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Toxinas lipofílicas en moluscos del noroeste de Baja California: Monitoreo y regulación

Ernesto Garcia Mendoza

Departamento de Oceanografía Biológica / CICESE

“V Simposio Internacional de Sanidad e Inocuidad Acuícola”

Estado actual y perspec/vas en la región

Ø  Actividades importantes acuicultura y de pesquerías Ø De las descargas de sardina y anchoveta mas importantes en el país Ø La producción mas alta de mejillones y ostiones cultivados: Lagunas de Guerrero Negro, Manuela y San Quintín. Area de Rincón de Ballenas, BTS Ø Pesca de almeja chiluda (y cultivo) es una actividad de reciente desarrollo Ø Cultivo de atunes en encierros Ø Varios centros de investigación

Bahía de Todos Santos

Baja California, condiciones ambientales y ecología costera

Ø  Forma parte del Sistema de la Corriente de California Ø  Las condiciones oceanográficas originan ambientes ricos y productivos que sustentan pesquerías importantes

Ø Las surgencias es un proceso importantes de fertilizacion en al zona costra

Ø  Ambiente adecuado para la acuicultura de moluscos bivalvos

Sea surface temperature

Sea surface height and geostrophical circulation

Producción acuícola de Baja California

Year2000 2002 2004 2006 2008 2010 2012

Pro

duct

ion

(mt)

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

7000Oyster 21%

Tuna 63%

Mussels 8%

Datos: Secretaria de Pesca de Baja California

La actividad de acuicultura pude estas condicionada por la presencia de especies de fitoplancton con potencial toxico

Conceptos básicos

N COOH

COOH

COOH

H3C

H3C

H

¿Que son las ficotoxinas marinas?

Compuestos químicos que son producidos (metabolitos secundarios) por las microalgas. Pueden afectar a otros organismos y tener un efecto negativo sobre la salud publica

Ficotoxina Familia química

Peso molecular

Característica Especie productora

Saxitoxina

alcaloide

299

Hidrofilica

Alexandrium spp.,Gymnodinium spp., Pyrodinium Bahamense

Acido domoico Aminoácido cíclico

311 Hidrofilica Pseudo-nitzschia spp.

Acido okadaico Polieter 804 Lipofilica Dinophysis spp., Prorocentrum lima

Azaspiracido Polieter 841 Lipofilica Azadinium spinosum

Pectenotoxinas Polieter 858 Lipofilica Dinophysis spp

Gymnodimina Imina ciclica 507 Lipofilica Karenia selliformis

Prorocentriolo Imina ciclica

979 Lipofilica Prorocentrum spp.

Espirolidos Imina ciclica 691 Lipofilica Alexandrium ostenfeldii

Yesotoxinas Polieter 1140 Anfifílica Protoceratium reticulatum, L. polyedrum

Brevetoxinas Polieter 894 Lipofilica Karenia brevis

Limite máximo permisible 160 µg/kg

1 mg/kg)

160 µg/kg

?Porque se monitorean este tipo de toxinas en México?

Ø No existe casos reconocidas de intoxicación, pero se monitorean desde el 2009. Reconocida en la NOM-242-SSA1-2009 publicada en el 2011 (Toxina diarreíca , acido okadaico)

Ø Prácticamente no existe investigación sobre este tipo de toxinas en el

país

Ø Se implementaron dos vedas sanitarias en al región en el 2010 (primera veda sanitaria en Norteamérica?), tres en 2012 y una en 2013.

Ø En 2010 no se confirmó analíticamente la presencia de toxinas de tipo

lipofilica. Las dos vedas se implementaron con base a resultados positivos por bioensayo en ratón.

DSP o toxinas lipofilicas: ¿Un problema emergente?

Proyecto: Toxinas diarreicas (lipofilicas) en moluscos bivalvos cultivados en el pacifico de Baja California: ¿Un problema emergente?

Tesis: Ocean. Yaireb Sanchez Bravo

?Es un problema del uso del bioensayo en ratón como método de prueba?

El caso del 2012 § Comunidad fitoplanctonica § Medición temperatura a diferentes profundidades • Evaluación de la concentración de toxinas lipofilicas en mejillón Bioensayo en ratón utilizando el hepatopáncreas (Yasumoto, 1979) Bioensayo en ratón en cuerpo completo (EU Harmonized protocol) LC-MS/MS (EU Harmonized protocol). Centro de Investigaciones Marinas (CIMA). Centre for Environment, Fisheries and Aquaculture (CEFAS). Aquity Xevo TQ MS/MS Aquity I-Class Xevo TQ-S Okatest Jellets

Time (2012)

Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec

Din

ophy

sis

abun

danc

e (C

el L

-1)

0

1000

2000

3000

4000

5000 OA

/DTX/PTX ( mg O

A eq/kg)

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

180010 m

0 m

Toxinas lipo:licas en mejillones Toxinas diarreicas DSP .(AO, DTX y PTX) y abundancia de Dynophysis DTX1 detectada en 6 muestras. Concentración max. 8.5 µg/kg PTX2 concentraciones variables

Time (2012)


Rel

ativ

e ab

unda

nce

(%)

0

10

20

30

40

50

60

70 OA/D

TX/PTX ( mg OA eq/kg)

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

1800

Especies responsables

OA (mg kg-1)

0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800

PTX

(mg

kg-1

)

0

10

20

30

40

50

Time (2012)


Abun

danc

e C

el L

-1

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

PTX / AO

0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

D. fortiiD. acuminata

Abundancia superficial

0 m

10 m

2012Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec Jan

Tem

pera

ture

(oC

)

10

12

14

16

18

20

22

24

26

Time (2012)


Abun

danc

e Cel

L-1

0

1000

2000

3000

4000

5000

0 m 10 m

Yesotoxinas

Se detectaron cuatro análogos YTX: 19 to 62% HYTX: 45 to 65% OHYTX OH hYTX.

YTX detectadas en dos muestras de mejillón (0.7 y 0.10 mg/kg) en la jolla L polyedrum fue las especies responsable (Howard et al, 2008)

Lingulodinium polyedrum

Time (2012)


Abun

danc

e C

el L

- 1 (x

103 )

0

10

20

30

40

50

60

70

YTX ( mg/kg)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

Yesotoxinas

La especies responsable no fue detectada. ?La especies toxica (Gonyaulax spinifera or Protoceratium reticulatum??) estuvo asociada a un consorcio de dinoflagelados dominada por C. furca?

Ceratium furca

Tiempo

Jan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec 0

10

20

30

40

50

YTX ( mg/kg)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2A

Abun

danc

e C

el L

- 1 (x

103 )

Yesotoxinas

Time 2012


SPX1

(µg

kg-1

)

0

1

2

3

4

5

Otras toxinas: Iminas cíclicas

Las especies responsables no se detectaron

Karenia selliformis ?? Alexandrium ostenfeldii??

Tiempo


GYM

(mg/

kg)

0

1

2

3

4

Tiempo


AZA

1 (m

g/kg

)

0

2

4

6

8

Azaspiracidos

Azadinium spinosum?

BIOENSAYO EN RATÓN

XEVO - TQ XEVO- TQS

HP CC HP CC

TOTAL 37 43 31 43

FALSOS POSITIVOS 20 8 17 7

FALSOS NEGATIVOS 1 9 3 11

COINCIDENCIAS 16 26 11 26

% ERROR 57 39.5 64.5 41.8

Implicaciones: regulación .

En México no hay un protocolo normado

POSITIVO

NEGATIVO

A

BPOSITIVO

NEGATIVO

Tiempo

ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic.

Abu

ndan

cia

Cel

L-1

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

Tiempo


Abu

ndan

cia

Cel

L-1

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

C

Tiempo


OA

/DTX

/PTX

(mg

OA

-eq

kg-1

)

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

YTX (mg)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

A.Oceanica Aqua LapYTX

BER-‐ hepatopáncreas

BER-‐ cuerpo entero

POSITIVO

NEGATIVO

A

BPOSITIVO

NEGATIVO

Tiempo

ene. feb. mar. abr. may. jun. jul. ago. sep. oct. nov. dic. A

bund

anci

a C

el L

-1

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

Tiempo


Abu

ndan

cia

Cel

L-1

0

1000

2000

3000

4000

5000

6000

C

Tiempo


OA

/DTX

/PTX

(mg

OA

-eq

kg-1

)

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

YTX (mg)

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1.2

A.Oceanica Aqua LapYTX

Time (2012)


YTX

DSP toxins maximum permted level

Cierres asociados a resultados por masas

ID BER AO LIBRE

AO ESTERIFICAD

O

DTX/PTX/AO

AO ESTER/LIBRE

30 CC 31.30 113.24 170.93 3.62 36 CC 49.80 153.39 214.48 3.08 37 CC 89.59 396.10 532.18 4.42 38 CC/HP 50.77 137.71 191.37 2.71 41 CC 46.96 125.23 175.571 2.67 44 CC 101.55 156.00 266.78 1.54 53 CC 105.04 380.82 493.33 3.63 55 CC 79.63 178.02 258.56 2.24 56 CC 59.77 444.03 542.07 7.43

DSTx en muestras en que BER presentaron falsos negativos La concentración FN es

de 316.14 µg AO-eq kg-1. Esto representaría el nivel de detección de la BER-CC. Si no se consideran la muestras con una proporción alta de AO esterificado (muestras 37 y 56) la concentración promedio de las DSTx disminuye a 253 ± µg AO-eq kg-1 y no se presentó ninguna muestra positiva por BER y LC-MS/MS por debajo de este nivel.

PerpecXvas

LC-MS/MS DSP concetration (mg/kg)

200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800

Oka

test

OA

con

cetr

atio

n (m

g/kg

).

0

100

200

300

400

500

600

Métodos alterno al BER Okatest

D. fortii-2012

Tiempo


Abu

ndan

cia

Cel

L-1

0

1000

2000

3000

4000

5000

Superficie10 metros

D.fortii-2013

TiempoJan Feb Mar Apr May Jun Jul Aug Sep Oct Nov Dec

Abu

ndan

cia

Cel

/L0

1000

2000

3000

4000

5000

Superficie10 metros

Veda 2013: 16 de julio al 23 de agosto

FICOTOX : Colaboradores y personal asociado

Yaireb, Sánchez-Bravo . Juan Blanco J Andrew Turner Mancera-Flores J David Rivas D., Paula Perez-Brunius Antonio Almazán Becerril

Agradeccimientos

Secretaria del Pesca y Acultura de B.C.

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