Tecnicas de Biologia Molecular en Celulas - Sesion 2
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Técnicas deBiología Molecular
en Células
Biología Celular y MolecularBiólogo Manuel Fasabi Espinar
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INVESTIGACIÓN DE LAS CÉLULAS Y SUS PARTES
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MICROSCOPÍA
Aumento total = Objetivo x Ocular
Las células y tejidos vivos carecen de componentes que absorben la luz (invisibles) Es necesario fijar y teñir la muestra
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MICROSCOPÍA
Microscopia de campo
claro
Microscopia de contraste
de fase
Microscopia de contraste de interferencia
diferencial
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MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA (Inmunofluorescencia)
Tinción fluorescente: un químico es fluorescente si absorbe la luz de determinada longitud de onda y emite luz fluorescente
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GFP: Green Fluorescent Protein (proteína verde fluorescente)(medusa: Aequorea victoria)
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MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Resolución 0.1nm
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FRACCIONAMIENTO CELULAR
Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas
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FRACCIONAMIENTO CELULAR
Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas
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1) Centrifugación
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2) Electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS)
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3) Electroforesis bidimensional
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A. Cromatografía por filtración en gel
4) Cromatografía
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B. Cromatografía de intercambio iónico
4) Cromatografía
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C. Cromatografía de afinidad con anticuerpos
4) Cromatografía
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5) Inmunoblot
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PREGUNTAS
1. Radioisótopos2. Espectrometría de masas3. Espectrometría por resonancia magnética nuclear4. Cristalografía de rayos X