hoy en día uno de los objetivos principales de los colutorios
orales es afectar no solo cuantitativa sino cualitativamente el biofilm tanto
supragingival como el subgingival. (1)
Lo cual efectúa a través de ciertas
propiedades tales como la sustantividad que trata del tiempo de permanencia del
enjuague en las superficies orales, o la potencia que trata en cambio de la cantidad
de concentración necesaria para inhabilitar la acción de ciertos microorganismos. (9)
Además deben presentar baja toxicidad, nulos efectos adversos y un efecto
netamente local. (27)
Y por sobre todo acción anti placa adoptando ya sea una
función bactericida o bacteriostática. (5)
2.3.3 Definición
De acuerdo a lo expuesto anteriormente se puede decir que los colutorios son
soluciones que poseen sustancias que ayudan en la higiene oral cotidiana; (29)
mediante simples buchadas y que acompañan al método mecánico de limpieza oral,
aunque con mayor frecuencia de uso por quienes aceptan cada vez más a esta
técnica (13)
debido a que estas sustancias en un principio constaban únicamente de
agentes cosméticos y hoy en día gracias a las investigaciones están ayudadas de
elementos terapéuticos. (14)
Aunque con un cierto grado de aparecimiento de efectos
adversos.
32
2.3.4 Tipos
En base a los más recientes estudios acerca de la efectividad de enjuagues
bucales y su relación con ciertos efectos adversos se ha tomado mucho en cuenta
las sustancias naturales. (30)
Por otro lado las casas comerciales que distribuyen
estos productos se han preocupado en verificar dichas circunstancias mediante
estudios científicos con el fin de generar aceptación y seguridad. Sin embargo es
importante considerar que tiempo atrás el personal de salud tenía como única
opción el uso de la fitoterapia. (31)
Por lo que es necesario considerar con fines
didácticos y para la presente investigación dos tipos de colutorios orales: aquellos
realizados a base de sustancias químicas denominados como comerciales y aquellos
dispuestos a base de plantas medicinales designados como naturales.
2.4 Enjuagues comerciales
Fuente: https://odontologiapreventiva2.wordpress.com/
Autor: el investigador
2.4.1 Generalidades
Al hablar de enjuagues orales comerciales se puede citar que se trata de
sustancias capaces de atenuar las bacterias de la cavidad oral y que se encuentran de
venta en cualquier establecimiento afín a estos producto sin la necesidad de una
receta médica. (12)
Esta comercialización está regida bajo los parámetros dictados
por la Asociación Dental Americana (ADA). Como por ejemplo: cantidades
33
mínimas de alcohol, debido a que algunos estudios suponen la relación de este
agente contenido en colutorios orales con la aparición de cáncer oral; o la
disposición de tapas a prueba de niños e inclusive etiquetas de peligro en los
envases. (29)
Además de proveer efectos clínicos significativos, gran aceptación y
sobretodo mínimos efectos adversos. (27)
En cuanto a los criterios de selección de los enjuagatorios comercializados,
estos no deben estar guiados únicamente por el individuo sino deben estar basados
en la recomendación del profesional. (1)
Debido a que por lo general el comercio de
estos productos están relacionados con el aroma, coloración, sabor y efecto
satisfactorio que proveen, minimizando así la importancia de la acción terapéutica.
(13) Además un colutorio podría estar indicado para un individuo pero
contraindicado para otro, puesto que existen diferencias entre cada caso. (29)
2.4.2 Composición
En sí la mayoría de enjuagues orales tienen composiciones similares o más
bien elementos de base, y otros agentes que determinan la diferenciación de cada
uno de ellos. (11)
De hecho Herazo (28)
en 2012 cita a Gudiño y Prety quienes aducen
la existencia de cuatro elementos activos en lo colutorios como son: compuestos de
amonio cuaternario, peróxidos, compuestos fenólicos sin carga y antibióticos. Sin
embargo Perry (12)
en 2014 como muchos autores citados en este trabajo
investigativo le dan una mención especial a la clorhexidina. Por lo que en este
contexto se describirá algunos de los colutorios más utilizados.
2.4.2.1 Colutorios a base de Compuestos fenólicos ( LISTERINE)
Fuente: http://www.listerine.ca/products/classic-clean
Autor. El investigador
34
A estos compuestos también se los denomina como aceites esenciales ya
que están formados a base de elementos que incluyen fenol, timol, eucaliptol,
entre otros. Además es el enjuagatorio pionero aceptado por la ADA como
antiplaca y anti gingivitis. (13)
Su acción bactericida trata de la ruptura de la pared
celular y precipitación de las proteínas por lo que en concentraciones altas tienen
cierto grado de toxicidad. (9)
De esta manera las investigaciones denotan a este
producto como aceptado por la población ya que incluso actúa sobre Candida
albicans. (27)
Más específicamente se menciona por Madrigal (29)
en 2009 que los aceites
esenciales que componen dicho colutorio son un potente agente antiplaca,
eliminándola por un largo periodo de tiempo, asimismo Sharma (32)
en 2004
gracias a su estudio los describe como uno de los mejores tratamientos para la
gingivitis. Estos colutorios se comercializan en la gran mayoría de países bajo la
casa comercial Johnson & Johnson bajo el nombre de Listerine.
2.4.2.2 Enjuagues a base de compuestos de amonio cuaternario
Fuente: http://www.brushwithromance.com/mexico/products/Oral-B_Pro-Salud/
Autor: el investigador
Estos colutorios están elaborados en base sobre todo a un compuesto
denominado cloruro de cetilpiridinio. (12)
Aunque también poseen cloruro de
benzalconio, cuya función principal es romper la pared celular de las bacterias y
dañar su citoplasma lo cual les provee de una acción antibacteriana similar a la de
la clorhexidina aunque con menor función inhibitoria de biofilm. (33)
Por otra parte
35
se les atribuye a estos cloruros actuar como detergentes, antisépticos y
desinfectantes. Además se expone que estos enjuagues poseen una sustantividad
baja y es posible que su uso prolongado produzca pequeñas manchas reversibles
con profilaxis. (28)
Existen varias marcas comerciales compuestas con estos
elementos como por ejemplo Oral B.
2.4.2.3 Enjuagatorios a base de triclosán
Fuente: http://www.colgateprofesional.com.co/productos/Enjuague-Bucal-Colgate-Plax
Autor: El investigador
El triclosán es un elemento con efecto comprobado contra bacterias y
hongos, sin embargo no actúa sobre esporas; además posee una función contra la
inflamación según algunos autores, y al parecer su acción antiplaca es un tanto
restringida aunque se expone que mejora su efectividad después de extensos
períodos de utilización. (1)
No obstante existen investigaciones que demuestran su
efectividad en la disminución de la cantidad y calidad de placa.
Por otra parte cabe anotar que al inicio se lo usó con fines cosméticos y en
los últimos tiempos se lo introdujo en colutorios y pastas dentales. (9)
Estos
enjuagues incluyen marcas reconocidas como Colgate y Sensodyne, este último
cabe citar posee como elemento principal el nitrato de potasio que le atribuye su
principal característica contra la sensibilidad. (34)
36
2.5 Colutorios naturales
Fuente: http://www.lavidalucida.com/remedios-naturales-para-el-cuidado-de-las-encias.html
Autor: El investigador
2.5.1 Generalidades
El uso de plantas con propiedades curativas o Fitoterapia tiene una historia
bastante amplia, ya que se la conoce incluso desde inicios de la humanidad, puesto
que era la única opción que tenían nuestros ancestros para tratar dolencias, quienes
fueron heredando sus conocimientos acerca de las características de varias especies
vegetales, de generación en generación aunque sin bases científicas. (29)
Es así que
en las últimas décadas se han realizado estudios in vivo sobre las propiedades de
varios agentes naturales no solo en cuanto a medicina general se refiere sino
también en Odontología. (14)
Puesto que los individuos últimamente reflexionan más
acerca del uso de productos sintetizados químicamente por los problemas que
conlleva su uso prolongado. (30)
De esta manera se expone que la utilización de enjuagues bucales a base de
elementos netamente naturales para controlar la cantidad y calidad de biofilm
consiente su uso habitual con una disminución notable de contraindicaciones.
(35)1Sin embargo y a pesar de esto, no se prioriza en la práctica diaria la
recomendación de su uso. (29)
Es así que en esta investigación se tratará de ciertas
características de plantas tales como la menta, el eucalipto y aloe vera o sábila
37
2.5.2 Menta
Fuente: http://misremedios.com/sustancias/menta/
Autor: El investigador
La menta es una planta perdurable y que posee un crecimiento bastante rápido
y se la cultiva generalmente con fines ornamentales en varias partes del mundo. (36)
Es así que si se trata de utilizar esta planta con objetivos terapéuticos se
recomienda el uso tan solo de sus hojas. (37)
Las cuales poseen propiedades
curativas extensas sobre todo en el sistema respiratorio para el tratamiento por
ejemplo de gripes y afecciones bronquiales, además funciona en el aparato
digestivo como anestésico a nivel estomacal. (38)
Ya a nivel de la Odontología se consideran ciertas propiedades como el hecho
de ostentar un principio activo denominado mentol (39)
que le provee cierta
propiedad contra microorganismos, por lo que se la cataloga como antiséptico,
razón por la cual se la comercializa en varios elementos de higiene bucal. (27)
Es así
que en 2007 se hizo un trabajo de investigación acerca de su eficacia para el control
de placa dental con resultados aceptables, al igual que un estudio similar realizado
en 2009 cuya conclusión la expone como buena contra biofilm. (29)
38
2.5.2.1 Composición química
La menta está constituida químicamente por una serie de elementos que le
proveen sus más sobresalientes propiedades como son: el mentol (5-metil-2-
isopropilciclohexanol) o denominado también químicamente como hexa-hidro-
timol quien le provee a esta planta su sabor especial, también están presentes
hidrocarburos como el metano, cetonas como la mentona y acetatos de metilo y
cineol. (39)
Además se ubican flavonoides como el apingenol, luteol, eriodictiol, e
inclusive existen en su composición taninos. (19)
2.5.3 Eucalipto
Fuente: http://www.plantasmedicinales10.com/articulo/eucalipto-catarro.html
Autor: El investigador
El eucalipto es un árbol que consigue grandes tamaños de altitud ya que
alcanza en algunos casos los 80 metros. (40)
Dentro de sus propiedades generales
más sobresalientes se encuentran las de poseer una acción balsámica y además de
provocar sudoración en quienes la utilizan. (41)
Por lo que se usa en mayor
porcentaje para afecciones de vías respiratorias. (42)
Por otra parte y como dato
curioso se cita que en distintas zonas se lo conoce como “árbol de la fiebre” puesto
que actúa en la malaria. (43)
En cuanto al uso de este árbol en la rama de la Odontología es necesario
acotar que posee una sustancia designada como eucaliptol acompañada de citrinetol
y muchas otras sustancias. (39)
Este eucaliptol tiene su importancia ya que es
utilizado en ciertas marcas comercializadas de limpieza dental, debido a que se trata
de uno de los antisépticos de mayor potencia cuando se usa como aceite esencial.
39
(36) Además posee características contra la inflamación.
(24) Por lo que en el estudio
realizado en 2009 acerca de eficacia de colutorios contra biofilm reflejó obtener el
mejor resultado. (29)
2.5.3.1 Composición química
El eucalipto químicamente se encuentra constituido por una serie de
elementos que le proporcionan sus propiedades dentro de las cuales se ubican en
mayor porcentaje el eucaliptol y el citronetol, además posee aldehídos (butílico),
alcoholes (etílico), timol, borneol, terpinol, citrol, aromadendreno, eudesmol,
felandreno, fenchona, (39)
Asimismo se considera de importancia la presencia de
sustancias tales como las resinas, el tanino y el ácido gálico. (44)
2.5.4 Aloe vera
Fuente: http://aerobicsalud.com/los-beneficios-de-la-sabila-para-la-belleza/
Autor: El investigador
El aloe vera o más comúnmente conocida como sábila es una planta
perdurable, de mucha historia, que se la encuentra en Ecuador en mayor
porcentaje en los valles. (36)
Posee espinas en toda su superficie y para utilizarla en
algún procedimiento terapéutico es necesario emplear el jugo gelatinoso que se
ubica en su interior, el cual tiene un sabor desagradable. (43)
Este líquido es
utilizado en general como cicatrizante y desinflamante sobre todo en zonas
gástricas. (40)
Como dato curioso cabe mencionar que existen narraciones que
relatan que Cleopatra utilizaba la sábila en cosméticos de belleza para el cutis. (45)
40
Ahora bien, si se requiere conocer la utilidad que se le da al aloe vera en
Odontología, es necesario acotar que no existe variedad de publicaciones acerca
de esto; sin embargo se puede mencionar que debido a que posee numerosas
acciones farmacológicas, como ser antinflamatoria, antimicrobiana y
regeneradora, es posible utilizarla en tratamientos no solo periodontales sino
además en procesos endodónticos, patología oral y tratamientos pos extracción.
(45) De hecho hace 30 años se realizó una investigación en la que se comprobó su
acción contra bacterias bucales con un aceptable resultado ya que en
concentraciones altas actúa como bactericida incluso para Streptococcus fecalis y
Cándida albicans. (46)
Ahora bien al utilizarlo como colutorio se menciona en una
publicación más reciente que es efectivo para la reducción de biofilm así como de
gingivitis, sin presentar además contraindicaciones tras su uso frecuente. (47)
2.5.4.1 Composición Química
Presenta una composición química verdaderamente compleja: azúcares tales
como: glucosa-6-fosfato, manosa-6-fosfato, fructosa, así como los denominados
glucomanamos; vitaminas: A, C, E, B1, B2, B6, B12 complementadas con ácido
fólico y colina; aminoácidos: 20 de los 22 aminoácidos del ser humano y 7 de los
8 esenciales; ácidos grasos: colesterol, campesterol,; enzimas: amilasa,
bradiquinasa, catalasa (45)
en su pulpa, el aloe vera presenta además carbohidratos,
resinas, y ácidos. (39)
41
2.6 Infusiones naturales
Fuente: http://www.terra.org/categorias/articulos/la-infusion-paso-paso
Autor: El investigador
Las infusiones tienen una historia amplia puesto que su uso fue muy común y
aceptado por nuestros antecesores debido a su fácil elaboración; en sí, son
preparaciones realizadas a partir de los componentes de diversas plantas, entre los
que se tiene: las hojas, flores, semillas, raíces, frutos, y corteza.(36)
Resulta
conveniente mencionar que si se requiere elaborar una infusión con raíces, semillas
u otra parte de la planta que se encuentre en contacto con la tierra es necesario
realizar más bien una decocción. Las infusiones además se diferencian del té
habitual puesto que estos necesitan sumergir la bolsita en agua hirviendo mientras
que las infusiones no necesariamente requieren esto sino basta con que
permanezcan en la superficie.
Para preparar una infusiones existen algunos métodos pero el más común es
aquel dispuesto por White (36)
, Duke (48)
y Bruno del médico (49)
quienes exponen
que lo primero es colocar agua en un recipiente resistente al calor, luego someterla
a fuego hasta llegar a punto de hervor, e inmediatamente depositar hojas o flores
secas de cualquier planta que se requiera utilizar, (48)
y dejar reposar hasta su
enfriamiento con el fin de permitir que los aceites esenciales se volatilicen en toda
la superficie del agua (36)
por último en ocasiones se requiere realizar una filtración
mediante un tamiz o colador .
42
2.7 Medios de cultivos bacteriológicos
Fuente: http://revistaialimentos.com/ediciones/ediciones-2012/edicion-31/inocuidad-2/la-evolucion-del-
diagnostico-microbiologico-en-la-industria.htm
Autor: El investigador
2.7.1 Generalidades
En el ámbito de la medicina existen formas o métodos para estudiar los
agentes microbiológicos que causan la enfermedad, los mismos que se denominan
cultivos bacterianos. (23)
En otras palabras un cultivo no es más que hacer crecer
bacterias o microorganismos fuera de su hábitat, en una superficie sólida o líquida,
con diferentes fines como realizar conteo bacteriano o antibiograma, por ejemplo. (9)
Para lo cual son necesarios una serie de requisitos o circunstancias como son los
nutrientes o el medio ambiente en el que se desarrollan los microorganismos. (50)
2.7.2 Requisitos Generales
Para que un cultivo sea exitoso existen diferentes requerimientos que debe
cumplir y uno de ellos es la presencia de ciertos nutrientes como fuente de energía
como es el caso de la sangre de ciertos animales, o nutrientes vegetales como la
soya e inclusive elementos artificiales. (6)
Además está el hecho de cumplir con una
serie de normativas estrictas que se deben efectuar de acuerdo al tipo de cultivo, así
como a la necesidad de quien investiga en la siembra, así se tiene la seguridad
43
biológica, el medio ambiente óptimo para el crecimiento bacteriano. (30)
Asimismo
se necesita un pH óptimo, temperatura adecuada, ausencia o presencia de oxígeno,
entre los más importantes. (41)
2.7.3 Tipos
A los cultivos bacteriológicos se los puede clasificar de acuerdo a la
funcionalidad, a la consistencia y al origen. Los primeros se diferencian en medios
de cultivo selectivos, donde se provee al medio con sustancias de tal manera que
favorezcan el crecimiento de ciertas bacterias y la muerte de otras; además existen
medios diferenciales en los que se agrega un elemento que permita determinar el
lugar exacto donde se localizan diferentes colonias de acuerdo a su metabolismo.
(51) Además se encuentran medios selectivos-diferenciales donde se ayuda de
tinciones para diferenciar las colonias. En lo concerniente a los clasificados según
su consistencia se encuentran los sólidos como el agar o líquidos como el
tioglicolato. (9)
En cuanto a su origen se distinguen tres tipos como son: los
naturales, sintéticos y semisintéticos.
2.7.4 Métodos de siembra
Cuando se realiza una toma una muestra bacteriológica, sea cual sea el lugar
de donde se la hizo, es posible realizar una siembra bacteriana, es decir se puede
hacer crecer los microorganismos presentes en la muestra tomada, para lo cual
existen diferentes formas de hacerlo como es el método de superficie en un medio
sólido donde se coloca la muestra en la superficie del medio de cultivo (17)
para
luego proceder a realizar estriaciones con un asa que debe estar esterilizada
mediante el sometimiento a fuego en un mechero hasta que se muestre al rojo vivo
(52); las estrías deben realizarse de tal manera que se forme un pentágono.
(53)
44
Esto a su vez debe realizarse en 3 periodos, sin olvidarse de esterilizar el asa
al terminar cada tiempo, el primero debe ser tomado a partir de la siembra inicial, el
segundo debe ser en sentido contrario al primero y el tercero en el mismo sentido
que el anterior pero en diferente dirección como se observa en el gráfico 4:
Gráfico 4: Esquema modo de siembra
Fuente:http://gsdl.bvs.sld.cu/greenstone/collect/preclini/index/assoc/HASH01eb.dir/fig122a17.png
Autor: El investigador
45
CAPÍTULO III
3. METODOLOGÍA
3.1 Tipo de investigación
Esta investigación es de tipo experimental in vitro.
IN VITRO: puesto que se realizó en un laboratorio microbiológico
EXPERIMENTAL: ya que utiliza métodos y técnicas para la obtención de los
resultados.
3.2 Población y muestra
El universo consta de un número infinito de cultivos de cepas puras de
Streptococcus sanguinis ATCC 10556.
3.2.1 Selección y tamaño de la muestra
Para el cálculo de la muestra se tomó el muestreo estadístico denominado
discrecional o por juicio en el cual el laboratorio microbiológico indica que se
deben realizar 12 cultivos cada uno con 4 discos impregnados en las diferentes
sustancias a investigar, evitando de esta manera una excesiva repetitividad.
Se tomó como referente comercial el colutorio a base de compuestos fenólicos
(Listerine) puesto que en base a evidencia bibliográfica y científica revela un buen
porcentaje de actividad antiplaca y antimicrobiano, también presenta muy pocos
efectos adversos como lo expone Madrigal (29)
en su publicación realizada en 2009;
y además de ser uno de los más comercializados en nuestro país.
46
3.2.2 Criterios de Inclusión
Cepas puras de Streptococcus sanguinis ATCC10556
Colutorio comercial a base de compuestos fenólicos. (Listerine)
Infusiones preparadas con hojas de menta, eucalipto y aloe vera frescas.
3.2.3 Criterios de Exclusión
Cultivos bacterianos que al momento de la medición de halos se presenten
contaminados.
Cultivos en los cuales se aprecie crecimiento de bacterias diferentes a S.
sanguinis.
Colutorios fenólicos que se encuentren caducados.
.
47
3.2.4 Variables
3.2.4.1 Definición de variables
IDENTIFICACIÓN
DE VARIABLES
CONCEPTUALIZACIÓN CLASIFICACIÓN INDICADOR
CATEGÓRICO
ESCALA DE
MEDICIÓN
Enjuagues bucales
comerciales a base de
compuestos fenólicos
Son aquellos colutorios que
poseen como base de su
constitución compuestos
fenólicos tales como los
aceites esenciales: timol,
eucaliptol, mentol y que
además denotan bajos efectos
adversos. (33)
Independiente Porcentaje de
compuestos
fenólicos en el
enjuague comercial.
Cualitativa
Infusiones naturales Aquellas infusiones que se
fabrican a partir de plantas
cuyas propiedades incluyen la
disminución de
microorganismos que forman
parte de la placa bacteriana (30)
Independiente
Infusiones naturales
a base de: menta,
eucalipto, aloe vera
Cualitativa
Inhibición del
crecimiento
La inhibición del crecimiento
de S. sanguinis se medirá de
acuerdo al halo de inhibición
que presente el cultivo
bacteriano frente a cada
colutorio utilizado.
Dependiente Milímetros Cuantitativa
48
3.3 Materiales y métodos
3.3.1 Recursos materiales
Se utilizó hojas de menta, eucalipto y aloe vera para la elaboración de
colutorios naturales; además enjuague bucal comercial con base fenólica.
Figura 1: Sustancias a investigar
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
Para el cultivo: Cepas puras de S. sanguinis, agar sangre de cordero, discos de
papel filtro estéril, asa bacteriológica, incubadora, autoclave, agar Muller-Hinton,
cajas Petri, hisopos estériles.
Figura 2: Cepas puras S. sanguinis y discos en blanco
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
49
Figura 3: Agar Muller Hinton
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
Figura 4: Incubadora
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
50
Figura 5: Esterilizadora
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
Figura 6: Micropipeta
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
Además se utilizó implementos básicos de bioseguridad (mascarilla, gorro,
guantes, mandil) además de lysol, vasos desechables, lápices bicolores, esferos y
libreta de apuntes.
51
Figura 7: Implementos de Bioseguridad
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
3.3.2 Recursos humanos
Para la realización del presente trabajo fueron necesarios la presencia del
investigador, la microbióloga, un estadístico y un ayudante.
3.4 Estandarización
3.4.1 Estandarización para preparación de colutorios naturales
El procedimiento para la elaboración de colutorios naturales se estandarizó de
acuerdo a los criterios mencionados por recetarios herbarios como el de Duke
(1998) (48)
y Bruno del Médico (2014) (49)
Es así que se colocó 1 litro de agua en un recipiente metálico para ser
sometido a fuego lento hasta llegar a hervir a 91 oC aproximadamente en la Sierra,
una vez conseguido esto se añadió 10-20 gr aproximadamente de hojas de cada
planta a investigar previamente lavada (una cucharada), se dejó reposar y se tapó el
recipiente hasta su enfriamiento, para finalizar con un embotellado en envase
plástico rotulado con el nombre del colutorio.
52
3.4.2 Estandarización para elaboración de cultivo microbiológico
La estandarización se basó en patrones mencionados por la especialista en el
campo microbiológico, quien impartió al investigador una capacitación para el
manejo de instrumentos y materiales de laboratorio así como para el procedimiento
del cultivo bacteriano.
3.5 Procedimiento
3.5.1 Adquisición cepas
Lo primero fue obtener cepas puras y liofilizadas de Streptococcus
sanguinis en el distribuidor MEDIBAC (anexo 6)
Figura 8: Cepas Streptococcus sanguinis
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
53
3.5.2 Fase en laboratorio
Luego en el laboratorio microbiológico de la facultad de Odontología
(anexo 5) se realizó de acuerdo a los estándares impartidos por la
licenciada especialista en el campo, lo siguiente:
I. Se toma una pequeña cantidad de la cepa para realizar la siembra y
cultivo bacteriano por el método de agotamiento de estrías con un
hisopo estéril en una caja Petri con agar sangre de cordero para
colocarlas luego en una incubadora por 24 horas a 37 oC.
Figura 9: Hisopado agra sangre
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
II. En el transcurso de este período se elaboró los colutorios naturales con
el fin de obtener compuestos frescos de la siguiente manera:
III. Se colocó 1 litro de agua en un recipiente metálico para ser sometido a
fuego lento hasta llegar a hervir a 91 oC aproximadamente en la Sierra,
una vez conseguido esto se añadió 10-20 gr aproximadamente de
eucalipto previamente lavado (una cucharada), se deja reposar y se tapa
el recipiente hasta su enfriamiento, para finalizar con un embotellado en
envase plástico rotulado con el nombre del colutorio. El mismo
procedimiento se realizó para la fabricación del colutorio natural de
menta.
54
IV. En el caso de aloe vera: previamente se lavó las hojas, se las peló y se
las volvió a lavar con el fin de eliminar la sustancia amarga contenida en
la superficie de la pulpa de dicha planta y luego se procedió de manera
similar al eucalipto.
V. Se envasó y rotuló las infusiones de la siguiente manera: menta: 1;
eucalipto: 2; aloe vera: 3. Asimismo se rotuló al colutorio fenólico
como: 4; control positivo (clorhexidina): 5; y control negativo(suero
fisiológico): 6.
Figura 10: Envasado y rotulado infusiones naturales
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
VI. Una vez obtenido crecimiento bacteriano se procedió a diluir el
microorganismo hasta que alcance una turbidez de 0,5 en la escala de
Mc Farland.
55
Figura 11: Medición de turbidez Mc Farland
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
VII. Luego se inoculó con hisopos estériles en agar Mueller Hinton
suplementado con 5% de sangre de la misma manera que se realizó la
siembra anterior.
Figura 12: Inoculación en agar Müller Hinton
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
56
VIII. Cabe destacar que se harán 12 repeticiones con el fin de no caer en una
repetitividad excesiva
IX. Se impregnaron discos de papel filtro estériles en blanco en las cuatro
sustancias a investigar mediante el uso de la micropipeta.
Figura 13: Colocación soluciones en discos blanco
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
X. En cada caja Petri se colocó 4 discos de papel filtro impregnados cada
uno en los diferentes colutorios obtenidos: Fenólico, menta, eucalipto,
aloe vera
XI. Además se colocó un disco de papel embebido en clorhexidina al 2%
como grupo control positivo y otro en suero fisiológico como control
negativo en un cultivo al azar.
57
Figura 14: Control positivo (clorhexidina)
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
Figura 15: Control negativo (suero fisiológico)
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
XII. Cada disco se rotuló con el respectivo número de colutorio utilizado
58
Figura 16: Rotulación de discos 1 menta, 2 eucalipto, 3 aloe vera, 4 colutorio fenólico, 5 control positivo, 6 control
negativo
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
XIII. Se introdujo nuevamente en la incubadora a 37 oC por 24 horas.
XIV. Al cabo de este período se midió con una regla los milímetros del halo
de inhibición producidos en cada una de las muestras anotando en el
registro para la recolección de datos los resultados obtenidos. (anexo 3).
Todo este proceso en el Laboratorio está basado en los estudios
realizados por Aguilera et al. (5)
en 2011, Yañex & Cuadro (30)
en 2012 y
Kamalinejad (54)
et al.en 2014
59
Figura 17: Medición halos de inhibición
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
XV. Para el adecuado manejo de desechos las cajas Petri fueron esterilizadas
en autoclave para posteriormente ser recolectados en una funda plástica
de color rojo y rotulados como infectocontagiosos conjuntamente con
otros elementos utilizados por la microbióloga y el investigador, para ser
almacenados en el contenedor general de desechos infecciosos del
laboratorio, para ser llevados por el personal encargado al contenedor
general de la Facultad de Odontología de la UCE, y finalmente ser
enviados a la empresa GADERE quienes manejan el servicio integral de
60
desechos ambientales conforme al acuerdo No. 142 Suplemento-registro
oficial No 856 del 21 de diciembre del 2012 (anexo 4)
Figura 18: Colocación de desechos en contenedor
Elaborado por: El investigador
Fuente: El investigador
XVI. Una vez recopilados los resultados, estos se ingresaron en el programa
Excel para ser tabulados y graficados para mejorar su comprensión
finalizando con su análisis en un paquete estadístico determinado por el
especialista en este campo.
3.6 ASPECTOS ÉTICOS
De acuerdo con los principios establecidos en la constitución de la República
del Ecuador según el Acuerdo Ministerial 4889 de julio 01 del 2014, y debido a que
esta investigación es considerada como una investigación sin riesgo y en
cumplimiento con los aspectos mencionados con el artículo 6 de la presente
resolución, este estudio se desarrolló conforme a los siguientes criterios:
Al tratarse de una investigación in vitro no existe comprometimiento en la
integridad de ningún sujeto.
61
CAPÍTULO IV
4. ANÁLISIS DE DATOS
Una vez realizada la parte experimental del proyecto de investigación se recopilaron
las medidas de los halos de inhibición producidas por cada uno de los colutorios
naturales y fenólico, lo cual fue registrado en la matriz previamente diseñada,
quedando de la siguiente manera:
COLUTORIOS UTILIZADOS
CAJA
No
(1)MENTA
mm halo
(2) EUCALIPTO
mm halo
(3)ALOE VERA
mm halo
(4)FENÓLICO
mm halo
1 8 9 9 8
2 8 8 11 9
3 8 8 8 8
4 9 8 8 8
5 8 8 8 8
6 9 10 11 10
7 8 8 8 8
8 8 8 8 8
9 8 9 11 9
10 8 8 8 8
11 9 10 10 9
12 8 8 8 8
Tabla 1: Resultados medición halos
Autor: El investigador
Fuente: Laboratorio microbiológico
62
Así mismo se obtuvo la medida de los halos formados alrededor de los discos
control:
CAJA
No
(5)CONTROL
POSITIVO
CLORHEXIDINA
(6)CONTROL
NEGATIVO
SUERO
FISIOLOGICO
mm halo mm halo
1 20 0
Tabla 2: Resultado medición halos sustancias control
Autor: El investigador
Fuente: Laboratorio microbiológico
4.1 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Con los datos obtenidos se puede exponer las medidas de tendencia central tales como
la media, la mediana o la moda, siendo la primera el valor promedio entre las medidas
obtenidas; así:
Autor: El investigador
Fuente: In. Juan Molina
Descriptivos
HALOS (mm) Media
Desviación Error 95% del intervalo de
confianza para la media Mínimo Máximo
Estándar Estándar Límite
inferior
Límite
superior
MENTA 8,25 0,45 0,13 7,96 8,54 8,00 9,00
EUCALIPTO 8,50 0,80 0,23 7,99 9,01 8,00 10,00
ALOE VERA 9,00 1,35 0,39 8,14 9,86 8,00 11,00
FENÓLICO 8,42 0,67 0,19 7,99 8,84 8,00 10,00
CLORHEXIDINA 20,00 0,00 0,00 20,00 20,00 20,00 20,00
SUERO FISIOLOGICO 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00
Total 9,03 5,90 0,70 7,64 10,41 0,00 20,00
Tabla 3: Media o promedio entre halos de inhibición
63
En esta tabla se puede apreciar el tamaño promedio de los halos de inhibición
formados por cada colutorio investigado en los 12 cultivos, así como el tamaño mínimo y
máximo.
De tal modo que se puede apreciar que ninguno de los colutorios se acercaron a la
media del control positivo, sin embargo se expone que aloe vera obtiene el mejor resultado
y menta el menor, aunque ninguno de estos con una diferencia significativa. De igual
manera se observa que el control negativo no produjo ningún valor.
Esto se puede visualizar de mejor manera en los siguientes gráficos:
Autor: el investigador
Fuente: In. Juan Molina
Menta Eucalipto Aloe vera C. Fenólico
Mediana (Me) 8 8 8 8
Moda (Mo) 8 8 8 8
Tabla 4: Mediana y Moda
Autor: El investigador
Fuente: Laboratorio microbiológico
8,25 8,50 9,00 8,42
20,00
0,00
MEN
TA
EUC
ALI
PTO
ALO
E V
ERA
FEN
ÓLI
CO
CLO
RH
EXID
INA
SUER
OFI
SIO
LOG
ICO
Comparación de Medias
Gráfico 5: Media de halos de inhibición
64
En cuanto a la moda y la mediana todos los colutorios presentan un resultado de 8,
mostrando de esta manera la poca o casi nula diferencia que existe entre ellos en cuanto a
la formación de halos de inhibición.
Ahora bien para establecer si en este estudio se utilizan procedimientos estadísticos
paramétricos o no paramétricos inicialmente se verifica que las muestras tomadas
provienen de una población con distribución Normal, esto se realiza con las pruebas de
Kolmogorov - Smirnov o con la prueba de Shapiro - Wilk (menor a 20 datos), luego vamos
a probar si:
Ho (Hipótesis inicial): La muestra proviene de una población con distribución Normal
Ha (Hipótesis alterna): La muestra NO proviene de una población con distribución Normal
Pruebas de normalidad
Kolmogorov – Smirnov Shapiro – Wilk
Estadíst
ico Gl Sig. Estadístico gl Sig.
MENTA 0,460 12 0,000 0,552 12 0,000
EUCALIPTO 0,401 12 0,000 0,662 12 0,000
ALOE VERA 0,354 12 0,000 0,705 12 0,001
FENOLICO 0,400 12 0,000 0,674 12 0,000
Tabla 5: Pruebas de normalidad
Autor: El investigador
Fuente: Ing. Juan Molina
De la prueba de Shapiro-Wilk todos los valores de significación (Sig.) son menores
a 0,05 (95% de confiabilidad) luego aceptamos Ha, esto es todas las muestras NO proviene
de una población con distribución Normal, como se observa en los siguientes gráficos:
65
Autor: El investigador
Fuente: In. Juan Molina
Como se observa que ninguna gráfica se asemeja a la curva normal (forma
de campana) se verifica que las muestras no surgen de una población normal,
entonces aplicamos pruebas no paramétricas para la comparación entre las
muestras:
4.2.1 Pruebas no paramétricas: Kruskal-Wallis
Ho: (hipótesis nula) Las muestras proceden de poblaciones con la misma
distribución de probabilidad.
Ha: (hipótesis alternativa) Existen diferencias respecto a la tendencia
central de las poblaciones y puede ser direccional o no.
Gráfico 6: Curvas de normalidad
66
Descriptivos
HALOS (mm) N Media Desviación
estándar
Error
Estándar
95% del intervalo
de confianza para
la media
Mínim Máxim Límit
e
inferi
or
Límite
superior
MENTA 12 8,2500 0,45227 0,13056
7,962
6 8,5374 8,00 9,00
EUCALIPTO 12 8,5000 0,79772 0,23028
7,993
2 9,0068 8,00 10,00
ALOE VERA 12 9,0000 1,34840 0,38925
8,143
3 9,8567 8,00 11,00
FENÓLICO 12 8,4167 0,66856 0,19300
7,991
9 8,8414 8,00 10,00
CONTROL
POSITIVO
CLORHEXIDINA
12 20,000 0,00000 0,00000 20,00
0 20,0000 20,00 20,00
CONTROL
NEGATIVO
SUERO
FISIOLOGICO
12 0,0000 0,00000 0,00000 ,0000 ,0000 0,00 0,00
Total 72 9,0278 5,90052 0,69538
7,641
2 10,4143 0,00 20,00
Tabla 6: Prueba de Kruskal- Wallis Autor: El investigador
Fuente: Ing. Juan Molina
67
Gráfico 7: Prueba de Kruskal-Wallis
Autor: El investigador
Fuente: In. Juan Molina
De la Prueba de Kruskal-Wallis Sig. asintót. = 0,000 es menor a 0,05 (95% de
confiabilidad), luego existen diferencias respecto a la tendencia central de las poblaciones.
No todas son similares, para verificar cuales son similares, se realizan pruebas dos a dos:
68
Gráfico 8: Comparaciones por parejas de sustancias Autor: El investigador
Fuente: In. Juan Molina
Tabla 7: Prueba dos a dos Autor: El investigador
Fuente: Ing. Juan Molina
69
De las pruebas dos a dos se tiene que son diferentes la CLORHEXIDINA y el
SUERO FISIOLÓGICO, el resto de sustancias son estadísticamente similares lo que
demuestra una vez más la poca diferencia que posee cada colutorio para formar halos
de inhibición frente a S. sanguinis.
70
4.3 DISCUSIÓN
La placa dentobacteriana se ha constituido como una de las entidades más
prevalentes y patógenas en cuanto a salud oral se refiere conjuntamente con la caries,
por lo que se han realizado una serie de estudios para determinar los microorganismos
que la componen, siendo el Streptococcus sanguinis el pionero en su formación. Así
también con el pasar de los años se ha intensificado la búsqueda de métodos eficaces
para disminuir, controlar o evitar la aparición de biofilm como lo es el uso de
colutorios. Por lo que el presente trabajo de investigación se realizó con el fin de
buscar el enjuague bucal ya sea con base natural (menta, eucalipto, aloe vera) o con
base sintética (fenólico) que presente mayor efectividad para inhibir el crecimiento de
Streptococcus sanguinis, cuya importancia radica como ya se expuso en distinguirse
como microorganismo pionero en la formación de placa dentobacteriana.
De este modo este estudio in vitro determinó el colutorio idóneo para controlar
biofilm, similar a lo que realizó Aguilera (5)
en 2011, pero con una gran diferencia
puesto que este autor utilizó cepas liofilizadas y puras de Streptococcus mutans
mientras que el autor de este trabajo de investigación más bien utilizó cepas de
Streptococcus sanguinis. Por otra parte Villalobos (47)
en 2001 realizó algo diferente ya
que conformó un estudio in vivo para evaluar el uso de colutorios para el control de
placa bacteriana, lo cual también se asemeja con el estudio expuesto por Ge, Caufield,
Fish & Li (55)
quienes en 2008 realizaron un análisis in vivo con 22 niños en los que
evaluaron la relación de la existencia de S. mutans y S. sanguinis en la aparición de
caries.
Además esta investigación se realiza con el muestreo denominado por juicio o
discrecional en el que el laboratorio microbiológico indica que el número de cultivos a
elaborar debe ser de 12, con el fin de evitar una excesiva repetitividad, Yáñez &
Mogollón (30)
en 2012 utiliza también el mismo tipo de muestreo, aunque en su estudio
se evidencia la elaboración de un solo cultivo por cada bacteria utilizada, tales como el
Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Bacillus subtilis y
Enterococcus faecalis. Gaete (35)
en 2012 más bien expone su trabajo mediante el
muestreo denominado no probabilístico por conveniencia similar a lo expuesto por
Cárcamo (56)
en 2011.
71
De tal manera, el presente estudio evaluó enjuagues naturales a base de menta,
eucalipto y aloe vera fabricados mediante el concepto de infusión natural y los
comparó con un enjuague a base de compuestos fenólicos, similar a lo realizado por
Madrigal (29)
en 2009 quien también valoró enjuagatorios naturales vs comerciales, sin
embargo dicho autor no utiliza infusiones sino más bien aceites esenciales, además
utiliza elementos naturales diferentes como la hierbabuena en lugar de aloe vera, y no
solo usa colutorios fenólicos sino también enjuagues comerciales (Colgate Plax y
Clorhexil), encontrando que el Listerine resulta ser el mejor para control de biofilm lo
cual también difiere con el autor del presente estudio ya que este expone que el
enjuagatorio fenólico resultó ocupar el tercer lugar. Kamalinejad (54)
en 2014 difiere de
este estudio puesto que dicho autor utiliza para su investigación el extracto de Rush
colaria la misma que se muestra eficaz contra el S. sanguinis, por su parte Sadanand
(57) en 2016 hace algo diferente ya que utiliza enjuagues de clorhexidina y granadilla
para inhibir microorganismos formadores de biofilm.
En este reporte bibliográfico se realiza la evaluación mediante la medición de los
milímetros de los halos de inhibición formados alrededor de cada disco de papel filtro
impregnado con las diferentes sustancias utilizadas, encontrando que aloe vera formó
9 mm siendo de tal modo el más eficaz, mientras que menta formó 8.25 mm siendo el
de menor eficacia; lo que se asemeja a lo elaborado por Azam Aliasghari (58)
en 2016
quien para desplegar sus resultados también se valió del análisis de los milímetros
formados alrededor de las diferentes bacterias cariogénicas utilizadas (sanguinis,
mutans, salivarius, sobrinus), encontrando que el quitosano produce un halo
inhibitorio entre 8.5-13.5mm, lo cual exhibe una validez aceptable. Cárcamo (56)
en su
artículo publicado en 2011 difiere ya que en su estudio la evaluación de los colutorios
se la hizo a través del conteo de UFC en las placas de agar y reafirmado con el índice
de Loe Silness lo que le arrojó como respuesta que el enjuagatorio con manzanilla se
muestra como eficaz debido a que tiene una duración de efecto de 4 a 6 horas.
Una vez que se realizó la medición de los halos de inhibición se conformó un
análisis de resultados, dando como consecuencia que el colutorio a base de aloe vera
presente un promedio de 9 mm, superando de este modo a los enjuagatorios a base de
menta eucalipto e inclusive al colutorio comercial fenólico. Prashant (59)
en 2007
encontró que el colutorio natural de mango producía resultados aceptables en cuanto a
72
los mm de los halos alrededor de cepas de Streptococcus cariogénicos (sanguinis,
salivarius, mutans). Mientras tanto Madrigal (29)
evidencia que los colutorios
comerciales obtienen un mejor resultado sobre los colutorios naturales, lo cual difiere
del presente estudio ya que este enjuague apenas ocupa el tercer puesto ya que
presentó una media de 8.41 mm por debajo de aloe vera y eucalipto con 9 y 8.5 mm
respectivamente. Camejo (60)
en su publicación de 1999 más bien cita que el Gluconato
de clorhexidina mantiene una media de 8.2 mm de halo alrededor de los discos, lo cual
discierne un tanto de la presente publicación ya que dicha sustancia formó un halo de
20 mm aunque en un solo cultivo ya que se lo tomó como control positivo.
Al finalizar este reporte investigativo se concluye que los colutorios naturales de
eucalipto y aloe vera muestran una leve superioridad sobre colutorios comerciales con
bases fenólicas, no solo por los promedios en cuanto a los halos de inhibición sino
además por los diversos estudios científicos que demuestran los muy pocos efectos
adversos que en ellos se distinguen. Por su parte Charles (61)
en 1999 concluyen su
trabajo expresando que los fenoles y aceites esenciales poseen una grata efectividad
para reducir placa bacteriana. Larrueca (14)
en cambio concluye su proyecto
investigativo exponiendo que las infusiones naturales a base de té natural son eficaces
para inhibir cepas de Streptococcus. Estas conclusiones diferentes entre autores se
deben quizá a las diferentes metodologías utilizadas así como también a la población
estudiada.
73
CAPÍTULO V
5 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1 CONCLUSIONES
Se midió los halos de inhibición producidos por los colutorios naturales y sintéticos
utilizados, exhibiéndose para aloe vera 9 mm, eucalipto 8.5, fenólico 8.41mm y
menta 8.25mm.
Se determinó que las infusiones naturales eucalipto y aloe vera poseen una
capacidad aceptable para inhibir crecimiento de Streptococcus sanguinis.
Se estableció que el enjuague comercial fenólico presenta moderada capacidad
inhibitoria frente al Streptococcus sanguinis.
Se comprobó que las infusiones naturales eucalipto y aloe vera muestran mejor
eficacia para inhibir cepas de Streptococcus sanguinis frente a colutorio fenólico.
74
5.2 RECOMENDACIONES
Es oportuno promover la realización de estudios afines a la presente
investigación, puesto que el uso de técnicas que favorezcan el control del biofilm a la
hora de ser preventivas se hacen verdaderamente necesarias debido a la prevalencia
que mantiene dicha entidad patológica. En el mismo contexto y debido a las buenas
características y resultados obtenidos en el presente estudio se invita no solo a utilizar
colutorios con bases naturales como método coadyuvante en higiene oral sino que con
la utilización de los mismos se puede realizar control de placa en grandes poblaciones
debido a su bajo costo pudiendo ser utilizado en brigadas públicas de salud oral.
75
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79
ANEXOS
ANEXO 1: ACEPTACION DE TUTORIA
80
ANEXO 2: CAMBIO DE TEMA
81
ANEXO 3: FORMATO PARA RECOLECCION DE DATOS
CAJA
No
MENTA(1) EUCALIPTO(2) ALOE VERA(3) FENÓLICO(4)
mm halo mm halo mm halo mm halo
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
No. CONTROL
POSITIVO(5)
CONTROL
NEGATIVO(6)
mm halo mm halo
1
82
ANEXO 4: MANEJO DE DESECHOS
83
ANEXO 5: SOLICITUD USO DE LABORATORIO
84
ANEXO 6: CERTIFICADO AUTENTIFICACION STREPTOCOCCUS
SANGUINIS
85
ANEXO 7. CERTIFICADO ESTADÍSTICO
86
ANEXO 8: CERTIFICADO COMITE DE ETICA
87
ANEXO 9: CERTIFICADO ANTIPLAGIO
88