· Title: Estudios de Estabilidad Fisicoquímica. Vicente Merino Created Date: 6/5/2019 10:50:56...

Agenda

Concepto de Estabilidad

Aspectos regulatorios y metodológicos

(ICH, FDA, Gerpac,…)

Metodología de desarrollo de EE

Resultados destacables de los EE del GT de FT

Estabilidad: concepto

• Capacidad que tiene un medicamento para mantener en el tiempolas propiedades y características propias, dentro de márgenes decalidad establecidos.

• El período de tiempo debe de contemplar desde su fabricación, y abarcar el tiempo de almacenamiento y de uso (vida útil)

• Estamos hablando de conservar las propiedades físicas, químicas, microbiológicas y biofarmacéuticas que definen a los medicamentos.

Tipos de estabilidad (USP-40)

Tipo de Estabilidad Condiciones mantenidas durante toda la Vida Útil delProducto

Química Cada ingrediente activo conserva su integridad química y la potenciadeclarada en la etiqueta, dentro de los límites especificados

Física Se conservan las propiedades físicas originales, entre ellas, aspecto, palatabilidad, uniformidad, disolución y capacidad de suspensión

Microbiológica Se conserva la esterilidad o resistencia a la proliferación microbiana según los requisitos especificados. Los agentes antimicrobianos (si lo están) conservan la eficacia dentro de los límites especificados

Terapéutica No se altera el efecto terapéutico

Toxicológica No se produce ningún aumento significativo de la toxicidad

The United States pharmacopeia, 40nd rev., and The national formulary, 35th ed. Rockville (MD):United States Pharmacopeial Convention; 2017:1662-66.

Factores que afectan a la estabilidad

Hidrólisis

Epimerización

Descarboxilación

Deshidratación

Oxidación

Descomposición fotoquímica

Fuerza iónica

Efecto del pH

Compatibilidad Inter-iónica

Estabilidad en estado sólido

Temperatura


¿Estudio de estabilidad?: por dónde empezamos…

Aspectos Regulatorios y Metodológicos

Fuentes bibliográficas para desarrollo de estudios estabilidad

• ICH: International Conference On Harmonisation of Technical Requeriments ForRegistration of Pharmaceuticals For Human Use.

• Farmacopeas: RFE, EP, USP, JP, BP,…

• Guías de sociedades científicas GERPAC

(Groupe d’Evaluation et de Recherche sur la Protection en Atmosphère Contrôlée).

• FDA: Stability testing of drugs substances and drugs products.

• OMS: Guideline for stability testing of pharmaceutical ingredients and finishedpharmaceutical products.

• Bibliografía: American Journal Health-System Pharmacy, IJPC, Pharmaceutical Development and Technology,...

Guías ICH

Reúne a las autoridades reguladoras y la industria farmacéutica para discutir los aspectos científicos y técnicos del registro de medicamentos.

Hacer recomendaciones para armonización en la interpretación y aplicación de directrices técnicas el registro de productos (EEUU, Europa y Japón)

Diálogo constructivo sobre cuestiones científicas entre las autoridades reguladoras y la industria farmacéutica sobre la armonización de los requisitos técnicos para los productos farmacéuticos.

Supervisar y actualizar los requisitos técnicos armonizados que conduzcan a una mayor aceptación mutua de los datos de investigación y desarrollo.

Evitar los requisitos divergentes futuros, a través de la armonización de determinados temas necesarios como resultado de los avances terapéuticos y el desarrollo de nuevas tecnologías para la producción de medicamentos.

Facilitar la adopción de enfoques técnicos y de investigación nuevos o mejorados que actualicen o sustituyan las prácticas actuales.

https://www.ich.org

Condiciones de almacenamiento

http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/Q1A_R2/Step4/Q1A_R2__Guideline.pdf

https://www.fda.gov/downloads/drugs/guidances/ucm073369.pdf

http://apps.who.int/medicinedocs/documents/s19133en/s19133en.pdf

ICH: TEST DE FOTOESTABILIDAD Q1B

http://www.ich.org/fileadmin/Public_Web_Site/ICH_Products/Guidelines/Quality/Q1B/Step4/Q1B_Guideline.pdf

Farmacopeas

Real Farmacopea Española (RFE)

Farmacopea Europea (EP)

United States Pharmacopeia (USP)

Japanese Pharmacopiea (JP)

British Pharmacopeia (BP)

International Pharmacopeia (IP)

ASP

ECTO

S M

ETOD

OLÓ

GIC

OS

TECN

OFA

RM

AC

ÉUTIC

OS

Ejemplo USP: piridoxina

Guía de la GERPAC

• Grupo Francés de gran experiencia

• Se basan en normativos ICH y EP.

• Conceptos claros y bien definidos.

• Disponible en Francés e Inglés.

• Buen punto de partida.

Etapas en el desarrollo de estudios de estabilidad

Identificación de la formulación a estudiar

Busqueda bibliográfica de estudios previos

Especificar que queremos determinar.

Buscar la metodología para el análisis (HPLC,

pH, osmolalidad,…)

Desarrollo metodológico del estudio (ICH,

USP,otras fuentes,…)

Validación de técnicas analíticas

Estudio de estabilidad propiamente dicho

Interpretación de resultados

Realización del informe final

Publicación del estudio

El paso siguiente…

BUSCAR ALIANZAS

UNIVERSIDADES

INSTITUTOS DE BIOMEDICINA

LABORATORIOS DE ANÁLISIS PRIVADOS

OTROS (instrumental propio,…)

Ayudas a GT de la SEFH

Estudio de estabilidad de soluciones orales pediátricas

2014-2015: Clonidina, Hidralazina, Fenobarbital

2015-2016: Isoniazida (hidrazina) y Etambutol (aminobutanol)

2016-2017: Riboflavina, Tiamina, Piridoxina y Ácido Fólico

SOLUCIÓN DE PIRIDOXINA HCl 25 MG/ML

Ejemplo común metodológico

Objetivo

Estudio de la estabilidad fisicoquímica de piridoxina HCl 25 mg/mL solución

En diferentes condiciones de conservación durante un período de tiempo de 90 días siguiendo las recomendaciones de las guías ICH.

Las condiciones a estudiar son tres:

• Refrigeración (5±3ºC)

• Temperatura ambiente (25±2ºC)

• 40 ºC (±2ºC)

Estudio microbiológico en la condición más favorable según USP 61 y 62

• Envases cerrados

• Envases abiertos

http://www.ich.org/products/guidelines/quality/article/quality-guidelines.html

HPLC y validación del método

Método cromatográfico:•Columna C18 4.6x250 mm, 5 µm

•Fase móvil: 1% ácido acético glacial (exceso)

• 1.40 mg/ml de hexanosulfonato de sodio en 400 mL de agua Milli-Q, 1 mL ácido acético glacial y 600 mL de Metanol (ajustándose a pH=7.2 con KOH)

•Flujo 1 mL/min

•Inyección 1 µL

•Longitud de onda= 254 nm

•Temperatura columna 25ºC.

•Tiempo de análisis: 10 minutos/muestra.

Validación del método:

• Recta de calibrado: 0.1—0.35 mg/mL

• Exactitud: 0.1, 0.2 y 0.35 mg/mL

• Precisión intra e interdía: 0.1, 0.2 y 0.35 mg/mL

• Especificidad y selectividad:análisis espectral2D-3D

• Límite de cuantificación y de detección


Fundamentos HPLC

HPLC: técnica de separación de moleculas orgánicas en disolución

Propiedades hidrofóbicas diferentes entre moléculas (HPLC-RP)

Permite identificación: cada molécula aparece a un TIEMPO DE RETENCIÓN CARACTERÍSTICO

Permite cuantificación: relación Señal-Concentración

La separación se lleva a cabo en COLUMNA porosa de Octadecilsilano (C18)

Versatilidad/Universalidad

(multitud de aplicaciones)

Elaboración Piridoxina HCl 25 mg/mL

Fórmula 1 (CON conservante)

• Piridoxina HCl.......................................2.5 g

• Agua cons. sin propilenglicol……..…….20 mL

• Jarabe simple csp..…….…………………..100 mL

Fórmula 2 (SIN conservante)

• Piridoxina HCl.....................................2.5 g

• Agua purificada……..…………………….….20 mL

• Jarabe simple csp..…….…………………..100 mL

*Agua conservante sin propilenglicol:o Nipagin base…………………………………0.08 go Nipasol base…………………………………0.02 go Agua purifcada csp……………………….100 mL

Condiciones almacenamiento

Elaboración en frascos de vidrio topacio estériles:

F1: Fórmula CON conservantes

LOTE A: 3 FRASCOS A 40ºC

LOTE B: 3 FRASCOS A 25ºC

LOTE C: 3 FRASCOS A 5ºC

F2:Fórmula SIN conservantes

LOTE A: 3 FRASCOS A 40ºC

LOTE B: 3 FRASCOS A 25ºC

LOTE C: 3 FRASCOS A 5ºC

Límite de estabilidad 90-115% de contenido en Piridoxina HCl

Metodología: control pH y visual

Control del pH en los días análisis:

• pHmetro CRISON GLP21+

• 3 puntos de calibración (pH 4.01, 7.00 y 9.21)

Control visual:

• Sobre fondo claro

• Sobre fondo oscuro

Control Osmolalidad

• Osmómetro OsmoSTATION® OM-6050 ARKRAY

• Análisis día 0 y 90.

Metodología: estudio microbiológico

Prueba de promoción del crecimiento y aptitud del método de recuento

•Se comprobó la capacidad de crecimiento de cepas patrón en cada formulación del estudio

•S. aureus ATCC 6538, P. aeruginosa ATCC 9027, B. subtilis ATCC 6633, C. albicans ATCC 10231, A. brasiliensis ATCC 16404, E. coli ATCC 8739, S. enterica ATCC 14028 y C. sporogenes ATCC 11437.

Prueba de recuento microbiano en placa

•Recuento total de microorganismos aerobios (RTMA) y el recuento total combinado de hongos filamentosos y levaduras (RTCHL) que podían desarrollarse en condiciones aerobias,

•Límite: RTMA de 102 y RTCHL 101 y debe haber ausencia de E. coli.

Prueba de microorganismos específicos

•Demostrar la ausencia o presencia limitada de microrganismos específicos:

Detección de bacterias gram negativas tolerantes a bilis

E. coli, Salmonella, P. aeruginosa, S.aureus, Clostridios, C. albicans.

Si hubiera crecimiento identificación final por MALDI-TOF

<USP-61> The United States pharmacopeia, 40nd rev., and The national formulary, 35th ed. Rockville (MD) United States Pharmacopeial Convention; 2017:57-61.

<USP-62>The United States pharmacopeia, 40nd rev., and The national formulary, 35th ed. Rockville (MD):United States Pharmacopeial Convention; 2017:61-7.

Metodología: Estabilidad microbiológica

Ensayo sobre envases cerrados:Seaplicaron los métodos antes

mencionados sobre las formulaciones (con conservante y sin conservante) en

la condición más estable desde el punto de vista FQ durante los días 0, 7,

14, 28, 42, 60 y 90.

Ensayo sobre envases abiertos:Paraemular unas condiciones de uso real y

evaluar la posible contaminación microbiana, los envases se abrieron y cerraron 1 vez al día durante los 42

días que duró este ensayo. El muestreo se realizó a los 0, 7, 14 y 28 y

42 días.

RESULTADOS DESTACABLES

Estudio de clonidina (interacción conservante)

Dihidropiridonas

Dihidropiridonas

Influencia del pH de los vehículos

Componentes/pH media±DE

A. Jarabe simple (64

partes sacarosa/36

partes de agua)

B. Jarabe simple con

conservantes

parahidroxibenzoato de

metilo y propilo base

(0.06% p/v-0.04%)

C. Jarabe simple con

conservantes

parahidroxibenzoato de

metilo sódico y propilo

sódico (0.06% p/v-0.04%

p/v)

D. Solución de sorbitol al

70% con sorbato potásico

0.15 % p/v

AGUA PURIFICADA PhEur

+ AZUCAR DOMÉSTICO6.89±0.050 6.32±0.017 8.79±0.005

6.44±0.005

(EN AGUA PURIFICADA PhEur)AGUA PURIFICADA PhEur

+ SACAROSA PhEur6.60±0.005 5.69±0.015 8.71±0.010

AGUA ULTRAPUFICADA

MILLI-Q + SACAROSA

PhEur

6.87±0.080 6.41±0.010 8.75±0.010 6.45±0.005

(EN AGUA ULTRAPURIFICADA

MILLI-Q)AGUA ULTRAPUFICADA

MILLI-Q + AZUCAR

DOMÉSTICO6.49±0.051 6.06±0.026 8.90±0.050

pH AGUA

ULTRAPURIFICADA

MILLI-Q6.58±0.010

pH AGUA PURIFICADA

PhEur 5.56±0.010

SOLUCIÓN DE MIDAZOLAM 1 mg/mL

A B C

Merino-Bohórquez et al. Comunicación Oral. 60 Congreso SEFH, Valencia 2015.


• Fenobarbital sódico...................1090 mg

• Glicerina...........................................10 g

• Sacarina sódica...........................100 mg

• Sorbitol 70%..................................30 mL

• Metilparaben sódico……...........….80 mg

• Propilparaben sódico………………...20 mg

• Agua purifcada csp……………….....100 mL


•Fenobarbital sódico...................1090 mg

•Glicerina...........................................10 g

•Sacarina sódica...........................100 mg

•Sorbitol 70%..................................30 mL

•Agua purifcada csp……….……….....100 mL

Ejemplo pH: Fenobarbital

Merino-Bohórquez et al. Comunicación Póster Papel. 61 Congreso SEFH, Madrid 2017,

Estudio Fenobarbital (efecto del pH)

40

50

60

70

80

90

100

110

DIA 0 DIA 5 DIA 7 DIA 14 DIA 21 DIA 28 DIA 42 DIA 50 DIA 60 DIA 90% R

ecu

per

ació

n F

eno

bar

bit

alFormulación Fenobarbital CON consevantes

F1 40ºC F2 25ºC F1 5ºC

7

7,5

8

8,5

9

9,5

10

DIA 0 DIA 5 DIA 7 DIA 14 DIA 21 DIA 28 DIA 42 DIA 50 DIA 60 DIA 90

pH

Fen

ob

arb

ital

Formulación Fenobarbital CON consevantes


min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

140

3.186

13.04

5

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

3.192

13.08

3

Día 0: Formulaciones CON y SIN conservante

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

140

3.202

13.078

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

3.195

13.121

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

50

100

150

200

250

3.194

13.122

Día 90 F. CON CONSERVANTES

PRODUCTOS DE DEGRADACIÓN

40ºC

25ºC

5ºC



Día 90: F. SIN CONSERVANTES

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

3.196

13.11

1

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

3.195

13.102

min2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

20

40

60

80

100

120

3.190

13.093

40ºC

25ºC

5ºC

Importancia de las impurezas: ISONIAZIDA e HIDRAZINA

ETAMBUTOL y AMINOBUTANOL

FDA ICH

Metodología: elaboración ISONIAZIDA


• Isoniazida.........................................5 g

• Agua conservante*……….............50 mL

• Sorbitol 70% csp.........................100 mL


• Isoniazida.........................................5 g

• Agua purifcada……………….............50 mL

• Sorbitol 70% csp.........................100 mL

*Agua conservante sin propilenglicol:o Nipagin base…………………………………0.08 go Nipasol base…………………………………0.02 go Agua purifcada csp……………………….100 mL

Resultados: contenido en ISONIAZIDA (I)

50

60

70

80

90

100

110

DÍA 0 DIA 6 DÍA 10 DÍA 14 DÍA 21 DÍA 28 DÍA 50 DÍA 70 DÍA 90

% R

ECU

PER

AC

IÓN

CONTENIDO ISONIAZIDA FORMULACIÓN CON CONSERVANTES


Resultados: contenido en ISONIAZIDA(II)

50

60

70

80

90

100

110


% R

ECU

PER

AC

IÓN

CONTENIDO ISONIAZIDA FORMULACIÓN SIN CONSERVANTES


Hidrazina

Utilizado en síntesis de productos

farmacéuticos.

Producto de degradación Mutagénico, Genotóxico y

Carcinogénico.

Produce aductos de

ADN y alteraciones

en las cromátidas.

Potencial carcinogénico en roedores:

hígado y pulmones.

Otros fármacos que se degradan a

hidrazina: hidralazina, cisplatino,

oxaliplatino,…

M7(R1) Addendum to ICH M7: Assessment and Control of DNA Reactive(Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential CarcinogenicRisk, International Consortium of

Harmonisation (ICH), (June 2015).

nm250 300 350 400 450 500 550

mAU

0

100

200

300

400

500

Metodología: HPLC y validación

HPLC: cuantificación de HIDRAZINA en los días de estudio:

• Método cromatográfico:

• Columna C18 4.6x250 mm, 5 µm

• Fase móvil: 50% ACN:50% AGUA.

• Tª columna: 30ºC

• Vol inyección=50 mcl

• Flujo=1,5 mL/min

• λ=310 nm (derivatización precolumna con benzaldehido)

• Tiempo de análisis: 8 minutos/muestra.

• Validación del método:

• Recta de calibrado: 50—300 ng/mL

• Exactitud:50, 200 y 300 ng/mL

• Precisión intra e interdía: 50, 200 y 300 ng/mL

• Límite de cuantificación y de detección


Resultados: contenido en HIDRAZINA

0

5

10

15

20

25

30

DÍA 0 DIA 6 DÍA 10 DÍA 14 DÍA 21 DÍA 28 DÍA 50 DÍA 70 DIA 90

CO

NC

ENTR

AC

IÓN

(Μ

CG

/ML)

FORMACIÓN DE HIDRAZINAEN LAS DOS FORMULACIONES

F1 40ºC F1 25ºC F1 5ºC F2 40ºC F2 25ºC F2 5ºC

Día 0: Formulaciones CON y SIN conservante

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

HIDRAZINA

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

6.5

10

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

6.5

11

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

6.4

94

Día 90 F. CON CONSERVANTES HIDRAZINA

40ºC

25ºC

5ºC

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

6.5

22

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

6.5

05

min1 2 3 4 5 6 7

mAU

0

500

1000

1500

2000

2500

3000 6.5

08

Día 90 F. SIN CONSERVANTES HIDRAZINA

40ºC

25ºC

5ºC

Dosis ingeridas de hidrazina: modelo ICH

Condición Día 14 Día 28 Día 50 Día 90

40ºC 31 µg/día 54 µg/día 92 µg/día 143 µg/día

25ºC 3.25 µg/día 6.38 µg/día 11.60 µg/día 20.34 µg/día

5ºC 0.60 µg/día 1.1 µg/día 1.86 µg/día 3.23 µg/día

*suponiendo dosis de 300 mg isoniazida/día

M7(R1) Addendum to ICH M7: Assessment and Control of DNA Reactive(Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential CarcinogenicRisk, International Conference on

Harmonisation (ICH), (Junio 2014).

Dosis ingeridas de hidrazina: modelo FDA

Peso/Dosis Dosis Aceptable Ingerida

5 kg (50 mg INH) 3,87 µg/día

10 kg (100 mg INH) 7,74 µg/día

15 kg (150 mg INH) 11,61 µg/día

20 kg (200 mg INH) 15,48 µg/día

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

DIA 14 DÍA 28 DÍA 50 DÍA 90

LÍMITES DE HIDRAZINA ACEPTABLE POR PESO

5 kg

10 kg

15 kg

20 kg

25 ºC

5 ºC

U.S. Department of Health and Human Services, Food and DrugAdministration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center forBiologics Evaluation and Research (CBER), M7 Assessment and Control of DNAReactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit PotentialCarcinogenic Risk, International Consortium of Harmonisation (ICH), (May2018)


• Etambutol HCl.........................................5 g

• Agua conservante sin propilenglicol...30 mL

• Jarabe simple csp..............................100 mL


• Etambutol HCl....................................5 g

• Agua purificada….…………...............30 mL

• Jarabe simple csp.........................100 mL

Agua conservante sin propilenglicol:o Nipagin…………………………………………0.08 go Nipasol…………………………………………0.02 go Agua purificada csp……………………….100 mL

ETAMBUTOL y AMINOBUTANOL

AMINOBUTANOL

Utilizado en la síntesis de etambutol

Producto de degradación de etambutol

En grandes cantidades nocivo por ingestión, corrosivo y puede provocar quemaduras

Potencial mutagénico

Estructura del 2-amino-1-butanol

R. Hendrickson, et al. (eds.); Remington: The Science and Practice of Pharmacy 21th ed. Lippincott Williams and Wilkins, Baltimore, Maryalnd, p.1663 (2005)

1. Condiciones Fluorimétricas:• Fluorímetro Perkin-Elmer LS-55.

• Cubetas de 1 cm para fluorimetría

• Solución de derivatización: Fluorescamina(0.1 mg/mL en acetona)

• Tampón borato ajustado a pH 9.

• Longitud onda Em: 485 nm Exc:385 nm

2. Validación de la técnica:

• Linealidad :0.05,0.2, 0.3, 0.5, 0.6 y 0.8 µg/mL aminobutanol

• Exactitud: 0.05, 0.5 y 0.7 µg /mL

• Precisión intra e interdía: 0.05, 0.5 y 0.8 µg /mL

• Límite de cuantificación y detección.

Fluorimetría y validación aminobutanol


U.S. Department of Health and Human Services, Food and DrugAdministration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center forBiologics Evaluation and Research (CBER), M7 Assessment and Control of DNAReactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit PotentialCarcinogenic Risk, International Consortium of Harmonisation (ICH), (Junio 2014)

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

D I A 0 D I A 5 D I A 7 D I A 1 4 D I A 2 1 D I A 2 8 D I A 5 0 D I A 7 0 D I A 9 0

CO

NC

ENTR

AC

IÓN

(M

CG

/ML)

FORMACIÓN DE AMINOBUTANOL EN LAS DOS FORMULACIONES

F1 40ºC F1 25ºC F1 5ºC F2 40ºC F2 25ºC F2 5ºC

Formación de aminobutanol

Según la guía ICH la ingesta aceptable para una impureza con potencial mutagénico es de 20 ug/día para tratamientos que

duren entre 1 y 12 meses.

Condición Día 14 (µg/día) Día 28(µg/día) Día 50 (µg/día) Día 90(µg/día)

F1 40ºC 5,98 µg/día 15,01 µg/día 34,57 µg/día 49,26 µg/día

F1 25ºC <0,05 µg/día* <0,05 µg/día* <0,05 µg/día* 0,52 µg/día

F1 5ºC <0,05 µg/día* <0,05 µg/día* <0,05 µg/día* <0,05 µg/día*

F2 40ºC 4,66 µg/día 10,99 µg/día 29,18 µg/día 51,52 µg/día



*Suponiendo una dosis de 2500 mg/día

Conclusiones

Se ha demostrado la estabilidad FQ Y microbiológica en las formulaciones

de Isoniazida y Etambutol 50

mg/mL durante al menos 90 días en

todas las condiciones de

almacenamiento estudiadas sobre

envases cerrados y 42 días desde su

apertura (en USO)

- La formación de hidrazina y

aminobutanol es termodependiente,

lo cual hace necesaria la

refrigeración de las estas fórmulas.

- Los conservantes parecen no acelerar

la formación de impurezas

La cuantificación de productos de

degradación con capacidad

carcinogénica está tomando cada vez más relevancia por

autoridades reguladoras.

Esta práctica resulta en preparados más

seguros a largo plazo.

Oxidación

Propiedades FQ Ácido Fólico

Propiedades Fisicoquímicas

Incompatibilidades

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Metodología: elaboración Ácido Fólico 1 mg/mL


• Ácido Fólico......................................100 mg

• Sorbitol 70%................……..................20 mL

• Agua cons. sin propilenglicol*csp….100 mL• Ajustar a pH=8.0-8.5 con NaOH 1N


• Ácido Fólico......................................100 mg

• Sorbitol 70%................……..................20 mL

• Agua purificada csp……………………….100 mL

• Ajustar a pH=8.0-8.5 con NaOH 1N*Agua conservante sin propilenglicol:o Nipagin base…………………………………0.08 go Nipasol base…………………………………0.02 go Agua purifcada csp……………………….100 mL

Resultados: contenido en Ác. Fólico (I)

60

65

70

75

80

85

90

95

100

105

110

DÍA 0 DIA 5 DÍA 7 DÍA 1 4 DÍA 2 1 DÍA 2 8 DÍA 5 0 DÍA 7 0 DÍA 9 0

% R

ECU

PER

AC

IÓN

% RECUPERACIÓN DE ÁCIDO FOLICO FORMULACIÓN CON CONSERVANTES

F1A 40ºC F1B 25ºC F1C 5ºC

7

7,5

8

8,5

9

9,5

10

10,5


Evolución pH formulaciones CON conservantes


Resultados: contenido en Ác. Fólico (II)

60

70

80

90

100

110


% R

ECU

PER

AC

IÓN

% RECUPERACIÓN DE ÁCIDO FOLICO FORMULACIÓNSIN CONSERVANTES

F1A 40ºC F1B 25ºC F1C 5ºC

7

7,5

8

8,5

9

9,5

10

10,5


Evolución pH formulaciones SIN conservantes


Día 0: Cromatogramas Ácido Fólico CON y SIN conservantes

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

8.174

min2 4 6 8

mAU

0

10

20

30

40

50

8.077

F2: Formulación SIN conservantes

F1: Formulación CON conservantes

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

8.151

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

8.111

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

10

20

30

40

50

60

70

80

8.017

Día 90 F. CON CONSERVANTES Ácido Fólico

40ºC

25ºC

5ºC

Productos de degradación


min2 4 6 8

mAU

0

10

20

30

40

50

7.992

min2 4 6 8

mAU

0

10

20

30

40

50

7.974

min2 4 6 8

mAU

0

10

20

30

40

50

7.947

Día 90 F. SIN CONSERVANTES Ácido Fólico

40ºC

25ºC

5ºC


Resultados degradación acelerada

Las condiciones que más afectan:

Condición % Recuperación Impacto

Oxidantes (H202 15% v/v) 0% ++++

Ácidas (HCl 1N) 27.18% ++

Básicas (NaOH 1N) 72.96% +

Calor (90ºC) 100.8% -min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

50

100

150

200

250

2.6

95 2

.787

3.0

45

3.3

56

3.6

56

3.8

26

4.0

12

4.7

84

5.9

59 6.9

95

H2O2 15% v/v

min1 2 3 4 5 6 7 8 9

mAU

0

5

10

15

20

25

30

35

2.4

75

2.6

65 2.8

04

3.0

47

3.2

39

8.6

77

HCL 1N

Cambios en la osmolalidad: PIRIDOXINA HCl

Osmolalidad

(mOms/Kg-H2O)

Día 0 Día 90

F1 40ºC

2600±77.78

4868±80.98

F1 25ºC 3958±142.50

F1 5ºC 2706±30.13

F2 40ºC

2545±91.92

4930±56.78

F2 25 ºC 4146±7.63

F2 5ºC 26563±44.81

Aumento significativo a 25 y 40ºC

Inestabilidades Microbiológicas

Estabilidad microbiológica sin esterilización

CERRADOS Día 0 Día 7 Día 14 Día 28 Día 42 Día 60 Día 90

F1 40ºC

F1 25ºC

F1 5ºC

RTMA*>102

UCF/ml - - - - - -

ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DE CLONIDINA 20 µg/mL (SIN PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA)

F2 40ºC

RTMA*>102

UCF/ml - - - - - -

F2 25ºC RTCHL±>101

UCF/ml- - - - -

F2 5ºC

RTMA*>102

UCF/ml - - - - - -

Sol. estándar RTMA*>102

UCF/ml

* RTMA: Recuento Total de Microorganismos aerobios

±RTCHL:Recuento Total Combinado de Hongos filamentosos y Levaduras

Estabilidad microbiológica tras esterilización

CERRADOS Día 0 Día 7 Día 14 Día 28 Día 42 Día 60 Día 90

F1 40ºC

F1 25ºC

F1 5ºC

ESTUDIO MICROBIOLÓGICO DE CLONIDINA 20 µg/mL (ENVASES ESTERILIZADOS)

F2 40ºC

F2 25ºC

F2 5ºC

Sol. estándar RTMA*>102

UCF/ml

* RTMA: Recuento Total de Microorganismos Aerobios

Susceptibilidad a la contaminación microbiológica: Riboflavina


• Riboflavina Sodio Fosfato.................3,375 g

• Agua conservante sin propilenglicol...50 mL



• Riboflavina Sodio Fosfato.................3,375 g

• Agua purificada………………………………..50 mL


Control Visual

FÓRMULA DIA 0 DIA 5 DIA 7 DIA 14 DIA 21 DIA 28 DIA 50 DIA 70 DIA 90

F1 40ºC √ √ √ √ √ √ √ √ √

F1 25ºC √ √ √ √ √ √ M M M

F1 5ºC √ √ √ √ √ √ √ √ √

F2 40ºC √ √ √ √ √ √ √ √ √

F2 25ºC √ √ √ M M M M M M

F2 5º C √ √ √ √ √ √ √ √ √

M: Se observan partículas en suspensión que impresionan de hongos mucilaginosos

NORMAL PARDEAMIENTO

CONTROL MICROBIOLÓGICO RIBOFLAVINA

CONDICIÓN/ENVASE DÍA 0 DÍA 7 DÍA 14 DÍA 28 DÍA 42 DÍA 60 DÍA 90

F1-F2 5ºC CERRADOS

F1-F2 5ºC CERRADOS

F1-F2 5ºC CERRADOS

F1-F2 25ºC CERRADOS

F1-F2 25ºC CERRADOS

Recuento Total Combinado de Hongos filamentosos patógenos y Levaduras (RTCHL)>101 UFC/mL

Resumen estabilidades estudiosFÓRMULAS PERÍODO DE VALIDEZ

(CON CONSERVANTES)PERÍODO DE VALIDEZ(SIN CONSERVANTES)

FACTOR LIMITANTE ESTABILIDAD

Clonidina 20 µg/mL solución90 días a 5ºC

42 días abiertos90 días a 5ºC

42 días abiertosInteracción con

conservante

Hidralazina 10 mg/mL solución90 días a 5ºC y a 25ºC

42 días abiertos90 días a 5ºC y a 25ºC

42 días abiertospH

Fenobarbital 10 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertospH

Isoniazida 50 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertos

Generación termodependiente de

Hidrazina

Etambutol 50 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertos

Generación termodependiente de

aminobutanol

Riboflavina 25 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertosContaminación

microbiológica a 25ºC

Ácido Fólico 1 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertosOxidación, pH y

temperatura

Tiamina 100 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertosAumento significativo de

osmolalidad

Piridoxina 25 mg/mL solución90 días a 5ºC


42 días abiertosAumento significativo de

osmolalidad

TFG y TFM

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· Title: Estudios de Estabilidad Fisicoquímica. Vicente Merino Created Date: 6/5/2019 10:50:56...

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